提高水果酵素中SOD的製備方法與流程
2023-05-24 07:52:51 1
本發明屬於酵素技術領域，具體涉及一種提高水果酵素中sod的製備方法。
背景技術：
酵素存在於所有活的動植物體內，是維持機體正常功能，消化食物，修復組織等生命活動的一種必需物質。隨著年齡的增長和飲食安全、生活環境等問題，人體內的酵素含量在逐年的下降，身體會由於酵素的流失使身體代謝速率下降，容易產生亞健康和慢性病等問題，逐年呈現老化的趨勢。若沒有酵素，生化反應將無法進行，五大營養素都將變得對機體毫無用處，生命現象將會停止。補充酵素，可以讓人體內所有生命活動會有條不紊的進行，讓我們的身體時刻保持活力。
超氧化物歧化酶orgotein(superoxidedismutase,sod)，簡稱sod。sod是一種源於生命體的活性物質，能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質。對人體不斷地補充sod具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶是1938年首次從牛紅血球中分離得到超氧化物歧化酶開始算起，人們對sod的研究己有七十多年的歷史。1969年mccord等重新發現這種蛋白，並且發現了它們的生物活性，弄清了它催化過氧陰離子發生歧化反應的性質，所以正式將其命名為超氧化物歧化酶。
酵素生產過程中所使用的酵母菌含有豐富的sod，但sod屬於胞內酶，需要細胞破裂後方可釋放出來，因此，如何有效高效的釋放酵母菌含有的sod提高產品的特性物質含量成為一個迫切的技術突破點。目前實驗室階段酵母破壁方式有甲苯破壁法，氯仿-乙醇法，酶裂解法，細胞自溶法，但是還未有適用與酵素行業的方法。
技術實現要素：
本發明提出一種提高水果酵素中sod的製備方法，該方法提高了酵素中酵母菌釋放sod的效率，增加了產品中sod的濃度。
本發明的技術方案是這樣實現的：
一種提高水果酵素中sod的製備方法，包括以下步驟：
1)原料處理：以柑橘、蘋果、葡萄、草莓、菠蘿、香蕉、桃、梨、杏、香瓜、西瓜、椰子與藍莓中的一種或者多種為原料，將各原料洗淨後分別打碎處理，混合得到水果漿；
2)水果漿處理：將步驟1)打碎得到的水果漿迅速降溫至18～20℃，再進行均質化處理，調節ph至3.0～3.5；
3)酵母發酵：將釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌加入步驟2)均質化處理的水果漿中進行發酵，發酵18～20℃，直至發酵液中的糖度低至4g/l時，停止發酵；。
4)醋酸醋桿菌發酵：向步驟3)的發酵液中添加醋酸醋桿菌進行發酵，發酵溫度29～31℃，直至發酵液ph達到4.8～5.2時終止發酵；
5)鹽化保溫：立即向步驟4)終止發酵的發酵液中加入飽和氯化鈉溶液，溫度保持40～50℃，同時低速攪拌，保溫22～26小時；
6)過濾濃縮：將步驟5)鹽化保溫結束後的發酵液使用硅藻土過濾機和紙板過濾機進行低溫過濾，然後再真空低溫濃縮即可。
優選地，所述步驟5)中飽和氯化鈉溶液的添加量為步驟3)的發酵液重量的4～6wt％或者8～12wt％，低速攪拌的攪拌速度15～20r/min。
優選地，所述步驟2)均質化處理時，調整果漿糖度100g/l。
優選地，步驟3)中的釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌接種量為原料總重量的2～4wt％。
優選地，馬克斯克魯維酵母與釀酒酵母的質量比為1:1.9～2.1。
優選地，步驟4)中的醋酸醋桿菌的接種量為原料總重量的5～8wt％。
優選地，所述步驟6)中的低溫的溫度為10～15℃。
優選地，所述步驟6)的濃縮倍數為5倍。
本發明的有益效果：
本發明的製備方法通過酵母發酵、醋酸醋桿菌發酵及鹽化保溫等步驟充分破壁釋放酵母中的sod，區別於其他的使用有機溶劑的方法，安全可靠。本發明製備方法獲得酵素中sod含量較常規方法樣品中sod含量高2.5倍。
具體實施方式
實施例1
一種提高水果酵素中sod的製備方法，包括以下步驟：
1)原料處理：以柑橘、蘋果、葡萄、草莓、菠蘿、香蕉、桃、梨、杏、香瓜、西瓜、椰子與藍莓為原料，將各原料洗淨後分別打碎處理，混合得到水果漿；
2)水果漿處理：將步驟1)打碎得到的水果漿迅速降溫至18℃，再進行均質化處理，調節ph至3.5；
3)酵母發酵：將釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌(混合菌接種量為原料總重量的2wt％，馬克斯克魯維酵母與釀酒酵母的質量比為1:2)加入步驟2)均質化處理的水果漿中進行發酵，發酵18℃，直至發酵液中的糖度低至4g/l時，停止發酵；。
4)醋酸醋桿菌發酵：向步驟3)的發酵液中添加醋酸醋桿菌(醋酸醋桿菌的接種量為原料總重量的5wt％)進行發酵，發酵溫度30℃，直至發酵液ph達到5.0時終止發酵；
5)鹽化保溫：立即向步驟4)終止發酵的發酵液中加入佔發酵液重量4wt％的飽和氯化鈉溶液，溫度保持40℃，同時低速攪拌，保溫26小時；
6)過濾濃縮：將步驟5)鹽化保溫結束後的發酵液使用硅藻土過濾機和紙板過濾機進行15℃低溫過濾，然後再真空低溫濃縮即可，濃縮倍數為5倍。
實施例2
一種提高水果酵素中sod的製備方法，包括以下步驟：
1)原料處理：以柑橘、蘋果、葡萄與草莓為原料，將各原料洗淨後分別打碎處理，混合得到水果漿；
2)水果漿處理：將步驟1)打碎得到的水果漿迅速降溫至20℃，再進行均質化處理，調節ph至3.0；
3)酵母發酵：將釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌(混合菌接種量為原料總重量的3wt％，馬克斯克魯維酵母與釀酒酵母的質量比為1:1.9)加入步驟2)均質化處理的水果漿中進行發酵，發酵20℃，直至發酵液中的糖度低至4g/l時，停止發酵；。
4)醋酸醋桿菌發酵：向步驟3)的發酵液中添加醋酸醋桿菌(醋酸醋桿菌的接種量為原料總重量的6wt％)進行發酵，發酵溫度29℃，直至發酵液ph達到5.2時終止發酵；
5)鹽化保溫：立即向步驟4)終止發酵的發酵液中加入佔發酵液重量6wt％的飽和氯化鈉溶液，溫度保持45℃，同時低速攪拌，保溫24小時；
6)過濾濃縮：將步驟5)鹽化保溫結束後的發酵液使用硅藻土過濾機和紙板過濾機進行10℃低溫過濾，然後再真空低溫濃縮即可，濃縮倍數為5倍。
實施例3
一種提高水果酵素中sod的製備方法，包括以下步驟：
1)原料處理：以葡萄、草莓、菠蘿與香蕉為原料，將各原料洗淨後分別打碎處理，混合得到水果漿；
2)水果漿處理：將步驟1)打碎得到的水果漿迅速降溫至20℃，再進行均質化處理，調節ph至3.0；
3)酵母發酵：將釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌(混合菌接種量為原料總重量的4wt％，馬克斯克魯維酵母與釀酒酵母的質量比為1:2.1)加入步驟2)均質化處理的水果漿中進行發酵，發酵20℃，直至發酵液中的糖度低至4g/l時，停止發酵；。
4)醋酸醋桿菌發酵：向步驟3)的發酵液中添加醋酸醋桿菌(醋酸醋桿菌的接種量為原料總重量的7wt％)進行發酵，發酵溫度31℃，直至發酵液ph達到4.8時終止發酵；
5)鹽化保溫：立即向步驟4)終止發酵的發酵液中加入佔發酵液重量8wt％的飽和氯化鈉溶液，溫度保持50℃，同時低速攪拌，保溫22小時；
6)過濾濃縮：將步驟5)鹽化保溫結束後的發酵液使用硅藻土過濾機和紙板過濾機進行12℃低溫過濾，然後再真空低溫濃縮即可，濃縮倍數為5倍。
實施例4
一種提高水果酵素中sod的製備方法，包括以下步驟：
1)原料處理：以香蕉、桃、梨、杏、香瓜、西瓜、椰子與藍莓為原料，將各原料洗淨後分別打碎處理，混合得到水果漿；
2)水果漿處理：將步驟1)打碎得到的水果漿迅速降溫至18℃，再進行均質化處理，調節ph至3.0；
3)酵母發酵：將釀酒酵母與馬克斯克魯維酵母的混合菌(混合菌接種量為原料總重量的4wt％，馬克斯克魯維酵母與釀酒酵母的質量比為1:2.1)加入步驟2)均質化處理的水果漿中進行發酵，發酵18℃，直至發酵液中的糖度低至4g/l時，停止發酵；。
4)醋酸醋桿菌發酵：向步驟3)的發酵液中添加醋酸醋桿菌(醋酸醋桿菌的接種量為原料總重量的8wt％)進行發酵，發酵溫度30℃，直至發酵液ph達到5.0時終止發酵；
5)鹽化保溫：立即向步驟4)終止發酵的發酵液中加入佔發酵液重量12wt％的飽和氯化鈉溶液，溫度保持48℃，同時低速攪拌，保溫23小時；
6)過濾濃縮：將步驟5)鹽化保溫結束後的發酵液使用硅藻土過濾機和紙板過濾機進行10℃低溫過濾，然後再真空低溫濃縮即可，濃縮倍數為5倍。
試驗例
本發明製備的酵素中的sod的含量為10000～12000u/ml，市售同類產品的sod的含量為1500～2500u/ml。
以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，並不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。