一種貫葉連翹提取物中金絲桃素的精製的方法
2023-04-23 11:09:21
專利名稱：：一種貫葉連翹提取物中金絲桃素的精製的方法
技術領域：
：本發明所涉及的是一種以目前市場所售的普通貫葉連翹提取物為原料，從中提取得到高含量的金絲桃素hypericin和黃酮類成分，並且活性可測成分^50%的方法。(二)
背景技術：
：貫葉連翹提取物是目前繼銀杏葉提取物之後的國外廠商所青睞的產品之一。在國外用做抗抑鬱藥已有百餘年歷史，而金絲桃素(hypericin)和黃酮類化合物是貫葉連翹提取物中抗抑鬱和抗焦慮的的主要活性成分。近年來隨著對貫葉連翹在抗病毒、抗癌、抗抑鬱機制等方面的研究深入，使其成為當前匯集研究開發熱點課題之一。為此，貫葉連翹提取物的活性成分的提取和純化工藝也普遍受到大家的關注。目前國內主要有醇提法、鹼水提。以乙醇為溶劑提取金絲桃素(hypericin)是比較常規的方法，但提取物中金絲桃素(hypericin)含量受提取條件影響很大，且提取物易吸溼粘結成塊，通過加除雜劑、調ra值等解決了產品的吸溼性，但是產品中金絲桃素(hypericin)的含量只有0.7%，金絲桃素基本上被破壞。如果使用大孔樹脂或溶劑等手段進行精製分離，雖然能得到含量較高的有效成分提取物，但成本太高，耗時相當長，作為普通的提取物乾粉其生產成本難以被市場接受。也有報導，在實驗室理，金絲桃素含量提高到28%，名但無法工藝化。所以針對國內現有提取物提取工藝狀況，必要對現有的製備工藝進行改進，本發明是通過有效的方法富集金絲桃素和黃酮類成分，使金絲桃素含量(hypericin)>30%，可測黃酮類成分^20%。(三)
發明內容本發明是以市場上銷售的普通的貫葉連翹提取物為提取工藝原料，目的在於提供一種利用生物改性的吸附柱精製金絲桃素的方法。本發明精製金絲桃素的方法包括以下步驟(1)稱取一定量的貫葉連翹提取物，(1020)倍量的(1%5%)二乙醇胺水溶液使溶解，溶液通過濾布(100400目)過濾，以此避光。(2)濾液以一定的流速通過吸附柱(cht30)，然後依次以(1020)倍量水、0.1%0.5%純鹼溶液衝洗吸附柱(cht30)，直至純鹼洗脫下來的溶液在350nm處的吸收度《0.3，純鹼溶液衝洗完畢後，又依次再加(1020)倍量(0.5%1.5%)檸檬酸溶液、(1020)倍量水、(1530)倍量的(70%80%)乙醇溶液衝洗柱子，棄去洗脫液。(3)以(1530)倍量0.5%二乙醇胺乙醇(80%乙醇)溶液洗脫金絲桃素，收集金絲桃素洗脫液。(4)金絲桃素洗脫液低溫(<45°C)真空濃縮，濃縮至無乙醇味，所得濃縮液趁熱過濾(先過濾紙，再過0.45iim膜)，得沉澱A.(5)濾液用18X鹽酸ph值調至(12)，析出沉澱，常溫靜置。待沉澱完全後離心，廢棄離心上清，得沉澱B。3(6)用蒸餾水清洗離心沉澱B，直至中性。(7)清洗好的沉澱B和沉澱A放入真空乾燥箱內，4(TC真空乾燥即得到金絲桃素成formulaseeoriginaldocumentpage4採用本發明的工藝製備的貫葉連翹提取物，其金絲桃素含量經過HPLC檢測達到50X以上，黃酮類成分槲皮素和蘆丁經過HPLC檢測也分別達到20X以上。並且工藝中所使用到的試劑都為國家規定的常規試劑，適合工業化生產。使用本發明製備的貫葉連翹提取物和使用其他方法提取的提取物的質量比較如下表tableseeoriginaldocumentpage4(四)採用了比較直觀的工藝流程簡圖來表示本發明工藝過程。(五)具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護範圍並不僅限於此實施例1:稱取貫葉連翹提取物500g，加10L5%二乙醇胺水溶液使溶解，溶液通過400目濾布過濾，濾液通過4kgcht30柱，然後依次以IOL水流速約為40kg/h、0.5%碳酸鈉溶液150kg流速約為23kg/h衝洗cht30柱，純鹼溶液衝洗完畢後，又依次再加10kg1.5%擰檬酸溶液、10L水、14kg的80X乙醇溶液衝洗柱子，棄去洗脫液。以20kg0.5%二乙醇胺80%乙醇溶液洗脫cht30柱，收集洗脫液。洗脫液低溫(<45°C)真空濃縮，濃縮至無乙醇味，所得濃縮液趁熱過濾(先過濾紙，再過0.45ym膜)，得沉澱.濾液用18X鹽酸ph值調至l，析出沉澱，常溫靜置。待沉澱完全後離心，廢棄離心上清液，又得沉澱。合併沉澱，用蒸餾水清洗離心沉澱，直至中性。清洗好的沉澱放入真空乾燥箱內，4(TC真空乾燥即得到金絲桃素提取物315.4g，HPLC檢測金絲桃素含量為51.6%，蘆丁含量為26%，槲皮素含量為3%，經紫外分光光度法檢測總黃酮為31%。實施例2:稱取貫葉連翹提取物500g，加10L5%二乙醇胺水溶液使溶解，溶液通過400目濾布過濾，濾液通過5kgcht30柱，然後依次以8L水流速約為36kg/h、0.3%碳酸鈉溶液180kg流速約為25kg/h衝洗cht30柱，純鹼溶液衝洗完畢後，又依次再加12kg1.5%檸檬酸溶液、10L水、15kg的80%乙醇溶液衝洗柱子，棄去洗脫液。以18kg0.5%二乙胺80%乙醇溶液洗脫cht30柱，收集洗脫液。洗脫液低溫(<45°C)真空濃縮，濃縮至無乙醇味，所得濃縮液趁熱過濾(先過濾紙，再過0.45iim膜)，得沉澱.濾液用18%鹽酸ph值調至1，析出沉澱，常溫靜置。待沉澱完全後離心，廢棄離心上清液，又得沉澱。合併沉澱，用蒸餾水清洗離心沉澱，直至中性。清洗好的沉澱放入真空乾燥箱內，4(TC真空乾燥即得到金絲桃素提取物357.3g，HPLC檢測金絲桃素含量為49.4%，蘆丁含量為28%，槲皮素含量為3.5%，經紫外分光光度法檢測總黃酮為32.5%。權利要求一種貫葉連翹提取物的製備方法，是以市場上銷售的普通貫葉連翹提取物為原料通過以下方法製得金絲桃素提取物成品，金絲桃素含量≥30％，黃酮可測成分槲皮素和蘆丁≥20％，其製備方法貫葉連翹提取物，一定量的二乙醇胺水溶液使溶解，溶液通過濾布過濾，濾液以一定的流速通過吸附柱(cht30)，依次以水、純鹼溶液衝洗吸附柱(cht30)，純鹼溶液衝洗完畢後，又依次再加檸檬酸溶液、水、乙醇溶液衝洗柱子，棄去洗脫液，0.5％二乙醇胺乙醇(80％乙醇)溶液洗脫金絲桃素，收集金絲桃素洗脫液；金絲桃素洗脫液低溫(＜45℃)真空濃縮，濃縮至無乙醇味，所得濃縮液趁熱過濾(先過濾紙，再過0.45μm膜)，得沉澱；濾液用18％鹽酸PH值調至1，析出沉澱，常溫靜置。待沉澱完全後離心，廢棄離心上清，得沉澱，用蒸餾水清洗離心沉澱，直至中性，合併兩次沉澱放入真空乾燥箱內，40℃真空乾燥即得到金絲桃素成品。2.根據權利要求l所述其特徵是所使用的捕獲劑型號是(cht30)，且用量是貫葉連翹提取物(cht30)=i:ii:io。3.根據權利要求l所述，其製備工藝特徵是貫葉連翹提取物以(1020)倍量的(1%5%)二乙醇胺水溶液使溶解，並且溶液通過黃色濾布(100400目)過濾。4.根據權利要求l所述，其特徵是濾液以一定的流速通過吸附柱(cht30)，依次以(1020)倍量水、0.1%0.5%純鹼溶液衝洗吸附柱(cht30)，純鹼溶液衝洗完畢後，又依次再加(1020)倍量(0.5%1.5%)檸檬酸溶液、(1020)倍量水、(1530)倍量的(70%80%)乙醇溶液衝洗柱子，棄去洗脫液。5.根據權利要求l所述，其特徵是以(1530)倍量0.5%二乙醇胺乙醇(80%乙醇)溶液洗脫金絲桃素，收集金絲桃素洗脫液。6.根據權利要求1所述，其特徵是濾液用18X鹽酸ra值調至(12)，所使用的鹽酸溶液是質量比。7.根據權利要求1所述，其特徵是金絲桃素洗脫液濃縮回收乙醇至無乙醇味為判斷標準，溫度始終30°C45。C。全文摘要本發明是以市場上銷售的普通的貫葉連翹提取物為提取工藝原料，目的在於提供一種利用生物改性的吸附柱精製金絲桃素的方法。採用本發明的工藝製備的貫葉連翹提取物，其金絲桃素(hypericin)含量經過HPLC檢測達到50％以上，黃酮類成分槲皮素和蘆丁經過HPLC檢測也達到20％以上。並且本發明的製備方法操作簡便快捷，產品質量均一穩定，生產容易實現，符合工業化生產。文檔編號C07C50/36GK101744890SQ20081020417公開日2010年6月23日申請日期2008年12月8日優先權日2008年12月8日發明者馬世界,黃亮,黃肖輝申請人:上海四埃美微科技有限公司