雌黃納米粒的製備工藝的製作方法

2023-05-23 04:36:21

專利名稱：雌黃納米粒的製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及治療腫瘤的傳統藥物雌黃新劑型，尤其是涉及雌黃納米粒的製備工藝。
背景技術：
雌黃是重要的含砷礦物中藥，也是重要的工業用砷原料，其主要成分為As2S3，不溶於水，也不溶於稀鹽酸。目前，人們都是採用浮選法從含砷礦石中提取較高純度的雌黃，用這種方法製取的雌黃粒徑均較大，無論是在醫學上還是在化工上，應用起來，均有較大的缺陷。有學者報導雌黃在抑制急性早幼粒細胞白血病(acutepromyelocytic leukemia，APL)、乳腺癌、卵巢癌細胞株生長和誘導凋亡過程中發揮重要作用，臨床用於治療-APL患者已取得血液學、遺傳學與分子生物學意義上的完全緩解，但雌黃的臨床應用和基礎研究目前僅局限於顆粒較大的傳統劑型，臨床上存在用藥量大、生物利用度較低、毒副作用強等問題，而且長期或者大劑量使用還會引發多種疾病，因此若能通過改進傳統製劑工藝、採用現代技術製備新劑型含砷中藥來提高其生物利用度、增強療效、減少用藥量、降低其毒副作用將具有重要的臨床意義。
納米技術是近年來迅速發展起來的前沿科技領域，並已逐步應用於醫藥領域，從而誕生了納米藥物這一新概念，為中藥的現代化開闢了新途徑。納米藥物是指粒徑小於500nm的顆粒狀藥物，這種小粒徑的性狀使它具有特殊的表面效應和小尺寸效應。與常規藥物相比，納米藥物顆粒小、表面反應活性高、活性中心多、催化效率高、吸附能力強，因此它具有許多常規藥物不具備的優點。近年來研究表明，運用納米技術所製備的納米粒徑的藥物可有效提高藥物的生物利用度，利於服用吸收，增強療效，在抗腫瘤研究中顯示了充分的優越性。如納米砒霜，納米雄黃，納米石決明等抗腫瘤作用明顯優於傳統劑型。

發明內容
本發明提供一種納米級雌黃的製備工藝，由本發明製得的雌黃納米粒藥物可有效提高藥物的生物利用度，利於服用吸收，用藥量減少，從而有效降低其毒副作用。
本發明採用如下技術方案配製As2O3鹽酸溶液和硫代乙醯胺(TAA)溶液將As2O3和鹽酸按每毫克質量與每毫升體積之比為33∶1的比例混合，60℃恆溫水浴中加熱使其完全溶解，得A液；將硫代乙醯胺和H2O按每毫克質量與每毫升體積之比為37.5∶1的比例充分混合溶解，得B液，在磁力攪拌下，按乙醇與A液體積之比為(19-79)∶1的比例將A液逐滴加入到乙醇中，混合均勻得C液，滴完後繼續攪拌5-10分鐘；在磁力攪拌下，按B液與C液體積之比為1∶(20-80)的比例將B液逐滴加入到C液中，滴完後繼續攪拌5-10分鐘，50℃-60℃水浴至溶液變渾濁，即溶液呈檸檬色，得粒徑為60nm-140nm的雌黃納米粒。
本發明的製備原理方程式為
與現有技術相比，本發明具有如下優點雌黃屬於礦物類中藥，不溶於水，傳統劑型呈方形、多邊形或不規則顆粒狀，平均直徑大於1μm(圖1中A所示)，臨床上存在生物利用度低、用藥量大、毒副作用強等局限性，而由本發明所述工藝製備的雌黃納米粒電鏡下呈圓形或橢圓形顆粒狀，大小較一致，分散性較好，平均直徑分別為60nm、80nm、140nm。電鏡能譜分析，製備的納米粒中只有As、S兩種元素，S、As質量百分含量分別為36.72％、63.28％，接近於As2S3理論值(As60.97％；S39.03％)，原子數百分含量為57.56％、42.44％，摩爾比接近於3∶2，說明所製備的納米粒確為As2S3納米粒。
當物質加工到納米尺寸時，由於量子尺寸效應和表面效應，納米粒子會呈現出新奇的物理、化學和生物學特性。表面效應是指納米粒子表面原子數之比隨粒徑變小而急劇增大後所引起的性質上的變化。粒子的尺寸越小，比表面積越大，表面原子數就越多，表面能亦迅速提高，當物質的粒徑達到納米尺寸時，其表面能很高，所以雌黃納米粒具有很強的化學活性。另外，藥物的吸收度常常受到藥物在吸收部位的溶出速度所支配，納米粒徑的藥物由於尺寸小，比表面積增大，增加了其暴露於介質中的表面積，促進了藥物的溶解，同時也擴大了藥物與吸收部位的有效接觸面積，從而提高了藥物的吸收利用度。
納米藥物還具有特殊的藥理效應研究表明，納米粒對腫瘤細胞具有特殊的親合力，易吸附於瘤細胞表面；無機納米粒子的強大離子交換能力和強極化力可與腫瘤細胞表面發生作用，或進入癌細胞內，與其中某些組分發生作用，從而產生抑制癌細胞作用；同時，由於納米粒的尺寸非常小，所以很容易被癌細胞通過胞飲和吞噬所攝取，甚至可直接進入癌細胞內發揮藥效，從而增強As2S3的藥效。
本實驗室用本發明提供的方案製備的雌黃納米粒對慢性粒細胞白血病(CML)急性期K562細胞和人肝癌SMMC-7721細胞進行了體外幹預實驗，結果顯示雌黃納米粒對這兩種惡性腫瘤細胞均產生明顯的細胞毒性作用，其效果明顯優於相同濃度傳統劑型的雌黃，等效劑量遠遠低於傳統劑型的雌黃。8μmol/LAs2S3作用於K562細胞72小時，細胞存活率為52.3％，而同濃度的As2S3納米粒組同條件下細胞存活率僅為3.2％(P＜0.01)。As2S3處理K562細胞48小時的IC50為13.0μmol/L，而As2S3納米粒處理48小時的IC50隻有1.27μmol/L。8μmol/LAs2S3作用於SMMC-7721細胞72小時細胞存活率為67.3％，而同濃度的As2S3納米粒組同條件下細胞存活率僅為26.9％(P＜0.001)。As2S3處理SMMC-7721細胞72小時的IC50為17.1μmol/L，而As2S3納米粒處理72小時的IC50僅為3.25μmol/L。因此，雌黃納米粒有望成為砷類中藥治療腫瘤的新劑型，為臨床應用開闢了新途徑，同時，本發明也為傳統中藥在抗腫瘤納米醫藥的發展上提供了新的思路和方法。


圖1是傳統劑型的雌黃電鏡照片。
圖2是雌黃納米粒電鏡照片2，納米粒直徑約為60nm。
圖3是雌黃納米粒電鏡照片3，納米粒直徑約為80nm。
圖4是雌黃納米粒電鏡照片4，納米粒直徑約為140nm。
圖5是雌黃納米粒在掃描電鏡圖譜分析。
圖6是雌黃和雌黃納米粒處理後K562細胞存活率比較(A為4μmol/l；B為8μmol/l；C為16μmol/l)。
圖7是雌黃和雌黃納米粒處理後SMMC-7721細胞存活率比較(A為4μmol/l；B為8μmol/l；C為16μmol/l)。
具體實施例方式
配製As2O3鹽酸溶液和硫代乙醯胺(TAA)溶液將As2O3和鹽酸按每毫克質量與每毫升體積之比為33∶1的比例混合，60℃恆溫水浴中加熱使其完全溶解，得A液；將硫代乙醯胺和H2O按每毫克質量與每毫升體積之比為37.5∶1的比例充分混合溶解，得B液，在磁力攪拌下，按乙醇與A液體積之比為(19-79)∶1的比例將A液逐滴加入到乙醇中，混合均勻得C液，滴完後繼續攪拌5-10分鐘；在磁力攪拌下，按B液與C液體積之比為1∶(20-80)的比例將B液逐滴加入到C液中，滴完後繼續攪拌5-10分鐘，50℃-60℃水浴至溶液變渾濁，即溶液呈檸檬黃色，得粒徑為60nm-140nm的雌黃納米粒。在本實施例中，乙醇與A液體積之比可選擇為20∶1，40∶1，60∶1，80∶1；B液與C液體積之比可選擇為1∶20，1∶40，1∶60，1∶80。在本實施例中，整個過程是在無菌條件下進行的，當溶液變混濁呈檸檬色後，將溶液放置12小時，待其溶液穩定後，將溶液滴至帶膜的銅網上，過濾出的粒子在電鏡下觀察，可以確定由本發明製得的雌黃納米粒的粒徑為60nm-140nm。
權利要求
1.一種作為治療腫瘤藥物的雌黃納米粒的製備工藝，其特徵在於配製As2O3鹽酸溶液和硫代乙醯胺(TAA)溶液將As2O3和鹽酸按每毫克質量與每毫升體積之比為33∶1的比例混合，60℃恆溫水浴中加熱使其完全溶解，得A液；將硫代乙醯胺和H2O按每毫克質量與每毫升體積之比為37.5∶1的比例充分混合溶解，得B液，在磁力攪拌下，按乙醇與A液體積之比為(19-79)∶1的比例將A液逐滴加入到乙醇中，混合均勻得C液，滴完後繼續攪拌5-10分鐘；在磁力攪拌下，按B液與C液體積之比為1∶(20-80)的比例將B液逐滴加入到C液中，滴完後繼續攪拌5-10分鐘，50℃-60℃水浴至溶液變渾濁，即溶液呈檸檬色，得粒徑為60nm-140nm的雌黃納米粒。
全文摘要
本發明提供了一種作為治療腫瘤藥物的雌黃納米粒的製備工藝，即以As
文檔編號A61K9/14GK1823841SQ20061003762
公開日2006年8月30日 申請日期2006年1月6日 優先權日2006年1月6日
發明者張東生, 林梅, 王子妤 申請人:東南大學