提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法

2023-05-01 08:19:36

專利名稱：提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法
技術領域：
本發明屬野生動物養殖技術領域，涉及一種提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法。
背景技術：
中國林蛙(Rana chensinensis)是我國重要的野生經濟蛙類，分布在以長白山區為主的北方部分省(區)。長期的過度捕捉使得野生資源銳減，目前已被列入《中國瀕危動物紅皮書》，為國家二級野生保護動物。林蛙是肉、藥、保健兼備的經濟蛙類，近年來，各地已開展林蛙的養殖，養殖林蛙種群的數量和產量均顯著增加，僅吉林省年產量就達8億隻以上，年產值超過20億元。實踐表明，養殖林蛙的經濟、社會和生態效益均較顯著，對促進山區經濟發展，保護野生動物資源，維持區域生物多樣性與生態平衡，都具有積極作用。林蛙養殖的經濟效益很大程度上取決於養殖林蛙種群中雌性數量的多少。自然林蛙種群中雌性數量所佔的比例一般為30% 50%，平均1000 1300隻個體種群可生產 Ikg林蛙油(幹品)。因此，提高養殖林蛙種群中的雌性數量是增加林蛙養殖經濟效益的重要途徑。提高養殖林蛙種群中的雌性數量包括兩方面的含義，一是通過採用林蛙的雌性誘導技術，增加養殖林蛙種群中雌性數量的相對比例；二是通過水質優化來促進林蛙胚胎與蝌蚪良性發育，提高養殖林蛙種群中雌性數量的絕對值。有關林蛙的雌性誘導，目前研究較多且普遍認同的是溫度的影響，即通過控制林蛙早期胚胎發育的水溫，使蝌蚪發育雌性化，從而增加變態幼蛙群體中雌性比例。實驗表明，較低的水溫具有促進蝌蚪發育雌性化的作用，其適宜的水溫為13 18°C。但是在胚胎發育早期，較低的水溫將減緩胚胎發育進程，蝌蚪質量較差。所以「低溫誘導法」應用於生產的效果並不理想。「離子誘導法」，即通過調節林蛙胚胎與蝌蚪發育期間水環境離子組成的濃度及其比例結構來促進蝌蚪發育雌性化。但因胚胎和蝌蚪發育期間水環境中適宜的離子濃度和比例結構尚不十分清楚，以至於生產上往往因離子濃度及其比例結構調節不當而造成胚胎發育不良甚至中止，蝌蚪也大量致死。目前所研究的「離子誘導法」，主要集中在H+濃度上，通過調整水環境的PH值範圍來調節水環境中的H+濃度水平，認為酸性水環境可促進蝌蚪發育雌性化，因而生產上常常將胚胎發育期和蝌蚪發育期的水環境PH值範圍調整到5. 5 7. 0，即相當於水環境的H+濃度在(0. 5 3. 2) X lO—mol/m3。但是長時間較低的pH值也可使胚胎發育不良，同時又不利於水質優化，影響蝌蚪的存活率、變態率和變態幼蛙的規格與存活率，最終影響養殖林蛙種群的總體數量和經濟效益。研究還發現，在構成水環境鹽度的離子成分中，Na+、Mg2+、Ca2+對促進蝌蚪雌性化發育也具有一定作用。但對於這些鹽分離子在胚胎發育期和蝌蚪發育期的適宜濃度及其比例結構也均未搞清，所以「鹽分離子誘導法」 目前也未得到廣泛應用。目前，林蛙養殖生產上應用較多的雌性誘導方法是雌性激素誘導法。該方法是按照一定的濃度將雌性激素或添加到蝌蚪飼料中，或直接添加到胚胎發育期和蝌蚪發育期的水環境中，促進蝌蚪發育雌性化。生產上最常用的雌性激素是雌-二醇激素。但是通過雌性激素誘導法獲得的雌性林蛙喪失了產卵繁殖能力，雄性林蛙的生殖能力也顯著下降，這對於林蛙的自然種群與養殖種群數量的增加，林蛙種質篩選與種質資源保持均不利。以上「低溫誘導法」、「離子誘導法」和「雌性激素誘導法」均未在生產上得到廣泛應用，以致目前尚缺少一種操作性強、效果穩定且益於種群數量增加的雌性誘導方法來指導林蛙產業化高效養殖。

發明內容
針對已有技術存在的問題，本發明通過胚胎發育期和蝌蚪發育期水環境pH值、鹽度、鹼度、H2C03的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的優化調配，探尋一種野外條件下適用，兼顧水質優化，益於胚胎與蝌蚪良性發育且不損害個體繁殖能力的提高養殖林蛙種群雌性數量的方法。這是實現林蛙產業化高效養殖的重要技術，也是目前林蛙養殖生產上亟待解決的問題。但是，迄今為止，尚未見到相關的研究報導與專利申請。本發明根據林蛙的雌性誘導、胚胎發育與蝌蚪發育均受控於水環境PH值、鹽度、 鹼度、KCO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的原理，在胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期，通過採取有效措施來達到水環境PH值、 鹽度、鹼度、H2C03的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的適宜指標的優化組合，實現以雌性誘導作用為主，兼有水質優化，促進胚胎與蝌蚪良性發育的多重效應。其目的是提供一種野外條件下，通過對林蛙胚胎發育與蝌蚪發育所需的水環境PH值、鹽度、 鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的適宜指標的優化調配來提高養殖林蛙種群雌性數量的方法，以期指導林蛙產業化高效養殖。本發明的提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，其步驟和條件如下I.提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池、蝌蚪發育池、曬水池和廢水回收池的建造方法如下(1)胚胎發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池的建造方法，其長度6 8m，寬度3 細，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降4° 5°，使水深50 60cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40%，水深 3 IOcm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70% ；(2)蝌蚪發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的蝌蚪發育池的建造方法，其長度10 15m，寬度5 8m，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降6° 8°，使水深70 80cm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70%，水深10 20cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40% ；(3)廢水回收池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的廢水回收池的建造方法，其位置選擇在胚胎發育池和蝌蚪發育池的附近平坦地帶，確保胚胎發育池和蝌蚪發育池的廢水方便地排入，其長度30 50m，寬度20 40m，可蓄水深度1. 2 1. 5m，池底和四壁鋪襯塑料布；廢水回收池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的2 3倍；(4)曬水池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的曬水池的建造方法， 其位置選擇在靠近胚胎發育池和蝌蚪發育池的背風朝陽處，確保曬水池中的水能夠順利進入胚胎發育池和蝌蚪發育池中，其長度25 30m，寬度15 20m，可蓄水深度1. 0 1. 2m， 池底和四壁鋪襯塑料布；曬水池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的3 5倍；II.水質測試分析對林蛙養殖區的水源水質進行測試分析，測試項目包括pH 值、鹽度 g/m3、鹼度 mol/m3、H2CO3 與 Ca2+、Mg2+、Na+、K+ 的濃度 mol/m3、Ca2++Mg2+ 的總濃度 g/ m3、Ca2VMg2+ 比值及 Na+/K+ 比值；III.確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值 根據已取得的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及 NaVK+比值對林蛙胚胎發育與蝌蚪發育的影響的實驗研究成果，確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/ Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值；(1)確定胚胎發育前期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值胚胎發育池中，從受精卵投放到卵粒彎曲為胚胎發育前期；胚胎發育前期所需要的指標為:pH值為6. 74，鹽度為1163. 6g/m3，鹼度為1. 372mol/m3，H2CO3的濃度為1. 849mol/ m3，Ca2VMg2+ 比值為 0. 197，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 83. 3mol/m3, Na+/K++ 比值為 118 ；(2)確定胚胎發育後期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的指標胚胎發育池中，從卵粒彎曲到蝌蚪出膜為胚胎發育後期；胚胎發育後期所需要的指標為PH值為7. 26，鹽度為1517. 9g/m3，鹼度為1. 867mol/m3, H2CO3的濃度為2. 095mol/ m3，Ca2VMg2+ 比值為 0. 248，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 129. 4mol/m3，Na+/K+ 比值為 109 ；(3)確定蝌蚪發育前期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的指標蝌蚪發育池中，從剛出膜的蝌蚪發育到25日齡為蝌蚪發育前期；蝌蚪發育前期所需要的指標為pH值為7. 50，鹽度為1376. 2g/m3，鹼度為1. 529mol/m3, H2CO3的濃度為 1. 636mol/m3，Ca2+/Mg2+ 比值為 0. 286，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 147. 3mol/m3，Na+/K+ 比值為 96 ；(4)確定蝌蚪發育後期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的指標蝌蚪發育池中，從25日齡的蝌蚪到變態結束為蝌蚪發育後期；蝌蚪發育後期所需要的指標為pH值為7. 00，鹽度為1000g/m3，鹼度為1. 500mol/m3，H2CO3的濃度為1. 830mol/ m3，Ca2VMg2+ 比值為 0. 300，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 150. Omol/m3，Na+/K+ 比值為 43 ；IV.胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境 PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的調配方法a.根據步驟II水質測試分析的林蛙養殖區水源水的PH值、鹽度、鹼度、H2C03的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值為調配標準的基礎值；b.調配方法分別向胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期的池塘中加入林蛙養殖區的水源水，加入的數量使池底部深水區的水深達到20 30cm ； 胚胎發育池在投放林蛙受精卵前Mh，蝌蚪發育池在投放蝌蚪前4 均調整好池水深度，封閉進、排水口，準確計算池水的體積數量，根據步驟II水質測試分析的結果，用噴霧器向池水中均勻噴灑預先溶解並稀釋50倍的工業CaCl2、MgCl2, NaCUKCl和NaHCO3 ；各種物質有效成分的添加量近似地按下列公式計算 C1 = Clr1/ (40. 081^+24. 305) - (C10T1C20) / (1. 6491巧+1)；
c2 = d/ (40. 08γ!+24. 305) + (C10T1C20) / (r^O. 6064)；c5 = c-c0 ；Wcacl2 = Clr1/ (0. 3617^+0. 2184) - (C10T1C20) / (0. 0149^+0. 009)；ffMgC12 = d/ (0. 42γ!+0. 256) + (C10T1C20) / (0· ΟΙΟδΓ^Ο. 0064)；ffNaC1 = r2[ (S-S0) / (r2+l. 2764)-(1. 4887Cl+l. 2771c2+l. 1268c5-c40) / (0. 0134r2+0. 0171)]-(c5+c30-r2c40)/(0. 0134r2+0. 0171)；Wkc1 = (S-S0) / (0. 7839r2+l) + (c30-r2c40) / (0. 0134r2+0. 0171)-(4. 3416(^+3. 7245c2 +c5)/(0. 0307r2+0. 0391)；Wmc03 = 84. 006 (c-c0)；式中，Cl、C2和C5分別為添加工業CaCl2、MgCl2和NaHCO3有效成分的摩爾數量 mol/m3 ；Wcacl2,ffMgC12,ffNaC1, Wkc1 和 WNaHCQ3 分別為添加工業 CaCl2、MgCl2、NaCl、KCl 和 NaHCO3 有效成分的質量數量g/m3 ；s0, C0, C10, C20, C30和C40分別為林蛙養殖區水源水的鹽度g/m3和 H2CO3>Ca2\Mg2\Na\K+的濃度mol/m3 ；s.c.d.r^^分別為步驟III確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境鹽度g/m3W2CO3的濃度mol/m3、 Ca2++Mg2+ 的總濃度 g/m3、Ca2VMg2+ 比值和 Na+/K+ 比值；V.胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境溫度的調節方法為了達到與胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+值的優化調配相適應，以便更有益於林蛙雌性誘導和胚胎與蝌蚪良性發育，分別在胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期，通過採用不同的灌水方式來調控水量的方法，進行胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境溫度的調節；(1)胚胎發育前期所需要的水環境溫度的調節方法胚胎發育前期所需的水環境溫度的值為16 18°C，通過封閉式灌水方法進行水環境溫度的調節，即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性加入到胚胎發育前期的池塘中，當注水量達到淺水區水深3 5cm,深水區水深40 50cm時，停止注水，並關閉進水口，使現有水位保持3 7天，然後換掉；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充未經過曝曬升溫的水源水；(2)胚胎發育後期所需的水環境溫度的調節方法胚胎發育後期所需的水環境溫度的值為19 21°C，通過半封閉式灌水方法進行水環境溫度的調節，即在保持胚胎發育後期的池塘進水口開放1/10的條件下，讓曬水池中已經過曝曬升溫的水源水自流進入胚胎發育後期的池塘中，當胚胎發育後期的池塘中淺水區水深達到5 10cm，深水區水深達到 50 60cm時，關閉進水口，保持該水位持續3 5天，然後換掉；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充未經過曝曬升溫的水源水；(3)蝌蚪發育前期所需要的水環境溫度的調節方法蝌蚪發育前期所需的水環境溫度的值為22 M°C，通過半開放式灌水方法進行水環境適宜溫度的調節，即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性注入蝌蚪發育前期的池塘中，當淺水區水深達到10 15cm,深水區水深達到60 70cm時，停止注水，並保持該水位2 3天，然後將進水口開放至1/10，同時將出水口打開至1/5，使池水保持一定的交換量；蝌蚪發育前期池塘水量的交換標準為當池中淺水區的最高處水深達到3cm時(俗稱寸水)，即以進水口開放至1/2，出水口開放至1/5的速度向池中灌水，灌水的數量以池中淺水區水深達到15 20cm，深水區水深達到70 80cm為標準，達到此標準即關閉進、出水口，保持該水位持續2 3天，再進入下一輪的水量交換；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充水源水；(4)蝌蚪發育後期所需要的水環境溫度的調節方法蝌蚪發育後期所需的水環境溫度的值為22 M°C，通過開放式灌水方法進行水環境溫度的調節，即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性注入蝌蚪發育後期的池塘中，當淺水區的水深達到10 20cm，深水區的水深達到70 80cm時，停止注水，並保持該水位1 2天，然後將進水口和出水口同時開放至1/5，直接利用水源水進行池水的連續交換，水量交換持續到蝌蚪變態結束；VI.灌水後所需要的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、 Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的調配方法a.把步驟III確定的值，作為胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期每次灌水後所需要的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2VMg2+比值、 Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的指標值；b.按步驟IV所述的調配方法調配；VII.廢水的淨化與再利用a.廢水的淨化胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期池塘排出的廢水直接進入廢水回收池中，並通過栽培漂浮性水生植物進行生物法淨化處理; 漂浮性水生植物優選水葫蘆；b.廢水的再利用下一年胚胎發育期間，將廢水回收池中已經過生物法淨化處理過的廢水再用漂白粉消毒，漂白粉的投入量為1 2g/m3水體，取其澄清水作為胚胎發育前期的池塘補充用水。有益效果(1)本發明提供的提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，是針對野外林蛙養殖區的水源水環境特點，通過向水源水中添加工業CaCl2、MgCl2, NaCU KCl和 NaHCO3來調配林蛙胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+的比值。 通過這種方法的優化組合，既實現了林蛙雌性誘導，提高野外養殖林蛙種群中雌性數量的相對比例，同時又可改良水質，促進林蛙胚胎與蝌蚪發育良性化，增加野外養殖林蛙種群中雌性數量的絕對值。採用本發明的方法，從表6、表7、表8和表9可以看出，胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2VMg2+ 比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的調配值與確定值的平均誤差低於士 10%;其中，調配值與確定值的平均誤差低於士5%的頻率佔78. 57%。(2)本發明提供的提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，在吉林省柳河縣大泉眼林蛙養殖基地建立了野外生態封溝林蛙養殖試驗示範區450hm2，開展試驗示範的1997 2010年，養殖林蛙種群的回捕數量合計139112隻(309隻/hm2)，各年份回捕數量範圍為
92873 16736隻(6 37隻/hm2)，年平均9937隻Q2隻/hm2)，比開展試驗示範以前的年平均5583隻(12隻/hm2)提高43. 82% ；養殖林蛙種群中雌性的回捕數量合計87286隻(194 只/hm2)，各年份雌性的回捕數量1362 12073隻(3 27隻/hm2)，年平均6235隻(14隻 /hm2)，比開展試驗示範以前的年平均3668隻(8隻/hm2)提高69. 98% ；養殖林蛙種群中雌性數量所佔的比例總體為62. 75%，比開展試驗示範以前自然林蛙種群的43. 19%提高了 19. 56% ；各年份回捕的養殖林蛙種群中雌性數量所佔的比例為47. 42% 74. 85%，年平均65. 68%，比開展試驗示範以前的年平均37. 52%高出28. 16% ；養殖林蛙種群中平均713 只個體可生產Ikg林蛙油(幹品)，比自然林蛙種群的1000 1300隻下降了 28. 70% 45.15% ；養殖林蛙種群中雌性和雄性個體均可正常繁殖。因此，本發明的的方法是科學的和可行的。
具體實施例方式實施例11993年以來，在吉林省農業綜合開發項目「半山區小流域綜合治理與高效利用試驗示範區建設」和中國科學院知識創新工程「九五」農業重大項目「山地與平原過渡帶綠色食品產業化示範」KN95-02-03的共同支持下，開展了野外林蛙養殖技術的理論與實踐研究工作，並在吉林省柳河縣大泉眼林蛙養殖基地，建立了野外生態封溝林蛙養殖試驗示範區 450hm2，進行了提高野外養殖林蛙種群雌性數量的理論與實踐研究。本發明的提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，其步驟和條件如下I.提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池、蝌蚪發育池、曬水池和廢水回收池的建造方法如下(1)胚胎發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池的建造方法，其長度6 8m，寬度3 細，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降4° 5°，使水深50 60cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40%，水深 3 IOcm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70% ；(2)蝌蚪發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的蝌蚪發育池的建造方法，其長度10 15m，寬度5 8m，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降6° 8°，使水深70 80cm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70%，水深10 20cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40% ；(3)廢水回收池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的廢水回收池的建造方法，其位置選擇在胚胎發育池和蝌蚪發育池的附近平坦地帶，確保胚胎發育池和蝌蚪發育池的廢水方便地排入，其長度30 50m，寬度20 40m，可蓄水深度1. 2 1. 5m，池底和四壁鋪襯塑料布；廢水回收池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的2 3倍；(4)曬水池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的曬水池的建造方法， 其位置選擇在靠近胚胎發育池和蝌蚪發育池的背風朝陽處，確保曬水池中的水能夠順利進入胚胎發育池和蝌蚪發育池中，其長度25 30m，寬度15 20m，可蓄水深度1. 0 1. 2m， 池底和四壁鋪襯塑料布；曬水池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的3 5倍；在本實施例中，在吉林省柳河縣大泉眼林蛙養殖基地建立了野外生態封溝林蛙養殖試驗示範區450hm2，採用本發明的方法分別修建胚胎發育池4 口，總面積82m2，蝌蚪發育池9 口，總面積618m2 ；廢水回收池2 口，總面積1600m2，曬水池5 口，總面積2700m2 ；II.水質測試分析對林蛙養殖區吉林省柳河縣大泉眼林蛙養殖基地的水源水-山泉水的水質進行測試分析，測試項目包括pH值、鹽度g/m3、鹼度mol/m3、H2CO3與Ca2+、Mg2+、Na+、K+的濃度 mol/m3、Ca2++Mg2+ 的總濃度 g/m3、Ca2+/Mg2+ 比值及 Na+/K+ 比值；詳見表 1 表1吉林省柳河縣大泉眼林蛙養殖基地的山泉水水化學特徵
權利要求
1.提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，其特徵在於，其步驟和條件如下I.提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池、蝌蚪發育池、曬水池和廢水回收池的建造方法如下(1)胚胎發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的胚胎發育池的建造方法，其長度6 8m，寬度3 細，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降4° 5°，使水深50 60cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40%，水深 3 IOcm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70% ； (2)蝌蚪發育池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的蝌蚪發育池的建造方法，其長度10 15m，寬度5 8m，呈東西走向，底部由傳統的「鍋底坑形」改為「一面坡形」，坡降6° 8°，使水深70 80cm的面積佔底部總面積的比例達到60% 70%，水深10 20cm的面積佔底部總面積的比例達到30% 40% ； (3)廢水回收池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的廢水回收池的建造方法，其位置選擇在胚胎發育池和蝌蚪發育池的附近平坦地帶，確保胚胎發育池和蝌蚪發育池的廢水方便地排入，其長度30 50m，寬度20 40m，可蓄水深度1. 2 I.5m，池底和四壁鋪襯塑料布；廢水回收池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的 2 3倍；(4)曬水池的建造方法提高野外養殖林蛙種群雌性數量的曬水池的建造方法， 其位置選擇在靠近胚胎發育池和蝌蚪發育池的背風朝陽處，確保曬水池中的水能夠順利進入胚胎發育池和蝌蚪發育池中，其長度25 30m，寬度15 20m，可蓄水深度1. 0 1. 2m， 池底和四壁鋪襯塑料布；曬水池的面積為胚胎發育池和蝌蚪發育池面積之和的3 5倍；II.水質測試分析對林蛙養殖區的水源水質進行測試分析，測試項目包括PH值、鹽度g/ m3、鹼度 mol/m3、H2CO3 與 Ca2+、Mg2+、Na+、K+ 的濃度 mol/m3、Ca2++Mg2+ 的總濃度 g/m3、Ca2+/Mg2+ 比值及Na+/K+比值；III.確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/ K+比值根據已取得的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值對林蛙胚胎發育與蝌蚪發育的影響的實驗研究成果，確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值；⑴確定胚胎發育前期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值胚胎發育池中，從受精卵投放到卵粒彎曲為胚胎發育前期；胚胎發育前期所需要的指標為pH 值為 6. 74，鹽度為 1163. 6g/m3，鹼度為 1. 372mol/m3, H2CO3 的濃度為 1. 849mol/m3, Ca2+/Mg2+ 比值為0. 197，Ca2++Mg2+的總濃度為83. 3mol/m3, Na+/K+比值為118 ； (2)確定胚胎發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/ K+比值胚胎發育池中，從卵粒彎曲到蝌蚪出膜為胚胎發育後期；胚胎發育後期所需要的指標為PH值為7. 26，鹽度為1517. 9g/m3，鹼度為1. 867mol/m3, H2CO3的濃度為2. 095mol/ m3，Ca2VMg2+ 比值為 0. 248，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 129. 4mol/m3, Na+/K+ 比值為 109 ； (3)確定蝌蚪發育前期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2VMg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值蝌蚪發育池中，從剛出膜的蝌蚪發育到25日齡為蝌蚪發育前期；蝌蚪發育前期所需要的指標為PH值為7. 50，鹽度為1376. 2g/m3，鹼度為1. 529mol/m3, H2CO3的濃度為 1. 636mol/m3，Ca2+/Mg2+ 比值為 0. 286，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 147. 3mol/m3，Na+/K+ 比值為96 ； (4)確定蝌蚪發育後期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值蝌蚪發育池中，從25日齡的蝌蚪到變態結束為蝌蚪發育後期；蝌蚪發育後期所需要的指標為PH值為7. 00，鹽度為1000g/m3，鹼度為1. 500mol/ m3，H2CO3 的濃度為 1. 830mol/m3，Ca2+/Mg2+ 比值為 0. 300，Ca2++Mg2+ 的總濃度為 150. Omol/ m3, NaVK+比值為43 ；IV.胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境PH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+ 比值的調配方法a.根據步驟II水質測試分析的林蛙養殖區水源水的PH值、鹽度、鹼度、 H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值為調配標準的基礎值；b.調配方法分別向胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期的池塘中加入林蛙養殖區的水源水，加入的數量使池底部深水區的水深達到20 30cm ；胚胎發育池在投放林蛙受精卵前Mh，蝌蚪發育池在投放蝌蚪前4 均調整好池水深度，封閉進、排水口， 準確計算池水的體積數量，根據步驟II水質測試分析的結果，用噴霧器向池水中均勻噴灑預先溶解並稀釋50倍的工業CaCl2、MgCl2, NaCUKCl和NaHCO3 ；各種物質有效成分的添加量近似地按下列公式計算=C1 = (1^/(40. 08Γι+24. 305)-(C10T1C20)/(1. 6491^+1) ;c2 = d/ (40. 08γ!+24. 305) + ((^-1^20)/(1^+0. 6064) ;c5 = c_c0 ；Wcacl2 = Clr1/(0· 3617^+0. 2184) - (C10T1C20) / (0. 0149^+0. 009)；ffMgC12 = d/ (0. 42γ!+0. 256) +(CltTr1C20)/(0· ΟΙΟδΓ^Ο. 0064)；ffNaC1 = r2[ (s-s0)/(r2+l. 2764)-(1. 4887Cl+l. 2771c2+l. 1268c5-c40)/(0. 0134r2+0. 0171 )]-(c5+c30-r2c40) / (0. 0134r2+0. 0171) ；Wkc1 = (s_s0) / (0. 7839r2+l) + (c30-r2c40) / (0. 0134r2+ 0. 0171)-(4. 3416(^+3. 7245c2+c5)/(0. 0307r2+0. 0391) ；ffNaHC03 = 84. 006 (c_c0)；式中，c」c2 和c5分別為添加工業CaCl2、MgCl2和NaHCO3有效成分的摩爾數量mol/m3 ；ffCaci2>WMgC12>ffNaC1> Wkc1和分別為添加工業CaCl2、MgCl2、NaCUKCl和NaHCO3有效成分的質量數量g/m3 ； sQ、C0, C10, C20, C30和C40分別為林蛙養殖區水源水的鹽度g/m3和H2C03、Ca2+、Mg2+、Na+、K+的濃度mol/m3 ；s、c、d、巧、r2分別為步驟III確定胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境鹽度g/m3、H2C03的濃度m0l/m3、Ca2++Mg2+的總濃度g/m3、 Ca2VMg2+比值和Na+/K+比值；V.胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需要的水環境溫度的調節方法為了達到與胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境PH值、鹽度、鹼度、的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+ 的總濃度及Na+/K+比值的優化調配相適應，以便更有益於林蛙雌性誘導和胚胎與蝌蚪良性發育，分別在胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期，通過採用不同的灌水方式來調控水量的方法，進行胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境溫度的調節；(1)胚胎發育前期所需要的水環境溫度的調節方法胚胎發育前期所需的水環境溫度的值為16 18°C，通過封閉式灌水方法進行水環境溫度的調節，即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性加入到胚胎發育前期的池塘中，當注水量達到淺水區水深3 5cm，深水區水深40 50cm時，停止注水，並關閉進水口，使現有水位保持3 7天，然後換掉；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充未經過曝曬升溫的水源水；( 胚胎發育後期所需的水環境溫度的調節方法胚胎發育後期所需的水環境溫度的值為19 21°C，通過半封閉式灌水方法進行水環境溫度的調節，即在保持胚胎發育後期的池塘進水口開放1/10的條件下，讓曬水池中已經過曝曬升溫的水源水自流進入胚胎發育後期的池塘中，當胚胎發育後期的池塘中淺水區水深達到5 10cm，深水區水深達到50 60cm時，關閉進水口，保持該水位持續3 5天，然後換掉；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充未經過曝曬升溫的水源水；C3)蝌蚪發育前期所需要的水環境溫度的調節方法蝌蚪發育前期所需的水環境溫度的值為22 M°C，通過半開放式灌水方法進行水環境適宜溫度的調節，即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性注入蝌蚪發育前期的池塘中，當淺水區水深達到10 15cm，深水區水深達到60 70cm時， 停止注水，並保持該水位2 3天，然後將進水口開放至1/10，同時將出水口打開至1/5，使池水保持一定的交換量；蝌蚪發育前期池塘水量的交換標準為當池中淺水區的最高處水深達到3cm時，即以進水口開放至1/2，出水口開放至1/5的速度向池中灌水，灌水的數量以池中淺水區水深達到15 20cm，深水區水深達到70 80cm為標準，達到此標準即關閉進、 出水口，保持該水位持續2 3天，再進入下一輪的水量交換；水位保持期間，根據水量的損失情況，隨時直接補充水源水；(4)蝌蚪發育後期所需要的水環境溫度的調節方法蝌蚪發育後期所需的水環境溫度的值為22 M°C，通過開放式灌水方法進行水環境溫度的調節， 即將曬水池中已經過曝曬升溫的水源水一次性注入蝌蚪發育後期的池塘中，當淺水區的水深達到10 20cm，深水區的水深達到70 80cm時，停止注水，並保持該水位1 2天，然後將進水口和出水口同時開放至1/5，直接利用水源水進行池水的連續交換，水量交換持續到蝌蚪變態結束；VI.灌水後所需要的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca27Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的調配方法a.把步驟III確定的值，作為胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期每次灌水後所需要的水環境PH值、鹽度、 鹼度、KCO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的指標值；b.按步驟IV 所述的調配方法調配；VII.廢水的淨化與再利用a.廢水的淨化胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期池塘排出的廢水直接進入廢水回收池中，並通過栽培漂浮性水生植物進行生物法淨化處理；漂浮性水生植物優選水葫蘆；b.廢水的再利用下一年胚胎發育期間，將廢水回收池中已經過生物法淨化處理過的廢水再用漂白粉消毒，漂白粉的投入量為1 2g/m3水體，取其澄清水作為胚胎發育前期的池塘補充用水。
2.如權利要求1所述的提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，其特徵在於，所述的步驟VII廢水的淨化與再利用，所述的漂浮性水生植物為水葫蘆。
全文摘要
本發明提供一種提高野外養殖林蛙種群雌性數量的方法，包括胚胎發育池、蝌蚪發育池、曬水池與廢水回收池的建造、胚胎發育前期、胚胎發育後期、蝌蚪發育前期和蝌蚪發育後期所需的水環境pH值、鹽度、鹼度、H2CO3的濃度、Ca2+/Mg2+比值、Ca2++Mg2+的總濃度及Na+/K+比值的確定與調配、適宜水溫的調節和廢水回收與再利用。採用本發明的方法，野外生態封溝的養殖林蛙種群中雌性數量的比例為62.75％，比自然林蛙種群中雌性數量的比例提高了19.56％，雌性林蛙的年平均回捕數量提高69.98％，每年回捕的養殖林蛙種群中雌性數量的比例平均為65.68％。為林蛙產業化高效養殖的重要技術。
文檔編號A01K67/02GK102524166SQ20111041623
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月14日 優先權日2011年12月14日
發明者楊富億 申請人:中國科學院東北地理與農業生態研究所