一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白及生產工藝的製作方法
2023-05-12 15:12:56 4
專利名稱：一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白及生產工藝的製作方法
技術領域：
本發明公開了一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白及生產工藝，涉及動物用生物藥品生產技術領域。
在毛皮經濟動物中，主要的病毒性傳染病是犬瘟熱、細小病毒性腸炎、狂犬病、犬肝炎(狐狸腦炎)、犬喉氣管炎、犬副流感、偽狂犬病和冠狀病毒性腸炎等，特別是犬溫熱和細小病毒腸炎的發病率和死亡率都很高，對於毛皮經濟動物的養殖造成很大損失；常規的辦法是進行病毒疫苗的免疫預防接種，但現有的疫苗保護率都不高，只能達到80％左右，免疫效果不理想。病毒性疾病與其它的傳染病不一樣，由於病毒侵襲和生長增殖的特殊性，即必需在活著的靶細胞中增殖，所以到現在為止，還沒有找到一種能在體內細胞內特異性殺滅病毒的藥品。
本發明提供一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白及生產工藝，利用馬、驢和騾來生產犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白，目的是解決毛皮經濟動物病毒性傳染病的緊急預防和緊急治療的問題。
本發明的技術解決方案如下將犬、狐、貂傳染病毒(至少一種)的弱毒培養液濃縮，病毒的TCID50效價在105.0以上，經差異離心法把病毒提純濃縮50～120倍，加福氏完全佐劑，按最佳途徑和計量經3次對馬(或驢、騾)進行免疫後，待抗體效價達最高峰值時採血，分離血清，用辛酸法分離提取純化抗病毒的特異性免疫球蛋白，即IgG，含量20mg/ml(±2％)。
本發明的積極效果在於通過馬、驢、騾免疫，防止了同種毛皮經濟動物之間某些其它病毒性傳染病的人為傳染，安全性好，用馬生產的犬、狐和貂用的抗病毒免疫球蛋白的中和效價為100倍稀釋的免疫球蛋白的中和效價為103.4(即2512倍)，200倍稀釋的免疫球蛋白的中和效價為1023(即199倍)。通過血清提取免疫球蛋白，呈無色透明液體，既可以冰凍保存(-20℃以上)，也可以冷藏保存(+4℃～+12℃)儲運方便。
在臨床試用效果較好，本品在小動物門診進行了緊急預防和緊急治療試驗，同群犬中5隻發生了腹瀉，經臨床診斷和電鏡檢測，均確診為細小病毒性腸炎，對其餘未發病的54隻幼犬用抗病毒二聯免疫球蛋白(抗犬瘟熱和抗細小病毒)進行了緊急預防注射，經觀察未再發生腸炎。對32例犬瘟熱進行緊急治療，治癒29例，治癒率達90.6％，對43例細小病毒腸炎病犬進行了緊急治療，治癒40例，治癒率達93％。
下面結合實施例進一步說明本發明實施例1將犬瘟熱弱毒培養液(TCID50效價在105.625以上)和細小病毒弱毒培養液(TCID50效價在105.0以上)用冷凍超速離心機差速離心法，分別將兩種病毒提純濃縮100倍。用兩種病毒的等量混合液與福氏完全佐劑等量製成免疫試劑，給健康馬免疫接種。第一次基礎免疫，皮內接種，8ml/匹，分8點注射；第二次加強免疫，淋巴結接種，8ml/匹，分8點注射；第三次高度免疫，靜脈緩慢注射，3ml/匹，兩次間隔一周，最後一次免疫後14天左右採血檢測抗體效價，待瓊脂擴散效價達到32倍以上時，在無菌條件下放血並分離血清。在血清中加入倍量的pH4.0的0.06M/L的醋酸鹽緩衝液，室溫下強力攪拌，同時按血清量計算，以7.5％的比例滴加化學純級的辛酸，4000轉/分離心30分鐘，過濾取上清液裝入透析袋，在pH7.4的0.015M/L的磷酸鹽緩衝液中透析48小時，再用除菌濾器抽濾，取樣檢測瓊脂擴散效價在16倍以上時，蛋白含量在20mg/ml(±2％)時，在無菌室分裝，即得本發明產品。
實施例2將犬瘟熱弱毒培養液(TCID50效價在105.625以上)、細小病毒腸炎弱毒培養液(TCID50效價在105.0以上)、犬肝炎(狐狸腦炎)腺病毒弱毒培養液(TCID50效價在104.5以上)、犬副流感病毒弱毒培養液(TCID50效價在104.5以上)、狂犬病毒弱毒培養液(LD50效價在105.0以上)和偽狂犬病毒弱毒培養液(TCID50效價在105.0以上)六種弱毒培養液，提純濃縮，對驢或騾進行免疫，按實施例1中所述得方法規程進行，即得本發明產品。
實施例3根據實際需要可增減弱毒培養液的種類，按實施例1中敘述的方法規程進行，就可得到相應的犬狐貂用的抗病毒免疫球蛋白。
權利要求
1.一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白，其特徵在於用馬或驢、騾經免疫生產犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白。
2.一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白的生產工藝，包括將犬、狐、貂傳染病毒的弱毒培養液濃縮，加福氏完全佐劑，對馬或驢或騾進行免疫，待血清中球蛋白的瓊脂擴散效價達到最高峰時採血，分離血漿，用辛酸法分離提取免疫球蛋白。
3.根據權利要求2所述的生產工藝，其特徵在於免疫馬或驢或騾時採取皮內、穴位、靜脈分三次接種，每兩次間隔一周。
4.根據權利要求2所述的生產工藝，其特徵在於犬、狐、貂傳染病毒的弱毒培養液濃縮為50～120倍。
5.根據權利要求2所述的生產工藝，其特徵在於犬、狐、貂傳染病毒的弱毒培養液包括犬瘟熱、細小病毒性腸炎、狂犬病、犬肝炎(狐狸腦炎)、犬喉氣管炎、犬副流感、偽狂犬病和冠狀病毒性腸炎中的一種或幾種混合物。
全文摘要
本發明公開一種犬、狐、貂用抗病毒免疫球蛋白及生產工藝,將犬、狐、貂傳染病毒的弱毒培養液濃縮,加福氏完全佐劑,對馬或驢、騾進行免疫,待血清中球蛋白的瓊脂擴散效價達到最高峰時採血,分離血漿,用辛酸法分離提取免疫球蛋白。通過馬、驢、騾免疫,防止了同種毛皮經濟動物之間某些其它病毒性傳染病的人為傳染。安全性好,效價高;通過血清提取免疫球蛋白,呈無色透明液體,既可以冰凍保存(－20℃以上),也可以冷藏保存(+4℃～+12℃)儲運方便。
文檔編號A61K39/395GK1296851SQ0012329
公開日2001年5月30日 申請日期2000年11月18日 優先權日2000年11月18日
發明者楊盛華, 李潤萍, 胡奎 申請人:楊盛華, 李潤萍, 胡奎