黃精提取物及其製備方法與應用的製作方法
2023-05-13 04:44:11 1
黃精提取物及其製備方法與應用的製作方法
【專利摘要】本發明涉及黃精提取物與提取物及其製備方法與應用，所述黃精提取物是由下述方法製備得到的：黃精乙醇熱提後，將提取液減壓回流得到總浸膏；加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得乙酸乙酯萃取部位；所述黃精提取物具有AGEs抑制作用，可進一步將其應用於抗糖尿病及其併發症藥物的製備，具有重要的臨床應用價值。
【專利說明】黃精提取物及其製備方法與應用
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種植物提取物及其製備方法與應用，尤其是黃精提取物與提取物及其製備方法與應用。
【背景技術】
[0002]根據2013年9月4日《美國醫學會雜誌》報告中國糖尿病病人數量超過I億，屬於疾病譜中的重大疾病之一。糖尿病血管併發症是導致糖尿病人截肢、失明、死亡等病症的主要原因，而晚期糖基化終產物(Advanced Glycosylat1n End-products, AGEs)是糖尿病血管併發症重要病因之一。AGEs是由蛋白質與還原糖經過一系列反應形成的不可逆聚合物，能誘發血管內皮功能紊亂、腎小球基底膜增厚等病變從而導致糖尿病併發症發生。因此，AGEs抑制劑對預防和治療糖尿病併發症具有重要意義，研發AGEs抑制劑(AGESI)的常用方法是體外篩選體系。
[0003]AGEs的檢測方法分為色譜分析法、酶聯免疫法、螢光光譜法、免疫組織化學法、放射免疫分析法及放射受體分析法等。色譜分析法其標準物很難找到；酶聯免疫法及免疫組化法成本過高，多用於動物實驗；放射免疫法及放射受體分析法對條件要求苛刻，使用受到限制。相比而言，螢光光譜法簡便易行，實用性強。因此本實驗採用螢光光譜法進行AGEs生成抑制率的測定。此方法為篩選AGEs形成抑制劑常用方法，且體外實驗與體內實驗結果相關。
[0004]黃精為百合科黃精屬植物黃精(Polygonatum sibiricum Red.)的乾燥根莖,為上好的藥食兩用中藥。中醫理論認為黃精具有滋陰補氣功效，常用於治療內熱消渴。現代醫學臨床中常用於糖尿病及其併發症治療。前期報導發現黃精多糖和黃精皂苷均具有降低血糖效果，且黃精多糖能夠降低AGEs受體(RAGE)基因的表達，由此提示黃精治療糖尿病及其併發症可能通過多種途徑實現，包括降糖和抑制AGEs機制，但黃精及其組分對抑制AGEs的生成至今尚未見報導。
【發明內容】
[0005]本發明所要解決的技術問題在於提供一種黃精提取物。
[0006]本發明所要解決的另一技術問題在於提供上述黃精提取物的製備方法。
[0007]本發明所要解決的另一技術問題在於提供上述黃精提取物的應用。
[0008]為解決上述技術問題，本發明的技術方案是:
[0009]一種黃精提取物，是由下述方法製備得到的:黃精乙醇熱提後，將提取液減壓回流得到總浸膏；加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得乙酸乙酯萃取部位。
[0010]優選的，上述黃精提取物，其物理化學和波譜性質:深棕色粘稠狀浸膏，1H-NMR譜:δ 1.23、0.85 (飽和脂肪酸的末端甲基和長鏈亞甲基信號)，δ 1.02~1.16 (留體皂苷類成分角甲基信號區)，δ3.25~4.37(糖區)，δ 6.03~8.01、8.38~12.19 (芳香質子和酚羥基質子信號區)，δ 9.54、7.49、6.60、4.50 (5-羥甲基糠醛特徵信號峰)。
[0011]優選的，上述黃精提取物，1H-NMR譜的信號峰主要分布在δ 0.6~13之間，主要分為飽和脂肪區δ 0.6~3.0、糖區δ 3.0~5.5和芳香區δ 5.5~10 ;其中，信號較強的是糖區和飽和脂肪區；在δ 9.55和δ 12.18處有較明顯的醛基氫和羧基氫信號；δ 9.54,7.49、
6.60和4.50為5-羥甲基糠醛的特徵信號峰，提示提取物中主要含5-羥甲基糠醛、留體皂苷和酚酸類(木脂素等)成分。
[0012]上述黃精提取物的製備方法，具體步驟如下:
[0013](I)黃精乙醇熱提後，將提取液減壓回流得到總浸膏；
[0014](2)加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，取乙酸乙酯萃取部位，即得。
[0015]優選的，上述黃精提取物的製備方法，具體步驟如下:
[0016](I)黃精用8倍量70%乙醇熱提3次，每次2h，將提取液減壓回流得到總浸膏；
[0017](2)加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，減壓回收溶劑，取乙酸乙酯萃取部位，即得。
[0018]上述黃精提取物在製備AGEs抑制劑藥物方面的應用。
[0019]優選的，上述黃精提取物在製備抗糖尿病及其併發症藥物方面的應用。
[0020]具有上述提取物的藥物組合物，包含治療和/或預防有效量的提取物以及任選的藥學可接受的賦形劑。
[0021]上述藥學可接受的賦形劑可以是藥物製劑領域中任何常規的賦形劑，特定賦形劑的選擇將取決於用於治療特定患者的給藥方式或疾病類型和狀態，用於特定給藥模式的合適藥物組合物的製備方法完全在藥物領域技術人員的知識範圍內。例如，可以作為藥學可接受的賦形劑包括藥學領域常規的稀釋劑、載體、填充劑、粘合劑、溼潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體和潤滑劑等，必要時，還可以在藥物組合物中加入香味劑、防腐劑和甜味劑等。
[0022]上述組合物可以製成片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜劑、注射乳劑、注射用無菌粉針等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學領域的常規方法製備。
[0023]本發明的有益效果是:
[0024]上述黃精提取物由植物黃精乙醇提取、乙酸乙酯萃取而得，具有AGEs抑制作用，可進一步將其應用於抗糖尿病及其併發症藥物的製備，具有重要的臨床應用價值。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0025]圖1是活性組分I的1H-NMR圖譜；
[0026]圖2是活性組分2的IH-NMR圖譜；
[0027] 圖3是黃精不同樣品在不同濃度下對AGEs形成的抑制率，其中樣品I為活性組分1，樣品3為活性組分2。
【具體實施方式】
[0028]為了使本領域的技術人員更好的理解本發明的技術方案，下面結合【具體實施方式】對本發明所述技術方案作進一步的詳細說明。
[0029]實施例1
[0030]活性組分的製備
[0031]實驗儀器:BRUKER AV III核磁共振波譜儀(400MHz，瑞士 fcuker公司)，METTLERTOLEDO萬分之一天平(梅特勒-託利多儀器有限公司)，SHZ-D (III)循環水式多用真空泵，DLSB-5/25型低溫冷卻液循環泵，RE-52A旋轉蒸發儀(鞏義市英峪予華儀器廠)。
[0032]實驗材料:反相C18柱層析矽膠0DS-A-HG(日本YMC公司)，DlOl大孔吸附樹脂(天津市海光化工有限公司)，所用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇均為分析純。本研究所用藥材購自河北安國藥材市場，經天津中醫藥大學中藥學院李天祥副教授鑑定為百合科黃精屬植物黃精(Polygonatum sibiricum Red.)的乾燥根莖,標本存放於天津中醫藥大學中藥新藥研發中心中藥化學與分析部(N0.B20704484)。
[0033]黃精19kg，8倍量70%乙醇熱提3次(每次2h)，合併提取液，減壓回流得到總浸膏。加適量蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，減壓回收溶劑，得石油醚萃取部位65g、乙酸乙酯萃取部位155g(樣品1，活性組分I)、正丁醇萃取部位968g(樣品2)。萃取後水層經70%乙醇醇沉，所得上清液濃縮再通過DlOl大孔吸附樹脂柱乙醇-水洗脫，經HPLC和IH-NMR分析檢識合併得醇洗脫部位(樣品3，活性組分2)。
[0034]取活性組分樣品少許，溶解於DMS0-d6後，轉移至7mm核磁管中加封，進行1H-NMR(400.13MHz)測試。測試採用德國Bruker公司的Topspin2.0軟體系統進行操控，並在所有樣品測試中使用統一的試驗參數。以DMS0-d6為內標(δ 2.50)，試驗溫度為299.1K ；主要參數:譜寬(Sff H) 8223.7Hz，掃描次數(NS) 16次，延遲時間(Dl) ls，接受增益(RG) 57。核磁譜圖應用MestReNova軟體進行分段積分處理。
[0035]如圖1可見，活性組分1(樣品I)中成分比較複雜，信號峰主要分布在δθ.6~13之間(圖1Q)。根據化合物的特徵信號峰，主要可以分為飽和脂肪區(δ 0.6~3.0)、糖區(δ 3.0~5.5)和芳香區(δ 5.5~10)。其中，信號較強的是糖區和脂肪區(圖la，圖lb，圖lc)，推測其主要來源於樣品中的留體皂苷以及少量脂肪酸類成分；芳香區的信號則相對較弱，但放大之後其譜線清晰可辨(圖1d)，推測其主要來源於木脂素等酚酸類成分。在δ 9.55和δ 12.18處出現了較明顯的醛基氫和羧基氫信號；δ 9.54,7.49,6.60和4.50 (圖1e)通過與文獻比對推測為5-羥甲基糠醛的特徵信號峰見表1。
[0036]表1活性組分I核磁共振氫譜特徵
[0037]
【權利要求】
1.一種黃精提取物，其特徵在於:是由下述方法製備得到的:黃精乙醇熱提後，將提取液減壓回流得到總浸膏；加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得乙酸乙酯萃取部位。
2.根據權利要求1所述的黃精提取物，其特徵在於:其物理化學和波譜性質:深棕色粘稠狀浸膏，1H-NMR譜:δ 1.23、0.85(飽和脂肪酸的末端甲基和長鏈亞甲基信號)，δ 1.02~.1.16 (甾體皂苷類成分角甲基信號區)，δ 3.25~4.37(糖區)，δ 6.03~8.01、8.38~.12.19 (芳香質子和酚羥基質子信號區)，δ 9.54,7.49,6.60,4.50 (5-羥甲基糠醛特徵信號峰)。
3.根據權利要求1所述的黃精提取物，其特徵在於:其物理化學和波譜性質:深棕色粘稠狀浸膏，1H-NMR譜的信號峰主要分布在δ 0.6~13之間，主要分為飽和脂肪區δ 0.6~.3.0、糖區δ 3.0~5.5和芳香區δ 5.5~10;其中，信號較強的是糖區和飽和脂肪區；在δ9.55和δ 12.18處有較明顯的醛基氫和羧基氫信號；δ 9.54、7.49、6.60和4.50為5-羥甲基糠醛的特徵信號峰，提示提取物中主要含5-羥甲基糠醛、留體皂苷和酚酸類(木脂素等)成分。
4.權利要求1-3之一所述的黃精提取物的製備方法，其特徵在於:具體步驟如下: (1)黃精乙醇熱提後，將提取液減壓回流得到總浸膏； (2)加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，取乙酸乙酯萃取部位，即得。
5.根據權利要求4所述的黃精提取物的製備方法，其特徵在於:具體步驟如下: (1)黃精用8倍量70%乙醇熱提3次，每次2h，將提取液減壓回流得到總浸膏； (2)加蒸餾水混懸，依次用等體積石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，減壓回收溶劑，取乙酸乙酯萃取部位，即得。
6.權利要求1-3之一所述的黃精提取物在製備AGEs抑制劑藥物方面的應用。
7.權利要求6所述的黃精提取物在製備抗糖尿病及其併發症藥物方面的應用。
8.具有權利要求1-3之一所述的提取物的藥物組合物，其特徵在於:包含治療和/或預防有效量的提取物以及任選的藥學可接受的賦形劑。
【文檔編號】A61K36/8969GK104069348SQ201410306492
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月30日 優先權日:2014年6月30日
【發明者】吳紅華, 徐硯通, 劉東巖, 汪娟, 朱彥, 張鵬, 董鵬志, 劉二偉 申請人:天津中醫藥大學