複方血栓通製劑在製備治療PAF介導疾病藥物中的用途的製作方法

2023-12-08 04:12:31

本發明涉及複方血栓通製劑的新用途，尤其是在製備治療paf介導的疾病藥物中的用途。

背景技術：

血小板活化因子(platelet-activatingfactor,paf；1-o-烷基-2-乙醯基-sn-甘油-3磷酸膽鹼)，是一種具有生物活性的脂質遞質，也是迄今為止所知的最強的血小板活化劑。體內許多細胞，如嗜酸、嗜鹼、嗜中性粒細胞、單核巨嗜細胞、肥大細胞、血小板和內皮細胞等等，在一定條件刺激下均可產生paf，paf在體內有著類似於激素的生物學活性，可作用於多種細胞和組織。研究表明，paf不但可促進血小板聚集，還可使中性粒細胞聚集，導致氧自由基、腫瘤壞死因子、白介素等的釋放，從而增加血管通透性，導致微循環障礙及炎性反應。臨床上，paf與心血管疾病、哮喘、急性胰腺炎、胃腸潰瘍等疾病密切相關。目前，已有大量關於paf受體拮抗劑的研究。由於大量的病理學免疫和炎性反應由paf介導，尋找抑制paf活性的新的藥物就顯得非常有必要了。

複方血栓通膠囊是上世紀80年代，由中山大學眼科中心與廣東眾生藥業股份有限公司共同研製的複方中藥製劑，具有活血化瘀，益氣養陰的功效。複方血栓通膠囊由三七、丹參、黃芪、玄參組成，其組方具有鮮明的中醫南派用藥特色，臨床上用於血瘀兼氣陰兩虛證的視網膜靜脈阻塞及穩定性勞累型心絞痛。專利文獻cn103655910a公開了複方血栓通膠囊具有肝臟保護作用。目前，尚無關於複方血栓通膠囊抑制paf活性的文獻報導。

技術實現要素：

本發明的目的在於提供複方血栓通膠囊在製備治療paf介導的疾病藥物中的用途。

本發明通過採用冰水浴聯合注射腎上腺素誘導的大鼠急性氣滯血瘀模型實驗證明，複方血栓通製劑能夠顯著抑制血小板活化因子(paf)活性，對治療paf介導的相關疾病具有顯著療效。特別是由paf介導的心肌炎、哮喘、肺氣腫、急性胰腺炎或胃腸潰瘍等疾病均具顯著療效。

與現有技術相比，本發明首次公開了複方血栓通製劑在製備治療paf介導的疾病藥物中的用途。

具體實施方式

下面結合具體的實施例對本發明做進一步說明。

實施例1

一、實驗動物與材料

spf級(specific-pathogenfree)雄性sd(spraguedawley)大鼠60隻，體重180-220g，動物質量合格證號：44007200028430；由廣東省醫學實驗動物中心提供，動物設施許可證號：scxk-(粵)2013-0002。

鹽酸腎上腺素注射液(adrenaline，adr；上海禾豐製藥有限公司，批號：20141009)，生理鹽水、枸櫞酸鈉、水合氯醛(廣州化學試劑廠)，血小板活化因子(plateletactivatingfactor，paf)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

二、試驗方法

sd大鼠隨機分為6組，即空白對照組、模型組、陽性對照藥(阿司匹林)組、複方血栓通低劑量組、複方血栓通中劑量組、複方血栓通高劑量組，每組10隻。動物在環境中適應一周後開始實驗。複方血栓通膠囊組和陽性對照藥組每天灌胃給藥一次，給藥體積為10ml/kg，連續給藥10天。空白對照組和模型組灌胃給予同體積生理鹽水。第11天清晨，灌胃給藥1h後，除空白對照組大鼠外，其餘各組大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素(0.8mg/kg)，2h後將大鼠置於0-4℃冰水內冰浴5min，空白對照組大鼠不作浸冰水處理，2h後大鼠再次皮下注射鹽酸腎上腺素(0.8mg/kg)。空白對照組皮下注射等體積生理鹽水。各組大鼠均禁食不禁水12h。

次晨，上述各組大鼠均採用10％水合氯醛進行腹腔注射麻醉(0.35ml/100g)，2％碘配消毒皮膚後打開腹腔進行腹主動脈採血，部分血液不加抗凝劑，離心分離血清後，利用elisa測定試劑盒檢測血小板活化因子paf，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，按試劑盒提供的方法測定。另外，部分血液用枸櫞酸鈉抗凝(3.2％，血液體積比1：9)，取3.0ml抗凝血液放入tdl-5m冷凍離心機進行第一次離心(500r/m,20℃,10min)得富血小板血漿(prp)，取出富血小板血漿並將剩餘部分再次離心(3000r/m,20℃,10min)得貧血小板血漿(ppp)，5μladp(300μmol/l)用於誘導血小板聚集，300μlprp與300μlppp放入北京普利生lby-nj4血小板聚集儀檢測血小板最大聚集率(mpar)。

三、實驗結果

由表1可見，與空白對照組比較，模型組大鼠paf含量顯著升高，血小板聚集率也顯著升高。複方血栓通膠囊低、中、高劑量組大鼠paf含量和血小板聚集率均比模型組顯著降低，差異均具有統計學意義(p<0.01或p<0.05)，且呈一定的量效關係。結果說明，阿司匹林對血小板聚集率的抑制不與血小板活化因子(paf)相關，而複方血栓通膠囊對血小板聚集率的抑制作用可能與抑制paf相關，即發現複方血栓通膠囊具有抑制paf這一新用途，為其在製備治療paf介導的疾病藥物中的應用提供了依據。

表1複方血栓通膠囊對paf以及血小板聚集率的影響

註：*p<0.05and**p<0.01vs正常組，#p<0.05and##p<0.01vs模型組(n＝10)。