用於增加骨強度的可食用脂肪組合物的製作方法
2023-05-01 09:21:46
專利名稱：：用於增加骨強度的可食用脂肪組合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及用於在人中，尤其是在兒童人群中，增加骨強度的組合物和方法，以及用於在人中改善骨狀態的方法。
背景技術：
：在整個本申請中提到的所有出版物均全部以引用方式合併入本文中，包括其中引用的所有參考文獻。骨強度傳統的雙能X線吸收測量法(DEXA)粗略地表示指定區域的骨礦物質濃度。該方法限於僅測量骨的一種特性，骨礦物質密度(BMD)，也稱為骨量。DEXA不考慮諸如骨大小或骨結構的許多特性。BMD還受體重和生長的影響。骨強度反映了幾種改變的骨特性，並與骨密度相比，提供了更全面的骨脆性的骨強度圖。聲速(SOS)是測量骨強度的最適宜的技術。聲波在骨中的傳播[聲速(SOS)]由許多因素來決定，包括礦物質密度、皮質厚度、彈性和微結構；因此，可能提供比單獨骨密度的測量更全面的骨強度圖。骨結構由小梁和相關結構的模式來決定。骨結構也由稱為「沃爾夫定律(Wolffslaw)，，的定律來決定，該定律表明「骨的形態和功能的每一變化，或僅其功能變化，都緊接著在其內部結構中發生某些確定的改變，並在其外部構造中發生繼發改變」。MM今天骨質疏鬆症被醫護專業人員定義為「具有老年人轉歸的兒童疾病」。這種狀態使得人們更加關注嬰兒、兒童和青少年時期健康骨的發育，並且期望有利於減少未來成人中骨質疏鬆症的發生率。研究者同意這樣的觀點，S卩，在兒童和青少年時間沒有達到最佳峰值骨強度的個體在其人生中較晚的時候可能會發生骨質疏鬆症，即使他沒有發生骨丟失加速。許多兒童由於缺少體育運動、營養差或其他危險因素而處於骨發育不佳的風險中，因此，嬰兒和兒童的骨測量對於確保到成年時兒童發育為最佳峰值骨強度是非常重要的。處於骨發育不良的風險的特殊人群包括早產的兒童、肥胖的兒童和其他人，他們尤其可受益於骨發育的早期評價。大量匯集的臨床證據顯示兒童的生活方式可影響其骨發育並影響其未來幾年的骨骼健康。在骨骼發育和生長期間生活方式和營養都對骨有顯著的影響。在青春期結束時，成人已經積累了幾乎全部的骨，將使他達到最大峰值骨強度。此峰值決定了在後面的成年期中骨強度下降的起始點。連同隨後的骨丟失一起，其將決定一個人在以後的生活中發生骨質疏鬆症的危險性。所有這些生活方式因素對骨健康的影響都強調了增加骨強度或狀態的積極因素在嬰兒和兒童的這些關鍵歲月期間的重要性。衛生專業人員不斷地呼籲兒童和青少年採用所有的健康生活方式以幫助骨達到其最大強度峰值。早產兒儘管過去20年中在美國總出生率(livebirthrate)穩定的下降，但早產兒的發生率(在妊娠37周前出生的嬰兒)在不斷地增加。代謝性骨病是早產兒中相對常見的事件，因為骨礦物質增加的主要時期通常發生在妊娠的最後三個月內，並且其在子宮外環境中難以再生。早產兒，或未成熟兒，根據其重量被分類為AGA(適合孕齡)或SGA(孕齡小)。另夕卜，嬰兒還分類為LBW(低出生重量，出生時小於2.5kg)，VLBW(極低出生重量，出生時小於1.5kg)，或超低VLBW(出生時小於Ikg)。未成熟兒，尤其是很小的(孕齡小)未成熟兒，易於發生早產兒代謝性骨病(MBDP)。骨質減少的程度與體重和孕齡負相關。有數據顯示在出生重量小於l，500g且孕齡小於34周的新生兒中有10-20%檢測到骨折。極低出生重量(VLBW)嬰兒具有增加的骨質減少風險，因為在子宮內的骨量增加有限並且骨營養素的需求較大。在以超低出生重量(ELBff)出生的嬰兒中骨質減少的患病率估計為50%，且具有很高的骨折率。在新生兒期的高死亡率、發生支氣管肺發育不良、利尿劑和類固醇的長期治療、長時間不動以及需要全胃腸外營養增加了骨健康受損的風險。這就突出了高質量和骨強度改善配方的必要性和極大重要性。早產發生率的不斷增加，以及由於技術的高度進步而獲得的其生存率的提高都增加了為早產兒的新生兒期和以後的生活開發出更具有創新性和成本有效的治療方式的需求。早產兒在妊娠的第三個三個月期間骨強度不會正常地增加，並且經常出生時骨強度很低。早產兒，由糖尿病母親生的嬰兒和接觸皮質類固醇的嬰兒被認為具有骨健康受損的風險。預防早產兒骨質減少的大多數治療努力已經集中在鈣和維生素D含量的營養變化。然而，儘管使用富含礦物質的專用配方，但這些努力僅部分地成功用於改善早產兒骨礦化。此外，這可能反映出這樣的事實這些努力集中於定量而非定性的變化。儘管預防骨質減少是最終的目標，但鑑別已存在有骨缺損的嬰兒將便於早期幹預，諸如飲食調整、運動計劃或藥物治療。骨強度隨訪能夠追蹤新生兒的骨。基於此追蹤的結果，兒科醫生/營養學家可對發育不全的嬰兒/學步幼童/兒童推薦質量配方或其他食物以便達到或保持更強壯的骨。遞骨強度的大部分在18歲之前自然增加的，使得兒童和青春期期間的骨生長成為關鍵過程。而且，在此關鍵時間內不能達到峰值骨強度在以後的時間中無法補償。這導致未來骨質減少和骨折的風險增加。兒科醫生處於影響其患者的骨發育並防止其患者的長期會導致骨折風險和骨質疏鬆症的行為和習慣的關鍵位置。骨強度和骨發育受一些重要因素的影響，這些因素對於保持骨健康也是很重要的。鈣是骨的主要礦物質成分之一，為骨骼提供密度和剛度，並且因此在保持骨健康中是重要的因素。建議兒童和青少年應該將其鈣攝入大大地增加至目前平均水平之上，以確保骨充分的發育。許多大概健康的兒童的飲食中乳製品、青菜和其他富鈣食品的含量不足。規律的體育運動是骨發育中的另一重要因素。研究已經顯示規律的鍛鍊有助於強化骨。鍛鍊使肌肉收縮牽拉骨，在骨上施加力，並且使其強化。目前的建議包括在一周的大多數時間內適度的體育運動。已知還有多種其他的因素與對骨狀態的負面影響和骨質疏鬆症的最終形成有關。在這些因素中，有導致神經性厭食的反覆節食、吸菸、飲酒、和攝入含二氧化碳的軟飲料。導致閉經的過度運動、一些職業運動員的常見問題，也可降低骨強度。此外，早產或以低出生重量出生的兒童在出生後至少6年內骨強度都很低，表明嬰兒期後弱骨的風險增加。這可能是在未成熟兒中早產兒骨質減少症的高患病率的結果。現有技術出版物提出了用於增加骨密度和峰值骨量的特殊組合物和方法。例如，以引用方式合併入本文的W005/036978公開了一種用酶製備的包括特殊植物來源的甘油三酯的脂肪基組合物，其製備和在嬰兒配方領域中用於預防鈣和能量損失的各種用途。美國專利申請第2004/0062820號公開了一種採用脂肪摻合物增加骨礦化的方法，該摻合物的棕櫚酸含量很小。然而，如上所述，為了提供健康骨和骨骼的發育，重要的是確保足夠的骨強度，不僅僅確保足夠的鈣吸收，而且確保骨密度和骨量。骨密度、峰值骨量和/或骨礦化不一定與骨強度相一致，並且改變前者(即，骨密度、峰值骨量和/或骨礦化)的任意一個或全部不一定導致後者(骨強度)的相應變化。此看法已經得到了許多作者的支持，包括Majumdar[MajumdarS(2003)Curr.Osteoporos.Rep.1(3)105-9]、Turner[TurnerC.H.(2002)0steoporos.Int.13(2):97_104]禾口Gilsanz[GilsanzV.(1998)Eur.J.Radiol.26(2)177-82]。在報導骨密度和骨礦化以及骨強度之間缺少關聯的研究中，可引用的研究，例如，Takeda及其同事的研究[Takeda等人，(2004)J.Amer.Coll.Nutr.23(6):712S_714S]，他們說明了在肥胖大鼠中骨強度和骨礦物質濃度之間的關係並得出結論，元素濃度的變化與骨強度不相關。Riggs及其同事表明在絕經後女性中，氟化物治療增加骨量並伴有骨骼脆性增力口，尤其是非脊椎骨[Riggs等人，(1990)N.Engl.J.Med.322(12):802_9]。Divittorio等人得出了類似的結論[Divittorio等人，(2006)Pharmacotherapy26(1)104-14]相反，雷洛昔芬，一種選擇性雌激素受體調節劑，顯著地增加脊椎骨強度，其不依賴骨礦物質密度[Allen等人，(2006)Bone39:1130-1135]。骨強度的增加反映了骨折和其他機械性骨缺陷的易發性較低。因此本發明的目的是提供用於在新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童和青少年中增加和保持骨強度的組合物和方法。本發明的進一步目的是提供在人中改善和保持骨狀態的組合物和方法。
發明內容因此，在第一個方面，本發明提供了一種在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或保持骨狀態的方法，包括將包含脂肪源的組合物施用於所述人，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55%是棕櫚酸部分的甘油三酯，並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)0具體地，所述脂肪源的特徵在於具有以下參數(i)總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於甘油主鏈的sn-2位；(ii)在甘油主鏈的sn_l和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分，以及(iv)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。在本發明的所述方法的一個實施方案中，所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年。在本發明的所述方法的另一實施方案中，所述組合物包括與植物油混合物摻合的如上所限定的脂肪源，其中所述混合物包括選自豆油、棕櫚樹油、油菜油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油和菜籽油的油類。在本發明的所述方法的進一步實施方案中，所述人處於骨強度受損的風險中。在本發明的進一步實施方案中，所述脂肪源包括在任意一種食品和嬰兒配方中，其中所述食品選自焙烤食品，包括麵包，尤其是餅乾和糕點，乳製品，包括奶和乳飲料，冰淇淋，穀類製品，調味汁，塗抹食品，包括人造黃油，油脂，大豆製品，肉製品，油炸食品，糖果食品，塊狀糖，糖果和巧克力，點心，飲料和奶昔(shakes)，速溶飲料產品，用於嬰兒和幼兒的預製食品，包括預製的熟制蔬菜泥和/或水果泥，調味品產品和食用油脂。在本發明的所述方法的更進一步實施方案中，所述嬰兒配方包含所述脂肪源，以及蛋白源、碳水化合物源、礦物質、維生素，和任選地包括載體、稀釋劑、添加劑或賦形劑中的至少一種。在另一個方面，本發明提供了一種用於在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或維持骨狀態的可食用脂肪源，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55%是棕櫚酸部分並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)的甘油三酯。具體地，所述脂肪源的特徵在於具有(i)總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於甘油主鏈的sn-2位；(ii)在甘油主鏈的sn-Ι和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分，以及(iv)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。在所述脂肪源的一個實施方案中，所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年。在本發明的所述脂肪源的另一實施方案，所述人處於骨強度受損的風險中。在進一步的方面，本發明提供了一種食品，其中所述食品包括如本發明中所述的脂肪源，並且其是用於在人中增加骨強度和/或維持骨狀態的食品，其中所述食品選自焙烤食品，包括麵包，尤其是餅乾和糕點，乳製品，包括奶和乳飲料，冰淇淋，穀類製品，調味汁，塗抹食品，包括人造黃油，油脂，大豆製品，肉製品，油炸食品，糖果食品，塊狀糖，糖果和巧克力，點心，飲料和奶昔，速溶飲料產品，用於嬰兒和幼兒和成人的預製食品，包括預製的熟制蔬菜泥和/或水果泥，調味品產品和食用油脂。在一個優選的實施方案中，所述食品用於保持和/或增加骨強度，其中所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年，尤其是當所述人處於骨強度受損的風險中。最後，本發明提供了一種商業包裝，該商業包裝包括a)經腸內施用於人後增加骨強度的脂肪源；b)任選地可食用的生理學可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或無活性添加劑中的至少一種；c)任選地至少一種用於運載a)和b)中所限定的一種或多種組分的可食用的生理學可接受的載體或稀釋劑；d)用於混合a)、b)和/或C)中所限定的(多種)組分的設備和容器；以及e)使用說明書。在本發明的商業包裝的一個優選實施方案中，所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55%是棕櫚酸部分的甘油三酯並且在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)。具體地，所述脂肪源的特徵在於⑴總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於甘油主鏈的sn-2位；(ii)在甘油主鏈的sn-Ι和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分，以及(iv)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。圖1使用最大負荷的極限剛度參數測量。表示飼以三種膳食的大鼠的極限剛度的測定的直方圖。飼以膳食A的大鼠顯示較高的抗彎曲性，抗彎曲性在圖中表示為極限剛度(u.s.)。在飼以膳食A(H2P)和膳食B(HP)(P=0.004)或膳食C(LP)(ρ=0.038)的大鼠組之間的明顯差異可能是由於骨礦物質添附的速率增加引起的。A、B和C分別代表膳食A、膳食B和膳食C。圖2表示在飼以三種膳食的大鼠中剛度(u.s.η.)對體重和椎骨高度的標準化的直方圖。剛度(u.s.η.)對體重和椎骨高度的標準化產生了在飼以膳食Α、Β(ρ=0.007)和C(0.031)的大鼠的結構剛度之間的顯著差異。A，B和C分別表示膳食A，膳食B和膳食C。發明詳述為了尋找在新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童、青少年或成人中用於增加骨強度和/或改善骨狀態和/改善骨結構的組合物，本發明人已經發現包括適當的脂肪源的可食用組合物，尤其是富含棕櫚酸殘基的甘油三酯組合物，可達到這些所需的目的。在此要理解，骨狀態指骨健康，並且其取決於受試者的年齡和性別，但通常包括骨礦物質含量、骨礦物質密度、結構剛度、骨微結構、彈性、皮質厚度等。因此，本發明的組合物(InFat，以濃縮基質或摻合物的形式)特別地用於在遭受骨強度減小或易於發生骨強度減小的人中保持和/或增加骨強度。骨強度通常被定義為在特定負荷條件下導致材料失效所需的負載力的量[Turner&Burr(1993)Bone14595-608；Currey&Butler(1975)JBoneJointSurgAm57:810-814]。Petit及其同事提出了骨強度的進一步定義，即骨強度為「導致材料彎曲所需的負荷」[Petit等人，(2005)JMusculoskeletNeuronalInteract5(3):213_224]。此進一步的定義考慮了當使用小棒形狀的骨片完成骨材料強度檢測時在該檢測中評價的參數，其中在檢測中該骨片在末端逐漸被牽拉從而被拉長。直至某個點，骨可承受應力(力)而沒有過多的應變(變形)。因此，骨可被拉伸至某個點並彈性地恢復至其初始長度。此特性也被定義為彈性模量(或楊氏模量)，並且也被稱為「材料剛度」。超過該點，發生損害並且材料開始彎曲，使得當將其放鬆時，其不能完全地恢復至其初始長度。最終，該材料不能彎曲，並且在該點，發生骨折[Petit(2005)編號同上]。其他骨強度參數，尤其是通過使用超聲骨密度計尤其是定量超聲，使用軸向傳播技術通過測量獲得的那些參數，為礦物質密度、彈性、皮質厚度和微結構。椎體標本的生物力學性能可在材料試驗機中進行分析，該試驗機提供負荷和變形值。這些通常僅能在動物模型中完成，因為需要收集標本(骨)以便進行該分析。負荷變形曲線提供了用於計算極限負荷時的應變、極限負荷、極限剛度和極限負荷時的能量吸收的參數。這些參數反映了椎體的強度。骨量密度是骨密度的指標。骨密度是一定體積的骨的骨組織量。其可使用定量計算層析X射線照相術來測定。本發明人已經表明，尤其是實施例4中所示的結果，包括本發明所述的InFat摻合物的改良膳食與飼以對照膳食的大鼠相比，誘導被治療大鼠的骨強度增加。因此，本發明人驚奇地發現，通過軸向傳播技術測定，飼以富含sn-2位棕櫚酸的膳食的動物顯示骨強度增加。因此，本發明的組合物還特別適合用於治療易於發生骨疾病和缺陷，例如，早產兒代謝性骨病(MBDP)的未成熟兒，尤其是很小的未成熟兒；具有極低出生重量(VLBW)的嬰兒，尤其是骨量減少風險較大的嬰兒；骨折率很高的出生時具有超低出生體重(ELBW)的嬰兒；患有支氣管肺發育異常的新生兒；接受利尿劑和類固醇長期治療或接觸類固醇的新生兒；由糖尿病母親生的嬰兒；和其他情況。受累於這些狀況的任意一種的受試者處於骨強度受損的風險中。骨質減少是骨礦物質密度的減少，其可以是骨質疏鬆症的前驅病症。骨質減少的診斷反映了低於正常峰值BMD但不足以低至被分類為骨質疏鬆症的骨礦物質密度(BMD)。因此，本發明的目標是提供一種用於在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或維持骨狀態的方法，包括將包括富含棕櫚酸的脂肪源的組合物施用於所述人，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)，並且總棕櫚酸含量為總脂肪酸的15-55%。在本發明的具體實施方案中，脂肪源包括總脂肪酸的15-55%為C16:0脂肪酸的甘油三酯。因此，所述脂肪源的棕櫚酸含量可以為總脂肪酸的15%、16%、17%、18%、19%、20%,21%,22%,23%,24%,25%,26%,27%,28%,29%,30%,31%,32%,33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41%,42%,43%,44%,45%,46%,47%,48%,49%,50%、51%、52%、53%、54%或55%。濃縮脂肪基質組合物的基本特徵為(i)總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於甘油主鏈的sn-2位；(ii)在甘油主鏈的sn-Ι和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分，以及(iv)在sn-Ι和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。更具體地，脂肪源包括總脂肪酸的0-20%的C12:0脂肪酸，優選5-15%；總脂肪酸的0-15%的C140脂肪酸，優選2-10%；總脂肪酸的15-55%的C160脂肪酸，其30%以上在甘油主鏈的sn-2位處被酯化；總脂肪酸的1-7%的C18:0脂肪酸，優選2_5%；總脂肪酸的25-75%的C18:1脂肪酸，優選28-45%；總脂肪酸的2-40%的C18:2脂肪酸，優選5-20%；總脂肪酸的0-8%的C183脂肪酸，優選1_3%；其他脂肪酸各自以小於總脂肪酸的8%，優選小於5%的水平存在。具體的脂肪源描述在W005/036987中。這些脂肪源包括脂肪濃縮物(脂肪基質)、脂肪摻合物、包括濃縮物/摻合物的嬰兒配方以及其他食物和食品。特別感興趣的是基於模擬人母乳脂肪的甘油三酯組成的合成油(可通過化學和優選酶學的方法產生)的脂肪源。此類油優選地具有在甘油三酯的sn-2位處的高水平的棕櫚酸，以及在sn-Ι和sn-3位處的高水平的不飽和脂肪酸。該成分在此也稱為InFatTM(酶學技術有限公司，米格達勒埃梅克(EnzymotecLtd.，MigdalHaEmeq)，以色列)，並且在表IA中定義。更具體地，本發明使用的脂肪源可以是濃縮物，尤其是酶學製備的脂肪基質組合物，其包括植物來源的甘油三酯的混合物，總棕櫚酸殘基含量至多為總脂肪酸殘基的38%；並且在甘油主鏈的sn-2位處的脂肪酸部分的至少60%為棕櫚酸殘基。InFat是用於生產在嬰兒營養和嬰兒配方中使用的脂肪製劑的先進的脂肪基質成分。其是一種專用脂肪基質，以特殊的甘油三酯組成和結構進行設計和製造，現在已經發現其能有效地增加骨強度，尤其是在易於出現骨發育問題的嬰兒人群以及其他此類人群中。在一個優選的實施方案中，所述脂肪源包括這樣的甘油三酯總脂肪酸的0-20%，優選5-15%為C12:0脂肪酸；總脂肪酸的0-15%，優選2-10%為C14:0脂肪酸；總脂肪酸的15-55%為C16:0脂肪酸，其30%以上在甘油主鏈的sn-2位處被酯化；總脂肪酸的1-7%，優選2-5%為C180脂肪酸；總脂肪酸的25-75%，優選28-45%為C181脂肪酸；總脂肪酸的2-40%，優選5-20%為C182脂肪酸；總脂肪酸的0_8%，優選1_3%為C183脂肪酸；其他脂肪酸各自以小於總脂肪酸的8%，優選小於5%的水平存在。因此，脂肪源可包括總脂肪酸的0%，1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%或20%的C12:0脂肪酸；總脂肪酸的0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%或15%的C14:0脂肪酸；總脂肪酸的15%,16%,17%,18%,19%,20%,21%,22%,23%,24%,25%,26%,27%,28%,29%,30%,31%,32%,33%,34%,35%,36%,37%,38%,39%,40%,41%,42%,43%,44%,45%,46%,47%,48%,49%,50%,51%,52%,53%,54%或55%的C16:0脂肪酸；總脂肪酸的1%>1.2%U.4%U.6%U.8%,2%,2.2%,2.4%,2.6%,2.8%,3.2%,3.4%,3.6%,3.8%A%A.2%A.4%A.6%A.85.2%,5.4%,5.6%、5.8%、6%、6.2%、6.4%、6.6%、6.8%或7%的C18:0脂肪酸；總月旨肪酸的25%、27%、28%、30%、32%、33%、35%、37%、39%、40%、42%、43%、44%、45%、47%,49%,50%,52%,53%,55%,57%,59%,60%,62%,63%,65%,67%,69%,70%,72%、74%或75%的C18:l脂肪酸；總脂肪酸的2%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%>12%,13%,14%,15%,16%,17%,18%,19%,20%,22%,23%,25%,27%,28%,30%、32%、33%、35%、37%、39%、40%的C182脂肪酸；總脂肪酸的O%、0.5%、1%、1.2%U.4%U.6%U.8%,2.2%,2.4%,2.6%,2.8%,3.2%,3.4%,3.63.8%A%A.2%A.4%A.6%A.8%,5.2%,5.4%,5.6%,5.8%,6.26.4%,6.6%,6.8%,7%,7.2%,7.5%,7.8%或8%的C18:3脂肪酸。本發明使用的脂肪源也可以是包括至少25%的所述脂肪基質與至多75%的至少一種植物油的摻合物的人乳脂肪代用品組合物。下面的實施例給出了8種摻合物，InFat1、InFat2、InFat3、InFat4、InFat5、InFat6、InFat7和InFat8，其中使用不同用量的脂肪基質濃縮物(InFat)，其用量為摻合物含量的30%至83%。在製備摻合物中使用的植物油可以是大豆油、棕櫚樹油、油菜油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油和菜籽油，以及其他植物油脂及其混合物中的至少一種。最重要地，本發明的脂肪源可以用於嬰兒配方的製備中。本發明使用的嬰兒配方除了所述脂肪源以外還包括至少一種蛋白質成分和任選地碳水化合物源、維生素、礦物質、核苷酸和胺基酸中的至少一種。術語「脂類」和「脂肪」在本文中作為同義詞使用。除了包括在嬰兒配方中以外，本發明使用的脂肪源可包括在以下中食品，諸如但不限於焙烤食品，包括麵包，尤其是餅乾和糕點，乳製品，包括奶和乳飲料，冰淇淋，穀類製品，調味汁，塗抹食品，包括人造黃油，油脂，大豆製品，肉製品，油炸食品，糖果食品，塊狀糖，糖果和巧克力，點心，飲料和奶昔，速溶飲料產品，用於嬰兒和幼兒和成人的預製食品，包括預製的熟制蔬菜泥和/或水果泥，調味品產品和食用油脂。本發明的方法通過將嬰兒配方或食品施用於需要的受試者而發揮作用，上述嬰兒配方或食品用本發明所述的濃縮基質或摻合物形式的脂肪源製備並包括該脂肪源。濃縮基質的非限制性例子為InFatA、B、C或D，並且摻合物的非限制性例子為InFat1、2、3、4、5、6、7或8。施用通常經口或腸內，其可包括應用採用胃飼管、探針(sonda)等的管飼法，尤其是適於嬰兒餵養的方法。本發明進一步提供了如本發明中所述的富含棕櫚酸的脂肪源在製備用於在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或保持骨狀態的組合物中的應用，其中所述脂肪源是其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)並且總棕櫚酸含量為總脂肪酸的15-55%的甘油三酯。該組合物優選地經口或腸內施用於處於骨強度受損的風險中的受試者。在進一步的方面，本發明涉及用於製備可食用脂肪源或食品的商業包裝，根據本發明，該可食用脂肪源或食品被推薦用於在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或保持骨狀態。除了活性和無活性成分以外，該商業包裝包含使用說明書。這些包括儲存條件，對用於施用的脂肪源或食品的製備、必要的稀釋、用藥量、施用的頻次等的說明。根據本發明的商業包裝還包含隨時可用形式的脂肪源，以及使用說明。用藥量通常根據受試者的年齡、體重、性別和健康狀況、根據主治醫師和其他醫務人員所知曉的良好醫療實踐來確定。本發明由權利要求限定，權利要求的內容要作為包括在本說明書的公開書之內的內容來閱讀。要理解的是本發明不限於具體的實施例、加工步驟以及在此所公開的各種材料，因為這些加工步驟和材料可進行一些變化。還要理解的是在此所使用的術語僅用於說明具體實施方式的目的，並不是限制性的，因為本發明的範圍將僅受附帶的權利要求及其等同形式限定。必須注意的是，除非上下文另外清楚地指明，如在本說明書和附帶的權利要求中所使用的單數形式「一個」和「該」包括複數指代物。在整個本說明書和隨後的權利要求中，除非另外上下文需要，詞「包括」以及其各種變形，要被理解為是指包含所指的整數或步驟或一組整數或步驟，但不排除任意其他的整數或步驟或一組整數或步驟。下面的實施例是本發明人在實現本發明的各個方面時所採用的技術的代表。應該理解的是儘管這些技術是用於實施本發明的優選實施方案的示例，但按照本公開內容，本領域專業技術人員要認識到在不背離本發明的精神和目標範圍的前提下可作出大量的變型。實施例實施例1InFat的組成和InFat摻合物下表IA詳述了本發明優選使用的脂肪源(InFat，也稱為「濃縮物質」)和也適合用作本發明的方法和組合物中的脂肪源的8種InFat摻合物的含量。這些脂肪源的製備在W005/036987中說明。表IAInFat-濃縮基質tableseeoriginaldocumentpage12formulaseeoriginaldocumentpage13表IB:InFat摻合物tableseeoriginaldocumentpage13tableseeoriginaldocumentpage14C16表示總棕櫚酸含量。Sn-2C16表示總sn-2位脂肪酸的棕櫚酸百分數。比率是指按照公式Ksn-2的棕櫚酸％)/(3x%總棕櫚酸MxlOO對每個位點標準化的總棕櫚酸的sn-2棕櫚酸百分數。除了比率規定為％以外，所有數字表示為％(w/w)0實施例2基於InFat的嬰兒配方如下製備包括InFat和模擬人母乳脂肪組成的其他油脂的嬰兒配方選擇的製劑(例如，表IA的那些中的一種)與適當的植物油或植物油的混合物摻合/混合。所得脂質混合物為與其他組分(蛋白質、碳水化合物、礦物質、維生素等)混合在一起形成嬰兒配方的脂質成分。漿料通過高壓均質機以得到穩定的乳液。然後被均質的產物在噴霧乾燥機中乾燥以獲得最終產物。其他添加劑例如，益生元(prebiotics)和/或益生菌(probiotics)(如LGG、BB12、G0S/F0S)可加入至該乾燥的粉末中以獲得最終製劑。通過InFat與如上所述的其他油脂的摻合而產生的脂肪成分進一步與其他營養素諸如蛋白質、礦物質、維生素和碳水化合物摻合以得到食品，該食品提供給嬰兒以也存在於人乳中的主要營養素。營養素和脂肪使用高壓均質機進行均質化，並被噴霧乾燥以得到均質的粉末。該粉末在水(每60ml水約9g粉末)中進一步再分散，從而得到隨時可食的配方。隨時可食配方的脂肪含量為約3.5g/100ml，對應於人母乳的脂肪含量範圍為30-40g/L0InFatA(30%)與用於生成嬰兒配方的其他油脂的摻合物的示例性脂肪酸組成在表2中給出，並且在下面的表3中規定了該配方的成分和性質的詳情。表2=InFat的摻合物的脂肪酸組成tableseeoriginaldocumentpage15表3與InFat的摻合物製備的配方的成分和性質tableseeoriginaldocumentpage15tableseeoriginaldocumentpage16tableseeoriginaldocumentpage17可對脂肪水平和精確組成進行改動以得到被設計成模擬不同泌乳期的嬰兒配方。實施例3基於InFat的餅乾和糕點為嬰兒和幼兒設計營養餅乾或糕點產品，該餅乾或糕點具有數個百分比的油脂，所有或大部分為InFat。該產品可包括115%的脂肪或油，優選39%。在具體的配方中，由包括下列成分的生麵團生產餅乾小麥粉(41%)、蔗糖(20.5%)、水(25.8%)、InFat(8.2%)、玉米澱粉(2.9%)和膨鬆劑(1.6%)0另一配方包括小麥粉(42.2%)、蔗糖(21.)、水(16.8%)、InFat(8.4%)、玉米澱粉(11.0%)、膨鬆劑(0.3%)和鹽(0.2%)。實施例4基於InFat6摻合物(InFat6)的嬰兒膳食對大鼠骨強度的作用在動物模型研究中研究InFat摻合物6的作用。該研究評價與飼以富含sn_l和sn-3位棕櫚酸的膳食的動物相比，飼以富含sn-2位棕櫚酸的膳食(InFat6摻合物)的動物的骨礦化和骨強度。進行一系列試驗以表徵接受受控飼養方案的剛斷奶大鼠的椎體的生物力學性能，上述受控飼養方案採用期望改變(增加)骨形成速率的先進脂質化學設計。研究設計斷奶後立即從HarlanLaboratories(Rehovot,以色列)獲取48隻21日齡，體重為40_50g的雄性Sprague-Dawley大鼠。將大鼠隨機分配以接受三種不同的膳食，飼養2周(每組12隻動物)。供應的膳食的脂肪含量不同1.膳食A具有含高含量的sn-2位棕櫚酸的油的膳食2.膳食B具有含高含量的sn-Ι和sn-3位棕櫚酸的油的膳食3.膳食C:具有含低含量棕櫚酸的油的膳食在試驗結束(飼養第15天)時，麻醉並處死動物，屍體在-80°C下冷凍直至進行骨強度試驗那天。膳食由HarlanTekledLtd，USA製造的標準大鼠飼料，Teklad通用18%蛋白齧齒動物膳食(TekladGlobal18%ProteinRodentDiet)(目錄#2018)用作對照膳食。定製的大鼠膳食由HarlanTekledLtd;USA製造。所有定製的膳食營養素含量相似，僅在油的種類方面不同(表5)。表4補充的油類的脂肪酸組成(％總脂肪酸)tableseeoriginaldocumentpage18表5:膳食組成(wttableseeoriginaldocumentpage19骨強度分析進行一系列試驗以表徵剛斷奶大鼠椎體的生物力學性能。生物力學表徵包括通過單軸壓縮第5腰椎體進行的骨小梁力學性能的敏感性功能測定。所有試驗均採用萬能試驗機(Zwick1456，Ulm德國)和專為研究應用特別製造的定製夾具進行。從被測骨的負荷位移曲線和負荷變形曲線的線性部分計算骨剛度。使用Omnipath,SunlightOmnisense的軸向傳播技術(也稱為A-QUS(軸向定量超聲))進行骨強度測定。結果骨強度測定如圖2中所示，膳食A組(高sn-2位棕櫚酸膳食)的結構剛度顯著高於膳食B組(高sn-Ι和sn-3棕櫚酸膳食)(ρ=0.004)，並顯著高於膳食C組(低棕櫚酸膳食)(ρ=0.038)。剛度對體重和椎體高度的標準化也產生了在膳食A和膳食B或膳食C之間結構剛度的顯著差異(分別為P=0.007,0.031)(圖3)，其中結構剛度提供骨抗斷裂性。彈性模量、極限剛度/mm2反映了骨組織對抗彎曲的能力。表6大鼠L5椎骨的生物力學分析tableseeoriginaldocumentpage19tableseeoriginaldocumentpage20總之，斷奶大鼠骨的力學性能似乎對施加的膳食幹預敏感。具體地，膳食A組飼養的大鼠中較高的結構剛度表明骨結構增強的速率加快。實施例5InFat7對餵配方的中國足月兒的骨強度的作用雙盲、隨機化、安慰劑對照的試驗InFat摻合物7的功效通過6個月的雙盲、隨機化、安慰劑對照的試驗在中國足月兒中研究InFat摻合物7(InFat7)的功效。該研究證明了與基於標準植物油的配方相比，具有高比例的sn-2位棕櫚酸的配方(本發明，來自表IB中列舉的InFat摻合物的InFat7)對中國足月兒的骨強度結果的作用。本研究的目的是通過測量超聲波沿骨的聲速(SOS)來評價嬰兒的骨強度。聲速(SOS)測定由定量超聲技術，Sunlight公司(SunlightMedicalInc.，薩默塞特，NJ)產品SunlightOmnisense7000P(Omnisense7000P)來完成。Omnisense7000P是被專門開發用來評價兒童群體的骨強度的基於超聲的診斷裝置。臨床研究已經顯示該裝置能夠檢測由體重超重和鈣消耗水平所引起骨強度的變化。Sunlight已經基於性別和人種起源開發了許多用於兒童群體的骨評價的參考資料庫。現有的資料庫為男性和女性資料庫，這些資料庫也包括中國人群。SunlightMedical的新的中國兒童參考資料庫是在中國的許多城市收集的，提高了SunlightOmnisense7000P對全世界中國兒童群體的應用性。研究設計經篩選後，80名嬰兒被隨機地分至兩個治療組中之一，每個治療組40名嬰兒1.配方A含InFat摻合物7的配方(表7)。2.配方B含標準植物油的對照配方(表7)。表7脂肪酸組成(總脂肪酸重量％)tableseeoriginaldocumentpage20tableseeoriginaldocumentpage21在出生後8-10天內合格的嬰兒入選至研究中。嬰兒被隨機分至兩組中之一治療組(配方A)或對照(配方B)。兩組均接受配方6個月，並且在基準日以及6和12周後的研究期間測量他們的骨強度。方法脛骨SOS的QUS(定量超聲)測量使用進行SunlightOmnisense7000Pqus進行脛骨中段的sos測量。結果預期結果是在餵養6周和12周後，在以配方AdnFat7摻合物)餵養的嬰兒中使用定量超聲技術測量的骨SOS顯著地高於在以配方B(對照配方)餵養的嬰兒中測量的SOS。與以配方B餵養的嬰兒相比，以配方A餵養的嬰兒的骨SOS測量值以更為顯著的速度隨時間增加。這些結果有可能表明與配方B相比，將sn-2位棕櫚酸添加至嬰兒配方中將產生明顯較高的全身骨量。實施例6InFat8產品對配方餵養早產兒的骨強度的作用雙盲、隨機化、安慰劑對照的試驗InFat摻合物8的功效通過持續3個月的雙盲、隨機化、安慰劑對照的試驗在早產兒中研究InFat摻合物8的功效。該研究證明了與標準植物油配方相比，具有高比例的sn-2位棕櫚酸的配方(來自表IB中列舉的InFat摻合物的InFat8)對早產兒的骨強度結果的作用。本研究的目的是通過測量超聲波沿骨的聲速(SOS)來評價嬰兒的骨強度。由SunlightPremiereQUS裝置進行的定量超聲測量在實施例4中說明。早產兒(在妊娠37周前出生的嬰兒)發生率的不斷增加，以及由於技術的高度進步而獲得的其生存率的提高都增加了為早產兒的新生兒期和以後的生活開發出更具有創新性和成本有效的治療方式的需求。如在
背景技術：
中所提到的，在早產兒中代謝性骨病是一種相對常見的事件，因為骨礦物質增加的最快時期通常發生在妊娠的最後三個月內，並且其在子宮外環境中難以再生。研究設計經篩選後，60名健康成長的早產兒被隨機地分至兩個治療組中之一，每個治療組30名嬰兒1.配方A具有表8中所示的脂肪酸組成的含InFat摻合物8的治療配方。2.配方B含標準植物油的對照配方(表8)。表8脂肪酸組成(總脂肪酸重量％)___脂肪酸配方A(InFat)配方B(對照)99C12:0C14:033C16:02121sn-2位C16:04910C18:0ΓδΓδC18:l4343C18:21616C18:31~51~5在孕齡為32-36周之間出生的合格早產兒被隨機分至兩組中之一治療組(配方A)或對照(配方B)。兩組均接受配方3個月，並且在基準日以及4、8和12周後的研究期間測量他們的骨強度。方法脛骨SOS的QUS測量使用SunlightPremiereQUS進行脛骨中段的SOS測量。結果在餵養4周、8周和12周後，在以配方A(本發明的InFat8配方)餵養的早產兒中使用定量超聲技術測量的骨SOS預期顯著地高於在以配方B(對照配方)餵養的嬰兒中測量的SOS。與以配方B餵養的嬰兒相比，以配方A餵養的嬰兒的骨SOS測量值有可能以更為顯著的速度隨時間增加。預期的結果有可能表明與配方B相比，將sn-2位棕櫚酸添加至嬰兒配方中會產生明顯較高的全身骨強度。權利要求一種在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或保持骨狀態的方法，包括將包含脂肪源的組合物施用於所述人，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55％是棕櫚酸部分的甘油三酯，並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30％(w/w)。2.如權利要求1所述的方法，其中在所述脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於所述甘油主鏈的sn-2位；(ii)在所述甘油主鏈的sn_l和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分；以及(iv)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。3.如權利要求1或2任意一項所述的方法，其中所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年。4.如權利要求1-3中任意一項所述的方法，其中所述組合物包括與植物油混合物摻合的如權利要求1或2任意一項所限定的脂肪源，其中所述混合物包括選自豆油、棕櫚樹油、油菜油、椰子油、棕櫚仁油、向日葵油、玉米油和菜籽油的油類。5.如權利要求1-4中任意一項所述的方法，其中所述人處於骨強度受損的風險中。6.如權利要求1-5中任意一項所述的方法，其中所述脂肪源包括在任意一種食品和嬰兒配方中，其中所述食品選自焙烤食品，包括麵包，尤其是餅乾和糕點，乳製品，包括奶和乳飲料，冰淇淋，穀類製品，調味汁，塗抹食品，包括人造黃油，油脂，大豆製品，肉製品，油炸食品，糖果食品，塊狀糖，糖果和巧克力，點心，飲料和奶昔，速溶飲料產品，用於嬰兒和幼兒的預製食品，包括預製的熟制蔬菜泥和/或水果泥，調味品產品和食用油脂。7.如權利要求6所述的方法，其中所述嬰兒配方包含所述脂肪源以及蛋白源、碳水化合物源、礦物質、維生素，和任選地載體、稀釋劑、添加劑或賦形劑中的至少一種。8.一種用於在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或維持骨狀態的可食用脂肪源，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55%是棕櫚酸部分的甘油三酯，並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)9.如權利要求8所述的脂肪源，其中在所述脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於所述甘油主鏈的sn-2位；(ii)在所述甘油主鏈的sn_l和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分；以及(iv)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。10.如權利要求8或9任意一項所述的脂肪源，其中所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年。11.如權利要求9或10所述的脂肪源，其中所述人處於骨強度受損的風險中。12.一種包括權利要求8-11中任意一項所述的脂肪源的食品，其用於在人中增加骨強度和/或維持骨狀態，其中所述食品選自焙烤食品，包括麵包，尤其是餅乾和糕點，乳製品，包括奶和乳飲料，冰淇淋，穀類製品，調味汁，塗抹食品，包括人造黃油，油脂，大豆製品，肉製品，油炸食品，糖果食品，塊狀糖，糖果和巧克力，點心，飲料和奶昔，速溶飲料產品，用於嬰兒和幼兒的預製食品，包括預製的熟制蔬菜泥和/或水果泥，調味品產品和食用油脂。13.如權利要求12所述的用於增加骨強度的食品，其中所述人是新生兒、嬰兒、學步幼童、兒童或青少年。14.如權利要求12或13所述的食品，其中所述人處於骨強度受損的風險中。15.一種商業包裝，包括a)經腸內施用於人後增加骨強度的脂肪源；b)任選地至少一種可食用的生理學可接受的蛋白質、碳水化合物、維生素、礦物質和活性或無活性添加劑；c)任選地至少一種用於運載a)和b)中所限定的一種或多種組分的可食用的生理學可接受的載體或稀釋劑；d)用於混合a)、b)和/或c)中所限定的組分的設備和容器；以及e)使用說明書。16.如權利要求15所述的商業包裝，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55%是棕櫚酸部分的甘油三酯，並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30%(w/w)。17.如權利要求16所述的商業包裝，其中在所述脂肪源中(i)所述總棕櫚酸殘基的至少30%，優選33%，更優選40%位於所述甘油主鏈的sn-2位；(ii)在所述甘油主鏈的sn-1和sn-3位處的脂肪酸部分的至少50%，優選70%是不飽和的；(iii)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少35%，優選至少40%是油酸部分；以及(iv)在sn-1和sn-3位處的所述不飽和脂肪酸部分的至少4%，優選至少6%是亞油酸部分。全文摘要本發明公開了一種在人中增加骨強度和/或提高骨抗彎曲性和/或改善骨結構和/或保持骨狀態的方法，包括將包含脂肪源的組合物施用於所述人，其中所述脂肪源是甘油三酯脂肪源，所述甘油三酯脂肪源包括在總脂肪酸中有15-55％是棕櫚酸部分的甘油三酯，並且其中在甘油主鏈的sn-2位處的棕櫚酸部分的水平為總棕櫚酸的至少30％(w/w)。所述方法特別地用於處於骨強度受損風險下的受試者。此外本發明還公開了所述脂肪源，以及包含所述脂肪源的食品和商業包裝。文檔編號A61P19/10GK101808633SQ200880109248公開日2010年8月18日申請日期2008年7月31日優先權日2007年8月1日發明者多裡·佩萊德,法比亞納·巴爾-約瑟夫,耶爾·利夫席茨申請人:酶學技術有限公司