一種中藥組合物及製備方法

2023-04-24 18:16:46

專利名稱：一種中藥組合物及製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥領域，具體涉及一種治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組 合物及製備方法。
背景技術：
慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍是胃、腸黏膜受到多種因素長期損傷後，引起的慢性 炎症及潰瘍。近30年來有兩個重要發現使慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍病因有重大更新， 一是明確了幽門螺桿菌是慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的主要病因，使胃炎及胃、十二指腸 潰瘍的病理生理和治療發生棄舊揚新的轉折；二是胃黏膜損傷因子持續存在。有些胃炎的 胃黏膜炎症細胞浸潤輕微，而上皮和血管變化很突出，實際上是一種胃病，而非胃炎。由於 內源性或外源性胃黏膜損傷因子持續存在，特別是胃動力不足時，十二指腸液反流使胃屏 障功能進一步減退，造成惡性循環，這是慢性胃炎難治的原因之一。慢性胃炎發病率隨年齡 而增加，多數是以胃竇為主的全胃炎，後期以胃黏膜固有腺體萎縮和腸化生為主要病理特 點。隨著西藥H2受體拮抗劑、質子泵抑制劑、抗生素、胃動力藥、強固屏障功能藥在臨床上 的廣泛應用，慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍短期內顯效已不再是棘手的問題，但隨著幽門螺 桿菌耐藥性產生，根除率下降，復發率增加，而且西藥副作用大，長期應用病人耐受性差，療 效受到了影響。因此，尋找抗Hp感染和增強胃黏膜屏障功能治療與其相關疾病的新途徑仍 然是人們關注的研究課題。中醫臨床研究發現，慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者以脾胃虛寒多見，特別是反 復發作者。這些患者，往往有不同程度的胃脘部怕涼，不敢進食生冷食物症狀，有些患者由 於服用西藥時間過長，常有喜熱飲，遇寒易發，便溏肢冷等脾胃虛寒之症。如果較長時間予 以健脾溫中法治療，使脾胃虛寒之症徹底得以改善，便可達到「四季脾旺不受邪」，從而可以 提高慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的治療質量，減少復發。現代研究認為，一些溫中方可改 善胃局部血液循環，使胃的功能得以振奮，胃運動得以調整或改善，增強胃黏膜的抵抗力， 截斷胃炎再次發生的過程，發揮中藥綜合療效。因此研製和生產一種具有抑制幽門螺桿菌， 改善胃運動，增強胃黏膜抵抗力的可長期服用、低毒副作用的中藥複方產品，仍是人們所盼 望的。我國著名老中醫焦樹得先生在臨床實踐中使用由高良姜10g，制香附6g，百合 30g,烏藥10g，丹參30g，檀香(後下)6g，砂仁3g組成的三合湯治療慢性胃炎取得良好療 效。而高良姜和香附、百合和烏藥已經作為一些中藥經驗組方在臨床中用於治療胃 病，如良附丸由高良姜和香附細粉混合而成，出自清-謝元慶《良方集腋》卷上，主要功效為 疏肝理氣，溫胃祛寒。適應病證是肝鬱氣滯，胃有寒凝，脘腹疼痛，喜溫喜按，或胸脅帳痛，苔 白，脈沉緊者。治療寒凝氣滯，脘痛吐酸，胸腹脹滿並取得較好的療效。百合、烏藥組成的百 合湯出自陳修園的《時方歌括》卷下和《時方妙用》卷二。適用於「治心口痛，服諸熱藥不效 者，亦屬氣痛」之證。據陳修園稱「此方餘從海壇得來，用之多驗」。百合既能補中益氣，又能潤肺補虛，以制約肝木太過。《神農本草經》謂「百合，味甘平，主邪氣腹脹心痛。」烏藥， 味辛，性溫，辛溫香竄，上走脾肺，下達腎與膀胱，善於疏通氣機，散寒止痛。《本草從新》道 「烏藥……疏胸腹邪逆之氣，一切病之屬氣者皆可治。，，故百合、烏藥相配，一涼一溫，一走一 守，柔中有剛，潤而不滯，辛而不燥。在中國專利《高良姜提取物及其用途》(授權號CN1325108C，2007年7月公告)則 公開了高良姜提取物具有抗幽門螺旋桿菌作用。三合湯是以水為溶劑提取的常規中藥湯劑，迄今為止，關於以高良姜、香附、百合、 烏藥乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成的口服製劑抗幽門螺旋桿菌感染和治療 與幽門螺旋桿菌感染有關的疾病尚無文獻報導。本發明者在對三合湯進行抗幽門螺旋桿菌活性和保護胃黏膜的篩選研究中發現 以高良姜、香附、百合、烏藥的乙醇提取物具有良好的抗幽門螺旋桿菌作用，並對內源性和 外源性引起的胃黏膜損傷具有保護作用，而且具有促進胃排空的作用，在動物上得到藥效 證實，從而完成了本發明。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在於彌補現有西藥治療虛寒證的慢性胃炎及胃、十二 指腸潰瘍之不足，提供一種對於虛寒證的慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者擁有療效全面， 價廉，低毒，無常用西藥的副作用，還可以減少復發的理想的中藥組合物。本發明公開的治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物是以高良姜、香附、 百合、烏藥的乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成，以口服製劑為佳。為了方便閱讀，對以下涉及的中藥組方命名解釋如下三合湯水提或醇提物是指其由高良姜、制香附、百合、烏藥、丹參、檀香(後下)、砂 仁組成；良附丸或良附提取物是指其由高良姜、制香附組成；百合湯或百合提取物是指其由百合、烏藥組成；良姜提取物是指高良姜單味提取物；聯合用藥是指良附丸或良附提取物和百合湯或百合提取物(分別減半聯合給藥) 合併用藥；二合湯水提或醇提物是指其由高良姜、制香附、百合、烏藥組成，即本發明的組方。在本發明的中藥組合物中還可以加入其他輔助中藥，以提高療效，所述的輔助中 藥可選用海螵蛸、浙貝母。本發明的活性成份各生藥重量份比例為高良姜7-15份、香附3. 5-7. 5份、百合 15-30份、烏藥7-15份。本發明所述的口服製劑是指醫學上可接受的各種口服劑型，包括顆粒劑、片劑、膠 囊劑或口服液等。本發明所述的藥用輔料為常規製劑中所採用的各種輔料。本發明所要解決的另一技術問題在於提供上述中藥組合物的製備方法。本發明公開的治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物的製備方法包括下 列步驟
1)活性成份提取物製備a)將配比量的高良姜、香附、百合、烏藥用8-12倍量70% -95%乙醇作溶劑，浸漬 10-15小時後，回流提取2次，合併提取液，離心，濾液真空60-70°C回收乙醇，濃縮至相對密 度1.14，得提取液I;b)將a)提取後的藥渣加8-12倍量水，提取2次，提取液離心，濾液濃縮至相對密 度1.10，得提取液II ；2)製劑製備合併上述提取液I、II，按常規方法與藥用輔料製成液體口服製劑；或將合併後的 提取液進行噴霧乾燥，按常規方法與藥用輔料製成固體口服製劑。本發明製劑單位劑量中含高良姜以高良姜素計，應大於相應製劑的含量要求， 1.4mg/g，具體見實施例，以HPLC法測定，色譜條件是，流動相0.5%乙酸乙腈60 40; 柱溫:35°C ；檢測波長:267歷。本發明所要解決的技術問題在於公開上述中藥組合物在治療慢性胃炎及胃、十二 指腸潰瘍藥物中的應用。本發明者的動物實驗證明將高良姜、制香附、百合、烏藥的4味藥配伍並採用本發 明的提取工藝具有抑制幽門螺桿菌作用、胃黏膜保護作用、促進胃運動作用，而且分別優於 三合湯、良附丸、百合湯、高良姜單味乙醇提取物以及良附提取物與百合提取物的聯合用 藥。中醫傳統製藥方法是將處方中各味藥合併用水煎煮，即中藥湯劑，本發明雖沿用 各味藥合併提取的方法，但改變了提取方式，本發明採用了乙醇提取工藝，這樣可充分提取 出有效成分。本發明所公開的組方所具有藥物作用機理與各藥協同或增溶作用有關。以本 發明高良姜中高良姜素和二芳基庚烷酮為例，傳統水提工藝高良姜素提取率為35%，二芳 基庚烷酮為30 %，而乙醇提取工藝高良姜素和二芳基庚烷酮提取率可達90 %。同時，工藝 研究中發現，四味藥合併提取的高良姜素提取率(90% )大於高良姜、香附兩味合併提取時 高良姜素的提取率(85% )。按本發明製備的中藥適用於胃脘喜暖、痛處喜按、舌苔白或薄白、脈象弦或沉細 弦、虛實寒熱症狀夾雜並見者。該組合物中良姜辛熱，溫胃散寒，香附味辛微苦幹、性平，理 氣行滯，利三焦、解六鬱，二藥合用，善治寒凝氣滯胃痛；百合性味甘平，主入肺胃，降瀉肺胃 鬱氣，肺氣降，胃氣和，則諸氣俱調，配以烏藥快氣宣通，疏散滯氣，溫順胃經逆氣。二藥合 用，既能清瀉肺胃鬱氣，又能防止百合平涼有礙中運，故本組合物對久治難愈，正氣漸虛的 胃炎，既能理氣定痛，又能益胃調胃，既主寒又主滯，既能治病又能益人，功效比較全面。
具體實施例方式下面的實施例用於進一步說明本發明，但不意味著對本發明的任何限制。實施例1 不同中藥處方及製備方法提取物對幽門螺桿菌根除的影響(小鼠)試驗目的採用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃製作小鼠幽門螺旋桿菌感 染模型，觀察按不同中藥處方及製備方法得到的提取物對幽門螺桿菌根除的影響。方法1、受試藥物製備
處方1 三合湯高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥10g，丹參30g，檀香(後 下)6g，砂仁3g製法1 按以上處方比例稱取各藥材，除檀香6味，加水10倍量，煮沸，煎煮1. 5h， 過濾，濾液備用，藥渣與檀香合併，加水10倍量，煎煮1. 5h，過濾，兩次濾液合併，濃縮，用 0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物的懸浮液，得三合湯水提液。製法2 按以上處方比例稱取各藥材，除檀香6味，加70%乙醇10倍量，回流提取 2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣與檀香合併再加水10倍量，煎煮2次， 每次1. 5h，過濾，濾液備用，將濾液與上述濃縮液合併，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含 0. 2g固含物的懸浮液，得三合湯醇提液。處方2 :二合湯高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥IOg製法1 按以上處方比例稱取各藥材，高良姜、制香附、百合、烏藥4味，加水10倍 量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾，濾液濃縮，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物 的懸浮液，得二合湯水提液。製法2 以上高良姜，制香附，百合，烏藥4 B末，加70%乙醇10倍量，回流提取2次， 每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾， 濾液備用，將濾液與上述濃縮液合併，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成Iml含0. 2g固含物的懸 浮液，得二合湯醇提液。2、分組與給藥將動物隨機分成5組，即模型組、陽性藥對照組(奧美拉唑5. 2mg/ kg、克拉黴素65mg/kg、甲硝唑104mg/kg)、三合湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液 治療組(2. Og/kg)、二合湯水提液治療組(2. 0g/kg)，二合湯醇提液治療組(2. 0g/kg)經灌 胃管灌服，每天兩次(每隻小鼠0. lml/10g體重)，連續給藥14天。停止給藥30天後，於無 菌室內解剖小鼠，進行快速尿素酶試驗。3、動物模型二級C57BL/6小鼠，用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃，實現 體內的Hp定植。將Hp定植的小鼠隨機分組。4、觀察指標與檢測方法治療結束後拉頸椎處死小鼠，開腹後切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕衝洗胃黏膜表面的汙物，將全胃投入快速尿素酶試驗試劑中，記錄幽門 螺旋桿菌(Hp)陽性數，計算根除率。結果見表1表1不同中藥處方及製備方法提取物對幽門螺桿菌根除的影響 注廣P < 0. Olvs模型，flP < 0. 05vs三合湯水提，二合湯水提結論結果表明，二合湯醇提液，即高良姜、制香附、百合、烏藥乙醇提取物具有清 除幽門螺桿菌作用，且優於三合湯水提組、醇提組和二合湯水提組。實施例2 不同中藥處方對幽門螺桿菌根除的影響(小鼠)試驗目的採用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃製作小鼠幽門螺旋桿菌感 染模型，觀察按不同中藥處方得到的提取物對幽門螺桿菌根除的影響。方法1、受試藥物製備處方1 高良姜10g，制香附6g按以上處方比例稱取兩藥材，高良姜，制香附2味，加70%乙醇10倍量，回流提取 2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成一定體積的懸浮液，得良 附提取物。處方2 百合30g，烏藥IOg按以上處方比例稱取兩藥材，百合，烏藥2味，加70%乙醇10倍量，回流提取2次， 每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾， 將濾液與上述濃縮液合併，用0.4%羧甲基纖維素鈉配成與上述良附提取物體積相同的懸 浮液，得百合提取物。處方3:高良姜IOg高良姜1 B末，加70%乙醇10倍量，回流提取2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，用 0.4%羧甲基纖維素鈉配成與上述良附提取物體積相同的懸浮液，得高良姜提取物。處方4 高良姜10g，制香附6g，百合30g，烏藥IOg以上4味，加70%乙醇10倍量，回流提取2次，每次1. 5h，提取液過濾，濃縮，濃縮 液備用；藥渣再加水10倍量，煎煮2次，每次1. 5h，過濾，濾液備用，將濾液與上述濃縮液合 並，用0. 4%羧甲基纖維素鈉配成懸浮液，得二合湯提取物。2、分組與給藥將動物隨機分成6組，即模型組、陽性藥對照組(奧美拉唑5. 2mg/ kg、克拉黴素65mg/kg、甲硝唑104mg/kg)、良附治療組、百合治療組、良姜治療組、聯合用藥 治療組(良附提取物與百合提取物分別給0. lml/10g)、二合湯治療組，經口灌服藥液，每天 兩次(每隻小鼠0. lml/10g體重)，連續給藥14天。停止給藥30天後，於無菌室內解剖小 鼠，進行快速尿素酶試驗。3、動物模型二級C57BL/6小鼠，用一定濃度的幽門螺旋桿菌(HpSSl)灌胃，實現 體內的Hp定植。將Hp定植的小鼠隨機分組。4、觀察指標與檢測方法治療結束後拉頸椎處死小鼠，開腹後切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕衝洗胃黏膜表面的汙物，將全胃投入快速尿素酶試驗試劑中，記錄幽門 螺旋桿菌(Hp)陽性數，計算根除率。結果見表2表2不同中藥處方及製備方法提取物對幽門螺桿菌根除的影響 注*P< 0. 05vs 模型，flP < 0. 05vs 百合湯組結論結果表明，二合湯治療組具有清除幽門螺桿菌作用，且優於其他4組。實施例3 不同中藥處方及製備方法提取物對乙醇胃黏膜損傷小鼠胃組織表皮生 長因子和過氧化體系的影響試驗目的採用乙醇灌胃製作小鼠乙醇黏膜損傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處 方及製備方法得到的提取物對乙醇黏膜損傷型小鼠胃黏膜表皮生長因子和抗氧化能力的影響。方法1、受試藥物製備同實施例12、分組與給藥將動物隨機分成6組，即模型組，陽性藥對照組(膠體果膠鉍 156mg/kg)，三合湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液治療組(2. Og/kg)、二合湯 水提液治療組(2. Og/kg)，二合湯醇提液治療組(2. Og/kg)，經灌胃管灌服，灌胃容量為 0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。小鼠禁食不禁水24h，在給乙醇Ih後每天給藥1次， 共3次。模型組灌等量的生理鹽水。3、動物模型小鼠乙醇黏膜損傷型潰瘍採用乙醇灌胃製作急性胃黏膜損傷型潰瘍 模型。以90%乙醇0. Iml/只灌胃，隔日同法再給予1次，Ih後即可建立起急性胃黏膜損傷 模型。4、觀察指標與檢測方法給藥2h後拉頸椎處死小鼠，開腹後切下全胃，沿胃大彎 剪開，用冰鹽水輕輕衝洗胃黏膜表面的汙物，用濾紙吸乾、除盡胃黏膜表面的粘液等。將胃 組織勻漿，低溫冷凍保存樣品，採用試劑盒測定表皮生長因子和超氧化岐化酶活力(SOD)、 過氧化產物(MDA)。表皮生長因子試劑盒購自Adlitteram Diagnostic Laboratories Inc 公司，S0D、MDA試劑盒購自南京建成生物工程研究所，上述指標測定按其測定試劑盒說明書 進行。結果見表3。表3不同中藥處方及製備方法提取物對乙醇胃黏膜損傷型小鼠胃組織表皮生長 因子和抗氧化能力的影響 注*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，#P < 0. 05vs 三合湯醇提結論結果表明三合湯醇提和二合湯醇提可以提高乙醇黏膜損傷小鼠的表皮生長 因子水平和SOD活力，降低MDA水平，而且在表皮生長因子水平和SOD活力方面二合湯醇提 優於三合湯醇提，說明應優選二合湯處方並採用乙醇提取工藝。實施例4 不同中藥處方提取物對乙醇胃黏膜損傷小鼠胃組織表皮生長因子和過 氧化體系的影響試驗目的採用乙醇灌胃製作小鼠乙醇黏膜損傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處 方得到的提取物對乙醇黏膜損傷型小鼠胃黏膜表皮生長因子和抗氧化能力的影響。方法1、受試藥物製備同實施例22、分組與給藥將動物隨機分成7組，即模型組，陽性藥對照組(膠體果膠鉍 156mg/kg)，良附治療組、百合湯治療組、良姜治療組、聯合用藥治療組、二合湯治療組，經灌 胃管灌服，灌胃容量為0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。小鼠禁食不禁水24h，在給乙醇 Ih後每天給藥1次，共3次。模型組灌等量的生理鹽水。3、動物模型同實施例3。4、觀察指標與檢測方法同實施例3結果見表4。表4不同中藥處方提取物對乙醇胃黏膜損傷型小鼠胃組織表皮生長因子和抗氧
化能力的影響 注*P < 0. 05，**P < 0. Olvs模型，#P < 0. 05vs良附組、百合湯組、良姜組結論結果表明百合湯組和聯合用藥組可以提高乙醇黏膜損傷小鼠的表皮生長因 子水平和SOD活力，良附組和良姜組可提高SOD活力，而在表皮生長因子水平方面未顯示作 用，從表皮生長因子水平和SOD活力兩方面評價，二合湯組最優。實施例5 不同中藥處方及製備方法提取物對醋酸損傷型潰瘍的影響(大鼠)試驗目的採用乙酸注射法製作大鼠損傷型潰瘍模型，觀察按不同中藥處方及制 備方法得到的提取物對乙酸損傷型潰瘍大鼠胃黏膜的潰瘍形成程度、表皮生長因子(EGF) 的影響。方法1、受試藥物製備同實施例12、分組與給藥將動物隨機分成6組，即模型組，雷尼替丁組(0. 108g/kg/d)，三合 湯水提液治療組(2. Og/kg)、三合湯醇提液治療組(2. Og/kg)、二合湯水提液治療組(2. Og/ kg)，二合湯醇提液治療組(2.0g/kg)。灌胃容量為lml/100g體重，各組給藥容量相同。於 手術次日開始給藥，每天一次，連續10天。模型組灌等量的生理鹽水。3、動物模型大鼠損傷型潰瘍採用乙酸注射法製作的慢性損傷型胃潰瘍模型。大 鼠在水合氯醛麻醉下開腹，暴露胃體，在胃前壁小彎側漿膜下注射20%冰醋酸0. 03ml/只， 縫合腹腔，常規飼養。4、觀察指標與檢測方法給藥結束後次日拉頸椎處死動物，開腹取胃，分別測量潰 瘍的長徑(L)與短徑(H)，按公式S= JiLH/4計算其潰瘍面積。用角膜環鑽將潰瘍打孔 取下，製成10%的組織勻漿液，測定表皮生長因子(EGF)的含量。試劑盒購自Adlitteram Diagnostic Laboratories, Inc公司，組織蛋白含量測定試劑盒購自南京建成生物工程研 究所，上述指標測定均按其測定試劑盒說明書進行。結果見表5和表6。表5不同中藥處方及製備方法提取物對乙酸損傷型潰瘍的潰瘍面積的影響
10 注:*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，flP < 0. 05vs 二合湯水提液表6不同中藥處方及製備方法提取物對乙酸損傷型潰瘍的表皮生長因子的影響 注:*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型，##P < 0. Olvs 三合湯醇提，二合湯水提結論結果表明三合湯和二合湯處方水提、乙醇提取物均具有降低乙酸損傷型潰 瘍的潰瘍面積的作用，但以二合湯處方的乙醇提取物最優。在對大鼠表皮生長因子(EGF) 的影響方面，三合湯和二合湯乙醇提取物有提高表皮生長因子水平的作用且二合湯處方優 於三合湯處方。實施例6 不同中藥處方提取物對小鼠胃排空的影響試驗目的本實驗採用葡聚糖藍2000作為胃內標誌物，觀察不同中藥處方提取物 對胃內色素殘留量的影響，以此作為評價該藥是否具有促進胃腸蠕動作用的評價指標。方法1、受試藥物製備同實施例22、分組與給藥將動物隨機分成7組，即空白對照組，多潘立酮片組(84. 6mg/kg/ d)，良附治療組、百合湯治療組、良姜治療組、聯合用藥治療組、二合湯治療組。灌胃容量為 0. lml/10g體重，各組給藥容量相同。于禁食24h後灌胃給藥，一次性給藥。空白對照組灌 0.4%羧甲基纖維素鈉溶液。3、觀察指標與檢測方法給藥30min後再灌2%葡聚糖藍2000水溶液0.4ml，再經 20min後脫頸椎處死小鼠，剖腹取全胃，切開，將胃內色素殘留物充分洗於4ml去離子水中， 3500r/min，離心15min，取上清液620nm處測定其胃內色素殘留量。以空白對照組的色素殘
11留量為基準值(100% )，計算胃殘留率為殘留率=殘留值/基準值X 100%。結果對小鼠胃排空的影響見表7。表7、本發明中藥提取物對小鼠胃排空的影響(^ ± s) 注:#P < 0. 05vs空白，< 0. Olvs良附組、百合湯組和良姜組結論結果表明，二合湯治療組具有促進胃排空作用，且優於其他4組。實施例7 本發明中藥提取物對小鼠胃排空的影響試驗目的本實驗採用葡聚糖藍2000作為胃內標誌物，觀察本發明中藥提取物對 胃內色素殘留量的影響，以此評價對胃排空的作用。方法1、受試藥物製備按照實施例1的處方2和製法2得到中藥提取物。2、分組與給藥將動物隨機分成5組，即空白對照組，多潘立酮片組(84. 6mg/kg/ d)，中藥提取物治療組(分0. 78g/kg/d、l. 56g/kg/d、3. 12g/kg/d三個劑量)。將中藥提取 物和多潘立酮片用蒸餾水製成不同濃度同等容量的溶液，灌胃容量為0. lml/10g體重，各 組給藥容量相同。于禁食24h後灌胃給藥，一次性給藥。空白對照組灌等量的生理鹽水。3、觀察指標與檢測方法給藥30min後再灌2%葡聚糖藍2000水溶液0. 4ml，再經 20min後脫頸椎處死小鼠，剖腹取全胃，切開，將胃內色素殘留物充分洗於4ml去離子水中， 3500r/min，離心15min，取上清液620nm處測定其胃內色素殘留量。以空白對照組的色素殘 留量為基準值(100% )，計算胃殘留率為殘留率=殘留值/基準值X 100%。結果對小鼠胃排空的影響見表8。表8、本發明中藥提取物對小鼠胃排空的影響 注*P< 0. 05，**P < 0. Olvs 空白對照結論結果表明本發明中藥提取物三個劑量與空白對照組相比均具有顯著差異 (P Imm者計算面積(公式兩徑相等者πΓ2，兩徑不等 者Jirlrf。面積小於lmm2的潰瘍點，10個相當於潰瘍面積llmm2)。其中，潰瘍面積為1 10mm2的潰瘍指數為1分，11 20mm2為2分，21 30mm2為3分，31 40mm2為4分，41 50mm2為5，彡51mm2或穿孔為6。(2)胃液指標測定試驗造模5h後處死大鼠，開腹，結紮 賁門，取出全胃，收集胃液，胃液離心去渣，去渣後測量胃液的體積，然後分別取一定的胃液 滴定胃酸的濃度與測定胃蛋白酶的活力。胃酸的濃度測定採用0. lmol/L的NaOH以酚酞為 指示劑進行酸鹼滴定，胃蛋白酶的活力的測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所，按其 測定試劑盒說明書進行。結果1、對大鼠潰瘍面積的影響見表9。表9本發明中藥提取物對幽門結紮型潰瘍的潰瘍面積的影響
注*P < 0. 05vs 模型2、對大鼠胃液量、胃酸濃度和胃蛋白酶活力的影響見表10。表10本發明中藥提取物對幽門結紮型潰瘍的胃液量、胃酸濃度和胃蛋白酶活力 的影響 注*P < 0. 05，**P < 0. Olvs 模型結論結果表明本發明中藥提取物中、高劑量組具有抗內源性胃黏膜損傷的作用。實施例9 本發明中藥提取物對慢性胃炎大鼠的影響試驗目的採用綜合因素製作慢性胃炎模型，觀察本發明中藥提取物對該模型大 鼠前胃部黏膜的氨基己糖含量、胃液體積、胃液酸鹼度的影響，以此作為評價該藥具有治療 慢性胃炎療效的指標。方法1、受試藥物製備按照實施例1的處方2和製法2得到中藥提取物。2、分組與給藥將動物隨機分成6組，即正常組，模型組，陽性藥三九胃泰對照組 (3g/kg/d)，本發明中藥提取物治療組(分0. 54g/kg/d、l. 08g/kg/d、2. 16g/kg/d三個劑 量)。將本發明中藥提取物和三九胃泰用蒸餾水製成不同濃度同等容量的溶液，灌胃容量為 lml/100g體重，各組給藥容量相同。每天一次，連續30天，模型組灌等量的生理鹽水。3、動物模型將大鼠隨機分為6組，每組10隻，共60隻，除正常組外，其餘動物用 0. 氨水溶液及20mmoL脫氧膽酸鈉溶液交替自由飲用，配合饑飽失常法(2d足食，Id禁 食)餵食，每隔3天灌60 %乙醇2ml/只，連續6周。
4、觀察指標與檢測方法末次給藥後禁食24h，淺麻醉下結紮幽門，6h後處死，收 集胃液，滴定總酸度，打孔器取下直徑8mm鼠胃黏膜組織一塊，勻漿、離心，取上清液備用， 用考馬斯亮藍染色法測定蛋白含量，採用改良後氨基己糖比色法的測定。結果對大鼠慢性胃炎的影響見表11。表11、本發明中藥提取物對大鼠慢性胃炎的影響(i±s) 注*Ρ< 0. 05，**P < 0. Olvs 模型結論結果表明本發明中藥提取物三個劑量與模型組相比可不同程度提高胃液酸 度和氨基己糖含量，說明本發明中藥提取物具有治療慢性胃炎的療效。實施例10 顆粒劑製備a)將1500g高良姜、750g香附、3000g百合、1500g烏藥用10倍量70%乙醇作溶 劑，浸漬12小時後，85°C回流提取2次，每次1小時，提取液離心(16000轉/分)分離後， 減壓回收乙醇，濃縮至相對密度1. 14(50-60°C )，得提取液I ；b)將a)提取後的藥渣加10倍量水，煎煮2次，每次1小時，提取液用管式高速離 心機離心(16000轉/分)，得提取液II ；c)將液II濃縮至相對密度為1. 10(50-60°C )後與液I合併進行噴霧乾燥(進風 溫度140°C)，得乾燥粉；d)取上述乾燥粉500g、蔗糖150g、糊精100g、膠體微晶纖維素30g、碳酸氫鈉適量 混合均勻，以適量95 %乙醇作潤溼劑，溼法制粒，過篩，烘乾，分裝製成6g/袋顆粒劑。用 HPLC法測定含高良姜以高良姜素計7. Smg/包。實施例11 片劑製備以實施例10同樣方法得到乾燥的提取物，加入10%交聯羧甲基纖維素鈉，溼法 制粒，烘乾，加入適量硬脂酸鎂混合，壓製成片劑。用HPLC法測定含高良姜以高良姜素計 1. 4mg/g0實施例12 膠囊劑製備
以實施例10同樣方法得到乾燥的提取物，加入10%微晶纖維素，3%微粉矽膠，以 適量90%乙醇作潤溼劑，溼法制粒，過篩，烘乾，加入適量硬脂酸鎂，混合均勻，製成硬膠囊。 用HPLC法測定含高良姜以高良姜素計1.4mg/g。實施例13: 口服液製備以實施例10同樣方法得到提取物。取蒸餾水適量，加入10%聚山梨酯-80製成溶 液，另外，將蔗糖、防腐劑適量溶於蒸餾水，在攪拌下加入上述溶液，混勻，過濾，分裝，滅菌， 製得口服液。用HPLC法測定含高良姜以高良姜素計大於0. 4mg/ml。
權利要求
一種中藥組合物，由高良姜、香附、百合、烏藥的提取物為活性成份與藥用輔料組成。
2.如權利要求1所述的中藥組合物，其特徵在於其中各味生藥按重量份為高良姜 7-15份、香附3. 5-7. 5份、百合15-30份、烏藥7-15份。
3.由權利要求1所述的中藥組合物製備而成的口服製劑。
4.如權利要求3所述的中藥組合物，其特徵在於其中所述的口服製劑為顆粒劑、片劑、 膠囊劑或口服液。
5.製備如權利要求1所述的中藥組合物的方法，包括下列步驟1)活性成份提取物製備a)將配比量的高良姜、香附、百合、烏藥用8-12倍量70%-95%乙醇作溶劑，浸漬 10-15小時後，回流提取2次，合併提取液，離心，濃縮，得提取液I ；b)將a)提取後的藥渣加8-12倍量水，提取2次，提取液離心，濾液濃縮，得提取液II；c)合併上述提取液I、II；2)按常規方法與藥用輔料製成液體製劑；或將合併後的提取液進行噴霧乾燥，按常規 方法與藥用輔料製成固體製劑。
6.如權利要求1所述的中藥組合物，單位劑量中高良姜素的含量，採用HPLC法測定大 於1. 4mg/g,色譜條件是流動相為0. 5%乙酸乙腈60 40，柱溫35°C，檢測波長267nm。
7.如權利要求1所述的中藥組合物在製備治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍藥物中的 應用。
全文摘要
本發明公開了一種治療慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍的中藥組合物及製備方法。本發明公開的中藥組合物是以高良姜、香附、百合、烏藥的乙醇提取物為主要活性成份與藥用輔料組成的製劑。該製劑對於慢性胃炎及胃、十二指腸潰瘍患者擁有明確的療效，無常用西藥的易復發等缺點。
文檔編號A61K36/9062GK101890141SQ200910159348
公開日2010年11月24日 申請日期2009年7月10日 優先權日2009年5月21日
發明者傅旭春, 扈榮, 潘福生, 白海波 申請人:杭州華東醫藥集團生物工程研究所有限公司;浙江大學城市學院