蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法
2023-04-25 02:06:11 3
專利名稱：蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥製品領域，以及食品和化妝品領域；特別涉及蛋白質及多肽類藥物製品領域，尤其涉及蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法。
背景技術：
蛋白質及多肽類藥物一直是生物醫藥行業的熱點領域，在每年上市的新藥品種中，該類藥物比例呈逐年上升的趨勢，隨著生物技術的迅猛發展，生物技術已經進入產業化發展階段，它在醫藥市場中的競爭越來越激烈。據統計，到目前為止上市的生物技術藥物總數為92種，其中22種是去年經FDA批准上市的，基因工程藥物已有16個品種上市；基因治療取得巨大進展。隨著生物技術的產業化過程的加速進行，以蛋白質及多肽類藥物為主要品種的生物技術醫藥，勢必呈現出強勁的發展勢頭，顯示出良好的社會效益和經濟效益。
如果將蛋白質及多肽類藥物與化學藥物進行比較，那麼它的缺點就顯得很突出①穩定性差、②分子量大。這兩個突出的缺點嚴重阻滯了蛋白質及多肽類藥物劑型的進一步開發，也阻滯了此類藥物的商業化進程，目前蛋白質及多肽類藥物大都採用注射給藥的方式。然而長期注射將會給病人帶來極大的痛苦和不便，因此採取新的藥物製劑技術，即將蛋白質及多肽類藥物進行適當的修飾，從而有效提高它的穩定性及通透性，顯得非常重要。其中有效的方法之一就是將蛋白質及多肽類藥物進行脂質體包封。脂質體包封對蛋白質及多肽類藥物起到了緩釋和控釋的作用，同時提高了蛋白質及多肽類藥物的穩定性；另外由於形成脂質體的成膜劑和分散劑與生物膜具有較大的相似性和組織相容性，易於被組織吸收，有效提高蛋白質及多肽類藥物的通透性。
發明內容
本發明的目的在於提供一種製備蛋白質及多肽類藥物脂質體的方法。
本發明是通過如下技術方案實現的一種蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其包括如下步驟1、將脂質體成膜劑加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；2、將溶液加入瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；3、加入分散劑，分別用均質機和高壓微射流儀分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體；4、加入蛋白質及多肽類藥物緩緩震搖均勻，得混合脂質體；5、分離，得均一脂質體。
所述成膜劑包括下述組分氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照組方比例混合；所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
所述分散劑包括下述組分琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照組方比例混合；其中，甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，也可以是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
上述製備方法工藝簡單，製備脂質體所用的原輔料經濟易得；所用的溶劑可以回收利用，不會汙染環境；脂質體質量可以有效控制，包封率高，經過脂質體包封后的藥物穩定。脂質體包封對蛋白質及多肽類藥物起到了緩釋和控釋的作用，同時提高了蛋白質及多肽類藥物的穩定性；另外由於形成脂質體的成膜劑和分散劑與生物膜具有較大的相似性和組織相容性，易於被組織吸收，有效提高蛋白質及多肽類藥物的通透性。
具體實施例方式
下面以幹擾素脂質體為例，簡要的介紹蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法。
實施例一以整個脂質體的100％的重量作為標準計算取成膜劑 氫化十八磷酸膽鹼 10％十八磷酸膽鹼 1％二硬脂醯磷脂醯膽鹼 1％
膽固醇 8％分散劑 琥珀酸鹽 30％甘露醇 30％葡萄糖 20％將脂質體成膜劑(氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照組方比例10∶1∶1∶8)加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
將溶液加入茄型瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；加入分散劑(琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照組方比例30∶30∶20)，分別用均質機和高壓微射流儀(M-110L型)分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體。其中，甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，也可以是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
加入100-500萬國際單位/毫升的重組人幹擾素-γ緩緩震搖均勻。分離，得均一脂質體。幹擾素也可以是其其他亞型，如可為α型幹擾素或β-幹擾素。
實施例二取 氫化十八磷酸膽鹼 28％十八磷酸膽鹼 3％二硬脂醯磷脂醯膽鹼 3％膽固醇 10％琥珀酸鹽 30％甘露醇 15％葡萄糖 11％將脂質體成膜劑(氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照組方比例28∶3∶3∶10)加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
將溶液加入茄型瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；
加入分散劑(琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照組方比例30∶15∶11)，分別用均質機和高壓微射流儀(M-110L型)分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體。其中，甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，也可以是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
加入100-500萬國際單位/毫升的重組人幹擾素-γ緩緩震搖均勻。分離，得均一脂質體。幹擾素也可以是其其他亞型，如可為α型幹擾素或β-幹擾素。
實施例三取 氫化十八磷酸膽鹼 28％十八磷酸膽鹼 3％二硬脂醯磷脂醯膽鹼 3％膽固醇 2％琥珀酸鹽 29％甘露醇 30％葡萄糖 5％將脂質體成膜劑(氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照組方比例28∶3∶3∶2)加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
將溶液加入茄型瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；加入分散劑(琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照組方比例29∶30∶5)，分別用均質機和高壓微射流儀(M-110L型)分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體。其中，甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，也可以是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
加入100-500萬國際單位/毫升的重組人幹擾素-γ緩緩震搖均勻。分離，得均一脂質體。幹擾素也可以是其其他亞型，如可為α型幹擾素或β-幹擾素。
實施例四取 氫化十八磷酸膽鹼28％十八磷酸膽鹼3％二硬脂醯磷脂醯膽鹼 3％膽固醇 10％琥珀酸鹽10％甘露醇 30％葡萄糖 16％將脂質體成膜劑(氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照組方比例28∶3∶3∶10)加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
將溶液加入茄型瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；加入分散劑(琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照組方比例10∶30∶16)，分別用均質機和高壓微射流儀(M-110L型)分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體。其中，甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，也可以是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
加100-500萬國際單位/毫升的重組人幹擾素-γ緩緩震搖均勻。分離，得均一脂質體。幹擾素也可以是其其他亞型，如可為α-幹擾素或β-幹擾素。
本發明利用重組人幹擾素-γ脂質體的製備方法為例，介紹了蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法。這不能認為是對本發明的限制。有機溶劑也可以是與氯仿同為滷族的其他化合物。成膜劑和分散劑也可以利用其他的原輔料按照其他的比例配比而成的。總之，如果本技術領域的人員，在本發明的啟發下，所做出的顯而易見的非實質性的改變或改進都應當落入本發明權利要求的保護範圍。
權利要求
1.一種蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，其包括如下步驟1)、將脂質體成膜劑加入燒杯中，加入2-6倍量的有機溶劑溶解；2)、將溶液加入瓶中，在35-45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；3)、加入分散劑，分別用均質機和高壓微射流儀分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體；4)、加入蛋白質及多肽類藥物緩緩震搖均勻，得混合脂質體；5)、分離，得均一脂質體。
2.根據權利要求1所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述成膜劑包括下述組分氫化十八磷酸膽鹼、十八磷酸膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、膽固醇按照比例混合。
3.根據權利要求2所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，氫化十八磷酸膽鹼∶十八磷酸膽鹼∶二硬脂醯磷脂醯膽鹼∶膽固醇＝10-28∶1-3∶1-3∶2-10。
4.根據權利要求1所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述有機溶劑為氯仿、異丙醇、丙酮、乙醇、甲醇中的一種或者幾種聯合使用。
5.根據權利要求1所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述分散劑包括下述組分琥珀酸鹽、甘露醇、葡萄糖溶液按照比例混合。
6.根據權利要求5所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述甘露醇可用山梨醇或乳糖替代，或是甘露醇、山梨醇、乳糖聯合使用。
7.根據權利要求5所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，琥珀酸鹽∶甘露醇∶葡萄糖溶液＝10-30∶15-30∶5-20。
8.根據權利要求1-7中任意一個所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，蛋白質及多肽類藥物的加入量為100-500萬國際單位/毫升。
9.根據權利要求1-7中任意一個所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述蛋白質及多肽類藥物為重組人幹擾素-α或β或γ中的一種。
10.根據權利要求9所述的蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其特徵在於，所述蛋白質及多肽類藥物為重組人幹擾素-γ。
全文摘要
本發明涉及醫藥製品領域，以及食品和化妝品領域；特別涉及蛋白質及多肽類藥物製品領域，尤其涉及蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法。一種蛋白質及多肽類藥物脂質體的製備方法，其包括如下步驟1.將脂質體成膜劑加入燒杯中，加入2－6倍量的有機溶劑溶解；2.將溶液加入瓶中，在35－45℃水浴中加熱減壓旋轉乾燥，揮盡有機溶劑；3.加入分散劑，分別用均質機和高壓微射流儀分散，控制脂質體的粒徑小於10微米，Zeta電位絕對值大於30，保證脂質體體系的穩定，得空白脂質體；4.加入蛋白質及多肽類藥物緩緩震搖均勻，得混合脂質體；5.分離，得均一脂質體。上述製備方法工藝簡單，製備脂質體所用的原輔料經濟易得；所用的溶劑可以回收利用，不會汙染環境。
文檔編號A61K38/21GK1943556SQ20051010052
公開日2007年4月11日 申請日期2005年10月24日 優先權日2005年10月24日
發明者馬小玲, 胡振湘, 彭旺 申請人:麗珠醫藥集團股份有限公司