一類e環取代的水飛薊賓衍生物及其製備方法和醫藥用途的製作方法

2023-12-05 16:16:36 2

專利名稱：一類e環取代的水飛薊賓衍生物及其製備方法和醫藥用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於有機化學和醫藥技術領域，具體而言，本發明涉及一類E環取代的水飛薊賓衍生物的製備方法和用途。該類化合物通過合成方法得到，對該類化合物的藥理學試驗表明該類化合物表現出較強的對抗雙氧水引起的大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞(PC12細胞)損傷作用，即對模擬腦神經細胞的PC12細胞有抗氧化損傷保護作用，說明其對保護腦細胞組織抗氧化和腦神經抗氧化、防治老年性痴呆症有積極作用，可以預期用於製備防治該類神經退行性疾病藥物的用途。再者，該化合物還對黃嘌呤氧化酶顯示一定的抑制作用，可以預期用於製備由黃嘌呤氧化酶引起的疾病包括痛風病的藥物。

背景技術：
神經退行性疾病是頗為可怕的一系列毀滅性的疾病，其可以毀壞中樞神經系統功能，導致多種認知缺陷和/或行動缺陷。就目前的醫療技術而言，此類疾病是致殘率及致死率均高的不可治癒性疾病，已構成現代社會尤其是老齡化社會的一大健康隱患。老年性痴呆症(AD)、帕金森氏症(Parkinson’sDisease)、亨廷頓舞蹈病、蛋白感染素病(prion disease)、肌萎縮性(脊椎)側索硬化都遭遇到大量的神經元丟失。此外，活性氧能造成細胞膜雙磷脂層的變化和損傷，有些雙磷脂層的破壞是直接造成AD的病因(Nitsch，RM，Proc.Natl Acad SCi USA 1992，891671-1675)。Markesbery的研究顯示脂質過氧化可以造成細胞膜雙磷脂層的降解從而導致AD患者發病(Markesbery，WR，Free Radic Bio Med，1997，23134-147)。使用抗氧化劑和鐵離子螯合劑都可以減緩脂質過氧化和AD的進程。現在常見的抗氧化製劑有Vitamin C、Vitamin E、銀杏製劑EGb761、褪黑激素、黃酮和胡蘿蔔素類。由於市場的需要，更多的抗氧化劑諸如雌激素類也開始活躍。
在眾多抗自由基天然產物中，水飛薊是少數幾個在臨床上廣泛應用的藥物之一。三十多年的臨床實驗證明該藥具有確切的療效和低毒性(Flora K等人，Am JGastroenterol，1998，93139-143；Saller R等人，Drugs，2001，61(14)2035-2063)。水飛薊素中水飛薊賓含量最多，活性也最高。該藥作用主要有以下幾點(一)抗自由基活性水飛薊素對於由四氯化碳、半乳糖胺、醇類和其他肝毒素造成的肝損害具有保護作用。1990年Lotteron等人報導了在小鼠肝微粒體內，水飛薊素能減少由四氯化碳代謝引起的體外脂質過氧化及由還原型輔酶單獨引起的過氧化作用，這些都表明水飛薊素為鏈中斷抗氧化劑或為自由基清除劑。(二)保護肝細胞膜通過抗脂質過氧化反應維持細胞膜的流動性，保護肝細胞膜；還能阻斷真菌毒素鬼筆毒環肽和α-鵝膏蕈鹼等與肝細胞上特異受體的結合，抑制其對肝細胞的攻擊及跨膜轉運，中斷其肝腸循環，從而增強肝細胞膜對於多種損害因素的抵抗力。(三)促進肝細胞的修復和再生水飛薊賓進入細胞後可以與雌二醇受體結合，並使之激活，活化的受體可以增強肝細胞核內RNA聚合酶1的活性，使RNA轉錄增強，促進酶及蛋白質的合成，並間接促進DNA的合成，有利於肝細胞的修復和再生。(四)抗腫瘤作用各種活性氧能氧化鳥嘌呤形成8-羥基鳥嘌呤，造成DNA損傷，進而引起腫瘤，水飛薊賓作為一個有效的抗自由基物質也顯示了預防和治療腫瘤的作用。
水飛薊賓類化合物具有確切的療效，故而以此天然藥物為先導化合物(Lead compound)進一步開發，尋找水飛薊賓新的衍生物，使其能夠具有更高或者更新的藥理活性，以期獲取自主智慧財產權的新藥，實屬必要。我們已經完成的開發工作中，前期之結構改造著重在水飛薊賓的B環上引入甲氧基，其結果如同預期地顯著提高了其清除超氧陰離子自由基的活性(楊雷香，趙昱等，「Synthesis and Antioxidant Properties Evaluaton of Novel SilybinAnalogue」，Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry，2006，21(4)399-404]。在繼續的調研中我們發現極少有報導針對水飛薊賓E環的改造。我們認為由於水飛薊賓分子的特殊性，其E環上的取代基變化可能導致其活性發生意想不到的變化，因此我們設計出改變了水飛薊賓E環取代基的一系列新化合物，通過改變其上的取代基(添加、刪減、引進滷素、引進芳環取代基等方法)來改變E環的電子云密度、疏水性、以及伸展取向等因素，以期得到新一代的結構新穎、療效更好的水飛薊賓類先導化合物。
合成出的此類新化合物用抗氧化損傷藥效學模型進行了評價。首先，本發明測試了合成出的水飛薊賓E環改造新化合物對於H2O2誘發PC12細胞的抗氧化損傷能力。目前比較肯定的用於研究神經病變性疾病(主要是膽鹼能神經系統)的體外細胞模型主要有如下幾種原代培養的海馬、皮層、基底前腦神經細胞、大鼠腎上腺嗜鉻瘤PC12細胞和海馬HT22細胞株。PC12細胞在培養過程中以其易獲得性和細胞均一性而成為神經科學離體研究中的重要工具細胞，並用於研究多種神經系統疾病，如AD、帕金森病等。雙氧水H2O2是一種強氧化劑，它能穿透細胞膜使細胞內反應性氧自由基之產生快速增加。本發明通過測試經H2O2處理後PC12細胞的死亡情況來評價新合成的抗氧化劑保護神經細胞抗氧化損傷的能力。
此外，抗氧化劑篩選模型中，黃嘌呤氧化酶抑制劑也是十分重要的評價標準。現代醫學理論證實痛風病的重要致病因素之一是體內黃嘌呤氧化酶(EC1.2.3.2，簡稱為XO)濃度過高。此酶是體內核酸代謝的一個重要酶，能催化次黃嘌呤和黃嘌呤生成尿酸和超氧陰離子，若機體不能及時清除產生的尿酸，使尿酸結晶鹽在關節處沉積，就會引起痛風。產生過多的超氧陰離子也可引起多組織受損，因此測定化合物對XO的作用對發現新的XO抑制劑和其抗氧化作用有重要意義。從天然產物以及其衍生物中篩選出黃嘌呤氧化酶抑制劑先導化合物也是開發治療痛風病新藥的重要任務。
綜上所述，本發明涉及一類E環取代基變化的水飛薊賓衍生物及其製備，並涉及該類化合物的抗氧化機製藥效學活性及其用於製備防治相關疾病藥物的用途。經測試，發現該類化合物具有保護模擬腦神經細胞的PC12細胞減輕H2O2誘發的氧化損傷的活性、抑制黃嘌呤氧化酶活性，說明設計合成出的式(1)所示之E環取代基變化的水飛薊賓衍生物對保護腦細胞組織抗氧化和腦神經抗氧化、防治老年性痴呆症有積極作用，從而可以預期用於製備防治腦組織氧化損傷及中樞神經損傷類疾病藥物的用途，還可以預期發展成為防治其他神經退行性疾病如帕金森氏症(PD)、亨廷頓舞蹈病、蛋白感染素病(prion disease)、肌萎縮性(脊椎)側索硬化等的藥物或藥物組合物。此外，式(1)所示之E環取代基變化的水飛薊賓衍生物還可以用於製備由黃嘌呤氧化酶引起的疾病包括痛風病的藥物用途，以及發展成為防治病變過程中與自由基相關的疾病包括炎症疾病、自身免疫性疾病、放射治療後遺症、腫瘤、心肌缺血、心肌肥厚、衰老、變態反應、動脈粥樣硬化等疾病的藥物。由此完成了本發明。


發明內容
本發明的目的是提供一種具有保護腦細胞組織抗氧化和腦神經抗氧化、防治老年性痴呆症，並能應用於製備治療神經退行性疾病、急性慢性肝損傷類疾病以及由氧自由基引起或與氧自由基有關的其他生理改變或疾病藥物，或用於製備防治痛風病藥物的活性化合物。
具體而言，本發明提供了一種式(1)所示結構的E環取代的水飛薊賓衍生物或其可藥用鹽
式(1) 其中，R1是氫或烷氧基；R2選自氫、烷氧基、滷素、烯丙基、苄氧基、羥基或羥甲基；其條件是當R1為氫或甲氧基時，R2不能為甲氧基或氫；10位和11位同時是R構型或同時為S構型。
本發明優選的式(1)化合物是 化合物1-a2-[2，3-二氫-3-(3-碘-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-b2-[2，3-二氫-3-(3，4-二羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-c2-[2，3-二氫-3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-d2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-e2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-f2-[2，3-二氫-3-(3-甲氧基-4-羥基-5-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-g2-[2，3-二氫-3-(4-羥基-3-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮； 化合物1-h2-[2，3-二氫-3-(3-苄氧基-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮。

本發明的又一個目的是提供了一種通過化學合成方法製備式(1)所示結構的水飛薊賓衍生物的全合成方法，合成式如下
其中，R1是氫或烷氧基；R2選自氫、烷氧基、滷素、烯丙基、苄氧基、羥基或羥甲基；其條件是當R1為氫或甲氧基時，R2不能為甲氧基或氫；式(1)中的10位和11位構型互為反式，即同時是R構型或同時為S構型。OEt是指乙氧基。
具體通過以下步驟實現不同取代的苯甲醛(I-a)在氯仿溶液中和磷葉立德縮合得到不同取代的對羥基肉桂酸乙酯(I-b)，在無水四氫呋喃中，用氫化鋰鋁-三氧化鋁於室溫還原得到不同取代的對羥基肉桂醇(I-c)。再以製備或商業購得的二氫槲皮素(II)和不同取代的對羥基肉桂醇(I-c)在無水苯和無水丙酮混合溶劑中，以碳酸銀為氧化劑，經過氧化偶合得到式(1)所示的E環取代的水飛薊賓衍生物。
本發明的另一個目的是提供了一種式(1)化合物或其可藥用鹽用於製備防治由氧自由基引起或與氧自由基有關的中樞神經損傷性疾病、神經退行性疾病、以及心血管及腦血管病變的藥物用途。
本發明的又一個目的是提供了式(1)化合物或其可藥用鹽用於製備基於抗氧化自由基機制的防治中樞神經損傷性疾病藥物、抗衰老藥物、防治神經退行性疾病的藥物用途。
本發明的再一個目的是提供了一種式(1)化合物或其可藥用鹽用於製備由黃嘌呤氧化酶引起的疾病包括痛風病的藥物用途。
本發明的再一個目的是提供了一種治療上述疾病的藥物組合物，其含有治療有效量的式(1)化合物或其可藥用鹽或其混合物、可藥用輔料和藥用載體。
本發明的有益之處在於設計並製備了E環取代基變化的水飛薊賓衍生物，並用藥理實驗揭示了該類化合物具有保護腦神經細胞、減輕氧化損傷能力。這些衍生物均顯示出比水飛薊賓優越的抗氧化活性，從而可預期發展成為新型抗氧化劑類藥物及用於製備防治包括老年性痴呆症在內的神經退行性疾病藥物的製藥用途。此外，該類新型水飛薊賓衍生物化合物還具有確切的抑制黃嘌呤氧化酶的功效，且抑制活性均超過水飛薊賓，可以預期開發成為治療痛風病藥物，具有潛在的巨大社會效益和經濟效益。本發明中式(1)化合物製備方法簡單、步驟短，汙染小，適於產業化操作。
具體實施方案 為了更好地理解本發明的實質，下面分別用實施例的形式說明式(1)化合物的製備過程，實施例給出了代表性化合物的部分物理和化學及波譜學數據。其中，OEt是指乙氧基、OBn是指苄氧基。必須說明，本發明的實施例是用於說明本發明而不是對本發明的限制。根據本發明的實質對本發明進行的簡單改進都屬於本發明要求保護的範圍。
實施例1化合物I-b-1(3-烯丙基-4-羥基肉桂酸乙酯)的製備
0.30克3-烯丙基-4-羥基苯甲醛(2毫摩爾)，0.70克磷葉立德(2毫摩爾)溶解於10毫升氯仿中，加熱回流5小時，減壓蒸餾除去溶劑，殘餘物經柱層析得白色固體0.30克，收率65％。Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.29，核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ1.33(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，3.42(d，J＝6.4Hz，2H，OCH2CH＝)，4.25(q，J＝7.2Hz，2H，OCH2)，5.16(d，J＝7.2Hz，＝CH2a)，5.20(s，1H，＝CH2b)，6.00(m，1H，CH＝CH2)，6.29(d，J＝16.0Hz，1H，H-8)，6.81(d，J＝8.0Hz，1H，H-6)，7.31(d，J＝8.0Hz，1H，H-5)，7.31(s，1H，H-2)，7.61(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，電噴霧質譜ESI-MS233[M+H]+。
根據實施例1相同的方法，製備得到實施例2-3的化合物 實施例2I-b-2(3-甲氧基-4-羥基-5-烯丙基肉桂酸乙酯)的製備
黃色油狀物；收率74％；Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.25，核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ1.33(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，3.40(d，J＝6.8Hz，2H，OCH2CH＝)，3.91(s，3H，OCH3)，4.25(q，2H，CH2)，5.09(m，2H，CH2＝)，6.00(m，1H，CH2＝CH)，6.28(d，J＝16.0Hz，1H，H-8)，6.92(d，J＝2.0Hz，1H，H-6)，6.96(d，J＝2.0Hz，1H，H-2)，7.59(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)。實施例3I-b-5(3-氯-4-羥基-5-甲氧基肉桂酸乙酯)的製備
淺黃色固體；收率63％；Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.40，核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，3.86(s，3H，OCH3)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H，CH2)，6.38(d，J＝16.0Hz，1H，H-8)，6.98(d，J＝2.0Hz，1H，H-6)，7.20(d，J＝2.0Hz，1H，H-2)，7.56(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)。
實施例4化合物I-c-1(3-溴-4-羥基肉桂醇)的製備
在乾燥，氮氣保護的反應瓶中加入0.11克氫化鋰鋁(3毫摩爾)，0.13克三氯化鋁(1毫摩爾)，緩慢加入10毫升無水四氫呋喃，攪拌至無氣體放出；將溶有0.27克3-溴-4-羥基肉桂酸乙酯(1毫摩爾)的5毫升無水四氫呋喃溶液緩慢加入反應物中，於室溫攪拌1小時後用20％鹽酸酸化至pH＝2，過濾，硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮得黃色油狀物，經柱層析得淺黃色固體0.19克，收率84％。Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.1；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ4.32(d，J＝5.6Hz，2H，H-9)，6.25(dt，J＝5.6，16.0Hz，1H，H-8)，6.56(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.83(d，J＝8.0Hz，1H，H-5)，6.93(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H，H-6)，6.96(d，J＝2.0Hz，1H，H-2)；電噴霧質譜ESI-MS230[M+H]+。
根據實施例4相同的方法製備表一所示實施例5-9化合物 表一
各化合物理化數據如下所示 I-c-2(3-烯丙基-4-羥基肉桂醇)Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.15；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ3.40(d，J＝6.4Hz，2H，ArCH2)，4.31(d，J＝5.2Hz，2H，H-9)，5.15(m，2H，CH2＝)，6.01(m，1H，CH2CH＝)，6.24(dt，J＝5.2，16.0Hz，1H，H-8)，6.53(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.77(d，J＝8.0Hz，1H，H-6)，7.07(s，1H，H-2)，7.16(d，J＝8.0Hz，1H，H-5)。
I-c-3(3-溴-4-羥基-5-甲氧基肉桂醇)Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.12；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ3.85(s，3H，OCH3)，4.49(d，J＝5.4Hz，2H，H-9)，6.25(dt，J＝5.4，16.0Hz，1H，H-8)，6.44(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.97(s，1H，H-2)，7.08(s，1H，H-6)。
I-c-4(3-氯-4-羥基-5-甲氧基肉桂醇)Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.13；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ3.85(s，3H，OCH3)，4.45(d，J＝5.6Hz，2H，H-9)，6.23(dt，J＝5.6，16.0Hz，1H，H-8)，6.47(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.95(d，J＝2.0，8.0Hz，1H，H-2)。
I-c-5(3-碘-4-羥基-5-甲氧基肉桂醇)Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)＝0.12；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ3.85(s，3H，OCH3)，4.40(d，J＝5.6Hz，2H，H-9)，6.24(dt，J＝5.6，16.0Hz，1H，H-8)，6.46(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.93(d，J＝2.0Hz，1H，H-2)，6.95(d，J＝2.0Hz，1H，H-6)。
I-c-6(3-甲氧基-4-羥基-5-烯丙基肉桂醇)Rf(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)＝0.28；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代氯仿)δ3.90(s，3H，OCH3)，3.91(d，J＝6.0Hz，2H，ArCH2)，4.29(d，J＝6.0Hz，2H，H-9)，5.06(m，2H，CH2＝)，6.01(m，1H，CH2CH＝)，6.22(dt，J＝6.0，16.0Hz，1H，H-8)，6.54(d，J＝16.0Hz，1H，H-7)，6.81(s，1H，H-6)，6.83(s，1H，H-2)。
實施例10化合物1-a的製備
在乾燥氮氣保護的反應瓶中投入0.80克(2.63毫摩爾)化合物II(二氫槲皮素，本室自製，HPLC檢測純度大於98％)，1.22克(4毫摩爾)3-碘-4-羥基-5-甲氧基肉桂醇和0.88克碳酸銀，注入20毫升丙酮和80毫升苯，於55-60℃之間保溫3.5小時，過濾，母液濃縮，柱層析(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)分離得淺黃色粉末0.80克，收率33％。
2-[2，3-二氫-3-(3-碘-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮Rf(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)＝0.12；核磁共振氫譜1HNMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.51(m，1H，H-23a)，3.75(m，1H，H-23b)，3.87(s，3H，OCH3)，4.13(m，1H，H-10)，4.62(d，J＝12.0Hz，1H，H-3)，4.99(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，5.08(d，J＝12.0Hz，1H，H-2)，5.95(s，1H，H-6)，5.98(s，1H，H-8)，6.92-7.41(m，5H，Ar-H)，11.65(s，1H，5-OH)；由10位和11位氫J值為8.0Hz的大耦合，可知二者互為反式構型。
電噴霧質譜ESI-MS607[M-H]+。
根據實施例10相同的方法製備表二所示實施例11-17化合物 表二 各化合物理化數據如下所示 化合物1-b(2-[2，3-二氫-3-(3，4-二羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸＝11∶0.5∶1∶0.1)＝0.23；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.46(m，1H，H-23a)，3.71(m，1H，H-23b)，4.08(m，1H，H-10)，4.62(d，J＝11.6Hz，1H，H-3)，4.97(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，5.06(d，J＝11.6Hz，1H，H-2)，5.94(s，1H，H-6，)，5.97(s，1H，H-8)，6.86-7.23(m，6H，Ar-H)，11.66(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS467[M-H]+。
化合物1-c(2-[2，3-二氫-3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)＝0.11；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.57(m，1H，H-23a)，3.83(m，1H，H-23b)，3.91(s，3H，OCH3)，4.18(m，1H，H-10)，4.66(d，J＝11.2Hz，1H，H-3)，5.04(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，5.12(d，J＝11.2Hz，1H，H-2)，5.98(s，1H，H-6)，6.00(s，1H，H-8)，6.98-7.16(m，5H，Ar-H)，11.70(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS515[M-H]+。
化合物1-d(2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸＝11∶0.5∶1∶0.1)＝0.25；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.42(m，1H，H-23a)，3.74(m，1H，H-23b)，4.12(m，1H，H-10)，4.58(d，J＝11.6Hz，1H，H-3)，4.90(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，5.00(d，J＝11.6Hz，1H，H-2)，5.88(s，1H，H-6)，5.91(s，1H，H-8)，6.90-7.35(m，6H，Ar-H)，11.66(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS452[M+H]+。
化合物1-e(2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶乙醇＝20∶1)＝0.16；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.42(m，1H，H-23a)，3.69(m，1H，H-23b)，3.78(s，3H，OCH3)，4.04(m，1H，H-10)，4.54(dd，J＝6.0，12.0Hz，H-3)，4.91(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，4.99(d，J＝12.0Hz，1H，H-2)，5.86(s，1H，H-6)，5.88(s，1H，H-8)，6.83-7.15(m，5H，Ar-H)，11.56(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS559[M-H]-。
化合物1-f(2-[2，3-二氫-3-(3-甲氧基-4-羥基-5-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)＝0.10；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.42(d，J＝6.0Hz，2H，CH2CH＝CH2)，3.51(m，1H，H-23a)，3.74(m，1H，H-23b)，4.11(m，1H，H-10)，3.87(s，3H，OCH3)，4.68(dd，J＝11.6，3.2Hz，H-3)，4.98(d，J＝7.2Hz，1H，H-11)，5.05(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.10(d，J＝11.6Hz，1H，H-2)，5.97(s，1H，H-6)，6.00(s，1H，H-8)，6.03(m，1H，CH2CH＝CH2)，6.91-7.27(m，5H，Ar-H)，11.72(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS523[M+H]+。
化合物1-g(2-[2，3-二氫-3-(4-羥基-3-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)＝0.13；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.42(d，J＝6.0Hz，2H，CH2CH＝CH2)，3.51(m，1H，H-23a)，3.74(m，1H，H-23b)，4.11(m，1H，H-10)，4.68(dd，J＝11.6，3.2Hz，H-3)，4.98(d，J＝7.2Hz，1H，H-11)，5.05(m，2H，CH2CH＝CH2)，5.10(d，J＝11.6Hz，1H，H-2)，5.97(s，1H，H-6)，6.00(s，1H，H-8)，6.03(m，1H，CH2CH＝CH2)，6.91-7.27(m，6H，Ar-H)，11.72(s，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS491[M-H]+。
化合物1-h(2-[2，3-二氫-3-(3-苄氧基-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮)Rf(氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝25∶1∶0.25)＝0.15；核磁共振氫譜1H NMR(400MHz，氘代丙酮)δ3.50(m，1H，H-23a)，3.73(m，1H，H-23b)，4.16(m，1H，H-10)，4.68(d，J＝11.6Hz，H-3)，4.98(d，J＝8.0Hz，1H，H-11)，5.11(d，J＝11.6Hz，1H，H-2)，5.19(s，2H，BnCH2)，5.98(s，1H，H-6)，6.00(s，1H，H-8)，6.93-7.51(m，11H，Ar-H)，11.71(br，1H，5-OH)；電噴霧質譜ESI-MS557[M-H]+。
式(1)化合物具有多種重要的生物活性，本發明通過多種藥效學試驗模型對該化合物抗氧化活性進行了測試，發現其具有很強的對抗雙氧水引起的PC12細胞損傷作用，即對模擬腦神經細胞的PC12細胞有抗氧化損傷保護作用。說明其對保護腦神經抗氧化、防治神經退行性疾病有積極作用，可以用於製備保護腦神經抗氧化、防治老年性痴呆症等神經退行性疾病藥物的用途。此外，該類化合物還被發現具有抑制黃嘌呤氧化酶活性的作用，因而可以預期作為治療痛風類疾病的藥物。
本發明的式(1)化合物或其可藥用鹽可以與藥學上常用的輔料或載體結合，製備得到具有防禦自由基引起的損害腦神經細胞活性的抗氧化組合物，可用於預防或治療與腦神經細胞損傷相關的疾病，如老年性痴呆等神經退行性疾病的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以採用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、貼劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發明的式(1)化合物或其可藥用鹽還可以與現已上市的抗自由基氧化劑藥物如超氧化物歧化酶(SOD)等聯合使用，製備得到具有防禦自由基引起的損害生理活性的抗氧化藥物組合物，用於治療上述疾病。其也可與其他保護腦神經抗氧化、防治老年性痴呆症藥物聯合使用，得到抗老年性痴呆藥物組合物。式(1)化合物或其可藥用鹽還可以用於防治帕金森氏症、亨廷頓舞蹈病、蛋白感染素病(prion disease)、肌萎縮性(脊椎)側索硬化等神經退行性疾病，上述藥物組合物可以採用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、貼劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發明的式(1)化合物或其可藥用鹽還可以與現已上市的治療痛風病藥物如黃嘌呤氧化酶抑制劑別嘌醇等聯合使用，製備得到具有治療痛風病的藥物組合物，用於痛風病的臨床治療。上述各類藥物組合物可以採用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、貼劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。
本發明中所述劑型如片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、貼劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑和軟膏劑以及各種緩釋、控釋劑型和納米製劑都可以根據現已公認的藥劑學常識常規製備而得，在這些公知知識和技術基礎上製備出的含有本發明權利要求化合物的藥物或藥物組合物的其它劑型都在本發明的保護範圍內。
為了更好地理解本發明的實質，下面分別用藥理實施例的形式舉例說明式(1)化合物對雙氧水(H2O2)所致PC12細胞損傷的保護作用試驗、對黃嘌呤氧化酶(XO)的抑制作用試驗之結果，及其在製藥領域中的用途。藥理實施例給出了化合物的部分活性數據。同樣必須說明，本發明列舉的這些藥理實施例是用於說明本發明而不是對本發明的限制，根據本發明的實質對本發明進行的簡單改進都屬於本發明要求保護的範圍。
藥理實施例1化合物1-a對雙氧水所致大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞損傷的保護作用試驗 1.1實驗材料與樣品 1.1.1細胞大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞(PC12細胞)購自中科院上海細胞所。
1.1.2實驗試劑 1.1.2.1雙氧水(hydrogen peroxide，H2O2)、硝基四氮唑蘭(nitroblue tetrazolium，NBT)、菲咯嗪(ferrozine)購自Sigma公司；Tris鹼、DMEM培養基購自Gibco公司；MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽)購自Amresco公司。
1.1.2.2水飛薊賓(Silybin)購自遼寧盤錦天緣藥業有限公司，HPLC檢測純度98％。
1.1.2.3小牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司；青黴素和鏈黴素由石家莊製藥集團有限公司生產；其它試劑均為國產分析純，購自杭州華東醫藥試劑有限公司。
1.1.3儀器 1.1.3.1酶標儀Synergy-HT型，BIO-TEK公司； 1.1.3.2立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器LDZX-40BI型，上海申安醫療器材廠； 1.1.3.3紫外分光光度計UV-1201型，北京瑞利分析儀器公司； 1.1.3.4超純水系統UPWS-I-60D型，杭州永潔達淨化科技有限公司； 1.1.3.5除菌過濾器Sterifil 500型，Millipore公司； 1.1.3.6氣浴恆溫振蕩器THZ-C，江蘇省金壇市醫療儀器廠； 1.1.3.7CO2細胞培養箱MMM，德國公司； 1.1.3.8倒置顯微鏡XD-2型，重慶光電儀器有限公司； 1.2實驗原理 雙氧水(H2O2)是一種主要的活性自由基的前體，它可引起中樞神經系統細胞的凋亡，PC12細胞可模擬腦神經細胞，因此常用它來作為研究藥物與神經細胞之間關係的模型，用MTT測細胞的存活率，如果待測化合物有清除由H2O2引起的自由基，減輕氧化損傷，保護神經細胞的作用，則細胞存活率高，OD值就高，反之就低(楊雷香，周長新，趙昱等，生薑中二苯庚烷類化合物的抗氧化和細胞毒活性研究，中國中藥雜誌，2009年)。
1.3細胞培養 PC12細胞用含10％小牛血清，100U/毫升青黴素和100U/毫升鏈黴素的DMEM培養基培養，於37℃、5％二氧化碳(CO2)細胞培養箱中孵育，常規方法傳代培養。
1.4實驗方法 1.4.1細胞毒性的測定首先用改良的MTT法測定了待測化合物對PC12細胞增殖的作用。PC12細胞用胰酶-EDTA消化液消化，收集細胞，計數，用含10％小牛血清的DMEM培養基稀釋至8000個/毫升的密度，然後接種於96孔細胞板中，細胞培養箱中繼續培養，24小時後，分別將新配的待測的二甲亞碸溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最終濃度分別為32、16和8微克/毫升。72小時後，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理鹽水溶液，繼續在37℃，5％CO2潮溼空氣的培養箱中培養3小時，棄去原液，每孔中加入150微升二甲亞碸，振蕩溶解生成的MTT晶體甲臢，用酶標儀在570nm波長下比色，細胞生長抑制率計算公式如下 ％細胞生長抑制率＝(OD溶劑對照-OD樣品)/OD溶劑對照×100％。
1.4.2化合物對H2O2所致PC12細胞損傷的保護作用的測定 PC12細胞用DMEM培養基培養，培養基中含10％牛血清，100U/毫升青黴素和100U/毫升鏈黴素。細胞以每孔8000個的密度加到96孔板中，在37℃，50％CO2潮溼空氣的培養箱中培養36小時。用倒置顯微鏡觀觀察細胞的形態變化以及用MTT法測定細胞的存活率。細胞經36小時的孵育後，分別將新配的化合物1-a和陽性對照的二甲亞碸溶液以濃度梯度加入到各孔中。作用2小時後加入新配的H2O2(終濃度為600微摩爾濃度)作用3小時，顯微鏡觀察記錄，棄去原培養液，加入新的培養液100微升，然後加入MTT10微升，3小時後，小心吸去培養液，加入150微升DMSO溶解甲臢，於570nm處讀數。採用水飛薊賓為陽性對照藥物。
1.4.3試驗結果見表三。
表三化合物1-a及陽性對照槲皮素對雙氧水損傷PC12細胞保護率

1.5結論 試驗結果表明，化合物1-a具有明確的對抗自由基引起的PC12細胞損傷作用，即對模擬腦神經細胞的PC12細胞有抗氧化損傷保護作用。而且在高(32微克/毫升)、中(16微克/毫升)、低(8微克/毫升)濃度下，其清除自由基保護細胞的能力均遠超過陽性對照水飛薊賓，說明該類E環取代的水飛薊賓類衍生物屬於具有強效保護模擬腦神經細胞的PC12細胞作用的抗氧化物質。
藥理實施例2化合物1-e對雙氧水所致大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞損傷的保護作用試驗 2.1實驗材料與樣品 2.1.1細胞大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞(PC12細胞)購自中科院上海細胞所。
2.1.2實驗試劑 2.1.2.1雙氧水(hydrogenperoxide，H2O2)、硝基四氮唑蘭(nitroblue tetrazolium，NBT)、菲咯嗪(ferrozine)購自Sigma公司；Tris鹼、DMEM培養基購自Gibco公司；MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽)購自Amresco公司。
2.1.2.2水飛薊賓(Silybin)購自遼寧盤錦天緣藥業有限公司，HPLC檢測純度98％。
2.1.2.3小牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司；青黴素和鏈黴素由石家莊製藥集團有限公司生產；其它試劑均為國產分析純，購自杭州華東醫藥試劑有限公司。
2.1.3儀器同藥理實施例1中所使用儀器。
2.2實驗原理同藥理實施例1。
2.3細胞培養同藥理實施例1。
2.4實驗方法 2.4.1細胞毒性的測定首先用改良的MTT法測定了待測化合物對PC12細胞增殖的作用。PC12細胞用胰酶-EDTA消化液消化，收集細胞，計數，用含10％小牛血清的DMEM培養基稀釋至8000個/毫升的密度，然後接種於96孔細胞板中，細胞培養箱中繼續培養，24小時後，分別將新配的待測的二甲亞碸溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最終濃度分別為32、16和8微克/毫升。72小時後，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理鹽水溶液，繼續在37℃，5％CO2潮溼空氣的培養箱中培養3小時，棄去原液，每孔中加入150微升二甲亞碸，振蕩溶解生成的MTT晶體甲臢，用酶標儀在570nm波長下比色，細胞生長抑制率計算公式如下 ％細胞生長抑制率＝(OD溶劑對照-OD樣品)/OD溶劑對照×100％。
2.4.2化合物對H2O2所致PC12細胞損傷的保護作用的測定 PC12細胞用DMEM培養基培養，培養基中含10％牛血清，100U/毫升青黴素和100U/毫升鏈黴素。細胞以每孔8000個的密度加到96孔板中，在37℃，50％CO2潮溼空氣的培養箱中培養36小時。用倒置顯微鏡觀觀察細胞的形態變化以及用MTT法測定細胞的存活率。細胞經36小時的孵育後，分別將新配的化合物1-e和陽性對照的二甲亞碸溶液以濃度梯度加入到各孔中。作用2小時後加入新配的H2O2(終濃度為600微摩爾/升)作用3小時，顯微鏡觀察記錄，棄去原培養液，加入新的培養液100微升，然後加入MTT10微升，3小時後，小心吸去培養液，加入150微升DMSO溶解甲臢，於570nm處讀數。採用水飛薊賓為陽性對照藥物。
2.4.3試驗結果見表四。
表四化合物1-e及陽性對照槲皮素對雙氧水損傷PC12細胞保護率
2.5結論 試驗結果表明，化合物1-e具有很強的對抗雙氧水引起的PC12細胞損傷作用，即對模擬腦神經細胞的PC12細胞有抗氧化損傷保護作用。而且在高(32微克/毫升)、中(16微克/毫升)、低(8微克/毫升)濃度下，其清除自由基保護細胞的能力均遠超過陽性對照水飛薊賓100％以上，說明該類E環取代的水飛薊賓類衍生物屬於具有強效保護模擬腦神經細胞的PC12細胞作用的抗氧化物質。
測定化合物對H2O2所致PC12細胞損傷的保護作用可作為初步探討其保護中樞腦神經細胞的作用機理。本發明中的E環取代水飛薊賓衍生表現出對雙氧水損傷所致PC12細胞的保護作用，說明其對老年性痴呆證等神經退行性疾病的治療有積極作用。
藥理實施例3化合物1-e對黃嘌呤氧化酶的抑制作用試驗 3.1實驗材料與樣品 3.1.1試驗動物SD(sprague-dawley)大鼠；合格證號SCXK(浙2007-0029)。
3.1.2實驗試劑 3.1.2.1吩嗪硫酸甲酯(phenazine methosulfate，PMS)、硝基四氮唑蘭(nitrobluetetrazolium，NBT)、黃嘌呤、菲咯嗪(ferrozine)購自Sigma公司；Triton X-100購自Gibco公司。
3.1.2.2陽性對照藥物水飛薊賓(Silybin)購自遼寧盤錦天緣藥業有限公司，HPLC檢測純度98％。磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀及其它試劑均為國產分析純(杭州華東試劑公司)。
3.1.3儀器 3.1.3.1酶標儀Synergy-HT型，BIO-TEK公司； 3.1.3.2立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器LDZX-40BI型，上海申安醫療器材廠； 3.1.3.3紫外分光光度計UV-1201型，北京瑞利分析儀器公司； 3.1.3.4超純水系統UPWS-I-60D型，杭州永潔達淨化科技有限公司； 3.1.3.5除菌過濾器Sterifil500型，Millipore公司； 3.1.3.6氣浴恆溫振蕩器THZ-C，江蘇省金壇市醫療儀器廠； 3.1.3.6玻璃勻漿器國產。
3.2實驗方法 3.2.1取SD大鼠，斷頭處死，迅速取出肝臟至預冷的磷酸緩衝液(100毫摩爾/升，pH 8.75)中，去除血管，剪碎後用磷酸緩衝液1∶1(w/v)稀釋後在冰上直接勻漿，於-20℃保存，用前用磷酸緩衝液(1∶7)稀釋，4℃條件下離心(8000rpm/10分鐘)，取上清作為酶原。
3.2.2化合物對黃嘌呤氧化酶(XO)的抑制作用測定採用酶聯免疫ELISA法樣品孔中加入底物黃嘌呤(0.1毫克/毫升，600微升)，酶(30微升)，化合物1-e用二甲亞碸溶解，用磷酸緩衝液稀釋，每孔30微升，使其終濃度為40微克/毫升、20微克/毫升和10微克/毫升，加入硝基蘭四氮唑和吩嗪甲硫酸酯(30微升)，最後加入Triton X-100(0.4％，10微升)，在37℃中水浴保溫2小時，於550nm波長下比色測定。化合物對黃嘌呤氧化酶抑制率由樣品OD值對於空白和對照OD值計算。以水飛薊賓為陽性對照。
XO抑制率(％)＝[(OD標準管-OD空白管)-(OD樣品管-OD樣品空白管)]/(OD標準管-OD空白管)×100％。
3.3實驗結果見表五。
表五化合物1-e及陽性對照藥物對黃嘌呤氧化酶抑制率
3.4結論 根據實驗結果可以得知，化合物1-e在40微克/毫升時對黃嘌呤氧化酶抑制率為35.9％，在20微克/毫升時對黃嘌呤氧化酶抑制率為25.4％，其對XO抑制活性呈量效關係，對黃嘌呤氧化酶有明確的抑制活性；且其抑制活性在同一測試濃度明顯優於陽性對照水飛薊賓。說明該化合物具有進一步發展成為療效確切的黃嘌呤酶抑制劑、或與其他黃嘌呤氧化酶抑制劑藥物共同開發使用的潛能。
藥理實施例4化合物1-h對黃嘌呤氧化酶的抑制作用試驗 4.1實驗材料與樣品 4.1.1試驗動物SD(sprague-dawley)大鼠；合格證號SCXK(浙2007-0029)。
4.1.2實驗試劑 4.1.2.1吩嗪硫酸甲酯(phenazine methosulfate，PMS)、硝基四氮唑蘭(nitrobluetetrazolium，NBT)、黃嘌呤、菲咯嗪(ferrozine)購自Sigma公司；Triton X-100購自Gibco公司。
4.1.2.2陽性對照藥物水飛薊賓(Silybin)購自遼寧盤錦天緣藥業有限公司，HPLC檢測純度98％；磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀及其它試劑均為國產分析純(杭州華東試劑公司)。
4.1.3儀器 4.1.3.1酶標儀Synergy-HT型，BIO-TEK公司； 4.1.3.2立式自動電熱壓力蒸汽滅菌器LDZX-40BI型，上海申安醫療器材廠； 4.1.3.3紫外分光光度計UV-1201型，北京瑞利分析儀器公司； 4.1.3.4超純水系統UPWS-I-60D型，杭州永潔達淨化科技有限公司； 4.1.3.5除菌過濾器Sterifil500型，Millipore公司； 4.1.3.6氣浴恆溫振蕩器THZ-C，江蘇省金壇市醫療儀器廠； 4.1.3.6玻璃勻漿器國產。
4.2實驗方法 4.2.1取SD大鼠，斷頭處死，迅速取出肝臟至預冷的磷酸緩衝液(100毫摩 爾濃度，pH 8.75)中，去除血管，剪碎後用磷酸緩衝液1∶1(w/v)稀釋後在冰上直接勻漿，於-20℃保存，用前用磷酸緩衝液(1∶7)稀釋，4℃條件下離心(8000rpm/10分鐘)，取上清作為酶原。
4.2.2化合物對黃嘌呤氧化酶(XO)的抑制作用測定採用酶聯免疫ELISA法樣品孔中加入底物黃嘌呤(0.1毫克/毫升，600微升)，酶(30微升)，化合物1-h用二甲亞碸溶解，用磷酸緩衝液稀釋，每孔30微升，使其終濃度為40微克/毫升、20微克/毫升和10微克/毫升，加入硝基蘭四氮唑和吩嗪甲硫酸酯(30微升)，最後加入Triton X-100(0.4％，10微升)，在37℃中水浴保溫2小時，於550nm波長下比色測定。化合物對黃嘌呤氧化酶抑制率由樣品OD值對於空白和對照OD值計算。以水飛薊賓為陽性對照。
XO抑制率(％)＝[(OD標準管-OD空白管)-(OD樣品管-OD樣品空白管)]/(OD標準管-OD空白管)×100％。
4.3實驗結果見表六。
表六化合物1-h及陽性對照對黃嘌呤氧化酶抑制率
4.4結論 根據實驗結果可以得知，化合物1-h在40微克/毫升時對黃嘌呤氧化酶抑制率為41.7％，在20微克/毫升時對黃嘌呤氧化酶抑制率為25.6％，說明其對黃嘌呤氧化酶有明確的抑制活性；且其對XO抑制活性呈量效關係。值得注意的是其抑制活性在同一測試濃度下均比陽性對照水飛薊賓高超過三倍以上，說明該類E環取代的水飛薊賓類化合物確實具有進一步發展成為療效確切的黃嘌呤酶抑制劑，或與其他黃嘌呤氧化酶抑制劑藥物共同開發使用的潛能。值得進一步開發。
在上述說明書闡述本發明時，同時提供了實施例和藥理相關實施例的目的是舉例說明本發明的實際操作過程和本發明的意義。在進入本發明權利要求和其等同物範圍內時，本發明的實際應用包括所有一般變化、配合，或改進。
權利要求
1.一種具有式(1)所示結構的E環取代水飛薊賓衍生物或其可藥用鹽
式(1)
其中，R1是氫或烷氧基；R2選自氫、烷氧基、滷素、烯丙基、苄氧基、羥基或羥甲基；其條件是當R1為氫或甲氧基時，R2不能為甲氧基或氫；10位和11位同時是R構型或同時為S構型。
2.根據權利要求1的式(1)所示結構的E環取代水飛薊賓衍生物，其特徵為式(1)化合物是選自
化合物1-a2-[2，3-二氫-3-(3-碘-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-b2-[2，3-二氫-3-(3，4-二羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-c2-[2，3-二氫-3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-d2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-e2-[2，3-二氫-3-(3-溴-4-羥基-5-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-f2-[2，3-二氫-3-(3-甲氧基-4-羥基-5-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-g2-[2，3-二氫-3-(4-羥基-3-烯丙基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮；
化合物1-h2-[2，3-二氫-3-(3-苄氧基-4-羥基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯並二氧六環-6-]-2，3-二氫-3，5，7-三羥基-4H-1-苯並吡喃-4-酮。
3.根據權利要求1、2之一的E環取代水飛薊賓衍生物或其可藥用鹽或者它們的混合物用於製備防治中樞神經氧化損傷或神經退行性疾病的藥物用途。
4.根據權利要求3所述的用途，其特徵在於所述的中樞神經損傷或神經退行性疾病是指老年性痴呆症、帕金森氏症、亨廷頓舞蹈病、蛋白感染素病、肌萎縮性脊椎側索硬化。
5.一種用於防治中樞神經損傷或神經退行性疾病的藥物組合物，其含有治療有效量的作為活性成分的權利要求1、2之一的E環取代水飛薊賓衍生物或其可藥用鹽和可藥用輔料。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於所述的中樞神經損傷或神經退行性疾病是指老年性痴呆症、帕金森氏症、亨廷頓舞蹈病、蛋白感染素病、肌萎縮性脊椎側索硬化。
7.根據權利要求1、2之一的E環取代水飛薊賓衍生物或其可藥用鹽或者它們的混合物用於製備黃嘌呤氧化酶抑制劑的藥物用途。
8.一種用於防治痛風病的藥物組合物，其含有治療有效量的作為活性成分的根據權利要求1、2之一的化合物或其可藥用鹽或者它們的混合物、可藥用輔料和藥用載體。
全文摘要
本發明涉及一類E環取代的水飛薊賓衍生物及其製備方法和醫藥用途，具體而言，本發明涉及一類水飛薊賓E環上取代的衍生物的合成，以及該類化合物或其可藥用鹽在製備防治氧化應激引起的生理病變或疾病的藥物用途。該類化合物具有保護雙氧水誘發的大鼠腎上腺嗜鉻瘤PC12細胞損傷的活性即對模擬腦神經細胞的PC12細胞有抗氧化損傷保護作用；其還具抑制黃嘌呤氧化酶之活性，故而可以預期發展成為製備防治腦神經細胞氧化病變、老年性痴呆症等神經退行性疾病的藥物，以及用於製備防治由黃嘌呤氧化酶引起的疾病包括痛風病的藥物用途。
文檔編號C07D407/04GK101781292SQ20101011729
公開日2010年7月21日 申請日期2010年3月4日 優先權日2010年3月4日
發明者趙昱, 龔景旭, 劉光明, 楊雷香, 巫秀美, 汪峰, 彭芳, 譚仁祥, 曾蘇 申請人:大理學院