一種六駁鹼的提取方法

2023-04-24 15:26:21

專利名稱：一種六駁鹼的提取方法
技術領域：
本發明屬於天然植物提取領域，涉及一種六駁鹼的提取方法，尤其是一種採用超 臨界流體萃取和氧化鋁柱層析純化六駁鹼的方法。
背景技術：
六駁鹼(Laurotetanine)，又名樟蒼鹼，山雞椒痙攣鹼；是一種阿樸啡生物鹼。分子式=C19H21NO4；分子量327. 38。理化性質淡棕色結晶，mp.(丙酮)，[a]32/D+125° (氯仿)；[a]22/ D+100。(c = 0.12，乙醇)。六駁鹼在樟科木姜子屬植物山雞椒(Litsea cubeba(Lour. )Pers)及山胡椒屬植 物狹葉山胡椒(Lindera angustifolia Cheng)。藥理研究表明其具有抗腫瘤協同作用，能 提高秋水仙鹼的抗有絲分裂的作用；抗血小板聚集作用，在100 μ g/mL時，對ADP誘導的兔 血小板聚集呈強的抑制作用；降壓作用，本品在1.0mg/kg時，對正常血壓的大鼠產生降血 壓作用，平均降低四.0%，並持續2分鐘；鬆弛血管作用。在本品100 μ g/mL時，強力抑制 大鼠由高K+(80mM)和去甲腎上腺素(3μΜ)引起的主動脈收縮。六駁鹼的提取方法有DMasao等人採用乙醇提取，再用3 %醋酸提取，濃縮至一定體積放置一夜過濾， 綠葉用氯仿提取，提取後酸性母液用氫氧化銨中和至析出固體，用氯仿提取出來，提取液再 用2%氫氧化鈉溶液振搖提取，其中的氫氧化鈉提取液加入碳酸銨至析出結晶，再用氯仿提 取，用無水碳酸鉀乾燥得到殘渣，殘渣的丙酮溶液加入苦酮酸鹽得紅色結晶，該方法操作繁 瑣，反覆酸鹼反應、重結晶，過程中目標產物損失大。2)中國專利(申請號200710040166. 6)，用乙醇提取，乙醇提取物用正丁醇萃取， 正丁醇萃取部分用矽膠柱粗分一次，得六駁鹼混合物，再用高速逆流色譜法製備高純度六 駁鹼，該方法雖較方法1)分離條件溫和，但製備量非常小，成本較高。

發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種六駁鹼的提取方法。該工藝能降低生產成 本，提高得率。本發明提取技術方案如下一種六駁鹼的提取方法，其特徵在於包含以下步驟a.超臨界CO2萃取將富含六駁鹼的藥材粉碎40-80目，投入萃取釜中，加溫裝置 正常工作後，打開壓縮泵加壓到22. 5-36. 8MPa，萃取溫度30-60°C，泵入液體(X)2和夾帶劑， 保持上述壓力和溫度0. 5-3小時，分離釜在壓力6. 8-14. 7MPa，溫度40_60°C下減壓解析分 離，收集提取物；b.離子交換將上述提取物加入陽離子交換樹脂，2-8%氨水洗脫，下注液濃縮幹 燥；
c.柱層析純化將上述乾燥物用少量氯仿溶解，加入氧化鋁層析柱，二氯甲烷-甲 醇混合溶劑洗脫，收集六駁鹼高含量洗脫部分，回收試劑至開始析晶，於低溫條件下靜置養 晶，過濾，乾燥即得產品。步驟a.中所述CO2流量控制為沈_33kg/h，夾帶劑為乙醇或甲醇，用量2-5%。步驟b.中所述陽離子交換樹脂為強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂001X8、大孔 弱酸丙烯酸系陽離子交換樹脂D152、弱酸陽離子交換樹脂7M或732。步驟c.中所述氧化鋁為100-200目的鹼性氧化鋁，梯度洗脫為2-4BV甲醇 —4-6BV 二氯甲烷-甲醇(1 1)混合溶液一3-8BV 二氯甲烷-甲醇(1 9)混合溶液。步驟c.中所述養晶條件溫度4-10°C，養晶時間為16-4他。綜上所述，本發明採用超臨界(X)2萃取，提取率高，生產安全；氧化鋁柱層析上樣量 大，洗脫效果好，產品純度高。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求的保護的範圍並不局 限於下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取80目豆豉姜Ikg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至45°C，分離塔溫度調至 55°C，提取壓力28. 3Mpa，解析壓力為7. 5Mpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器後在液 化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將CO2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和壓力， 流速30kg/h，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2. 5小時。停機後放出萃取 物，收集萃取物88g，加入001 X 8強酸性陽離子交換樹脂柱，3%氨水洗脫，收集下注液減壓 濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用3BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲 烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑至 開始析晶，放置在5°C環境中養晶18h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼1. 3g，含量97. 5%。實施例2 取40目狹葉山胡椒根Ikg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至47°C，分離塔溫度調 至59°C，提取壓力26. 4Mpa,解析壓力為9Mpa，CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器後在液 化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將(X)2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和壓力，流 速觀！^/!!，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2小時。停機後放出萃取物， 收集萃取物90g，加入D152大孔弱酸性陽離子交換樹脂柱，2 %氨水洗脫，收集下注液減壓 濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用2BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲 烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑至 開始析晶，放置在4°C環境中養晶20h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼1. 2g，含量98. 7%。實施例3 取60目豆豉姜5kg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至55°C，分離塔溫度調至 600C，提取壓力35. 5Mpa,解析壓力為10. IMpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器後在液 化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將(X)2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和壓力，流 速沈！^/!!，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取1. 5小時。停機後放出萃取物， 收集萃取物450g，加入7M弱酸性陽離子交換樹脂柱，5%氨水洗脫，收集下注液減壓濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用3BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲烷-甲 醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑至開始 析晶，放置在8°C環境中養晶16h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼6. 5g，含量98. 6%。實施例4 取80目狹葉山胡椒根IOkg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至42V，分離塔溫度 調至56°C，提取壓力27. 8Mpa，解析壓力為12. 7Mpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器 後在液化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將CO2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和 壓力，流速32kg/h，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2. 0小時。停機後放出 萃取物，收集萃取物920g，加入732弱酸性陽離子交換樹脂柱，6%氨水洗脫，收集下注液減 壓濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用2BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯 甲烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑 至開始析晶，放置在6°C環境中養晶Mh，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼12g，含量98. 4%。實施例5 取80目狹葉山胡椒根20kg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至45°C，分離塔溫度 調至55°C，提取壓力32. 6Mpa，解析壓力為14. 7Mpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器 後在液化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將CO2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和 壓力，流速33kg/h，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2. 5小時。停機後放出 萃取物，收集萃取物1. cg，加入724弱酸性陽離子交換樹脂柱，8%氨水洗脫，收集下注液減 壓濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用3BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲 烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑至 開始析晶，放置在4°C環境中養晶36h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼25g，含量98. 9%。實施例6:取80目豆豉姜30kg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至45°C，分離塔溫度調至 550C，提取壓力34. 7Mpa,解析壓力為13. 2Mpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器後在液 化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將(X)2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和壓力，流 速^kg/h，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取3小時。停機後放出萃取物，收 集萃取物2. m^g，加入D152大孔弱酸性陽離子交換樹脂柱，3%氨水洗脫，收集下注液減壓 濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用4BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲 烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑 至開始析晶，放置在7°C環境中養晶48h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼32g，含量99. 3%。實施例7 取80目豆豉姜20kg置於萃取釜，密封，將提取溫度調至41°C，分離塔溫度調至 53°C，提取壓力33. 3Mpa，解析壓力為8. 6Mpa, CO2氣體從鋼瓶放出，經過氣體淨化器後在液 化罐中，液化，進入儲罐用高壓計量泵將(X)2送入淨化器，通過預熱器到指定溫度和壓力，流 速31kg/h，打開調壓閥，通過調壓閥控制上述參數，動態提取2小時。停機後放出萃取物， 收集萃取物1. f5kg，加入001X8強酸性陽離子交換樹脂柱，4%氨水洗脫，收集下注液減壓 濃縮成浸膏，加入氯仿溶解，濾液泵入氧化鋁柱，先用3BV甲醇溶液洗脫雜質，再用二氯甲 烷-甲醇(1 1)、二氯甲烷-甲醇(1 9)洗脫，高液相檢測，收集高濃度流分，回收試劑至 開始析晶，放置在10°C環境中養晶30h，濾除結晶物，低溫乾燥得六駁鹼23g，含量99. 1 %。
權利要求
1.一種六駁鹼的提取方法，其特徵在於包含以下步驟a.超臨界CO2萃取將富含六駁鹼的藥材粉碎40-80目，投入萃取釜中，加溫裝置正常 工作後，打開壓縮泵加壓到22. 5-36. 8MPa,萃取溫度30-60°C，泵入液體CO2和夾帶劑，保持 上述壓力和溫度0. 5-3小時，分離釜在壓力6. 8-14. 7MPa，溫度40_60°C下減壓解析分離，收 集提取物；b.離子交換將上述提取物加入陽離子交換樹脂，2-8%氨水洗脫，下注液濃縮乾燥；c.柱層析純化將上述乾燥物用少量氯仿溶解，加入氧化鋁層析柱，二氯甲烷-甲醇混 合溶劑洗脫，收集六駁鹼高含量洗脫部分，回收試劑至開始析晶，於低溫條件下靜置養晶， 過濾，乾燥即得產品。
2.根據權利要求1所述的六駁鹼的提取方法，其特徵在於步驟a.所述CO2流量控制為 ^-33kg/h，夾帶劑為乙醇或甲醇，用量2-5%。
3.根據權利要求1所述的六駁鹼的提取方法，其特徵在於步驟b.所述陽離子交換樹脂 為強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂001X8、大孔弱酸丙烯酸系陽離子交換樹脂D152、弱酸 陽離子交換樹脂7M或732。
4.根據權利要求1所述的六駁鹼的提取方法，其特徵在於步驟c.所述氧化鋁為 100-200目的鹼性氧化鋁，梯度洗脫為2-4BV甲醇一4-6BV 二氯甲烷-甲醇(1 1)混合溶 液一3-8BV 二氯甲烷-甲醇(1 9)混合溶液。
5.根據權利要求1所述的六駁鹼的提取方法，其特徵在於步驟c.所述養晶條件溫度 4-10°C，養晶時間為16-48h。
全文摘要
本發明涉及一種六駁鹼的提取方法，方法是以富含六駁鹼的狹葉山胡椒根或豆豉姜為原料，粉碎40-80目，以CO2作萃取介質，低碳醇作夾帶劑，超臨界提取0.5-3小時，解析物加入陽離子交換樹脂，氨水洗脫，洗脫液上氧化鋁柱層析，二氯甲烷甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集高濃度流分濃縮結晶，即得高純度的六駁鹼晶體。本發明具有提取率高、工藝簡單、成本低廉等優點。
文檔編號C07D221/18GK102040557SQ20101029324
公開日2011年5月4日 申請日期2010年9月27日 優先權日2010年9月27日
發明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司