用於治療gi疾病的作為gaba受體調節劑的咪唑變體的製作方法

2023-04-25 02:13:11

專利名稱：用於治療gi疾病的作為gaba受體調節劑的咪唑變體的製作方法
技術領域：
本發明涉及新的具有正變構GABAB受體(GBR)調節劑作用的化合物，製備所述化合物的方法，以及它們在抑制暫時性食管下端括約肌鬆弛、治療胃食管反流疾病、以及治療功能性胃腸道疾病和腸易激惹症候群(IBS)中的應用。
背景技術：
食管下端括約肌(LES)易於間歇性鬆弛。因而由於在那時機械屏障出現暫時性消失，使得胃中的流體能夠進入食管，從而發生下文中所述的「反流」現象。
胃食管反流疾病(GERD)是最常見的上胃腸道疾病。目前的藥物療法目的在於減少胃酸分泌，或者中和食管中的酸。現已認為反流的主要機理取決於低滲的食管下端(lower esophageal)括約肌。然而，最近的研究(例如Holloway Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.19，pp.517-535)已經表明大多數的反流現象發生於暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESR)期間，即該鬆弛不是由吞咽引發的。還已發現經常性的胃酸分泌在患有GERD的患者中是正常的。
因此，需要一種治療方法以降低TLESR的發病率，並由此預防反流。
現已發現GABAB-受體激動劑能夠抑制TLESR，這點在WO98/11885 A1中已經得到了公開。
人們能夠根據Thompson WG，Longstreth GF，Drossman DA，Heaton KW，Irvine EJ，Mueller-Lissner SA.C.Functional BowelDisorders and Functional Abdominal Pain.InDrossman DA，TalleyNJ，Thompson WG，Whitehead WE，Coraziarri E，eds.Rome IIFunctional Gastrointestinal DisordersDiagnosis，Pathophysiology andTreatment.2 ed.McLean，VADegnon Associates，Inc.；2000351-432和Drossman DA，Corazziari E，Talley NJ，Thompson WG和Whitehead WE.Rome IIA multinational consensus document onFunctional Gastrointestinal Disorders.Gut 45(Suppl.2)，II1-II81.9-1-1999中的內容定義功能性胃腸道疾病，例如功能性消化不良。
人們能夠根據Thompson WG，Longstreth GF，Drossman DA，Heaton KW，Irvine EJ，Mueller-Lissner SA.C.Functional BowelDisorders and Functional Abdominal Pain.InDrossman DA，TalleyNJ，Thompson WG，Whitehead WE，Coraziarri E，eds.Rome IIFunctional Gastrointestinal DisordersDiagnosis，Pathophysiology andTreatment.2 ed.McLean，VADegnon Associates，Inc.；2000351-432和Drossman DA，Corazziari E，Talley NJ，Thompson WG和Whitehead WE.Rome IIA multinational consensus document onFunctional Gastrointestinal Disorders.Gut 45(Suppl.2)，II1-II81.9-1-1999中的內容定義腸易激惹症候群(IBS)。
GABAB受體激動劑GABA(4-氨基丁酸)是一種中樞和外周神經系統的內源性神經遞質。通常將GABA受體分為GABAA和GABAB受體亞型。GABAB受體屬於G-蛋白偶聯受體(GPCRs)總科。
研究最多的GABAB受體激動劑巴氯芬(4-氨基-3-(對氯苯基)丁酸；公開於CH 449046中)用作一種解痙藥。EP 356128 A2描述了GABAB受體激動劑(3-氨基丙基)甲基次膦酸在治療中的應用，特別是在治療中樞神經系統疾病中的應用。
EP 463969 A1和FR 2722192 A1公開了在丁基鏈的3-碳上具有不同雜環取代基的4-氨基丁酸衍生物。EP 181833 A1公開了與GABAB受體位點有高度親和力的取代的3-氨基丙基次膦酸。EP 399949 A1公開了(3-氨基丙基)甲基次膦酸的衍生物，它們被描述為有效的GABAB受體激動劑。在WO 01/41743 A1和WO 01/42252 A1中還分別公開了其他的(3-氨基丙基)甲基次膦酸和(3-氨基丙基)次膦酸。在J.Med.Chem.(1995)，38，3297-3312中討論了幾種次膦酸類似物關於它們與GABAB受體親和力的構效關係。在Bioorg. Med.Chem.Lett.(1998)，8，3059-3064中描述了亞磺酸類似物及其GABAB受體活性。關於GABAB配體更為綜合性的描述可參見Curr.Med.Chem.-CentralNervous System Agents(2001)，1，27-42。
GABAB受體的正變構調節現已公開了2，6-二-叔-丁基-4-(3-羥基-2，2-二甲基丙基)苯酚(CGP7930)和3-(3，5-二-叔-丁基-4-羥基苯基)-2，2-二甲基丙醛(公開於US 5,304,685中)能夠對天然和重組的GABAB受體活性產生正變構調節(Society for Neuroscience，30thAnnual Meeting，Now or leans，La.，Nov.4-9，2000Positive Allosteric Modulation of Native andRecombinant GABABReceptor Activity，S.Urwyler等；MolecularPharmacol.(2001)，60，963-971)。
現已公開了N，N-二環戊基-2-甲基硫烷基-5-硝基-嘧啶-4，6-二胺能夠對GABAB受體產生正變構調節(The Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics，307(2003)，322-330)。
1H-咪唑-5-甲酸衍生物現已公開了一些4-氨基-1H-咪唑-5-甲酸乙酯能夠用作合成嘌呤的中間體(Tetrahedron Lett.(1966)，1885-1889)，或用作合成咪唑並[4，5-d]嘧啶酮和咪唑並[4，5，-b]吡啶的中間體(Monatshefte für Chemie(1976)，1071413-1421)。此外還可由4-醯基氨基-lH-咪唑-5-甲酸乙酯製備l，7-二氫-6H-嘌呤-6-酮(Tetrahedron(1982)，381435-1441)。然而還不清楚這些化合物是否能作為正變構GABAB受體調節劑，也沒有公開這些化合物是否能用於治療GERD或功能性胃腸道疾病。
最近有關GPCR變構調節的綜述可參見Expert Opin.Ther.Patents(2001)，11，1889-1904。
發明概述本發明提供了新的式I化合物
其中R1表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R2表示C1-C10烷氧基或C1-C10硫代烷氧基，任選各自獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R3表示C1-C10烷氧基，任選被C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；或者氨基，任選被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基單-或雙取代；R4表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C1-C10烷氧基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；以下情況除外·1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-1-甲基-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯苯甲醯基)氨基]-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-2-(甲硫基)-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，2-(甲硫基)-4-[[(5-硝基-2-呋喃基)羰基]氨基]-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-[[4-(1，1-二甲基乙基)苯甲醯基]氨基]-1-(2-甲氧基苯基)-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，4-[(2，4-二氧代苯甲醯基)氨基]-1-[4-(1-甲基乙基)苯基]-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，1-[4-(1-甲基乙基)苯基]-4-[(2-甲基-1-氧代丙基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-噻吩基甲基]-4-[(氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；·1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-噻吩基甲基]-4-[(二氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；以及·1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-甲氧基苯基]-4-[(三氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯。
在本發明的一個實施方案中，R2是C1-C10烷氧基，其任選被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
在本發明的另一個實施方案中，R2是C1-C10硫代烷氧基，其任選被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺，腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
上式I的這一類新的化合物(1H-咪唑-5-甲酸乙酯或醯胺)可用作正變構GABAB受體調節劑。
通式I的定義中的常用術語具有以下含義C1-C10烷基是具有1-10個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基或庚基。烷基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。烷基可包含一個或多個選自O、N和S的雜原子，即一個或多個碳原子可以被此類雜原子取代。此類基團的實例是甲基-乙基醚、甲基-乙基胺和甲基-硫代甲基。烷基可形成環的一部分。烷基的一個或多個氫原子可以被氟原子取代。
C2-C10烯基是具有2-10個碳原子的直鏈或支鏈的烯基，例如乙烯基、異丙烯基和1-丁烯基。烯基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。烯基可包含一個或多個選自O、N和S的雜原子，即一個或多個碳原子可以被此類雜原子取代。烯基的一個或多個氫原子可以被氟原子取代。
C2-C10炔基是具有2-10個碳原子的直鏈或支鏈的炔基，例如乙炔基、2-丙炔基和2-丁炔基。炔基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。炔基可包含一個或多個選自O、N和S的雜原子，即一個或多個碳原子可以被此類雜原子取代。炔基的一個或多個氫原子可以被氟原子取代。
C3-C10環烷基是具有3-10個碳原子的環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基。環烷基也可以是未飽和的。環烷基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。環烷基可以具有一個或多個選自O、N和S的雜原子，即一個或多個碳原子可以被此類雜原子取代。環烷基的一個或多個氫原子可以被氟原子取代。
C1-C10烷氧基是具有1-10個碳原子的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、異丙氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基或庚氧基。烷氧基可以是環狀的、部分未飽和的或未飽和的，例如丙烯氧基或環戊氧基。烷氧基可以是芳族的，例如苯甲氧基或苯氧基。烷氧基可包含一個或多個選自O、N和S的雜原子，即一個或多個碳原子可以被此類雜原子取代。烷氧基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
C1-C10硫代烷氧基是具有1-10個碳原子的硫代烷氧基，例如硫代甲氧基、硫代乙氧基、正硫代丙氧基、正硫代丁氧基、硫代異丙氧基、硫代異丁氧基、仲硫代丁氧基、叔硫代丁氧基、硫代戊氧基、硫代己氧基或硫代庚氧基。硫代烷氧基可以是未飽和的，例如硫代丙烯氧基；或者是芳族的，例如硫代苯甲氧基或硫代苯氧基。硫代烷氧基可以被一個或多個C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
本文中的術語芳基被定義為具有6-14個碳原子的芳環，其包含單環或多環化合物，例如苯基、苯甲基或萘基，任選被一個或多個取代基取代，這些取代基例如C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基，例如聯苯基。多環是飽和的，部分未飽和或飽和的。
本文中的術語雜芳基被定義為具有3-14個碳原子的包含單環和多環化合物兩者的芳族環，其中一個或幾個環原子是氧、氮或硫，例如呋喃基，噻吩基或咪唑並吡啶。雜芳基任選被一個或多個取代基取代，這些取代基例如C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基，例如聯苯基。多環是飽和的，部分未飽和或飽和的。
本文中使用的滷素選自氯、氟、溴或碘。
當式I化合物具有至少一個不對稱碳原子時，它們能夠存在幾種立體化學形式。本發明包括了異構體的混合物以及單獨的立體異構體。本發明進一步包括幾何異構體、旋轉異構體、對映異構體、外消旋體和非對映體。
在應用時，式I化合物可以是中性形式，例如羧酸；或者是鹽的形式，優選藥學上可接受的鹽，例如所述化合物的鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鈣鹽或鎂鹽。
式I化合物可用作正變構GBR(GABAB受體)調節劑。正變構GABAa受體調節劑被定義為一種通過與GABAB受體蛋白在不同於內源性配體所使用的位點上相結合，從而能夠使GABAB受體對GABA和GABAB受體激動劑更為敏感的化合物。正變構GBR調節劑與激動劑產生協同作用，從而增加了GABAB受體激動劑的效能和/或內在效力。此外還已知的是正變構GABAB受體調節劑能夠產生激動作用。因此，式I化合物能夠有效用作完全激動劑或部分激動劑。
本發明的另一個方面是一種用於治療的式I化合物。
由於施用了正變構調節劑而使得GABAB受體對GABAB受體激動劑更為敏感，因此我們能夠發現GABAB激動劑對暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESR)的抑制作用增強。因而本發明直接涉及式I的正變構GABAB受體調節劑，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於抑制暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESRs)的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於預防反流的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療胃食管反流疾病(GERD)的藥物中的應用。
對嬰兒中的回流進行有效治療將是，預防以及治療由反流的胃內容物的吸入引起的肺部疾病，以及治療發育停滯，尤其是攝入的營養素的過量損失引起的發育停滯，的一個重要途徑。因此，本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療肺部疾病的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療發育停滯的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療或預防哮喘(例如與反流有關的哮喘)的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療或預防喉炎或慢性喉炎的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是一種抑制暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESRs)的方法，該方法包括給予需要這種抑制的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種預防反流的方法，該方法包括給予需要這種預防的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療胃食管反流疾病(GERD)的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療或預防回流的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療或預防嬰兒中回流的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療、預防或抑制肺部疾病的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。所治療的肺部疾病尤其是由反流的胃內容物的吸入引起的。
本發明的另一個方面是一種治療發育停滯的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療或預防哮喘(例如與反流有關的哮喘)的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是一種治療或預防喉炎或慢性喉炎的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個實施方案是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療功能性胃腸道疾病(FGD)的藥物中的應用。本發明的另一個方面是一種治療功能性胃腸道疾病的方法，該方法包括給予患有所述疾病的患者有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個實施方案是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療功能性消化不良的藥物中的應用。本發明的另一個方面是一種治療功能性消化不良的方法，該方法包括給予患有所述疾病的患者有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
功能性消化不良指的是集中於上腹部的疼痛或不適。不適的特徵在於上腹部發脹、早期過飽、胃氣脹或噁心，或者不適可以與這些症狀相組合。患有功能性消化不良的患者從病原學上可分為兩類1-那些具有可確認的病理生理學或微生物學異常的患者，這些異常為不確定的臨床關聯性(例如幽門螺旋桿菌胃炎、組織十二指腸炎、膽結石、內臟過敏症、胃十二指腸異常遊動性)2-症狀無法解釋的患者。
功能性消化不良能通過以下所述進行診斷前12個月中的至少十二周出現如下情況，這些情況不必是連續的，1-持續性或再發性消化不良(集中於上腹部的疼痛或不適)，以及2-沒有可能用於解釋症狀的器質性疾病跡象(包括上部內窺鏡檢查中出現的)，以及3-沒有跡象表明消化不良只能通過排便得到緩解，或伴隨著發生排便頻率或形式的變化。
功能性消化不良可根據特徵性的症狀表現分成幾個亞型，例如潰瘍樣消化不良、異常遊動樣消化不良以及未指定(非特異性)的消化不良。
現有的治療功能性消化不良的方法大多是根據經驗並且直接緩解顯著症狀。最常使用的治療方法還包括抗抑鬱藥。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療或預防腸易激惹症候群(IBS)的藥物中的應用，這些腸易激惹症候群例如便秘為主的IBS、腹瀉為主的IBS或交替腸運動為主的IBS。
本發明的另一個方面是一種治療或預防腸易激惹症候群(IBS)的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本文的IBS被定義為具有特定症狀的慢性功能性疾病，它包括伴隨有腸功能改變的持續性或復發性腹部疼痛和不適，其通常具有腹部氣脹和腹脹。一般根據主要的腸表現將IBS分成三個亞型1-腹瀉為主的2-便秘為主的3-交替腸運動為主的。
腹部疼痛或不適是IBS的標誌，其存在於三種亞型中。IBS症狀現已根據Rome標準進行了分類，隨後又修改成Rome II標準。IBS症狀表述中的這種統一性有助於在設計和評估IBS臨床研究中實現意見一致。
Rome II診斷標準是1-在上年以內的至少12周中出現腹部疼痛或不適(不必是連續性的)2-兩種或兩種以上的下列症狀a)排便可以緩解b)排便頻率發生變化c)糞便稠度發生變化本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療或預防CNS疾病(例如焦慮症)的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是一種治療或預防CNS疾病(例如焦慮症)的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明的另一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在製備用於治療或預防抑鬱症的藥物中的應用。
本發明的另一個方面是一種治療或預防抑鬱症的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者藥學和藥理學上有效量的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合。
本發明中的術語「激動劑」應當理解為包括全部激動劑以及部分激動劑，其中「部分激動劑」應當理解為能夠部分激活而非全部激活GABAB受體的化合物。
本文中的術語「TLESR」(暫時性食管下端括約肌鬆弛)可根據Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，LA.，Dent，J.，1995；Transient lower esophageal sphincter relaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610中的內容進行定義。
術語「反流」被定義為從胃中能夠進入食管的流體，其能夠進入食管是由於那時機械屏障出現了暫時性消失。
術語「GERD」(胃食管反流疾病)可根據van Heerwarden，M.A.，Smout A.J.P.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Baillière’s Clin.Gastroenterol.14，pp.759-774中的內容進行定義。
本發明中的「組合」指的是「固定組合」或「多部件試劑盒的組合」(kit of parts combination)。
「固定組合」被定義為一種組合，其中在一個單元中存在(i)式I化合物和(ii)GABAB受體激動劑。「固定組合」的一個實例是一種藥物組合物，其中(i)式I化合物和(ii)GABAB受體激動劑以混合物的形式存在。「固定組合」的另一個實例是一種藥物組合物，其中(i)式I化合物和(ii)GABAB受體激動劑在一個單元中存在，而並非以混合物的形式存在。
「多部件試劑盒的組合」被定義為一種組合，其中(i)式I化合物和(ii)GABAB受體激動劑在一個以上的單元中存在。「多部件試劑盒的組合」的一個實例是一種組合，其中(i)式I化合物和(ii)GABAB受體激動劑分開存在。「多部件試劑盒的組合」的組分可以同時給藥、順序給藥或分開給藥，即分開給藥或共同給藥。
術語「正變構調節劑」被定義為一種通過與受體蛋白在不同於內源性配體所使用的位點上相結合，從而能夠使受體對受體激動劑更為敏感的化合物。
除非另有說明，術語「治療方法」和「治療」還包括「預防」和/或預防方法。術語「治療的」和「在治療上」應當相應地進行解釋。
藥物製劑式I化合物能夠單獨進行製劑，或者與GABAB受體激動劑組合進行製劑。
對臨床應用而言，按照本發明，式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，適合於製備成口服給藥的藥物製劑。藥劑領域的普通技術人員還可以考慮直腸給藥、非經腸給藥或任何其他的給藥途徑。因此，式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，可使用藥學或藥理學上可接受的載體或輔料進行製劑。載體可以呈固體、半固體或液體稀釋劑的形式。
在製備本發明的口服藥物製劑時，待製劑的式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，可以和固體、粉狀成分，如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、澱粉、支鏈澱粉、纖維素衍生物、明膠或其它適合的成分，以及與崩解劑和潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂醇富馬酸鈉和聚乙二醇蠟混合。然後將所得到的混合物加工成顆粒劑或壓製成片劑。
軟明膠膠囊可用含有式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，以及植物油、脂肪或其它適合於軟明膠膠囊的載體的混合物的膠囊來製備。硬明膠膠囊可包含式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，與固體粉狀分成如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、土豆澱粉、玉米澱粉、支鏈澱粉、纖維素衍生物或明膠組合。
用於直腸給藥的劑量單元可以製備成(i)栓劑形式，包含混合了中性脂肪鹼的活性物質；(ii)明膠直腸膠囊形式，包含式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，以與植物油、石蠟油或其它適合於明膠直腸膠囊的載體的混合物的形式；(iii)預製微灌腸劑形式；或(iv)乾燥的微灌腸劑製劑形式，臨給藥前要在適當溶劑中重構(reconstitute)。
用於口服給藥的液體製劑可以製備成糖漿劑或懸浮劑形式，例如溶液或懸浮液，其含有式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，和其它製劑成分，包括蔗糖或糖醇以及由乙醇、水、甘油、丙二醇和聚乙二醇的混合物。如果需要的話，該液體製劑可含有著色劑、香味劑、糖精和羧甲基纖維素或其它增稠劑。用於口服給藥的液體製劑也可製成乾粉形式，使用前用適當溶劑重構。
用於非經腸給藥的溶液可製備成式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，在藥學上可接受的溶劑中的溶液形式。這些溶液也可含有穩定成分和/或緩衝成分，並且可配製成安瓿或小瓶形式的單位劑量。用於非經腸給藥的溶液也可製成乾粉製劑，使用前即時用適當溶劑重構。
本發明的一個方面是式I化合物，任選與GABAB受體激動劑組合，可每日一次或兩次進行給藥，其取決於患者病情的嚴重程度。式I化合物的典型日劑量為所治療患者的每公斤體重0.1-100mg，但是這取決於各種因素，例如給藥途徑、患者的的年齡和體重以及患者病情的嚴重程度。
製備方法本發明的式I化合物可根據以下常規步驟進行製備，其中R1，R2，R3和R4分別獨立如上文所定義(流程

圖1；相關文獻Tetrahedron(1982)，381435-1441)。
流程圖1其中通過在有機溶劑(例如THF等)中使用醯氯(典型地為1.5-2.5當量)，可以將式(II)的氨基咪唑有效地醯化為式(I)化合物。該反應是在聚合物承載的二異丙基乙基胺(PS-DIPEA；1.5-3當量)存在下，於環境溫度至50℃時攪拌4-18小時而進行。通過親核陰離子交換樹脂Isolute-NH2過濾反應混合物，使用THF洗脫並在真空下蒸發，從而得到油狀形式或無定形固體形式的預期產物。
式(II)的氨基咪唑是通過在鹼性條件下加熱中間體(III)或(IV)以及α滷代羰基化合物而製備(流程圖2；相關文獻Tetrahedron Lett.(1966)，1885-1889 and Monatshefte für Chemie(1976)，1071413-1421)。
流程圖2根據流程圖3，中間體(III)是通過使用相應的C1-C7烷氧基取代中間體(TV)中硫代甲氧基而製備，其中R2是C1-C7烷氧基。
流程圖3中間體(IV)是通過使用1-2當量的伯胺處理在乙醇中的氰基二硫代亞氨碳酸二甲基酯，並回流3-5小時而製備(參見流程圖4)。反應混合物進行冷卻並在真空下進行蒸發，然後通過直接過濾收集預期的化合物，或者在加入水沉澱產物之後過濾收集預期化合物。
流程圖4製備中間體(II)的另一條路線包含在鹼(例如碳酸鉀)存在下使用α滷代羰基化合物處理中間體(IV)，從而得到中間體(V)。隨後用親核物質如烷氧基或硫代烷氧基衍生物(例如NaOMe、NaOEt)處理中間體(V)，通過硫代甲基的取代和環閉合得到中間體(II)。
流程圖5此外，中間體(H)可通過與上述方法類似的方法進行製備，其通過使用氰基甲亞氨酸二苯基酯(diphenylcyanocarbonimidate)代替氰基二硫代亞氨碳酸二甲基酯作為起始物質(流程圖6；參考文獻Bioorg.Med.Chem.Lett.2001，11，2225-2228和Bioorg.Med.Chem.Lett.2004，14，4225-4229)。
流程圖64-醯基氨基-1H-咪唑-5-甲酸乙酯的多個並列合成
流程圖7使用Titan Resin LoaderTM將聚合物承載的二異丙基乙基胺(35mg，3.5 mmol/g)加入至Robbins Flex Chem teflon 96孔板的80孔中。隨後向這80孔中加入在THF中的1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯(600μl，0.05mmol)，接著加入1/80的醯氯(2-2.5當量)的THF溶液(600μl)。密封該板後在室溫下旋轉18小時，接著每一個孔通過Isolute-NH2(200mg)進行過濾，並用THF(1.5ml)進行洗脫。
真空下蒸發THF，得到無定形固體形式或油狀形式的醯化產物。
4-醯基氨基-1H-咪唑-5-甲酸乙酯的多個並列合成 流程圖8使用Titan Resin LoaderTM將聚合物承載的二異丙基乙基胺(70mg，3.5mmol/g)加入至Robbins Flex Chem teflon 96孔板的24孔中。隨後向這些孔中每豎行加入1/8的在THF中的氨基咪唑(600μl，0.1mmol)，接著每橫排加入1/3的醯氯(2-2.5當量)的THF溶液(600μl)。密封該板後在室溫下旋轉18小時，接著每一個孔通過Isolute-NH2(400mg)進行過濾，並用THF(2.5ml)進行洗脫。
真空下蒸發THF，得到無定形固體形式或油狀形式的醯化產物。
實施例實施例1合成1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯 流程圖9在1ml的管瓶中，將1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯(29mg，0.1mmol)溶解於THF(700μl)中。加入50mg的聚合物承載的二異丙基乙基胺(3.5mmol/g)，隨後加入3，4-二氯代苯甲醯氯(31mg，0.15mmol)。室溫下攪拌反應混合物過夜，通過Isolute-NH2柱(200mg)進行過濾，並且使用THF(1ml)進行徹底洗滌。真空下蒸發THF，從而得到產物(35mg，75％)。
NMR1H 400MHz(CDCl3)1.15(3H，t，COOCH2CH3)，2.85(3H，s，SCH3)，4.3(2H，q，COOCH2CH3)，5.45(2H，s，Ar-CH2)，7.1(2H，Ar-H)，7.2-7.35(3H，m，Ar-H)，7.55(1H，Ar-H)，7.75(1H，Ar-H)，8.05(1H，Ar-H)，10.0(1H，s，NH)實施例2合成1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯(用作中間體) 流程圖10將carbamimidothioic acid、N′-氰基-N-(苯基甲基)-，甲基酯(2g，9.7mmol)，乙酸溴乙酯(1.79g，10.7mmol)和碳酸鉀(1.48g，10.7mmol)溶解/懸浮於DMF(20ml)中，60℃下攪拌1小時。同時將0.56g金屬鈉溶解於12ml乙醇(99.9％)中。反應冷卻後，在5分鐘內逐滴加入乙醇鈉。然後將反應加熱至90℃並保持5分鐘，冷卻至室溫，加入水直至產物沉澱。過濾產物，並用乙醇/水(1∶1)洗滌，得到1.9g(67％)1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯。使用乙醇/水對0.5g產物進行重結晶，得到＞95％的純1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯(410mg)。
NMR1H 400MHz(CDCl3)1.15(3H，t，COOCH2CH3)，2.60(3H，s，SCH3)，4.25(2H，q，COOCH2CH3)，4.95(1H，br.s，NH2)，5.40(2H，s，Ar-CH2)，7.1(2H，Ar-H)，7.2-7.35(3H，m，Ar-H)實施例3carbamimidothioic acid，N′-氰基-N-(苯基甲基)-，甲基酯(用作中間體)
流程圖11向氰基二硫代亞氨碳酸二甲基酯(8.2g，56mmol)的乙醇溶液(150ml，99.9％)中加入苄胺(10g，93mmol)。約10秒鐘後形成稠的白色沉澱。在回流條件下加熱混合物3小時。將反應冷卻至室溫，通過過濾收集形成的沉澱物，並使用乙醇洗滌(產量6.43g)。蒸發濾液並加入乙醇(50ml)。過濾得到的白色沉澱物，用乙醇洗滌，從而得到第二產物(產量2.66g)。硫代亞氨酸，N′-氰基-N-(苯基甲基)-，甲基酯的總產量為79％。
NMR1H 400MHz(DMSO)2.6(3H，s，SCH3)，4.5(2H，s，Ar-CH2)，7.2-7.4(5H，m，Ar-H)，8.9(2H，br.s，NH2)下列化合物通過與實施例1中類似的方法進行合成(RT＝保留時間，TOF ES+＝電霧化質譜，即分子量+1)
中間體實施例4N-氰基-N′-苯基亞氨基硫代氨基甲酸甲基酯 將苯胺(0,093mol)加入至氰基二硫代亞氨碳酸二甲基酯(0.146mol)的250mL乙醇溶液(99.9％)中。加熱懸浮液3小時。使反應達到室溫，並通過過濾移出得到的沉澱。用冷的乙醇洗滌固體並在真空下乾燥，從而得到產物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(s，1H)，7.46-7.24(m，5H)，2.47(s，3H)MS m/z 192.05(M+H)實施例5製備2-甲硫基-取代的中間體(II)的常規步驟在惰性氣氛下，使用乾燥的玻璃器皿進行所有的反應。將相應的溴乙酸酯(0.023mol)滴加至N-氰基-N′-苯基亞氨基硫代氨基甲酸甲基酯(0.019mol)和碳酸鉀(0.023mol)的懸浮液中。85-90℃加熱反應混合物2小時。冷卻至室溫後，將12mL的4M NaOH(0.048mol)溶液加入至反應混合物中。15分鐘後，通過加入EtOAc停止反應。使用鹽水洗滌有機相，使用NaSO4進行乾燥，過濾並蒸發濃縮。通過使用EtOAc以及少量的庚烷進行沉澱以純化粗產物，從而得到預期的產物。
以下化合物根據實施例5進行製備4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.38(m，3H)，7.25-7.20(m，2H)，4.99(m，2H)，2.57(m，3H)1.21(s，9H)MS m/z(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，7.49-7.39(m，3H)，7.3-7.22(m，2H)，5.12(s，2H)5.07-4.98(m，1H)，3.25(m，3H)，3.20-3.08(m，2H)2.96(s，3H)，2.88(s，3H)，2.56(s，3H)，1.07-1.01(m，3H)MS m/z 322.11(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸環戊基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46.7.38(m，3H)，7.24-7.16(m，2H)，5-15-5.08(m，1H)，5.07-5.4.97(m，2H)2.53(s，3H)，1.69-1.53(m，2H)，1.44-1.17(m，6H)MS m/z 318.11(M+H)+
4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸異丙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45-7.37(m，3H)，7.25-7.19(m，2H)，5-03-4.88(m，3H)，2.53(s，3H)0.97(s，6H)MS m/z 292.10(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2，2-二甲基丙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47-7.36(m，3H)，7.28-7.20(m，2H)，5.10(s，2H)，3.70(s，2H)2.53(s，3H)，0.60(s，9H)MS m/z 320.05(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-氰基-1-甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.38(m，3H)，7.26-7.18(m，2H)，5.17(s，2H)，1.37(s，6H)MS m/z 317.05(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基戊基酯 MS m/z 348.11(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸四氫呋喃-3-基酯 1H MR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.39(m，3H)，7.26-7.17(m，2H)，5.24-5.05(m，1H)，5.05(s，2H)3.81-3.74(m，1H)，3.70-3.62(m，1H)，3.51-3.44(m，1H)，3.41-3.28.(m，1H)2.54(s，31H)，1.96-1.86(m，1H)，1.66-1.51(m，1H)MS m/z 320.05(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48-7.42(m，3H)，7.29-7.25(m，2H)，5.07(s，2H)，3.31-3.22(m，5H)2.56(s，3H)，1.30(s，6H)MS m/z 336.08(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基-2-氧代丙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.51-7.48(m，3H)，7.32-7.26(m，2H)，5.14(s，2H)，2.58(s，3H)2.05(s，3H)，1.15(s，6H)MS m/z 334.05(M+H)+4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-(甲氧基甲基)丙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43-7.38(m，3H)，7.29-7.19(m，2H)，5.05(s，2H)，4.93-4.84(m，1H)3.22(s，3H)，3.26-3.08(m，2H)，2.53(s，3H)，1.51-1.37(m，1H)1.34-1.16(m，1H)，0.74-0.66(m，3H)MS m/z 336.08(M+H)+實施例6製備2-甲氧基-取代的中間體(II)的常規步驟在惰性氣氛下，使用乾燥的玻璃器皿進行所有的反應。將相應的溴乙酸酯(0.014mol)滴加至N-氰基-N′-苯基亞氨基硫代氨基甲酸甲基酯(0.012mol)和碳酸鉀(0.014mol)在23ml乾燥的DMF中的懸浮液。60℃下加熱反應混合物1.5小時。冷卻至室溫後，緩慢加入溶解於30mL乾燥的MeOH中的NaOMe(0.060mol)，從而立即發生轉化。加入完成後在冰浴中冷卻反應，接著通過加入水得到沉澱，過濾沉澱並在真空下乾燥。通過高效色譜法(MeCN∶NH4OAc-緩衝梯度5∶95-95∶5％)純化粗產物，從而得到預期的產物。
以下化合物根據實施例6進行製備4-氨基-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41-7.29(m，3H)，7.26-7.19(m，2H)，5.07(s，2H)，3.93(s，3H)3.27(s，5H)，1.29(s，6H)MS m/z 320.12(M+H)+以下化合物根據實施例1進行合成，並且在400MHz下通過NMR進行分析4-[(4-氟代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.12(s，1H)，8.02(q，2H)，7.48-7.46(m，3H)，7.26-7.23(m，2H)，7.17(t，2H)，2.7(s，3H)，1.16(s，9H)MS m/z 428.08(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1-甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.01(s，1H)，7.94(d，2H)，7.49-7.42(m，5H)，7.28-7.22(m，2H)，5.12-5.02(m，1H)，3.17(s，3H)，3.13-3.07(m，1H)，2.99-2.91(m，1H)，2.69(s，3H)，0.98(d，3H)MS m/z 460.10(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸環戊基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.17(s，1H)，7.93(d，2H)，7.51-7.41(m，5H)，7.27-7.20(m，2H)，5.18-5.12(m，1H)，2.69(s，3H)，1.66-1.54(m，2H)，1.4-1.24(m，4H)，1.2-1.07(m，2H)MS m/z 456.03(M+H)+4-[(甲氧基乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.85(s，1H)，7.50-7.42(m，3H)，7.27-7.20(m，2H)，4.09(s，2H)，3.52(s，3H)，2.65(s，3H)，1.23(s，9H)MS m/z 378.11(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸異丙基酯 1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ10.09(s，1H)，7.92(d，2H)，7.48-7.41(m，5H)，7.26-7.20(m，2H)，4.98-4.88(m，1H)，2.68(s，3H)，0.91(d，6H)MS m/z 430.02(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2，2-二甲基丙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.32(s，1H)，7.93(d，2H)，7.52-7.42(m，5H)，7.30-7.25(m，2H)，3.73(s，2H)，2.69(s，3H)，0.52(s，9H)MS m/z 458.07(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-氰基-1-甲基乙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.93(s，1H)，7.93(d，2H)，7.51-7.44(m，5H)，7.28-7.22(m，2H)，2.7(s，3H)，1.35(s，6H)MS m/z 454.96(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基戊基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.07(s，1H)，7.93(d，2H)，7.48-7.42(m，5H)，7.26-7.20(m，2H)，2.67(s，3H)，1.46-1.39(m，2H)，1.16-1.05(m，8H)，0.95-0.85(m，2H)，0.8(t，3H)MS m/z 486.02(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸四氫呋喃-3-基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.02(s，1H)，7.92(d，2H)，7.51-7.43(m，5H)，7.28-7.22(m，2H)，5.27-5.22(m，1H)，3.77(dd，1H)，3.68-3.61(m，1H)，3.43(d，1H)，3.26(q，1H)，2.7(s，3H)，1.98-1.87(m，1H)，1.52-1.44(m，1H)MS m/z 320.05(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.99(s，1H)，7.91(d，2H)，7.49-7.42(m，5H)，7.27-7.21(m，2H)，3.20-3.13(m，5H)，2.66(s，3H)，1.18(s，6H)MS m/z 474.00(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基-2-氧代丙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.96(s，1H)，7.89(d，2H)，7.53-7.42(m，5H)，7.33-7.25(m，2H)，2.7(s，3H)，2.01(s，3H)，1.09(s，6H)MS m/z 473.98(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-(甲氧基甲基)丙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H)，7.93(d，2H)，7.49-7.40(m，5H)，7.28-7.22(m，2H)5.01-4.92(m，1H)，3.21-3.13(m，4H)，3.02-2.96(m，1H)，2.69(s，3H)，1.47-1.13(m，2H)，0.66(t，3H)MS m/z 473.98(M+H)+4-[(2，3-二-氫-1，4-苯並二氧芑(dioxin)-2-基羰基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.57(s，1H)，8.73-8.66(m，3H)，8.51-8.47(m，2H)，8.39-8.35(m，1H)，8.21-8.15(m，3H)，6.12(s，1H)，5.94-5.90(m，1H)，5.63-5.58(m，1H)，5.35(s，3H)，4.49(d，5H)，2.85(s，2H)，2.50(d，6H)MS m/z 482.13(M+H)+4-{[(3-氯代苯氧基)乙醯基]氨基}-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.25(s，1H)，7.46-7.36(m，3H)，7.29-7.17(m，3H)，7.07.6.95(m，2H)，6.93-6.35(m，1H)，4.64(s，2H)，4.06(s，3H)，3.21(s，5H)，1.20(s，6H)MS m/z 458.06(M+H)+4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.12(s，1H)，7.91(d，2H)，7.47-7.36(m，5H)，7.25-7.20(m，2H)，4.09(s，3H)，3.19-3.13(s，5H)，1.20(s，6H)MS m/z 492.04(M+H)+4-[(2，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.72(s，1H)，7.69-7.56(m，1H)，7.47-7.36(m，4H)，7.35-7.28(m，1H)7.26-7.18(m，2H)，4.19-3.95(m，3H)，3.24-2.96(m，5H)1.23(s，6H)MS m/z 488.06(M+H)+分析方法使用Micromass的8探針MUX-LTC ESP+系統進行LC-MS分析，通過單一波長(254nm)UV檢測法測量純度。通過XterraTM MSC8 3.5um(4.6×30mm柱，8並聯)進行色譜分析。通過8柱將流量15ml/min分流為流量1.9ml/min。10-分鐘的色譜梯度如下流動相A95％ACN+5％0,010M NH4OAc流動相B5％ACN+95％0,010M NH4OAc10分鐘0,0分鐘0％A8,0分鐘100％A9,0分鐘100％A9,1分鐘0％A在400MHz進行NMR分析。
生物學評價正變構GABAB受體調節劑在體外功能測定中的影響在有或沒有正變構調節劑的條件下，研究GABA和巴氯芬對CHO細胞中胞內鈣釋放的影響，其中CHO細胞是表達GABAB(1A，2)受體的異源二聚體。本發明的正變構調節劑能夠增加GABA的效力和效率。
化合物的效力是化合物降低GABA的EC50的能力，可通過將GABA的EC50降低50％所需的濃度反映化合物的效力。這些效力類似於Urwyler等報導的CGP7930(可從Tocris，Northpoint，FourthWay，Avonmouth，Bristol，BS11 8TA，UK購得)的效力。CGP7930能夠將GABA的效力由EC50約170-180nM增加至EC50約35-50nM。
實驗程序材料從Life technologies(Paisley，Scotland)購得的Nut mix F-12(Ham)細胞培養基、OPTI-MEM I還原型血清培養基、胎牛血清(FBS)、青黴素/鏈黴素溶液(PEST)、遺傳黴素、HEPES(4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙磺酸(緩衝液)，1M溶液)、漢克平衡鹽液(HBSS)和zeocin；從Sigma(St Louis，USA)購得的聚乙烯亞胺、丙磺舒、巴氯芬和γ-氨基丁酸(GABA)；從Molecular Probes(Oregon，USA)購得的Fluo-3 AM。從Amersham Pharmacia Biotech(Uppsala，Sweden)購得的4-氨基-正[2，3-3H]丁酸([3H]GABA)。
產生表達GABAB受體的細胞系從人腦cDNA克隆GABABR1a和GABABR2，然後分別亞克隆入pCI-Neo(Promega)和pALTER-1(Promega)。使用pCI-Neo-GABABR1a cDNA質粒和pLECl-Gαqi5(Molecular Devices，CA)構建GABABR1a-Gαqi5融合蛋白表達載體。為了使Gαqi5百日咳毒素變得不敏感，使用標準的PCR方法，通過引物5′-GGATCCATGGCATGCTGCCTGAGCGA-3′(正向)和5′-GCGGCCGCTCAGAAGAGGCCGCCGTCCTT-3′(反向)將Cys356突變成Gly。將Gαqi5mutcDNA連接入pcDNA3.0(Invitrogen)的BamHI和NotI位點。使用引物5′-GGATCCCCGGGGAGCCGGGCCC-3′(正向)和5′-GGATCCCTTATAAAGCAAATGCACTCGA-3′(反向)，通過PCR從pCI-Neo-GABABR1a中擴增GABABR1a編碼序列，並且將其亞克隆入pcDNA3.0-Gαqi5mut的BamHI位點。
為優化GABABR2的Kozak共有序列，使用Altered SitesMutagenesis試劑盒根據製造商的說明書(Promega)進行原位誘變，所用引物為5′-GAATTCGCACCATGGCTTCCC-3′。然後使用Xho I+Kpn I從pALTER-1限制性酶切優化後的GABABR2，並將其亞克隆入哺乳動物表達載體pcDNA3.1(-)/Zeo(Invitrogen)，從而得到最終的構建體，pcDNA3.1(-)/Zeo-GABABR2。
為產生穩定的細胞系，37℃下在Nut mix F-12(Ham)培養基中培養CHO-K1細胞，該培養基置於增溼的CO2培養箱中並補充了10％FBS、100U/ml青黴素和100μg/ml鏈黴素。用1mM EDTA的PBS溶液分離細胞，並在100mm培養皿中接種1百萬細胞。24小時後用OptiMEM取代培養基，在CO2培養箱中孵化1小時。
為產生表達GABABR1a/GABABR2異源二聚體的細胞系，在5mlOptiMEM中混合GABABR1a質粒DNA(4μg)、GABABR2質粒DNA(4μg)和lipofectamine(24μl)，並在室溫下孵化45分鐘。將細胞暴露於轉染培養基5小時，然後用培養基取代轉染培養基。再培養細胞10天，然後加入選擇性試劑(300μg/ml潮黴素和400μg/ml遺傳黴素)。轉染24天後，使用FACS Vantage SE(Becton Dickinson，PaloAlto，CA)通過流式細胞計量法將單細胞分選入96孔平皿。擴展後使用下述的FLIPR分析法測試GABAB受體的功能應答。選擇功能應答最高的克隆進行擴增，然後通過單細胞分選進行亞克隆。在本研究中使用的是在FLIPR中具有最大峰響應的克隆細胞系。
為產生表達GABABR1a-Gαqi5融合蛋白和GABABR2的穩定細胞系，在5ml OptiMEM中混合GABABR1a-Gαqi5mut質粒DNA(8μg)、GABABR2質粒DNA(8μg)和lipofectamine(24μl)，並在室溫下孵化45分鐘。將細胞暴露於轉染培養基5小時，然後用培養基取代轉染培養基。48天後，分離細胞並在6孔平皿中接種(2000細胞/孔)，然後在補充了遺傳黴素(400μg/ml)和zeocin(250μg/ml)的培養基中培養。4天後，收集單集落細胞並將其轉移至24孔平皿中。10天後，在T-25燒瓶中接種細胞克隆，接著培養16天，然後將其用於GABAB受體介導的功能應答的測試。收集具有最高峰響應的克隆，並通過在6孔平皿(1000細胞/孔)中接種進行亞克隆，接著重複上述的步驟。在本研究中使用的是在FLIPR中具有最大峰響應的克隆細胞系。
在FLIPR中GABAB受體依賴性胞內鈣釋放的測量通過Coward等，Anal.Biochem.(1999)270，242-248中所述的內容及對其一些修改在螢光成像板讀數器(FLIPR)中進行GABAB受體依賴性胞內鈣釋放的測量。在配有Glutamax-I的Nut Mix F-12(HAM)中培養轉染的CHO細胞，其中Nut Mix F-12中補充了10％的100U/ml青黴素、100μg/ml鏈黴素、250μg/ml zeocin和400μg/ml遺傳黴素。實驗前24小時，在避光的聚D-賴氨酸塗層的96孔平皿(Becton Dickinson，Bedford，UK)中接種細胞(35,000細胞/孔)，其中培養基沒有選擇性試劑。吸出細胞培養基，然後加入100μl載有Fluo-3的溶液(在Nut Mix F-12(Ham)中的4μM Fluo-3，2.5mM丙磺舒和20mM Hepes)。37℃下在5％CO2培養箱中孵化1小時，接著吸出染色溶液，使用15μl洗液(在HBSS中的2.5mM丙磺舒和20mM Hepes)洗滌細胞兩次，然後加入150μl洗液。使用螢光成像板讀數器(Molecular Devices Corp.，CA，USA)分析細胞。在包含20mM Hepes和5％DMSO的HBSS中將試驗化合物稀釋成50μM濃度，然後加在50μl體積中。在加入GABA(50μl 7.6nM-150μM)之前，螢光取樣為每秒一次，持續60秒(加入試驗化合物之前的10s和之後的50s)，此後每6秒取樣一次，持續120秒。
GTPgS30℃下在膜緩衝液(100mM NaCl，5mM，1mM EDTA，50mMHEPES，pH7.4)中，使用總體積為200μl的0.01％牛血清白蛋白(無脂肪酸)、10μM GDP、100μM DTT和0.53nM [35S]-GTPγS(Amersham-Pharmacia Biotech)進行[35S]-GTPγS結合實驗，其中緩衝液包含0.025μg/μl膜蛋白質(由上述的細胞系製備)。在20μMGTPγS存在的條件下測定非特異性結合。在有或沒有所需濃度的PAM的條件下，通過加入濃度為1mM-0.1nM的GABA啟動反應。通過加入用冰預冷的洗滌緩衝液(50mM Tris-HCl，5mM MgCl2，50mMNaCl，pH7.4)終止反應，接著在真空下通過Printed Filtermat A玻璃纖維過濾器(Wallac)(0.05％PEI處理的)迅速過濾，其中過濾器使用了Micro 96 Harvester(Skatron Instruments)。50℃下乾燥過濾器30分鐘，然後將石蠟閃爍體片熔融在該過濾器上，使用1450Microbeta Trilux(Wallac)閃爍計數器測定結合放射性。
計算方法使用4-參數邏輯方程建立在有或沒有試驗化合物的情況下的GABA計量-應答曲線，y＝ymax+((ymin-ymax)/1+(x/C)D)，其中C＝EC50，D＝斜率因子。
通過對GABA的EC50對數和進行測量存在的正變構調節劑的濃度對數進行繪圖，從而測定GTPγS分析中PAM的效力。
總而言之，式I化合物的效力為EC5020μM-0.001μM。個別EC50值的實例如下
IBS模型中化合物的作用(結腸直腸膨脹)結腸直腸膨脹對CRD而言，在輕度異氟烷麻醉法(Forene，Abbott ScandinaviaAB，Sweden)中，將具有連接導管的3cm聚乙烯球(室內製作)插入遠端結腸，其中球的基體距肛門2cm。將導管用膠帶固定至尾底部。同時，將靜脈導管(Neoflon，Becton Dickinson AB，Sweden)插入尾部靜脈以給予化合物。此後，將大鼠置於Bollman籠中，在開始實驗前使它們從鎮靜狀態中恢復至少15分鐘。
在CRD操作過程中，這些球與壓力換能器(P-602，CFM-k33，100mmHg；Bronkhorst Hi-Tec，Veenendal，The Netherlands)相連接。使用定製的恆壓器(AstraZeneca，Mlndal，Sweden)控制空氣膨脹和球內壓力。在標準PC上運行的定製計算機軟體控制恆壓器，並進行數據收集和儲存。通過模擬輸出方式產生脈衝波形，從而得到由恆壓器產生的膨脹示例。所用的CRD示例建立在重複的時相性(phasic)膨脹上，在80mmHg下出現12次，並且以5分鐘的時間間隔，脈衝持續時間為30秒。
通過記錄和定量膨脹脈衝期間的球內壓力的時相性變化，從而評價CRD應答。在結腸內部球的等壓膨脹期間的壓力振蕩反應了與膨脹相關聯的，因此，它被認為是與內臟疼痛的存在相關聯的內臟運動應答(VMR)的有效評估手段。
數據收集和分析在50Hz對球壓力信號進行抽樣，之後將其進行數字濾波。使用1Hz下的高通濾波器把收縮誘導的壓力變化和恆壓器產生的緩慢變化的壓力分開。在壓力發生器和壓力換能器之間的氣流阻力進一步增強了由動物腹部收縮誘導的壓力變化。此外，使用49-51Hz的帶阻濾波器移除線性頻率幹擾。使用定製的計算機軟體(PharmLab off-line4.0.1)定量球壓力信號的時相性變化。計算脈衝前30秒內(基線作用)以及脈衝期間(作為對膨脹的VMR的度量)的球壓力信號的平均校正值(ARV)。當進行脈衝分析時應當排除每次脈衝的第一秒和最後一秒，這是由於它們顯示了由恆壓器在球膨脹和排氣期間產生的假象信號，這些信號不是來自動物。
結果在大鼠內等壓CRD的VMR中檢驗正變構調節劑的作用。使用的示例包括80mmHg下12次膨脹。化合物的給藥劑量為1-50μmol/kg，將CRD的VMR應答與載體對照組進行比較。化合物能夠有效降低CRD的VMR應答(與使用的載體相比，至少是20％抑制)。
權利要求
1.通式I化合物 其中R1表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R2表示C1-C10烷氧基或C1-C10硫代烷氧基，任選各自獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R3表示C1-C10烷氧基，任選被C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；或者氨基，任選被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基單-或雙取代；R4表示C1-C10烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C1-C10烷氧基；或C3-C10環烷基；任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；其中烷基、烯基、炔基和環烷基可各自獨立具有一個或多個被O、N或S取代的碳原子；以下情況除外●1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-1-甲基-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-(乙醯氨基)-2-(甲硫基)-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，2-(甲硫基)-4-[[(5-硝基-2-呋喃基)羰基]氨基]-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-[[4-(1，1-二甲基乙基)苯甲醯基]氨基]-1-(2-甲氧基苯基)-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(2，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-1-[4-(1-甲基乙基)苯基]-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，1-[4-(1-甲基乙基)苯基]-4-[(2-甲基-1-氧代丙基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-噻吩基甲基]-4-[(氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；●1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-噻吩基甲基1-4-[(二氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯；以及●1H-咪唑-5-甲酸，1-[2-甲氧基苯基]-4-[(三氯代-乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-，乙酯。
2.根據權利要求1的化合物，其中R2表示C1-C10烷氧基，任選獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
3.根據權利要求2的化合物，其中R2表示C1-C5烷氧基，任選獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
4.根據權利要求1的化合物，其中R2表示C1-C10硫代烷氧基，任選獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
5.根據權利要求4的化合物，其中R2表示C1-C5硫代烷氧基、任選獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
6.根據權利要求1-5中任一項的化合物，其中R1表示C1-C7烷基或C3-C7環烷基，任選各自獨立被C1-C7烷氧基、C3-C10環烷基、羥基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈或者一個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C7烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C7環烷基、C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
7.根據權利要求6的化合物，其中R1表示C1-C4烷基，任選獨立被一個芳基或雜芳基取代。
8.根據權利要求1-7中任一項的化合物，其中R3表示C1-C7烷氧基，任選獨立被C1-C10硫代烷氧基、酮基、C3-C10環烷基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
9.根據權利要求1-7中任一項的化合物，其中R3表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
10.根據權利要求9的化合物，其中R3表示C1-C10烷基，任選獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
11.根據權利要求1-10中任一項的化合物，其中R4表示C1-C7烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基或C3-C7環烷基，任選各自獨立被C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
12.根據權利要求1-10中任一項的化合物，其中R4表示芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代。
13.根據權利要求1的通式I化合物，它選自●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-溴代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，2-(甲硫基)-4-[(1-氧代-2-苯基丁基)氨基]-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-甲氧基苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(2-噻吩基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-甲氧基苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[[4-(1，1-二甲基乙基)苯甲醯基]氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-1-(3-甲基丁基)-2-(甲硫基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-1-(3-甲基丁基)-2-(甲硫基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，2-(甲硫基)-4-[(1-氧代-2-苯氧基丙基)氨基]-1-(苯基甲基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，2-(甲硫基)-4-[(1-氧代-2-苯基丁基)氨基]-1-苯基-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-碘代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(3，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-1-(2-甲氧基苯基)-2-(甲硫基)-，乙酯●1H-咪唑-5-甲酸，4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-1-[4-(1-甲基乙基)苯基]-2-(甲硫基)-，乙酯●4-[(4-氟代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1-甲基乙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸環戊基酯●4-[(甲氧基乙醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸叔-丁基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸異丙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2，2-二甲基丙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-氰基-1-甲基乙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基戊基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸四氫呋喃-3-基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1，1-二甲基-2-氧代丙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸1-(甲氧基甲基)丙基酯●4-[(2，3-二氫-1，4-苯並二氧芑-2-基羰基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯●4-{[(3-氯代苯氧基)乙醯基]氨基}-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯●4-[(4-氯代苯甲醯基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯●4-[(2，4-二氯代苯甲醯基)氨基]-2-甲氧基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酸2-甲氧基-1，1-二甲基乙基酯。
14.用於治療的式I化合物 其中R1表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R2表示C1-C10烷氧基或C1-C10硫代烷氧基，任選各自獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R3表示C1-C10烷氧基，任選被C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；或者氨基，任選被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基單-或雙取代；R4表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C1-C10烷氧基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；其中烷基、烯基、炔基和環烷基可各自獨立具有一個或多個被O、N或S取代的碳原子。
15.根據權利要求1-13任一項中的化合物，其用作正變構GABAB受體調節劑。
16.一種藥物組合物，包含作為活性成分的權利要求1-13任一項中的化合物，以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。
17.任選與GABAB受體激動劑組合的根據權利要求14或15中的式I化合物在製備用於治療胃食管反流疾病(GERD)的藥物中的應用。
18.任選與GABAB受體激動劑組合的根據權利要求14或15中的式I化合物在製備用於預防反流的藥物中的應用。
19.任選與GABAB受體激動劑組合的根據權利要求14或15中的式I化合物在製備用於抑制暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESRs)的藥物中的應用。
20.任選與GABAB受體激動劑組合的根據權利要求14或15中的式I化合物在製備用於治療功能性胃腸道疾病的藥物中的應用。
21.根據權利要求20的應用，其中所述的功能性胃腸道疾病是功能性消化不良。
22.任選與GABAB受體激動劑組合的根據權利要求14或15中的式I化合物在製備用於治療腸易激惹症候群(IBS)的藥物中的應用。
23.根據權利要求22的應用，其中所述的IBS是便秘為主的IBS。
24.根據權利要求22的應用，其中所述的IBS是腹瀉為主的IBS。
25.根據權利要求22的應用，其中所述的IBS是交替腸運動為主的IBS。
26.一種治療胃食管反流疾病(GERD)的方法，其中給予需要這種治療的患者任選與GABAB受體激動劑組合的藥學和藥理學上有效量的根據權利要求14的式I化合物。
27.一種預防反流的方法，其中給予需要這種預防的患者任選與GABAB受體激動劑組合的藥學和藥理學上有效量的根據權利要求14的式I化合物。
28.一種抑制暫時性食管下端括約肌鬆弛(TLESRs)的方法，其中給予需要這種抑制的患者任選與GABAB受體激動劑組合的藥學和藥理學上有效量的根據權利要求14的式I化合物。
29.一種治療功能性胃腸道疾病的方法，其中給予需要這種治療的患者任選與GABAB受體激動劑組合的藥學和藥理學上有效量的根據權利要求14的式I化合物。
30.根據權利要求29的方法，其中所述的功能性胃腸道疾病是功能性消化不良。
31.一種治療腸易激惹症候群(IBS)的方法，其中給予需要這種治療的患者任選與GABAB受體激動劑組合的藥學和藥理學上有效量的根據權利要求14的式I化合物。
32.根據權利要求31的方法，其中所述的IBS是便秘為主的IBS。
33.根據權利要求31的方法，其中所述的IBS是腹瀉為主的IBS。
34.根據權利要求31的方法，其中所述的IBS是交替腸運動為主的IBS。
35.一種製備權利要求1的式I化合物的方法，其中從氰基二硫代亞氨碳酸二甲基酯製備中間體(IV) 和通過使用相應的C1-C7烷氧基取代中間體(IV)中的硫代甲氧基製備中間體(III) 和通過在鹼性條件下加熱中間體(III)或(IV)以及α滷代羰基化合物製備氨基咪唑(II)， 和將式(II)的氨基咪唑使用醯氯進行醯化；其中R1表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R2表示C1-C10烷氧基或C1-C10硫代烷氧基，任選各自獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R3表示C1-C10烷氧基，任選被C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；或者氨基，任選被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基單-或雙取代；其中烷基、烯基、炔基和環烷基可各自獨立具有一個或多個被O、N或S取代的碳原子。
36.式II的化合物 其中R1表示C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C3-C10環烷基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R2表示C1-C10烷氧基或C1-C10硫代烷氧基，任選各自獨立被C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；R3表示C1-C10烷氧基，任選被C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基，任選各自獨立被C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、C3-C10環烷基、酮基、滷素、羥基、巰基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；芳基或雜芳基，任選各自獨立被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環烷基、C1-C10烷氧基、C1-C10硫代烷氧基、滷素、羥基、巰基、硝基、酮基、羧酸、羧酸酯、羧酸醯胺、腈、或者一個或兩個芳基或雜芳基取代；或者氨基，任選被C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基或C3-C10環烷基單-或雙取代；其中烷基、烯基、炔基和環烷基可各自獨立具有一個或多個被O、N或S取代的碳原子；以下情況除外1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-1-甲基-2-(甲硫基)-，乙酯；4-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-(甲硫基)-1H-咪唑-5-甲酸乙酯；4-氨基-1-(4-異丙基苯基)-2-(甲硫基)-1H-咪唑-5-甲酸乙酯；4-氨基-1-(2-甲氧基苯基)-2-(甲硫基)-1H-咪唑-5-甲酸乙酯；甲酮，[4-氨基-1-甲基-2-(甲硫基)-1H-咪唑-5-基]苯基；甲酮，[4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-1H-咪唑-5-基]苯基-；1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-苯基-，乙酯；1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-1-甲基-2-(甲硫基)-，乙酯；以及1H-咪唑-5-甲酸，4-氨基-2-(甲硫基)-1-(2-丙烯基)-，乙酯。
全文摘要
本發明涉及新的具有正變構GABA
文檔編號A61K31/435GK1972942SQ200580021160
公開日2007年5月30日 申請日期2005年6月20日 優先權日2004年6月24日
發明者U·鮑爾, W·布萊爾斯福特, V·克哈傑拉尼, B·厄納, O·福傑爾斯特羅姆, L·古斯塔夫森, J·馬特森, K·尼爾森, T·奧爾森 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司