一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基及其應用的製作方法

2023-11-06 07:41:47

一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基及其應用的製作方法
【專利摘要】本發明為微生物領域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基，所述培養基的組分包括21g/L皰肉培養基、4.0g/L乳糖、15.0g/L胰月示、7.55g/L大豆腖、1.54g/L偏亞硫酸氫鈉、1.5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7.5-7.7。所述皰肉培養基為每升皰肉培養基中含有蛋白腖20.0g、牛肉浸粉3.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性澱粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。本發明培養基組方簡單，製備操作方便，成本低，利於推廣應用；菌生長迅速，變異率低；便於觀察，分析。
【專利說明】-種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基及其應用

【技術領域】
[0001] 本發明為微生物領域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基及 其應用。

【背景技術】
[0002] 產氣莢膜梭菌（C.perfringens)是臨床上氣性壞疽病原菌中最多見的一種梭菌， 因能分解肌肉和結締組織中的糖，產生大量氣體，導致組織嚴重氣腫，繼而影響血液供應， 造成組織大面積壞死，加之本菌在體內能形成莢膜，故名產氣夾膜梭菌。
[0003] 肉毒桿菌是一種生長在缺氧環境下的細菌，在罐頭食品及密封醃漬食物中具有極 強的生存能力，是毒性最強的毒素之一。肉毒桿菌是一種致命病菌，在繁殖過程中分泌毒 素，是毒性最強的蛋白質之一。軍隊常常將這種毒素用於生化武器。人們食入和吸收這種 毒素後，神經系統將遭到破壞，出現頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等症狀。
[0004] 培養基（Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養 基還含有抗菌素和色素，用於單種微生物培養和鑑定。培養基由於配製的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮後，易被細菌汙染或分解變 質，因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基（如組織培 養基），較長時間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內。由於液體培養基不易長期保管，現在 均改制成粉末。
[0005] 培養基根據化學分類為天然培養基、組合培養基和半組合培養基；根據物理分類 為液體培養基、固定培養基和脫水培養基；根據微生物分類為選擇性培養基、鑑別培養基。


【發明內容】

[0006] 本發明克服現有技術中的不足，提供一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養 基及其應用。
[0007] 本發明運用生物化學，微生物學及無機、有機、分析化學和螢光技術的原理，對不 同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養組分的組合進行篩選，對培養基 的pH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環境等物化因子進行了比較，研究出了 本發明的培養基。
[0008] 本發明所採用的技術方案為：
[0009] -種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基，所述培養基的組分包括21g/L皰 肉培養基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆腖、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸 檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0010] 在以上方案的基礎上，所述皰肉培養基為每升皰肉培養基中含有蛋白腖20. 0g、 牛肉浸粉3. 0g、酵母浸粉5. 0g、可溶性澱粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉 〇· 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。 toon] 本發明還公開了所述的胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基的應用，用於產 氣莢膜梭菌的平板計數。
[0012] 胰月示、大豆腖、蛋白腖和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳 糖為可發酵糖類提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養基的凝固劑；D-環絲氨酸抑制非梭菌的細菌。
[0013] 稱取本品47. 0g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝於500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養基（50°C )中，加入過濾除菌的0. 5% D-環絲氨酸溶液20ml。
[0014] 本發明的有益效果：
[0015] 1、培養基組方簡單，製備操作方便，成本低，利於推廣應用；
[0016] 2、菌生長迅速，變異率低；
[0017] 3、便於觀察，分析。

【具體實施方式】 [0018] 實施例1 :
[0019] 一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基，所述培養基的組分包括21g/L皰 肉培養基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆腖、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸 檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0020] 所述皰肉培養基為每升皰肉培養基中含有蛋白腖20. 0g、牛肉浸粉3. 0g、酵母浸 粉5. 0g、可溶性澱粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
[0021] 胰月示、大豆腖、蛋白腖和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子；葡萄糖和乳 糖為可發酵糖類提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養基的凝固劑；D-環絲氨酸抑制非梭菌的細菌。
[0022] 稱取本品47. 0g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝於500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養基（50°C )中，加入過濾除菌的0. 5% D-環絲氨酸溶液20ml。
[0023] 在 36 ± 1 °C 培養 20-24 小時
[0024] 質控菌株 |生長情況|其它特徵 產氣莢膜梭菌i 黑色菌落 生孢梭菌 +++ / 沙門氏菌 ~ 7
[0025] 上述【具體實施方式】中的實施例是說明性的而不是限定性的，可按照所限定範圍列 舉出若干個實施例，因此在不脫離本發明總體構思下所做的任何變化和修改，都應屬本發 明所限定的保護範圍之內。
【權利要求】
1. 一種胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基，其特徵在於所述培養基的組分包括 21g/L皰肉培養基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆腖、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、 1. 5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
2. 根據權利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基，其特徵在於所述 皰肉培養基為每升皰肉培養基中含有蛋白腖20. Og、牛肉浸粉3. Og、酵母浸粉5. Og、可溶性 澱粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
3. -種根據權利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基的應用，其特 徵在於用於產氣莢膜梭菌的平板計數。
【文檔編號】C12R1/145GK104232735SQ201410473324
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月16日 優先權日:2014年9月16日
【發明者】吳聯順, 楊光 申請人:青島永通電梯工程有限公司