1′-硫代靛玉紅類化合物、用途及其製備方法
2023-05-04 02:45:06 1
專利名稱：：1′-硫代靛玉紅類化合物、用途及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種醫藥
技術領域：
的化合物、用途及其製備方法，具體是一種l'-硫代靛玉紅類化合物、用途及其製備方法。
背景技術：
：靛玉紅在臨床上用於治療慢性粒細胞白血病，但是其溶解度較差，會對胃腸道產生副作用，在臨床應用的過程中有些病人因此不得不因此而停止服藥。經對現有技術的文獻檢索發現，Polychronopoulos，P.等在《JournalofMedicinalChemistry》(藥物化學雜誌)2004年第47期935946頁中發表了題為《Structuralbasisforthesynthesisofindirubinsaspotentandselectiveinhibitorsofglycogensynthasekinase_3andeye1in-d印endentkinases》(青定玉紅衍生物有效的選擇性抑制糖元合成激酶_3和周期蛋白依賴激酶的結構基礎)一文，文中評述，靛玉紅衍生物可以有效抑制糖元合成激酶_3和細胞周期蛋白依賴性激酶，因而可以治療因細胞生長紊亂所致的各種疾病，其中包括惡性腫瘤，但是在該文中，對靛玉紅的結構修飾是在保留靛玉紅母核結構的基礎上，只針對不同位置的取代基進行了簡單的改變，這不能夠從根本上改變靛玉紅類化合物溶解度差，從而導致的生物利用度低的缺點。為了提高與靛玉紅結構類似的化合物的抗腫瘤活性，有必要在靛玉紅結構式中引入新類型取代基及對靛玉紅母核結構進行改變。
發明內容本發明的目的在於克服現有技術的不足，提供一種1'_硫代靛玉紅類化合物、用途及其製備方法。本發明的化合物能抑制或殺滅腫瘤細胞，具有抗腫瘤活性的特性，可用來製備治療腫瘤的藥物。本發明涉及一種1'_硫代靛玉紅類化合物，結構式如下其中R、R1、R2、R3選擇以下組合中一種R=0，R丄=Cl，R2=H，R3=H;R=0，R丄=Br，R2=H，R3=H;R=0，R丄=CF3，R2=H，R3=H;R=0，=N02，R2=H，R3=H;R=0，R丄=H，R2=F，R3=H;R=0，R丄=H，R2=C1，R3==H;R=0，R丄=H，R2=Br，R3==H;R=0，R丄=H，R2=H，R3=F;R=0，R丄=H，R2=F，R3=F;R=0，R丄=H，R2=C1，R3==F;R=■，R丄=H，R2=F，R3=H;R=■，R丄=H，R2=Cl，R:S=H;R=■，=H，R2=Br，R:S=H。所述l'-硫代靛玉紅類化合物在製備抗腫瘤藥物中的用途。所述腫瘤為宮頸癌、胃癌、肝癌或肺癌。本發明還涉及一種1'_硫代靛玉紅類化合物的製備方法，包括如下步驟步驟一，在酸性條件下，將4-取代靛紅或6-取代靛紅分別與苯並[b]噻吩_3(2H)-酮或3-取代苯並[b]噻吩-3(2H)-酮縮合，得到R=0的1'-硫代靛玉紅類化合物；步驟二，將步驟一得到的R=0的1'-硫代靛玉紅類化合物與羥胺反應，得到R=NOH的1'-硫代靛玉紅類化合物。本發明在具有抗腫瘤作用的化合物靛玉紅母核結構基礎上，將1'位的氮原子替換為硫原子，同時在4位或6位引入取代基，合成了一系列全新的化合物，得到具有抗腫瘤活性的全新的4-取代-i'-硫代靛玉紅類化合物及e-取代-i'-硫代靛玉紅類化合物。與現有技術相比，本發明具有如下的有益效果本發明的1'-硫代靛玉紅類化合物具有抑制或殺滅腫瘤細胞的作用，可以用於製備抗腫瘤的藥物。具體實施例方式本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和過程，但本發明的保護範圍不限於下述的實施例。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照製造廠商所建議的條件。實施例14-氯-l'-硫代靛玉紅在100mL單口燒瓶中依次加入40mL冰醋酸、4-氯靛紅(147mg，0.62mmol)、苯並[b]噻吩-3(2H)-酮(105mg，0.70mmo1)，攪拌溶解，加入濃鹽酸2mL，氮氣保護下回流30min。冷卻至室溫，減壓蒸去冰醋酸得深紅色黏稠物。經矽膠柱色譜分離兩次(洗脫劑分別為二氯甲烷、環己烷-丙酮(6:1))，得暗紅色固體13mg，收率6.7X，mp〉300°C。'H-NMR(300MHz，DMSO，Sppm):11.12(s，1H，N—H)，7.79(d，1H，J=7.8Hz，H—4')，7.65-7.70(m，2H，H-6'，7')，7.34(t，1H，J=7.2Hz，H-5)，7.18-7.20(m，2H，H_6，5')，6.86(dd，1H，J=3.3Hz，5.4Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3186，1704，1680，1614，1592，1452，1432，1314，1284，1249，1165，1034，1007，875，775，740，727。ESI—MSm/z:314.11，316.13[M+H]+。實施例24-溴-l'-硫代靛玉紅由4-溴靛紅和苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例l。暗紅色固體，收率13.7%，mp>300°C。'H-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):11.23(s，1H，N-H)，7.89(d，1H，J=7.8Hz，H-4')，7.75-7.80(m，2H，H-6'，7')，7.44(t，1H，J=7.2Hz，H-5)，7.28-7.30(m，2H，H-6，5')，6.96(dd，1H，J=3.3Hz，5.4Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3184，1703，1678，1612，1563，1451，1428，1311，1284，1249，1034，1003，874，773，738，725。EI-MSm/z:358.10，360.07[M+H]+。實施例34-三氟甲基-l'-硫代靛玉紅由4-三氟甲基靛紅和苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例l。暗紅色固體，收率37.0%，mp237-238°C。^-NMR(300MHz，DMS0，Sppm):11.30(s，1H，N-H)，7.72-7.83(m，3H，H-4'，6'，7')，7.55(t，1H，J=7.8Hz，H—6)，7.37—7.43(m，1H，H-5')，7.31(d，lH，J=7.8Hz，H—5)，7.16(d，lH，J=8.1Hz，H—7)。IR(cm—、KBr):3174，1684，1661，1614，1585，1452，1439，1324，1281，1252，1223，1169，1125，1111，1081，1038，1001，878，778，740，698。ESI-MSm/z:348.17[M+H]+。實施例44-硝基-l'-硫代靛玉紅由4-硝基靛紅和苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例l。亮紫黑色固體，收率50.2%，mp>300°C。'H-NMR(300MHz，DMSO，Sppm):11.54(s，1H，N-H)，7.73-7.82(m，3H，H-4'，6'，7')，7.55—7.62(m，2H，H_5，6)，7.41(t，1H，J=7.2Hz，H-5')，7.26-7.33(m，1H，H-7)。IR(cm—、KBr):3337，1712，1675，1615，1590，1578，1537，1451，1354，1308，1282，1224，1202，1040，1005，975，878，847，773，724，711。ESI-MSm/z:325.11[M+H]+。實施例56-氟-l'-硫代靛玉紅在25mL單口燒瓶中依次加入15mL冰醋酸、6_氟靛紅(56mg，0.34mmo1)、苯並[b]噻吩-3(2H)-酮(60mg，0.40mmo1)，攪拌溶解，加入濃鹽酸lmL，氮氣保護下回流30min，逐漸析出紅色絮狀沉澱。熱過濾，濾餅用熱水洗滌，乾燥，得紅色絲狀固體87mg，收率86.3%，mp>300°C。'H-NMR(300MHz，DMSO，S卯m):11.27(s，1H，N-H)，9.06(dd，1H，J=6.3Hz，8.7Hz，H-4)，7.84(d，1H，J=7.5Hz，H-4')，7.71-7.74(m，2H，H-6'，7')，7.36-7.42(m，1H，H-5')，6.88(t，1H，J=9.3Hz，H-5)，6.74(dd，1H，J=3.0Hz，9.3Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3163，1699，1677，1653，1629，1588，1498，1451，1341，1283，1146，1048，1002，966，870，743。ESI-MSm/z:298.14[M+H]+。實施例66-氯-l'-硫代靛玉紅由6-氯靛紅和苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例5。亮紅色絮狀固體，收率55.7%，mp>300°C。力-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):11.23(s，1H，N-H)，8.97(d，1H，J=8.4Hz，H_4)，7.83(d，1H，J=7.5Hz，H_4')，7.71-7.73(m，2H，H-6'，7')，7.36-7.42(m，1H，H_5')，7.10(dd，1H，J=1.8Hz，8.4Hz，H-5)，6.93(d，1H，J=1.8Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3163，1706，1678，1615，1589，1450，1337，1297，1282，1092，1001，922，875，741。ESI-MSm/z:314.11,316.10[M+H]+。實施例76-溴-l'-硫代靛玉紅由6-溴靛紅和苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例5。亮紅色絮狀固體，收率70.2%，mp>300°C。力-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):11.24(s，1H，N-H)，8.92(d，1H，J=8.4Hz，H_4)，7.85(d，1H，J=7.8Hz，H_4')，7.72-7.75(m，2H，H-6'，7')，7.38-7.44(m，1H，H_5')，7.28(dd，1H，J=1.5Hz，8.4Hz，H-5)，7.09(d，1H，J=1.5Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3158，1704，1676，1610，1587，1449，1336，1296，1281，1227，1041，1001，911，874，739。ESI-MSm/z:356.1，358.l[M_H]+。實施例85'-氟-l'-硫代靛玉紅由靛紅和5-氟苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例5。暗紅色絲狀固體，收率76.0%，mp>300°C。力-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):11.14(s，1H，N-H)，8.94(d，1H，J=7.2Hz，H_4)，7.79-7.84(m，1H，H-4')，7.60-7.67(m，2H，H-6'，7')，7.42(t，1H，J=7.8Hz，H_6)，7.06(t，1H，J=7.8Hz，H_5)，6.93(d，1H，J=8.lHz，H-7)。IR(cm—、KBr):3173，1706，1671，1618，1468，1340，1307，1268，1233，1055，922，889，827，773，746。ESI-MSm/z:296.2[M_H]+。實施例95'，6-二氟-l'-硫代靛玉紅由6-氟靛紅和5-氟苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例5。紅棕色絮狀固體，收率92.2%，mp>300°C。力-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):H.31(brs，IH，N-H)，9.03-9.10(m，lH，H-4)，7.82(m，1H，H-4')，7.62-7.69(m，2H，H_6'，7')，6.91(t，1H，J=9.3Hz，H_5)，6.78(dd，1H，J=2.4Hz，9.OHz，H_7)。IR(cm—、KBr):3228，1707，1673，1629，1595，1469，1449，1343，1307，1267，1055，918，846，816。ESI-MSm/z:314.2[M-H]+。實施例105'-氟_6-氯-1'-硫代靛玉紅由6-氯靛紅和5-氟苯並[b]噻吩-3(2H)-酮反應製得。方法同實施例5。紅棕色絮狀固體，收率83.9%，mp>300°C。力-NMR(300MHz，DMS0，S卯m):11.29(s，1H，N-H)，8.97(d，1H，J=8.7Hz，H_4)，7.83-7.85(m，1H，H-4')，7.62-7.69(m，2H，H-6'，7')，7.14(dd，lH，J=2.lHz，8.7Hz，H_5)，6.96(d，1H，J=2.1Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3182，1704，1673，1614，1471，1440，1340，1305，1267，1050,912,812。ESI-MSm/z:330.2，332.2[M-H]+。實施例116-氟-l'-硫代靛玉紅_3'-肟在25mL單口燒瓶中依次加入7.5mL吡啶、6_氟_1'-硫代靛玉紅(59mg，0.20mmo1)、鹽酸羥胺(140mg，2.Olmmol)，回流攪拌6h。冷卻至室溫，減壓蒸去吡啶得深紅色黏稠物。經矽膠柱色譜分離兩次[洗脫劑二氯甲烷、環己烷-乙酸乙酯(5:l)]，得棕紅色固體37mg，收率59.7%，mp260-261°C。'H-NMR(300MHz，DMSO，Sppm):13.59(s，1H，N-OH)，11.08(s，1H，N-H)，8.88-8.94(m，1H，H-4)，8.66(d，1H，J=8.4Hz，H-4')，7.67(d，1H，J=7.5Hz，H-7')，7.52(t，1H，J=7.5Hz，H-6')，7.34(t，1H，J=7.5Hz，H-5')，6.71-6.82(m，2H，H_5，7)。IR(cm—、KBr):3293,2924，1656，1626，1596，1515，1496，1449，1433，1341，1263，1250，1144，1114，1081，998，854，754，730。ESI-MSm/z:313.14[M+H]+。實施例126-氯-l'-硫代靛玉紅_3'-肟由6-氯-1'-硫代靛玉紅與鹽酸羥胺反應製得。方法同實施例ll。暗紅色固體，收率50.9%，mp259-260°C。'H-NMR(300MHz，DMSO，Sppm):13.68(s，1H，N-0H)，11.08(s，1H，N-H)，8.86(d，1H，J=8.7Hz，H-4)，8.66(d，1H，J=7.8Hz，H-4')，7.68(d，1H，J=7.5Hz，H-7')，7.53(t，1H，J=7.8Hz，H-6')，7.35(t，1H，J=7.8Hz，H-5')，7.01(dd，lH，J=2.1Hz，8.4Hz，H-5)，6.94(d，lH，J=2.4Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3240,2921,2850，1692，1677，1613，1583，1524，1477，1428，1335，1289，1252，1211，1190，1125，1069，974，848，801，760，729。ESI-MSm/z:329.10，331.12[M+H]+。實施例136-溴-l'-硫代靛玉紅_3'-肟由6-溴-1'_硫代靛玉紅與鹽酸羥胺反應製得。方法同實施例ll。暗紅色固體，收率48.0%，mp262-263°C。力-NMR(300MHz，DMSO，Sppm):13.68(s，1H，N-0H)，11.07(s，1H，N-H)，8.79(d，1H，J=8.7Hz，H-4)，8.65(d，1H，J=8.1Hz，H—4')，7.68(d，1H，J=7.8Hz，H-7')，7.52(t，1H，J=7.8Hz，H-6')，7.35(t，1H，J=7.5Hz，H-5')，7.14(dd，1H，J=2.lHz，9.0Hz，H-5)，7.07(d，1H，J=2.1Hz，H-7)。IR(cm—、KBr):3112,2921,2850，1674，1608，1579，1527，1475，1428，1334，1209，1250，1126，1063,984，849，801，752，729。ESI-MSm/z:373.08，375.06[M+H]+。抗腫瘤活性測試—、材料與儀器(1)細胞株人肝癌細胞QGY-7701、人肺癌細胞A-549、人宮頸癌細胞HELA、人胃癌細胞SGC-7901。(2)試劑[OO94]RPMI.1640培養液(吉諾生物醫藥技術有限公司)、DMEM高糖培養液(吉諾生物醫藥技術有限公司)、胎牛血清(FBS)(杭州四季青工程公司)、青-鏈黴素溶液(100X)(Biowest公司)、磷酸鹽緩衝溶液(PBS)(北京Solarbio技術有限公司)、0.25%胰酶溶液+0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)(吉諾生物醫藥技術有限公司)、磺醯羅丹明B(SRB)(Sigma公司)、二甲基亞碸(DMS0)(上海鈺森生物技術有限公司)、三氯乙酸(TCA)(國藥集團化學試劑有限公司)、Tris鹼(Sigma公司)和冰醋酸(國藥集團化學試劑有限公司)。(3)對照品靛玉紅，自製，經結構鑑定。(4)試劑的配製以冰醋酸與雙重蒸餾水配製成1%醋酸溶液；以1%醋酸溶液與SRB配製成0.4%SRB溶液，避光，4t:保存；以TCA與雙重蒸餾水配製成50%TCA溶液；以Tris鹼與雙重蒸餾水配製成10mmol/LTris鹼溶液，用氫氧化鈉溶液調至pH=10.0;以被測樣品(實施例1-13所述化合物)、對照品用匿SO配製成2mg/mL的原始溶液保存，實驗時用培養基配製成所需濃度。(5)主要儀器C02培養箱(ThermoFormaSeriesII)、淨化工作檯(上海新苗醫療器械製造有限公司)、酶聯免疫監測儀(ThermoMK3)、倒置生物顯微鏡(OlympusIX71)、電子天平(MettlerToledoAL204)和離心機(飛鵒TDL80-23)。二、方法與結果步驟一，細胞培養細胞接種於含有10%FBS、lX青-鏈黴素溶液的培養基中，置於37t:、5XC02培養箱中，每2-3天傳代一次，實驗時取對數生長期細胞。步驟二，SRB法測定IC5。值取對數生長期細胞，以配製好的新鮮培養基調節細胞懸液濃度至5X104個/mL，接種到96孔板中，每孔190iiL，設藥物處理組、平行對照組、空白對照組。在37°C、5%C02培養箱中培養12h後，加入lOyL不同濃度的被測樣品溶液和對照品溶液，實驗設置雙復孔。平行對照組培養30min、藥物處理組培養48h後，加入50XTCA50yL固定細胞，靜置5min後將96孔板置於4。C下30min。棄去固定液，水洗5次，空氣乾燥。每孔加入0.4%SRB溶液100iiL，室溫放置lh。棄去SRB溶液，用1%醋酸溶液洗滌5遍，空氣乾燥。每孔加入200iiL10mmol/LTris鹼溶液(pH=10.0)，在570nm波長下用酶聯免疫監測儀測定光密度(0D)值，運用非線性回歸分析計算ICs。值(表l)。通過實驗結果可知，實施例製備的1'_硫代靛玉紅類化合物可以抑制或殺滅腫瘤細胞，具有抗腫瘤活性。表l1'-硫代靛玉紅類化合物的抗腫瘤活性tableseeoriginaldocumentpage9權利要求一種1′-硫代靛玉紅類化合物，其特徵在於，結構式如下其中R、R1、R2、R3選自以下組合中一種R＝O，R1＝Cl，R2＝H，R3＝H；R＝O，R1＝Br，R2＝H，R3＝H；R＝O，R1＝CF3，R2＝H，R3＝H；R＝O，R1＝NO2，R2＝H，R3＝H；R＝O，R1＝H，R2＝F，R3＝H；R＝O，R1＝H，R2＝Cl，R3＝H；R＝O，R1＝H，R2＝Br，R3＝H；R＝O，R1＝H，R2＝H，R3＝F；R＝O，R1＝H，R2＝F，R3＝F；R＝O，R1＝H，R2＝Cl，R3＝F；R＝NOH，R1＝H，R2＝F，R3＝H；R＝NOH，R1＝H，R2＝Cl，R3＝H；F2009103103831C0000011.tif2.—種根據權利要求l所述的l'-硫代靛玉紅類化合物的用途，其特徵在於，是在製備抗腫瘤藥物中的用途。3.根據權利要求2所述的用途，其特徵是，所述腫瘤為宮頸癌、胃癌、肝癌或肺癌。4.一種根據權利要求l所述的l'-硫代靛玉紅類化合物的製備方法，其特徵在於，包括如下步驟步驟一，在酸性條件下，將4-取代靛紅或6-取代靛紅分別與苯並[b]噻吩-3(2H)-酮或3-取代苯並[b]噻吩-3(2H)-酮縮合，得到R=0的1'-硫代靛玉紅類化合物；步驟二，將步驟一得到的R=0的1'-硫代靛玉紅類化合物與羥胺反應，得到R=NOH的l'-硫代靛玉紅類化合物。全文摘要一種醫藥
技術領域：
的1′-硫代靛玉紅類化合物，結構式見下式。本發明還涉及1′-硫代靛玉紅類化合物在製備抗腫瘤藥物中的用途。本發明還涉及1′-硫代靛玉紅類化合物的製備方法，包括如下步驟步驟一，在催化劑的存在下，將4-取代靛紅或6-取代靛紅與苯並[b]噻吩-3(2H)-酮衍生物縮合，得到R＝O的4-取代-1′-硫代靛玉紅類化合物或6-取代-1′-硫代靛玉紅類化合物；步驟二，步驟一得到的化合物與與羥胺反應，得到1′-硫代靛玉紅類化合物。文檔編號A61P35/00GK101704813SQ20091031038公開日2010年5月12日申請日期2009年11月25日優先權日2009年11月25日發明者俞鳴烽,張愛英,毛振民申請人:上海交通大學