一種從丹梔逍遙散中提取的複合物及其應用的製作方法

2023-04-27 07:26:31 2

專利名稱：一種從丹梔逍遙散中提取的複合物及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種複合物，具體是涉及一種從名方丹梔逍遙散中提取出的有效成分所複合而成的複合物。本發明還涉及了該複合物在製備治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症的藥品中的應用。
背景技術：
丹梔逍遙散又名加味逍遙散，最早記載於《內科摘要》。以重量份計，它由炙甘草3份、當歸6份、芍藥6份、茯苓6份、炒白朮6份、柴胡6份、炒梔子3份、丹皮3份組成。
丹梔逍遙散具有如下功效養血疏肝，清熱瀉火；治肝脾血虛，虛火上炎，骨蒸潮熱，自汗盜汗，顴紅口乾，頭痛目澀，怔仲不寧；亦治婦女月經不調，小腹脹痛，或小腹重墜，小便淋澀。可用於婦女鬱怒傷肝，經來腹痛。
在現代臨床應用中，丹梔逍遙散可用於如下方面1.痛經、月經病、更年期症候群、庫柏氏症候群、更年期失眠、婦女乳腺增生病、乳腺囊性增生症、月經失調、經前期症候群、行經乳脹、功能性子宮出血、月經周圍性精神病等婦科疾病；2.急性視神經炎、前部缺血性視神經病變、視神經萎縮、中心性漿液性脈絡膜視網膜病變等眼科疾病；
3.此外還可應用於慢性膽囊炎、黃褐斑、先兆流產、膽汁返流性胃炎、功能性消化不良、失音、頑固性失眠、神經性皮炎、纖維肌痛症候群、女性痤瘡、慢性頑固性葡萄膜炎、惡性腫瘤、高泌乳素血症、成年甲狀腺機能減退症、慢性膽囊炎、化療栓塞術後肝功能損害、經行便血及男科疾病。
由上述可知，丹梔逍遙散的主治功效及臨床應用範圍雖然非常廣泛，但由於中醫傳統的煎煮方法與製劑工藝，使得其存在著療效不一定確切，重複性差的問題。

發明內容
本發明的一個目的在於針對已有技術存在的缺點，提供一種從丹梔逍遙散中提取出的有效組分所複合而成的一種複合物。本發明利用現代工藝手段，提取丹梔逍遙散的活性成分，提高其生物利用度，增強其療效；並且採用公認的藥理藥效學實驗，明確複合物功效及主治範圍。
本發明的另一個目的在於將該複合物用於製備治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症的藥品。
為達到上述目的，本發明採取了以下的技術方案一種複合物，包括以下方法提取得到的四種有效組分將丹梔逍遙散藥材粗粉按處方比例混合，總重為5000g，加石油醚12000～20000ml，加熱回流4次，回流時間分別為2h、1.5h、1.5h和1.5h；合併提取液，過濾，濾液濃縮得石油醚提取物；為棕色粘稠油狀物，即為有效組分1；
取一半由上述方法過濾得到的藥渣，揮去石油醚，加水煎煮3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1.5h；合併水提取液，過濾，濾液濃縮得濃縮液2500ml；棄藥渣；濃縮液加95％乙醇至藥液含醇量65％，放置12小時，過濾；取沉澱物用65％乙醇處理，過濾；合併濾液，減壓，回收乙醇製成濃縮液，即為有效組分2；沉澱物用95％乙醇洗滌，冷凍乾燥，得有效組分3；取另一半藥渣揮去石油醚，加75％乙醇加熱回流3次，回流時間分別為2h、1.5h和1.5h；合併提取液，過濾，濾液濃縮得乙醇提取物，為棕色浸膏，即為有效組分4，不溶物棄藥渣；將上述方法得到的有效組分1、2、3和4按一定比例配合，即得到複合物。
上述技術方案中，所述的丹梔逍遙散的處方為炙甘草3份、當歸6份、芍藥6份、茯苓6份、炒白朮6份、柴胡6份、炒梔子3份、丹皮3份。
作為對上述技術方案的改進，在提取有效物質1時，加熱回流在水浴中進行，水浴溫度為70～90℃。
作為對上述技術方案的另一種改進，在上述有效組分的提取中，濾液的濃縮為在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓濃縮。
通過上述技術方案製備得到的複合物都可以用於治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症。
與已有技術相比，本發明具有如下的優點本發明利用現代工藝手段，提取丹梔逍遙散的活性成分，提高其生物利用度，增強其療效。並且採用公認的藥理藥效學實驗，明確複合物功效及主治範圍。本發明的複合物在治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症方面具有優異的效果。
具體實施例方式
實施例1將丹梔逍遙散藥材粗粉按處方比例混合，總重為5000g，加石油醚12000～20000ml，水浴加熱回流4次，回流時間分別為2h、1.5h、1.5h和1.5h；水浴溫度為70～90℃；合併提取液，過濾，濾液在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓，濃縮得石油醚提取物。為棕色粘稠油狀物(有效組分1)62g，得率1.24％。
取一半由上述方法過濾得到的藥渣，揮去石油醚，加水煎煮3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1.5h，合併水提取液，過濾，濾液在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓，濃縮得濃縮液2500ml，棄藥渣。濃縮液加95％乙醇至藥液含醇量65％，放置過夜，過濾。取沉澱用65％乙醇處理，過濾，合併濾液(65％乙醇液)，在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓，回收乙醇製成濃縮液(有效組分2)(1250ml，1ml＝2g藥材)，測幹固物量，得率25.7％；沉澱物用95％乙醇洗滌，冷凍乾燥，得391g，(有效組分3)，得率15.6％。
取另一半藥渣揮去石油醚，加75％乙醇加熱回流3次回流時間分別為2h、1.5h和1.5h；合併提取液，過濾，濾液減壓濃縮得乙醇提取物(1250ml，1ml＝2g藥材)，為棕色浸膏(有效組分4)，得率25.9％；不溶物棄藥渣。
將上述提取方法得到的有效組分1、2、3和4按一定比例配合，即得到所要製備的複合物。
實施例2試驗結果及其分析實驗報告動物所用動物大鼠有Wistar大鼠、SD大鼠兩種，小鼠均為昆明種小鼠藥物有效組分1～4實驗報告一 抗焦慮試驗——大鼠群居接觸實驗實驗動物和分組SD大鼠，雄性106隻，180-220g，以每籠2隻進行飼養，自由飲食，自然光照。隨機分為9組生理鹽水組、多糖高中劑量組、石油醚高中劑量組、醇提液高中劑量組、水提醇沉液高中劑量組，以上各組除分籠飼養，不採用任何造模方法。
藥物及給藥方法採用生理鹽水、原方水煎劑及多糖高中劑量、石油醚高中劑量、醇提液高中劑量、水提醇沉液高中劑量，每日灌胃，連續17天，第17天，灌胃後50min，進行實驗。
儀器與設備敞箱(52cm×46cm×35cm，箱內壁塗成黑色)，秒表實驗方法飼養2周後，每籠大鼠同時放入敞箱中適應8min，連續2天，第3天將大鼠按體重相近原則配對(配對大鼠體重相差一般不超過15g)，測試前50min，灌胃給藥，測試時將重新配對的相互不熟悉大鼠放入敞箱，在自然光照下進行觀察測試，記錄5min內群居接觸時間，其指標包括嗅、爬上或下鑽、理毛、性探究、跟隨或圍繞轉。被動接觸如背靠背及攻擊性行為如攻擊性理毛、咬、踢、格鬥等，不作為群居接觸行為。
實驗結果其中有效組分3(水提醇沉液)具有增加群居接觸時間的作用(p＜0.01)，具體結果見表1。
表1 各有效組分對大鼠群居接觸模型的影響(x±s)Group N(對)接觸時間正常對照組 443.50±12.12醇提中組 430.25±1.26水提醇沉高組 486.75±11.59**水提醇沉中組 558.60±14.84多糖高組 563.20±33.77多糖中組 443.50±21.56石油醚高組 48.00±5.29**石油醚中組 510.20±8.41**與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結論大鼠群居接觸實驗是焦慮行為測試的可靠動物模型，本研究結果顯示表明有效組分3(水提醇沉液)具有明顯抗焦慮作用。
實驗報告二 抗抑鬱實驗——小鼠懸尾實驗實驗動物和分組KM種小鼠，雄性118隻，18-22g，自由飲食，自然光照，隨機分為9組生理鹽水組、多糖高中劑量組、石油醚高中劑量組、醇提液高中劑量組、水提醇沉液高中劑量組，以上各組都給予相應的藥物灌胃，不採用任何造模方法。
藥物及給藥方法採用生理鹽水、原方水煎劑及多糖高中劑量、石油醚高中劑量、醇提液高中劑量、水提醇沉液高中劑量，每日灌胃，連續7天，第7天，灌胃後50min，進行實驗。
儀器多功能小鼠自主活動記錄儀(購自山東省醫學科學設備站)，秒表實驗方法小鼠灌胃後60min後，立即用粘膏條將小鼠尾在距尾尖2cm處粘在一水平木板上，木板距地面15cm，保持此狀態適應1min後，觀察5min，記錄小鼠不動時間，以此為指標。
實驗結果其中有效組分1(石油醚提取液)、2(醇提液)、3(水提醇沉液)、4(多糖)均可縮短懸尾實驗中小鼠不動時間(p＜0.01或p＜0.05)，具體實驗結果見表2。
表2 各複合物對懸尾實驗小鼠不動時間的影響(x±s)Group N 不動時間正常對照組 9 138.44±39.71醇提高組13 93.54±41.94**醇提中組10 79.10±48.02**水提醇沉高組10 113.40±33.38水提醇沉中組12 80.25±41.64**多糖高組12 85.58±50.29**多糖中組10 90.40±32.12*石油醚高組 10 92.40±38.69*石油醚中組 11 68.00±36.73**與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結論小鼠懸尾實驗屬「行為絕望」急性抑鬱模型，有效組分1～4均表現出明顯的抗抑鬱作用。
實驗報告三 鎮靜催眠試驗(一)——戊巴比妥鈉延長睡眠時間實驗實驗動物和分組KM種小鼠，雄性146隻，18-22g，自由飲食，自然光照，實驗前測自主活動，按自主活動次數分為9組生理鹽水組、多糖高中劑量組、石油醚高中低劑量組、醇提液高中劑量組、水提醇沉液高中劑量組，以上各組都給予相應的藥物灌胃，不採用任何造模方法。
藥物及給藥方法採用生理鹽水、原方水煎劑及多糖高中劑量、石油醚高(10倍)中(5倍)低(2倍)劑量、醇提液高中劑量、水提醇沉液高中劑量，每日灌胃，連續7天，第7天，灌胃後50min，進行實驗。
儀器與試劑多功能小鼠自主活動記錄儀(購自山東省醫學科學設備站)，秒表，2％戊巴比妥鈉，電子秤實驗方法稱重，按50mg/kg計算所需2％戊巴比妥鈉的用量，灌胃給藥後50min，腹腔注射戊巴比妥鈉以翻正反射消失(將動物以背向下的姿勢輕輕放在木板上，保持此姿勢30s以上，則認為翻正反射消失)為入睡時間，從翻正反射消失到恢復時間為睡眠持續時間。
實驗結果 有效組分1(石油醚提取液)、2(醇提液)具有顯著延長戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間的作用(p＜0.01或p＜0.05)。具體結果見表3。
表3 各複合物對小鼠睡眠時間的影響(x±s)Group N 睡眠持續時間正常對照組 15 130.40±45.40石油醚低組 14 170.71±48.39石油醚中組 12 274.16±115.38**石油醚高組 13 385.00±63.04**多糖中組14 134.92±33.70多糖高組15 153.00±70.62醇提中組15 124.60±48.57**醇提高組15 155.53±46.42水提醇沉中組10 101.00±41.72水提醇沉高組11 140.45±26.87丹中組 12 165.00±19.87合計146 175.15±94.72與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結論 有效組分1(石油醚提取液)、2(醇提液)對戊巴比妥鈉致小鼠睡眠有協同作用，具有明顯的鎮靜催眠作用。
實驗報告三 鎮靜催眠試驗(一)——戊巴比妥鈉閾下劑量鎮靜催眠協同作用實驗實驗動物和分組KM種小鼠，雄性48隻，18-22g，自由飲食，自然光照，實驗前測自主活動，按自主活動次數分為4組生理鹽水組、石油醚高中低劑量組，以上各組都給予相應的藥物灌胃，不採用任何造模方法。
藥物及給藥方法採用生理鹽水、石油醚高(10倍)中(5倍)低(2倍)劑量，灌胃一次後50min，進行實驗。
儀器與試劑多功能小鼠自主活動記錄儀(購自山東省醫學科學設備站)，秒表，2％戊巴比妥鈉，電子秤實驗方法稱重，按21mg/kg計算所需2％戊巴比妥鈉的毫升數，灌胃給藥後50min，腹腔注射戊巴比妥鈉，觀察15min內，小鼠翻正反射消失1min以上的個數。
實驗結果 有效組分1(石油醚提取液高劑量)能明顯增加閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠小鼠個數(p＜0.01)表4 各複合物對小鼠閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠的影響(x±s)Group N睡眠個數正常對照組 14 2石油醚低組 11 5石油醚中組 13 4石油醚高組 10 9**合計48 20與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結論 有效組分1(石油醚提取液高劑量)能明顯增加閾下劑量戊巴比妥鈉睡眠作用，具有明顯鎮靜催眠作用。
權利要求
1.一種複合物，包括以下方法提取得到的四種有效組分將丹梔逍遙散藥材粗粉按處方比例混合，總重為5000g，加石油醚12000～20000ml，加熱回流4次，回流時間分別為2h、1.5h、1.5h和1.5h；合併提取液，過濾，濾液濃縮得石油醚提取物；為棕色粘稠油狀物，即為有效組分1；取一半由上述方法過濾得到的藥渣，揮去石油醚，加水煎煮3次，煎煮時間分別為2h、1.5h、1.5h；合併水提取液，過濾，濾液濃縮得濃縮液2500ml；棄藥渣；濃縮液加95％乙醇至藥液含醇量65％，放置12小時，過濾；取沉澱物用65％乙醇處理，過濾；合併濾液，減壓，回收乙醇製成濃縮液，即為有效組分2；沉澱物用95％乙醇洗滌，冷凍乾燥，得有效組分3；取另一半藥渣揮去石油醚，加75％乙醇加熱回流3次，回流時間分別為2h、1.5h和1.5h；合併提取液，過濾，濾液濃縮得乙醇提取物，為棕色浸膏，即為有效組分4，不溶物棄藥渣；將上述方法得到的有效組分1、2、3和4按一定比例配合，即得到複合物。
2.根據權利要求1所述的複合物，其特徵在於以重量份計，丹梔逍遙散的處方為炙甘草3份、當歸6份、芍藥6份、茯苓6份、炒白朮6份、柴胡6份、炒梔子3份、丹皮3份。
3.根據權利要求1或2所述的複合物，其特徵在於在提取有效物質1時，加熱回流在水浴中進行，水浴溫度為70～90℃。
4.根據權利要求1或2所述的複合物，其特徵在於在上述有效組分的提取中，濾液的濃縮為在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓濃縮。
5.根據權利要求3所述的複合物，其特徵在於在上述有效組分的提取中，濾液的濃縮在旋轉蒸發儀中抽成真空後減壓濃縮。
6.權利要求1～5中任一項所述的複合物在製備治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症的藥品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種從民方丹梔逍遙散中提取出的有效成分按一定比例所複合而成的複合物。本發明的複合物在治療抑鬱症、焦慮症、睡眠障礙疾病、亞健康狀態及疲勞綜合症方面具有優異的效果。
文檔編號A61P25/20GK1634179SQ20031011754
公開日2005年7月6日 申請日期2003年12月26日 優先權日2003年12月26日
發明者徐志偉, 嚴燦 , 吳麗麗 申請人:廣州中醫藥大學