小牛血去蛋白提取物及製備工藝的製作方法
2023-11-06 21:51:07 1
專利名稱：小牛血去蛋白提取物及製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及小牛血去蛋白提取物及製備工藝，完善小牛血去蛋白提取物的生產工藝，屬於醫藥技術領域。
背景技術：
小牛血去蛋白提取物(protein-free calf blood extract)是小牛血去蛋白提取物注射液的主要原料。小牛血去蛋白提取物是1-6個月的幼牛血經過除蛋白後得到的小分子生物活性物質，其主要成分為胺基酸、小肽、核酸及其它含氮化合物。小牛血去蛋白提取物可顯著提高網狀內皮系統活力，提高酶活性，加速細胞的氧化磷酸化反應和ATP的合成，激活細胞呼吸，促進新陳代謝，加快組織再生。該藥物對腦神經損傷、腦卒中及腦梗塞等疾病有積極的治療效果，同時還具有眼角膜修復、增強記憶力 等作用，在臨床上應用廣泛。目前，國內生產小牛血去蛋白提取物的製備方法是有機溶劑提取法。如中國發明專利(CN200710194950. 2)所公開的方法(I)將小牛血攪拌、離心得到血清；(2)將離心得到的血清加熱去除蛋白，過濾後濃縮濾液；(3)向濃縮後的濾液中加入乙醇進行醇沉，過濾去除沉澱出的蛋白，濾液濃縮回收乙醇，得到醇沉後的濾液；(4)向醇沉後的濾液中加入酸調節PH值為酸性,加入活性炭並加熱進行脫色和水解,過濾收集濾液；(5)將收集的濾液用鹼調節PH至6. 8 8，冷凍除蛋白，過濾得到濾液，再冷凍、過濾，反覆2 5次，所述冷凍溫度為-50 0°C，時間為12 72小時；(6)將冷凍除蛋白後得到的濾液用纖維膜超濾除高分子物質，得到小牛血去蛋白提取物。但採用上述方法進行提取不僅造成環境汙染、生產成本高，更重要的是有機溶劑導致了具有生物活性化合物的變性失活，使藥效學活性下降。
發明內容
本發明提供一種小牛血去蛋白提取物，其呼吸活力提聞了 80%,提聞了藥品質量標準。本發明提供一種小牛血去蛋白提取物的製備工藝，完善小牛血去蛋白提取物生產工藝，降低成本、減少汙染、縮短生產周期、提高產品的質量標準，實現產業化生產目標。本發明公開的小牛血去蛋白提取物注射液的製備工藝，解決方案如下採1-6個月幼牛靜脈血，用物理方法將血液凝固，採用壓榨法將血液中的蛋白去除，得到的液體進行酸鹼處理，將其中的酸及鹼性蛋白質雜質除淨，將所得血清進行超濾滅菌，最後進行灌裝。本發明小牛血去蛋白提取物注射液的具體工藝，包括以下步驟
在無菌條件下，採取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調節PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性8 10，再超濾(20000)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。根據國家食品藥品監督管理局頒布暫行的小牛血去蛋白注射液質量標準，採用「呼吸活力測定法」測定該藥物活力，並以刺激指數(SI)作為質量控制參數。本發明工藝生產的小牛血去蛋白提取物注射液SI (活力指標)為4. 3^4. 8，而規定的SI為2. 5，其呼吸活力提聞了 80%,提聞了藥品質量標準。發明的積極效果在於採用物理方法代替了有機溶劑沉澱蛋白質的方法，降低成本、減少汙染、縮短生產周期；保持了製劑的藥理學活性在實驗室研究階段，產物的呼吸活力活性比有機溶劑法提聞了 80% ;大大提聞了藥品的質量標準。
具體實施例方式實施例I
在無菌條件下，採取5個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾；50kg濾液中加入鹽酸調節PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性8 10，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮25kg ；5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。檢測活性指標SI為4. 5。實施例2
在無菌條件下，採取6個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾；55kg濾液中加入鹽酸調節PH值4為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集·濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性10，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮28kg ;5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。檢測活性指標SI為 4. 3。實施例3
在無菌條件下，採取2個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾；48kg濾液中加入鹽酸調節PH值3為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性9，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮22kg ;5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。檢測活性指標SI為 4. 8。
權利要求
1.一種小牛血去蛋白提取物，是通過以下方法製成的在無菌條件下，採取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調節PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性8 10，再超濾(20000)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。
2.一種小牛血去蛋白提取物的製備工藝，包括以下步驟 在無菌條件下，採取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經壓榨後，上清液經無機膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調節PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾後，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調節為鹼性8 10，再超濾(20000)，收集濾液並調節至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然後滅菌，灌裝。
全文摘要
本發明提供一種小牛血去蛋白提取物及製備工藝，採1-6個月幼牛靜脈血，用物理方法將血液凝固，採用壓榨法將血液中的蛋白去除，得到的液體進行酸鹼處理，將其中的酸及鹼性蛋白質雜質除淨，將所得血清進行超濾滅菌，最後進行灌裝。本發明完善小牛血去蛋白提取物生產工藝，其呼吸活力提高了80%，提高了藥品質量標準降低成本、減少汙染、縮短生產周期、提高產品的質量標準，實現產業化生產目標。
文檔編號A61P27/02GK102908363SQ201210434370
公開日2013年2月6日 申請日期2012年11月5日 優先權日2012年11月5日
發明者安麗萍, 杜培革, 李紅宇, 苑廣信, 韓笑, 姜爽, 遲仁志, 徐廣宇, 邵曉彤, 周亭亭 申請人:北華大學