基因表達調節失常矯正劑的製作方法

2023-05-12 07:47:36

專利名稱：基因表達調節失常矯正劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及來自天然物質的生理活性物質的利用，以及以該生理活性物質作為有效成分的藥物。
白介素中的白介素6(IL-6)作為誘導B細胞的最終分化的分化因子，其cDNA已被克隆。此後逐漸闡明了IL-6不僅與免疫應答有關，而且與造血系統、神經系統的細胞分化和急性反應也有關。另外IL-6與各種免疫異常和炎性疾病、淋巴系腫瘤的發生也有密切關係。
IL-6誘導B細胞產生抗體，雖然IL-6可誘導產生IgM、IgG、IgA各類免疫球蛋白，但與白介素4不同，它不參與類別轉換。IL-6也起著B細胞和漿細胞增殖因子的增殖因子作用。再有，IL-6與T細胞系有關，使T細胞增殖。另外IL-6也與造血系統有關，與白介素3協調作用，通過縮短G0期使造血幹細胞增殖。另外促進巨核細胞成熟、誘導血小板增加。
另外IL-6也參與生物體對細菌或病毒感染、惡性腫瘤等作出迅速反應的的急性反應。IL-6也與神經系統有關，在神經胚細胞瘤和星形母細胞瘤等從神經系統分泌、神經系統的分化誘導中也有作用[用語文獻「細胞因子和增殖因子」、「實驗醫學」別冊、p28-29、(1995年)、羊土公司]。
另外已知白介素10(IL-10)是抑制範圍廣泛的細胞因子合成的一類細胞因子，是由II型輔助細胞產生的，通過抑制抗原提示細胞間接地抑制由Th1細胞產生的細胞因子。因此，如果IL-10的生產過量，由於抑制幹擾素γ等的產生，會使免疫力下降。
另外，作為具有白血球趨向化因子群的趨化因子與過敏性炎症和自我免疫疾病有密切關係。趨化因子按照它們的胺基酸序列中的半胱氨酸的位置大致可分為CXC趨化因子和CC趨化因子2個家族。作為前者如巨噬細胞炎症蛋白2-β(MIP2β)、巨噬細胞炎症蛋白2-α(MIP2α)、生長調節蛋白1(Gro1)等，作為後者如巨噬細胞炎症蛋白1-α(MIP1α)、RANTES[RANTES(調節激活、正常T細胞表達和分泌)]、巨噬細胞炎症蛋白1-β(MIP1β)、肝和激活作用調節性趨化因子(LARC)、由巨噬細胞衍生的趨化因子(MDC)等。
另外已知腫瘤壞死因子α(TNFα)直接引起慢性風溼性關節炎等自我免疫疾病和炎性疾病中炎症。
由此看來，細胞因子本來對生物體的恆定性的維持很重要，但其生產過度時，也會變成引起與免疫、炎症反應有關的各種疾病的發病原因。
另外除了上述那樣細胞因子的作用以外，已知花生四烯酸代謝也與生物體內組織的炎症和疼痛的起因有密切關係，所以人們認為與花生四烯酸代謝有關的前列腺素G/H合成酶-2(COX2)等作用的調節在與上述疾病的關係中也很重要。
另外，活性氧也與炎症疾病有很大關係。活性氧大致分為自由基和非自由基活性氧。在自由基系統活性氧中包括羥基自由基、羥過氧自由基、過氧自由基、烷氧自由基、二氧化氮、一氧化氮、チイル基、超氧化物。非自由基系統活性氧中包括單線態氧、過氧化氫、脂質氫過氧化物、次亞氯酸、臭氧、過氧亞硝酸。無論哪種活性氧都與多種疾病，即各種炎性疾病、糖尿病、癌、動脈硬化、神經疾病、局部缺血再灌注障礙等有關。
在生物體內不斷地通過一些途徑生成低濃度的活性氧。這些活性氧有從生理上線粒體等電子傳遞系統漏出的超氧化物和過氧化氫、通過銅和鐵等過渡金屬催化的羥自由基、通過嗜中性細胞和單核細胞等生成的為防止感染的次亞氯酸、由於精氨酸分解生成的NO等，無論哪一種都是不可避免的。對於這些活性氧的生成，生物體具有作為消除活性氧系統的酶、低分子混合物，維持生成和消除的平衡。然而有時不知道生成系統由於什麼原因被活化，而相反活性氧的消除系統沒有被活化，當活性氧生成系統相對於消除系統佔優勢時，生物體就要受到氧化的傷害。這樣的狀態稱之為氧化應激。而且不僅當生物體內平衡瓦解時，而且由於大氣和食品等生物體外的原因，生物體經常被暴露於氧化應激中，即便在日常生活中也不能避免氧化應激。
血紅素加氧酶(HO)是與膽紅素的產生有關的生物體內的酶。已知在HO中存在著血紅素加氧酶-1(HO1)和血紅素加氧酶-2(HO2)兩種同功酶。而在上述膽紅素中存在著作為脂肪酸抗氧化作用、脂質自由基淨化作用、伴隨著嗜中性細胞吞噬作用大量產生的氧自由基引起的磷脂、中性脂肪、膽固醇的過氧化氫產生的抑制作用、與動脈硬化發病有密切關係的LDL(Low density lipoprotein)生成的抑制作用、單線態氧的淨化作用等抗氧化物質的活性，作為內源性抗氧化物質在生物體內起著重要的作用。各種自由基不僅作用於脂質，也作用於蛋白質、核酸等各種各樣的生物體物質，成了引起慢性疾病、癌症的主要原因，但膽紅素可以使這樣的各種自由基減少[「卟啉-血紅素的生命科學-遺傳病和癌症工學應用的展開-」、「現代醫學」增刊27、(1995)、東京化學同人]。就是說，HO活性低、HO基因的表達低下妨礙對生物體的氧化應激的適應。因此，可以認為HO的產生誘導對生物體內的抗氧化作用、抗炎症作用有貢獻。
另外有報導說作為細胞因子一種的上述RANTES增強嗜酸性細胞的活性氧產生，可以期待通過抑制RANTES產生，會收到與HO的生成誘導同樣的效果。
已經證實在處於應激負荷狀態和向疾病轉移的狀態中，生物體內恆定性維持功能發生了變化。雖然在生物體內的恆定性維持中涉及到各種作用、上述那樣各種生物體內分子的複合作用，但從根本上講在生物體內存在著基因表達狀態的惡性變化(表達調節失常)。然而在諸如受到應激的狀態和在避免應激狀態的過程中在基因水平由調節引起的基因表達的調節的詳細情況還不清楚，因此有關通過基因水平的調節避免基因表達調節失常的手段還沒有發現。
本發明的目的在於提供對幹擾素和生物體內酶等各種生物體內因子的產生進行調節、對生物體恆定性的維持和恢復有用的藥物組合物。
如果對本發明進行概述的話，本發明的第一個發明涉及到基因表達調節失常矯正劑，其特徵是含有從下式(I)、(II)表示的化合物以及它們的鹽類選擇出至少一種化合物作為有效成分。 (式中，X和Y為H或CH2OH、而當X為CH2OH時，Y為H，當X為H時，Y為CH2OH) (式中，R為從含有SH基化合物除去一個SH的殘基)在本發明的第一個發明中，作為通過該基因表達調節失常矯正劑可以矯正表達調節失常的基因有諸如從以下31種基因群中選擇出來的一種以上的基因，這31種基因是白介素-6[interleukin-6(Genbank Accession號M14584)]基因、白介素-10[interleukin-10(Genbank Accession號M57627)]基因、血紅素加氧酶-1[hemeoxygenase-1(Genbank Accession號NM002133)]基因、前列腺素G/H合成酶-2[prostaglandin G/H synthase-2(GenbankAccession號AL033533)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-1-α[macrophage inflammatory protein-1-α(Genbank Accession號M23452)]基因、RANTES[RANTES(Genbank Accession號NM002985)]基因、白介素-1α[interleukin-1α(Genbank Accession號X02851)]基因、白介素-1β[interleukin-1β(Genbank Accession號K02770)]基因、腫瘤壞死因子α[tumor necrosis factorα(Genbank Accession號M10988)]基因、白介素-7受體[interleukin-7 receptor(Genbank Accession號M29696)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-1-β[macrophage inflammatory protein-1-β(Genbank Accession號J04130)]基因、肝和激活作用調節性趨化因子[liver and activation-regulatedchemokine(Genbank Accession號D86955)]基因、巨噬細胞衍生的趨化因子[macrophage-derived chemokine(GenbankAccession號U83171)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-2-β[macrophage inflammatory protein-2-β(Genbank Accession號M36821)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-2-α[macrophage inflammatory protein-2-α(Genbank Accession號M36820)]基因、生長調節蛋白-1[growth regulated protein-1(Genbank Accession號J03561)]基因、基質金屬蛋白酶-9[matrix metalloproteinase-9(GenbankAccession號J05070)]基因、移動抑制因子相關蛋白-8[migration inhibitory factor-relatedprotein-8(Genbank Accession號X06234)]基因、溶菌酶[lyzozyme(Genbank Accession號M21119)]基因、GABA(A)受體相關蛋白[GABA(A)receptor-associatedprotein(Genbank Accession號NM007278)]基因、幹擾素誘導17-kDa/15-kDa蛋白[interferon-induced 17-kDa/15-kDa protein(Genbank Accession號M13755)]基因、幹擾素誘導蛋白p78[interferon-inducible protein p78(GenbankAccession號M33882)]基因、SCO同系物-2[SCO(cytochrome oxidase deficient，yeast)homolog-2(Genbank Accession號AL021683)]基因、轉酮酶[transketolase(Genbank Accession號L12711)]基因、腺苷A2a受體[adenosine A2a receptor(Genbank Accession號S46950)]基因、CD37抗原[CD37 antigen(Genbank Accession號X14046)]基因、備解素P因子[properdin P factor，complement(Genbank Accession號M83652)]基因、G-蛋白信號傳遞的調節蛋白-2[regulator of G-proteinsignaling-2(Genbank Accession號L13463)]基因、Nef-相關因子-1[Nef-associated factor-1(Genbank Accession號AJ011896)]基因、骨髓白血病細胞分化蛋白-1[myeloid leukemia celldifferentiation protein-1(Genbank Accession號L08246)]基因、和信號肽酶複合物[signal peptidase complex(18kDa)(GenbankAccession號AF061737)]基因。
本發明的第二個發明涉及到對從上述31種基因中選擇出1個以上的基因的表達調節失常需要矯正的疾病的治療藥或預防藥，其特徵是含有從式(I)表示的化合物、式(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇的化合物作為有效成分。有關的治療藥或預防藥特別適用於需要矯正表達調節失常的疾病是炎性疾病的場合。而作為治療藥或預防藥的一種模式如白介素-6產生抑制劑、白介素-10產生抑制劑、血紅素加氧酶產生抑制劑、前列腺素G/H合成酶-2產生抑制劑、巨噬細胞炎症蛋白-1-α產生抑制劑、RANTES產生抑制劑、腫瘤壞死因子α產生抑制劑等，特別是這裡具體例舉的各種生物體內因子產生抑制劑或產生誘導劑更適用。
而在本說明書中，「誘導」的意思中包含與投藥前相比，投藥使生物體內的目的物質的量增加的「增強」意思。
本發明的第3個發明涉及到基因表達調節失常的矯正方法，其特徵是將從式(I)表示的化合物、式(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇出來的至少一種化合物投藥給哺乳動物。利用本發明的第3個發明作為可以對基因表達調節失常進行矯正的基因如至少從上述31種基因群中選擇出來的一種以上的基因。附圖的簡單說明第1圖是表示在各種培養條件下對細胞進行培養時培養上清中的IL-6的濃度的圖。
第2圖是表示在各種培養條件下對細胞進行培養時培養上清中的IL-10的濃度的圖。
第3圖是表示來自COX2 mRNA的cDNA經PCR擴增結果的瓊脂糖凝膠電泳圖。
第4圖是表示來自MIP1α mRNA的cDNA經PCR擴增結果的瓊脂糖凝膠電泳圖。
第5圖是表示來自RANTEs mRNA的cDNA經PCR擴增結果的瓊脂糖凝膠電泳圖。
第6圖是表示在添加和不添加DGE的各種培養條件下對細胞進行培養時培養上清中的TNFα的濃度的圖。
第7圖是表示在添加和不添加瓊脂二糖的各種培養條件下對細胞進行培養時培養上清中的TNFα的濃度的圖。實施發明的最好方式在本發明中作為有效成分使用從上述式(I)表示的化合物、式(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇出來的至少一種化合物。另外象下面敘述的那樣作為前藥可以發揮作用的該化合物的衍生物也可以使用。因此本發明中涉及到的有效成分中只要可以獲得本發明所期望的效果，也包括上述式(I)和式(II)的衍生物和它們的鹽。
本發明使用的用式(I)表示的化合物可以通過將還原末端含有3，6-脫水半乳糖的化合物，例如瓊脂二糖、κ-角叉藻二糖等維持在中性到鹼性的條件下製備。另外也可以將結構中含有3，6-脫水半乳糖的化合物進行不足pH7的酸水解和/或酶分解，然後將得到的酸分解物和/或酶分解物維持在中性到鹼性的條件下製備。作為結構中含有3，6-脫水半乳糖的化合物如瓊脂二糖、瓊脂四糖、瓊脂六糖、瓊脂八糖、κ-角叉藻二糖等。
維持還原末端含有3，6-脫水半乳糖的化合物，例如瓊脂二糖、κ-角叉藻二糖等處於pH7以上的中性到鹼性的條件下，將從這些化合物選擇出的至少一種以上化合物溶解或懸浮之後進行反應的反應液的組成沒有特別限定，但最好是用水(例如蒸餾水、離子交換水、自來水等)作為溶劑，對鹼的種類也沒有特別限定，例如可以使用使氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氨等無機鹽、Tris、乙胺、三乙胺等有機鹼溶解後的試劑。鹼的濃度沒有特別限定，最好使用0.0001～5N濃度、更理想的是使用0.001～1N濃度。另外反應溫度也沒有特別限定，設定在0～200℃比較好，設定在20～130℃更好。而反應時間也沒有特別限定，最好設定在數秒～數日。鹼的種類和濃度、反應溫度和反應時間以及溶解或懸浮於反應液成為原料的上述化合物的量可以根據該化合物的種類和作為目標的用式(I)表示的化合物的生成量適當地進行選擇。一般來說，pH7以上比較好，選擇高濃度鹼、高溫，式(I)表示的化合物的生成要比選擇低濃度鹼、低溫條件時快。
例如通過製備瓊脂二糖或κ-角叉藻二糖的pH11.5的溶液，於37℃維持5分鐘就可生成式(I)表示的化合物。
含有生成的式(I)表示的化合物的鹼溶液根據目的，可以用於中和，也可以調到不足pH7作為酸性溶液使用。
結構中含有3，6-脫水半乳糖的化合物可供不足pH7的酸水解或酶解，而通過象上述那樣維持在中性到鹼性條件下，可以獲得式(I)表示的化合物時，作為酸水解最好使用諸如0.001～5N濃度的鹽酸、硫酸、硝酸等無機酸、檸檬酸、甲酸、醋酸、乳酸、抗壞血酸等有機酸，以水作為溶劑製備反應液，將適量的作為原料的化合物溶解或懸浮於反應液中進行反應，反應溫度優選是0～200℃，反應時間優選是數秒～數日。而進行酶解時，與酸水解中所用的反應液和反應條件同樣，例如，作為酶可以適量使用α-瓊脂糖酶，如國際公開第00/50578號專利記載的α-瓊脂糖酶，在該酶表現出活性的條件下進行反應。
作為反應液中含有的本發明式(I)表示的化合物的純化手段可以使用化學方法、物理方法等眾所周知的純化手段，可以將凝膠過濾、利用分子量分級膜的分級法、溶劑萃取法、離子交換樹脂等各種層析等純化方法組合進行純化。
例如，從瓊脂二糖的中性到鹼性條件下的處理物中純化X為CH2OH，而Y為H的式(I)表示的化合物，從κ-角叉藻二糖的中性到鹼性條件下的處理物中純化X為H，而Y為CH2OH的式(I)表示的化合物。
本發明中使用的用式(II)表示的化合物可以通過式(I)表示的化合物和含有SH基的化合物反應生成。
使用的含有SH基的化合物只要是至少含有一個SH基的化合物即可，並沒有特別限定。式(II)中的R表示通過含有SH基的化合物和式(I)表示的化合物的反應，除去式(I)與該含有SH基的化合物結合中消耗的一個SH基後剩下的殘基。因此當含有SH基的化合物含有2個以上SH基時，R代表的殘基中應當存在一個以上的SH基。有關的含有SH基化合物的例子如巰基甲烷、巰基丁烷、巰基乙醇、含有SH基胺基酸、含有SH基胺基酸的衍生物等。
作為含有SH基的胺基酸例子如半胱氨酸、高半胱氨酸等。而作為含有SH基胺基酸的衍生物如上述胺基酸的衍生物、如半胱氨酸衍生物、含有半胱氨酸的肽、含有半胱氨酸衍生物的肽等。作為半胱氨酸衍生物如半胱氨酸的醯胺化合物、乙醯化合物、酯化合物等。作為含有半胱氨酸的肽只要肽中組成成分有半胱氨酸就可以，並沒有特別限定。作為含有該半胱氨酸的肽包括從寡肽，包括如穀胱甘肽那樣的低分子到蛋白質那樣的多肽高分子物質。而含有胱氨酸或高胱氨酸的肽在可變成反應中含有半胱氨酸或高半胱氨酸的肽的條件下，例如通過組合還原處理也可以作為本發明中含有半胱氨酸或高半胱氨酸的肽使用。作為含有半胱氨酸衍生物的肽如在上述含有半胱氨酸的肽中，半胱氨酸是由半胱氨酸衍生物構成的物質。
作為含有半胱氨酸的肽也包括含有糖質、脂質等含有半胱氨酸的肽。即使是上述各種物質的鹽、酸酐、酯等也可以。
在製造以式(II)表示的化合物時的式(I)表示的化合物與含有SH基化合物的反應只要是在眾所周知的反應條件下進行就可以，只要是含有SH基的化合物具有反應性的條件就可以，並沒有特別限定。例如，在水、PBS等溶液中，使式(I)表示的化合物與含有半胱氨酸或穀胱甘肽等含有SH基的化合物反應，反應溫度優選是0～100℃，更理想的溫度是30～50℃，而反應時間優選是1小時～1周，更理想的是放置1夜。
作為使式(I)表示的化合物與含有上述SH基的化合物反應生成式(II)表示的化合物的純化、分離手段可以使用化學方法、物理方法等眾所周知的純化手段。例如，可以組合使用作為上述式(I)表示的化合物的純化手段例舉的各種手段。
而式(I)表示的化合物在生物體內，例如與含有SH基的化合物(半胱氨酸、穀胱甘肽等)反應，從代謝上也可以轉換為本發明中使用的式(II)表示的化合物。
作為上述式(I)表示的化合物或式(II)表示的化合物的鹽最好是醫藥上容許的鹽，可以通過眾所周知的方法進行轉換。例如與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸等反應得到的無機鹽、與甲酸、醋酸、草酸、丙二酸、琥珀酸等有機酸反應得到的鹽，或與碘代甲烷等烷基滷化物、苄基滷化物等反應得到的銨鹽等。
上述式(I)或式(II)表示的化合物的光學異構體、酮-烯醇互變異構體、幾何異構體等各種異構體都可以在本發明中使用，無論是分離的各個單個異構體，還是其混合物都可以。
本發明中使用的上述式(I)或式(II)表示的化合物是例如有可能生成酯等在體內容易水解，可發揮所預期效果的衍生物(前藥)。有關前藥的製備根據眾所周知的方法進行。
另外上述異構體和衍生物即使是它們的鹽也可以。
在本發明中作為有效成分使用的上述式(I)表示的化合物或式(II)表示的化合物以及它們的鹽是以抑制癌細胞(HL-60細胞)增殖的活性作為指標進行探索、發現的結果。因此，該有效成分可以認為是具有誘發細胞程序死亡的活性、抑制癌活性作用的成分。具體來說，該有效成分具有各種生物體內因子的產生調節作用、編碼該因子的基因的表達調節作用，例如IL-6產生抑制作用、IL-10產生抑制作用、HO產生誘導作用、COX2產生抑制作用、MIP1α產生抑制作用、RANTES產生抑制作用、TNFα產生抑制作用等生理活性。其中作為生理活性這裡例舉的各種作用都很顯著。推測這樣的生理活性表現是通過成為產生抑制或產生誘導的對象的各種生物體內因子的基因轉錄活化抑制或誘導和/或來自各種細胞的產生抑制或誘導起作用的。而其作用對生物體恆定性的維持和恢復有用，也不用特別擔心其副作用。有關的生理活性就像後面實施例所闡明的那樣。另外已經確認各種生物體內因子的產生抑制作用並不是由細胞毒性所引起的作用。
根據本發明可以提供，根據上述有效成分的活性對本說明書中例舉的那樣的各種生物體內因子的基因表達調節失常進行矯正的含有上述有效成分的基因表達調節失常矯正劑，另外還提供含有上述有效成分的需要對生物體內因子基因表達調節失常進行矯正的疾病的治療藥或預防藥物。作為有關的治療藥或預防藥物，例如需要IL-6產生抑制的疾病、需要IL-10產生抑制的疾病、需要HO產生誘導的疾病、需要COX2產生抑制的疾病、需要MIP1α產生抑制的疾病、需要RANTES產生抑制的疾病、需要TNFα產生抑制的疾病等的治療劑或預防劑。另外作為有關的治療劑或預防劑可以作為IL-6產生抑制劑、IL-10產生抑制劑、HO產生誘導劑、COX2產生抑制劑、MIP1α產生抑制劑、RANTES產生抑制劑、TNFα產生抑制劑使用，這裡具體例舉的治療劑或預防劑比較好用。因此，本發明也包括上述有效成分在IL-6產生抑制劑、IL-10產生抑制劑、HO產生誘導劑、COX2產生抑制劑、MIP1α產生抑制劑、RANTES產生抑制劑或TNFα產生抑制劑製造中的使用。而在本說明書中，所謂「對基因表達調節失常進行矯正」，雖然並沒有特別限定，但就由於疾病和種種外部主要原因其表達狀態脫離正常水平的基因來說是指使該基因的表達轉向生物體恆定性恢復的方向。例如，包括對由於疾病表達量上升，使病情惡化的基因的表達量進行抑制，為使疾病康復誘導表達的基因其表達量要維持和增強。就是說，所謂本發明的基因表達調節失常矯正劑(suppressor forunbalance of gene expressions)是抑制由於疾病和各種外部主要原因引起的基因表達狀態失常(unbalance of gene expressions)的抑制因子(suppressor)。所以本發明的基因表達調節失常矯正劑可以用於調節失常的基因表達狀態的改善或預防。換言之，本發明的基因表達調節失常矯正劑是在基因表達水平上對生物體的恆定性維持有貢獻的物質，也可以稱之為基因表達異常的調節劑(modulator ofgene expressions disorder)。
在表現出自身免疫疾病那樣症狀的前房黏液瘤患者中，由腫瘤細胞產生出大量的IL-6。而由於多發性骨髓瘤患者骨髓瘤細胞的增殖可被抗IL-6抗體抑制，所以IL-6作為骨髓瘤細胞的自身增殖因子的可能性很大。另外，原發性腎小球腎炎患者的尿中也含有IL-6，IL-6起著腎小球膜細胞增殖因子的作用。這裡例舉的疾病無論那一種都可以認為IL-6的異常產生是其中的一個原因，因此本發明的基因表達調節失常矯正劑對有關疾病是有用的，而且對於對IL-6基因表達調節失常需要矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制IL-6的產生可以預防或治療有關的疾病。
IL-10產生過度時，抑制幹擾素γ的產生，結果抑制免疫。因此，本發明的基因表達調節失常矯正劑對於IL-10的產生過度作為一個原因免疫被抑制的疾病，例如需要對幹擾素γ基因表達調節失常進行矯正的疾病(例如，哮喘、花粉症、特應性皮炎等過敏性疾病)是有用的，而對於對IL-10基因表達調節失常需要矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制IL-10的產生可以預防或治療有關的疾病。
在HO中存在著33kDa的HO1和36kDa的HO2的兩種同功酶。HO2具有多附帶了由HO1的N末端一側的20個胺基酸組成的胺基酸序列的結構。其餘部分的同源性為40～50％，高級結構很相似。兩者在C末端都存在疏水區，通過該部分與微粒體膜結合。如果對微粒體膜進行胰蛋白酶處理，由於可以得到具有分解血紅素活性的可溶性級分，所以可以認為含有活性中心的大的結構域從細胞質一側突出。
HO1是誘導酶，在各種細胞中會被作為底物的血紅素、重金屬離子、某些有機化合物、過氧化氫、或熱休克、UV照射、局部缺血那樣的化學的、物理的因素顯著地誘導。HO2是組成酶，出現在各個組織中，特別是在腦和精巢中活性最高。
HO可以將血紅素分解成膽綠素、CO、鐵，膽綠素進一步通過還原酶作用生成膽紅素。該膽紅素可以使各種自由基減少。就是說，通過誘導HO，可以誘導具有抗氧化活性的膽紅素的產生，可以治療或預防由於自由基產生引起的各種疾病(例如各種炎性疾病、糖尿病、癌、動脈硬化、神經疾病、局部缺血再灌注障礙等)。即本發明的基因表達調節失常矯正劑對有關的疾病是有用的，而對於對HO基因的表達調節失常需要進行矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過誘導HO的產生可以預防或治療有關的疾病。
花生四烯酸代謝與生物體內組織的炎症和疼痛的發生有密切關係。COX2參與花生四烯酸代謝，通過COX2的作用，來自膜磷脂的花生四烯酸被代謝為前列腺素、前列腺環素、血栓烷三種物質。即利用本發明的基因表達調節失常矯正劑通過抑制COX2的產生，可以表現出鎮痛、抗炎作用。而對於對COX2基因表達調節失常需要進行矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制COX2的產生可以預防或治療生物體內組織的炎症和疼痛的發生。
所謂趨化因子是具有特定白血球趨化性的細胞因子，與過敏性炎症、自身免疫疾病有密切關係。趨化因子就像上述那樣分為CXC趨化因子和CC趨化因子兩個亞家族。趨化因子是由92～99個胺基酸組成，含有可分別結合成二硫鍵的4個半胱氨酸殘基。CXC趨化因子中開始的2個半胱氨酸之間插入了一個其它胺基酸，而CC趨化因子沒有其它胺基酸插入。CXC趨化因子主要對嗜中性細胞表現出趨化作用，而CC趨化因子對淋巴細胞、單核細胞、嗜鹼性細胞、嗜酸性細胞表現出趨化作用。
RANTES屬於CC趨化因子，特別對嗜酸性細胞表現出很強的趨化作用。RANTES是由T細胞、B細胞、單核細胞、成纖維細胞、巨噬細胞、血管內皮細胞、血小板、呼吸道上皮細胞以及嗜酸性細胞本身產生的。RANTES不僅對嗜酸性細胞表現出很強的趨化作用，而且與脫粒也有關係。RANTES有選擇地使記憶T細胞從輔助細胞(CD4+)T細胞遷移，是在過敏性炎症中起關鍵作用的細胞因子。實際上有報導說哮喘時RANTES上升，而在過敏性結膜炎中、淚液中存在RANTES。另外也有報導說RANTES可增強嗜酸性細胞活性氧的產生。因此通過抑制RANTES的產生，預料可以預防或治療RANTES細胞作用作為一個病因的哮喘、過敏性炎性疾病(例如過敏性結膜炎、過敏性皮炎、過敏性胃腸炎、變應性脈管炎、變應性脊髓炎、變應性肉芽腫性血管炎、變應性腦脊髓炎、過敏性鼻炎、變應性膀胱炎等)。另外由於抑制由嗜酸性細胞引起的活性氧的產生，所以在生物體內表現出抗氧化效果、抗炎症效果。因此本發明的基因表達調節失常矯正劑對RANTES的作用作為一個病因的上述疾病，例如對於作為HO產生誘導有效例舉的疾病是有用的，而對於對RANTES的基因表達調節失常需要進行矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制RANTES的產生可以預防或治療有關的疾病。
MIP1α也與RANTES一樣都是CC趨化因子，具有CC趨化因子的特徵。然而，有報導說MIP1α的趨化作用比RANTES低，例如在支氣管哮喘患者中表現出不同的特徵，RANTES從發作初期上升，而MIP1α在治療後病情進一步惡化前上升。因此通過抑制MIP1α的產生有可能阻止哮喘和上述例舉的那樣的過敏性炎性疾病的惡化。本發明的基因表達調節失常矯正劑特別對阻止有關疾病的惡化有用，而對於對MIP1α基因表達調節失常需要進行矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制MIP1α的產生可以預防或治療有關疾病的惡化。
作為在本發明中使用的有效成分之一的下面敘述實施例中記載的瓊脂寡糖、DGE由於可以對RANTES和MIP1α兩種基因的表達調節失常進行矯正，所以認為有預防、治療過敏性炎性疾病以及阻止治療中病體惡化的效果。
另一種細胞因子TNFα在慢性風溼性關節炎等自身免疫疾病和炎性疾病中直接引起與這些疾病相關的炎症。
TNFα雖然是作為在腫瘤部位誘導出血性壞死的因子發現的，但現在認為是與以炎症作為基本的生物體防禦和免疫機制有廣泛關係的細胞因子，TNFα產生調節機制的破壞會給宿主帶來各種各樣的不利問題。就是說TNFα過度或無調節地產生與包括下列的許多疾病有關[Molecular Medicine、第33卷、第1010～1020頁、第1182～1189頁(1996)]，這些疾病是慢性風溼性關節炎、風溼性脊髓炎、變形性關節炎、痛風性關節炎、敗血病、敗血性休克、內毒素休克、革蘭氏陰性菌敗血病、中毒性休克綜合症、腦型瘧疾、慢性肺炎、移植片對宿主反應、同種移植排斥反應、由流感那樣的傳染病等引起的發熱和肌肉疼痛、感染或惡性腫瘤的二次惡病質、人獲得性免疫缺陷綜合症(AIDS)的二次惡病質、AIDS、與AIDS有關的綜合症、疤痕瘤形成、潰瘍性大腸炎、多發性硬化症、自身免疫糖尿病和全身性紅斑狼瘡等自身免疫疾病。
因此本發明的基因表達調節失常矯正劑對上述例舉的那樣的通過TNFα介導的或惡化的疾病有用，而對於對TNFα基因表達調節失常需要進行矯正的疾病，使用本發明的治療劑或預防劑，通過抑制TNFα的產生可以預防或治療這樣的疾病。例如通過使用本發明的基因表達調節失常矯正劑，可以改善炎症、風溼病、特別是慢性風溼性關節炎的症狀、作為炎症標誌的C反應蛋白質(CRP值)、類風溼因子(rheumatoidfactorRF)值、紅血球沉降速度(血沉)值驟減，步行困難等複雜症狀也有顯著改善。
另外在本發明中使用的上述有效成分具有對生物體的恆定性維持重要的其它各種生物體內因子的基因表達調節失常進行矯正的作用。
生物受到來自生活環境的變化等外部原因、來自病毒、細菌感染等內部原因的各種各樣的應激。作為應激如處於高溫、低溫環境、飢餓狀態、暴露於化學物質等。例如作為化學物質如十四烷醯基佛波醇醋酸酯(TPA)、脂多糖(LPS)、植物血細胞凝集素(PHA)、Okadicacid等。其中，TPA和LPS用於人體會引起炎症，利用這樣的作用可以用於以人工製造炎症模型為目的的用途中。
受到上述那樣應激的結果使得生物體內各種各樣基因的表達發生變化。其中既有誘導或增強表達、對生物體帶來壞影響的基因群(A群)，也有通過抑制表達給正常生活的生命活動帶來支撐的基因群(B群)。受到應激，上述各種基因群的表達調節的失常狀態如果繼續下去，就會導致各種各樣疾病的發生。因此使受到應激時基因表達的變動恢復到正常時的狀態就會治療和預防各種各樣疾病。
就是說，通過本發明的基因表達調節失常矯正劑可以使包括上述細胞因子類和各種酶類、任何應激產生的表達調節失常的那樣的各種生物體內因子的基因表達調節失常狀態恢復到通常狀態(保持恆定性的健康狀態)。
例如，作為本發明的有效成分可以使用的後面敘述的實施例中記載的DGE作為可以將基因表達調節失常矯正到正常狀態的基因，具體如表1和表2所示。
表1基因名稱(縮寫) Genebank Accession號● 細胞因子和細胞因子受體白介素-6(IL-6)M14584白介素-1α(IL-1α)X02851白介素-1β(IL-1β)K02770腫瘤壞死因子α(TNFα) M10988白介素-7受體(IL-7r) M29696● CC趨化因子巨噬細胞炎症蛋白-1-β(MIP1β)J04130肝和激活作用調節性趨化因子(LARC) D86955巨噬細胞衍生的趨化因子(MDC) U83171● CXC趨化因子巨噬細胞炎症蛋白--2-β(MIP2β) M36821巨噬細胞炎症蛋白--2-α(MIP2α) M36820生長調節蛋白-1(Gro1) J03561
表2基因名稱(縮寫) Genebank Accession號● 其它基因基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)J05070移動抑制因子相關蛋白-8(MRP8) X06234溶菌酶(Lyz)M21119GABA(A)受體相關蛋白(GABArp)NM007278幹擾素誘導17-kDa/15-kDa蛋白M13755(IFNp15/p17)幹擾素誘導蛋白p78(IFNp78) M33882SCO(cytochrome oxidase deficient， AL021683yeast)同系物-2(SCO2)轉酮酶(TK) L12711腺苷A2a受體(ADORA2A) S46950CD37抗原(CD37) X14046備解素P因子(PFC) M83652G-蛋白信號傳遞的調節蛋白-2(RGS2) L13463Nef-相關因子-1(NAF1) AJ011896骨髓白血病細胞分化蛋白-1(MCL1) L08246信號肽酶複合物(18kDa)(SPC18) AF061737特別根據本發明可以通過提供含有上述有效成分的適用於對從前面表1和表2例舉的各種生物體內因子的基因中選擇出的1種以上的基因的表達調節失常需要進行矯正的炎性疾病的治藥物或預防藥物。
本發明的基因表達調節失常的矯正劑無論是上述有效成分本身，還是含有上述有效成分的組合物都可以。例如可以通過就該有效成分和其它具有同樣使用用途的成分等按照常規方法進行混合製造。在相關矯正劑中該有效成分的含有量考慮到投藥方法等，最好是按照後面提到的投藥量範圍給出該有效成分的量，並沒有特別限定。另外本發明的治療劑或預防劑是含有上述有效成分的藥物，可以將該有效成分與眾所周知的醫藥用載體組合進行製劑。一般來說，就讀有效成分與藥學上容許的液體或固體狀載體配合，根據需要加入溶劑、分散劑、乳化劑、緩衝劑、穩定劑、賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等製成片劑、粒劑、散劑、細粉劑、膠囊等固形劑，通常的液體製劑、懸浮劑、乳劑等液體製劑。另外可以作成在使用前添加適當載體成為液體狀的乾燥品。
本發明的治療劑或預防劑可以通過口服製劑或注射製劑、點滴用製劑等非口服製劑或外用製劑任一種製劑投藥。
醫藥用載體可以根據上述投藥方式和製劑類型進行選擇。由固體組合物組成的口服製劑可以作成片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、細粉劑、粒劑等，例如可以利用澱粉、乳糖、白糖、甘露醇、羧甲基纖維素、玉米澱粉、無機鹽等。另外在製備口服製劑時，也可以配合粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤滑劑、流動性促進劑、矯味劑、著色劑、香料等。例如作成片劑或丸劑時，根據需要也可以用蔗糖、明膠、羧丙基纖維素等糖衣或胃溶性或腸溶性物質的膜包被。在製造由液體組合物組成的口服製劑時可以作成製藥學上容許的乳濁劑、溶液製劑、懸浮劑、糖漿等，例如，可以用純化水、乙醇等作為載體。另外根據需要也可以添加象溼潤劑、懸浮劑那樣的輔助劑、增甜劑、風味劑、防腐劑等。
在製造非口服製劑時，根據常規方法將本發明的上述有效成分溶解或懸浮於作為稀釋劑的注射用蒸餾水、生理鹽水、葡萄糖水溶液、注射用植物油、芝麻油、花生油、大豆油、玉米油、丙二醇、聚乙二醇等，根據需要通過添加殺菌劑、穩定劑、滲透調節劑、無痛化劑等製備。另外也可以製造固體組合物、使用前溶解於無菌水或無菌的注射用溶劑中使用。
作為外用製劑包括經皮投藥用的或經黏膜(口腔內、鼻腔內)投藥用的固體乃至半固體狀、半固體或液體狀的製劑。另外也包括栓劑。例如乳劑、洗劑等懸浮劑、外用酊劑、經黏膜投藥用液體製劑等液體狀製劑、油性軟膏、親水性軟膏等軟膏製劑、膜製劑、貼劑、泥敷劑等經皮給藥或經黏膜投藥用的粘結劑。
以上各種製劑可以分別利用眾所周知的醫藥用載體等，根據合適的常規方法製造。而相關製劑中有效成分的含量與上述基因表達調節失常矯正劑的情形一樣。
例如，上述基因表達調節失常矯正劑的投藥可以根據適合各自製劑形態的投藥途徑實施。投藥方法也沒有特別限定，可以通過內用、外用和注射方式投藥。注射製劑例如可以通過靜脈內、肌肉內、皮下、皮內等投藥，外用製劑也包括栓劑等。
另外，投藥量可以根據製劑形態、投藥方法、使用目的、和哺乳動物(例如患者)的年齡、體重症狀適當地設定，沒有一定標準，但上述有效成分的投藥量成人最好是每天10μg～200mg/kg。在以製劑投藥時，有效成分的投藥量如果能在上述理想範圍內就可以。但是，由於該投藥量隨著各種條件有所變動，有時投藥量比上述投藥量少也可能就足夠了，或者有時超過上述範圍也是需要的。投藥可以在所需要的投藥量範圍內採取1日一次，或1日數次。而作為經口服投藥的方法如上述基因表達調節失常矯正劑等可以直接經口投藥，或將上述有效成分任意添加到飲食中，經日常攝入也可以獲得本發明所期望的效果。
而作為本發明的一種模式提供將上述有效成分用於哺乳動物的基因表達調節失常的矯正方法。特別是更適合於用於矯正上述例舉的各種生物體內因子的基因、最好是從上述31種基因群中選擇出來的至少1種基因表達調節失常需要進行矯正的基因。這樣的方法例如對認為有必要對有關基因表達調節失常進行矯正的，或對有這樣必要的哺乳動物將上述有效成分以本發明基因表達調節失常矯正劑投藥來實施，通過投藥出現所期望的生物體內因子的產生誘導或產生抑制，使生物體內的恆定性恢復。有效成分的投藥方法、投藥量可以根據上述基因表達調節失常矯正劑等實施。在相關的方法中上述矯正劑等適合用作各種因子的產生誘導劑或產生抑制劑。
另外作為本發明的一種模式也提供各種生物體內因子、例如與細胞因子類和酶有關的疾病的治療劑或預防劑的篩選方法。相關的篩選方法例如是通過對於編碼上述例舉的各種生物體內因子的基因、最好是從上述31種基因群中選擇出來的至少1種基因經處理使其表達量發生變化，研究被檢測物質能否對上述基因的表達量變化進行矯正來實施的。
而在本發明中使用的上述有效成分中無論那一種即使經口一次投藥100mg/kg也沒有發現死亡的例子。實施例以下給出實施例對本發明進行更具體說明，但本發明不限定於這些實施例。
製造例1 L-甘油基-1，5-環氧-1αβ，6-二羥基-順-己-3-烯-2-酮(DGE)and D-甘油基-1，5-環氧-1αβ，6-二羥基-順-己-3-烯-2-酮(κ-DGE)的製備市售的瓊脂(Agar Noble)2.5g懸浮於50ml的0.1N HCI中，於100℃下加熱13分鐘，進行溶解。冷卻到室溫，用NaOH將pH調至12，然後進行中和處理。
對中和處理物進行以下正相HPLC，得到各個峰的級分，減壓乾燥後溶解在水中。使用HL-60細胞對各個級分的癌細胞增殖抑制活性進行測定，確認在保留時間為4.05分～4.16分的級分中存在癌細胞增殖抑制活性。
然後大量提取4.05～4.16分鐘的級分，進行結構解析，確認該級分是L-甘油基-1，5-環氧-1αβ，6-二羥基-順-己-3-烯-2-酮(L-glycero-1，5-epoxy-1αβ，6-dihydroxy-cis-hexa-3-en-2-oneDGE)。以下給出了常規HPLC的條件柱子PALPAK TypeS(4.6mm×250mm、寶酒造公司生產)移動相A90％乙腈水溶液移動相B50％乙腈水溶液流速1ml/分洗脫移動相A(10分鐘)→從移動相A到移動相B的直線梯度洗脫(40分鐘)→移動相B(10分鐘)檢測195nm的吸光度柱溫40℃同樣κ-角叉藻二糖的鹼處理根據上述瓊脂情形處理，從得到的鹼處理物中同樣可以純化D-甘油基-1，5-環氧-1αβ，6-二羥基-順-己-3-烯-2-酮(κ-DGE)。
κ-角叉藻二糖製備如下。即將κ-角叉聚糖(carrageenan)(Sigma公司生產、C-1263)2.5g懸浮於50ml的0.1N HCI中，於100℃下加熱16分鐘，進行溶解。冷卻到室溫，用NaOH將pH調至中性附近，然後用Cosmonise Filter S(ナカライテスク社制)進行過濾，用下常規HPLC進行分離，收集保留時間為27.8分的κ-角叉藻二糖，減壓乾燥後，製備κ-角叉藻二糖。以下給出了常規HPLC的條件柱子PALPAK TypeS(4.6mm×250mm、寶酒造公司生產)移動相A90％乙腈水溶液移動相B50％乙腈水溶液流速1ml/分洗脫移動相A(10分鐘)→從移動相A到移動相B的直線梯度洗脫(40分鐘)→從移動相B(10分鐘)檢測195nm的吸光度柱溫40℃製造例2 5-L-谷光甘肽-S-基-2-羥基-3，7-二氧雜雙環[2.2.2]辛-1-醇(DGE-GSH)的製備將DGE和還原型穀胱甘肽(GSHnakalaitesque公司生產)分別溶解於PBS中，使終濃度為20mM，於37℃下反應過夜。將該反應液100μl用正相柱PAL-PAK TypeS進行分級。流速1ml/分，0～10分鐘用90％乙腈水溶液洗，10～50分鐘用90％乙腈水溶液到50％乙腈水溶液梯度進行洗脫，於檢測波長195nm下進行正相層析，每1.5分鐘收集一次級分。對各個級分進行濃縮乾燥後，再溶解於50μl的蒸餾水中，使用HL-60細胞對各個級分的癌細胞增殖抑制活性進行測定。結果確認級分30～40附近的級分能夠抑制細胞增殖。將同樣製備的活性級分50μl進行反相層析(TSKgel ODS-80Ts(5μm)/東洋曹達公司生產、4.6mm×250mm)分級。於流速1ml/分鐘，0～15分鐘用含有0.1％TFA的蒸餾水洗，15～30分鐘用從含有0.1％TFA的蒸餾水到含有0.1％TFA的50％乙腈水溶液的直線梯度洗，30～45分鐘用含有0.1％TFA的50％乙腈水溶液洗脫，檢測波長215nm的條件下進行層析，每1.5分鐘收集一次級分。對各個級分進行濃縮乾燥後，再溶解於50μl的蒸餾水中，使用HL-60細胞對各個級分的癌細胞增殖抑制活性進行測定。結果確認級分保留時間在4～9分鐘附近的級分有抑制細胞增殖活性。
將上述正相的層析反覆進行10次，獲得讀活性級分，濃縮乾燥後，再溶解於1ml的蒸餾水中通過正相層析製備純化級分。然後將該正相層析得到的純化級分進行上述的反相層析，得到活性級分，濃縮乾燥。結果從20mM DGE和20mM的穀胱甘肽的1ml反應液可以得到5mg的活性化合物。對該化合物的結構進行確定，確認該化合物就是5-L-穀胱甘肽-S-基-2-羥基-3，7-二氧雜雙環[2.2.2]辛-1-醇(DGE-GSH)。
結果可以確認在添加DGE的組中抑制TPA誘導IL-6產生，該抑制依賴於DGE的濃度。結果如

圖1所示。即，圖1是表示在各種培養條件下培養細胞時的培養上清中的IL-6的濃度的圖，橫軸表示培養條件，縱軸表示IL-6濃度(ng/ml)。
另外對κ-DGE、DGE-GSH也進行同樣的實驗，確認了IL-6產生抑制作用。
結果可以確認在添加DGE的組中抑制LPS誘導IL-10產生，該抑制依賴於DGE的濃度。結果如圖2所示。即，圖2是表示在各種培養條件下培養細胞時的培養上清中的IL-10的濃度的圖，橫軸表示培養條件，縱軸表示IL-10濃度(pg/ml)。
另外對κ-DGE、DGE-GSH也進行同樣的實驗，確認了IL-10產生抑制作用。
結果在添加DGE的組中可以看到來自HO1蛋白質的帶。而帶的強度依賴於DGE的濃度。其結果如表3所示。表中HO1蛋白質帶的強度用+表示。就是說、表3中完全沒有看到帶的都用-表示，而+-、+、++的順序表示帶強度逐漸增強。
表3樣品 HO1蛋白質帶的強度水(陰性對照) -終濃度40μM DGE++終濃度20μM DGE+終濃度10μM DGE+-15-去氧-Δ12，14-前列腺素J2++(陽性對照)另外對κ-DGE、DGE-GSH也進行同樣的實驗，確認了HO產生誘導作用。實施例4(1)PBMC的分離和保存從健康人志願者採集400ml血。將採集的血用PBS(-)稀釋2倍，鋪在Ficoll-paque(Pharmacia公司生產)上，於500×g離心20分鐘。用移液管將中間層的末梢血單核細胞(PBMC)回收，用RPMI1640培養基(Bio Whittaker公司生產)洗淨。採集的PBMC懸浮於由90％FCS(JRHbioscience公司生產)/10％二甲基亞碸組成的保存液，保存在液氮中。實驗時將這些保存的PBMC於37℃水浴中迅速融解，用含有10μg/ml Dnase(Calbiochem公司生產)的RPMI1640培養基洗淨後，通過臺昐藍染色法算出活細胞數共實驗用。(2)單核細胞的分離將PBMC懸浮於含有5％人AB型血清、0.1mM非必需胺基酸、1mM丙酮酸鈉、2mM L-穀氨醯胺(Bio Whittaker公司生產)、10mMHEPES(nakalai tesque公司生產)、1％鏈黴素-青黴素(Gibco BRL公司生產)的RPMI1640培養基(以下簡稱為5HR PMI培養物)，終濃度為4×106cells/ml，然後鋪在6孔細胞培養板(Falcon公司生產)中，每孔3ml，於37℃、5％CO2條件下於溼式孵育箱內孵育1.5小時。1.5小時後將非貼壁細胞吸引除去，用RPMI1640培養基將各個孔洗淨，加2ml的5HRPMI培養基，得到單核細胞。(3)RNA的製備對於上述得到的單核細胞向各個孔添加8μl的10mM DGE水溶液或作為對照添加8μl的水，於37℃、5％CO2條件下於溼式孵育箱內孵育5小時。然後向各個孔添加2μl的1μg/ml LPS水溶液或2μl的25mM TPA二甲基亞碸溶液，或者什麼物質也不加再培養4小時後，使用RNeasy Mini Kit(QIAGEN公司生產，74104)，根據說明書從各個細胞製備RNA。將對細胞只添加水或只添加DGE水溶液的組作為陰性對照，另外將對細胞添加水和LPS水溶液或TPA溶液的組作為陽性對照。(4)cDNA的合成使用循環變溫加熱器(GeneAmp PCR System 9600，AppliedBiosystems)將含有上述製備的RNA 0.5μg和10mMTris-HCl(pH8.3)、50mM KCl、5mMMgCl2、1mMdNTP混合液、150pmol Random6mers、60U的核糖核酸酶抑制劑(寶酒造公司生產2310A)、15U逆轉錄酶XL(AMV)(寶酒造公司生產，2620A)的總液量為60μl的混合液於30℃保溫10分鐘，然後繼續於42℃保溫1小時後，為使酶失活於99℃加熱5分鐘，製備cDNA。(5)引物的合成根據COX2的mRNA的鹼基序列[GenBank Accessionn號ALo33533]，設計PCR反應用的寡核苷酸引物，通過DNA合成儀(Applied Biosystems公司生產)合成。即分別合成寡核苷酸引物CX1(序列表中序列1所示；以下同樣)、CX2(序列2)。根據MIP1α的mRNA的鹼基序列[GenBank Accessionn號M23452]，分別合成寡核苷酸引物MP1(序列3)、MP2(序列4)。根據RANTES的mRNA的鹼基序列[GenBank Accessionn號NM002985]，分別合成寡核苷酸引物RS1(序列5)、RS2(序列6)。另外作為內部標準根據人β-肌動蛋白的mRNA的鹼基序列[GenBank Accessionn號M10277]，分別合成寡核苷酸引物AC1(序列7)、AC2(序列8)。(6)以cDNA為模板通過PCR法擴增DNA片段在含有各5pmol合成的寡核苷酸引物CX1、CX2或MP1、MP2或RS1、RS2和作為內部標準β-肌動蛋白的寡核苷酸引物AC1、AC2與上述製備的cDNA溶液2.5μl、10×Ex Taq緩衝液(寶酒造公司生產)2.5μl、0.625U TakaRa Ex Taq聚合酶(寶酒造公司生產，RR001A)、0.2mM dNTP混合液的總液量為25μl的反應系統中，使用循環變溫加熱器，按照於94℃下2分鐘一個循環，然後進行每一循環為95℃30秒、59℃30秒、73℃30秒的30個循環，最後於72℃5分鐘的一個循環的程序進行反應。反應後的樣品在分析之前一直冷凍保存在-20℃。
對各個PCR反應液10μl通過2.0％瓊脂糖凝膠電泳進行分析。結果可以看到在單獨添加LPS的組中來自COX2、MIP1α、RANTES的各個mRNA帶的擴增。即，這些基因被LPS誘導已被證實。與此相反，在添加DGE和TPA的組中看不到無論來自COX2、MIP1α、RANTES的任一個mRNA帶的擴增。即表明無論由DGE，還是由LPS引起的基因誘導被抑制了。另外，單獨添加TPA的組中，確認了來自COX2、MIP1α的各mRNA的帶的增幅。即，確認了這些基因通過TPA誘導。與此相對，添加了DGE和TPA的組中，確認了來自於COX2、MIP1α的任一個來自於mRNA的帶的擴增。即確認了由DGE、由TPA引起的這些基因的誘導被抑制。其結果如圖3～5所示。即圖3表示來自COX2的、圖4表示來自MIP1α的、圖5表示來自RANTES的各個mRNA的cDNA經PCR擴增的反應液通過電泳分析的結果。圖3～5中的各個帶分別表示帶1表示100bp DNA ladder marker，帶2表示對照(水)，帶3表示添加DGE組，帶4表示添加LPS組，帶5表示添加DGE和LPS組，帶6表示添加TPA組，帶7表示添加DGE和TPA組。
表4基因名稱(縮寫) Genebank 引物名稱(序列號)Accession號● 細胞因子和細胞因子受體白介素-6(IL-6) M14584 IL6-F(序列號9)IL6-R(序列號10)白介素-1α(IL-1α) X02851 IL1α-F(序列號11)IL1α-R(序列號12)白介素-1β(IL-1β) K02770 IL1β-F(序列號13)IL1β-R(序列號14)腫瘤壞死因子α(TNFα) M10988 TNF-F(序列號15)TNF-R(序列號16)白介素-7受體(IL-7r)M29696 IL7r-F(序列號17)IL7r-R(序列號18)● CC趨化因子巨噬細胞炎症蛋白-1-J04130 MIP1β-F(序列號19)β(MIP1β) MIP1β-R(序列號20)肝和激活作用調節性趨 D86955 LARC-F(序列號21)化因子(LARC) LARC-R(序列號22)巨噬細胞衍生的趨化因 U83171 MDC-F(序列號23)子(MDC)MDC-R(序列號24)● CXC趨化因子巨噬細胞炎症蛋白-2-β M36821 MIP2β-F(序列號25)(MIP2β) MIP2β-R(序列號26)巨噬細胞炎症蛋白-2-α M36820 MIP2α-F(序列號27)(MIP2α) MIP2α-R(序列號28)生長調節蛋白-1(Gro1) J03561 Gro1-F(序列號29)Gro1-R(序列號30)
表5基因名稱(縮寫)Genebank 引物名稱(序列號)Accession號● 其它基因基質金屬蛋白酶-9(MMP-9) J05070 MMP9-F(序列號31)MMP9-R(序列號32)移動抑制因子相關蛋白- X06234 MRP8-F(序列號33)8(MRP8)MRP8-R(序列號34)溶菌酶(Lyz) M21119 Lyz-F(序列號35)Lyz-R(序列號36)GABA(A)受體相關蛋白 NM007278 GABArp-F(序列號37)(GABArp) GABArp-R(序列號38)幹擾素誘導17-kDa/15-kDa M13755 IFNp15/p17-F(序列號39)蛋白(IFNp15/p17) IFNp15/p17-R(序列號40)幹擾素誘導蛋白 M33882 IFNp78-F(序列號41)p78(IFNp78)IFNp78-R(序列號42)SCO(cytochrome oxidase AL021683 SCO2-F(序列號43)deficient，yeast)同系物- SCO2-R(序列號44)2(SCO2)轉酮酶(TK) L12711 TK-F(序列號45)TK-R(序列號46)腺苷A2a受體(ADORA2A)S46950 ADORA2A-F(序列號47)ADORA2A-R(序列號48)CD37抗原(CD37) X14046 CD37-F(序列號49)CD37-R(序列號50)備解素P因子(PFC)M83652 PFC-F(序列號51)PFC-R(序列號52)G-蛋白信號傳遞的調節蛋 L13463 RGS2-F(序列號53)白-2(RGS2) RGS2-R(序列號54)Nef-相關因子-1(NAF1)AJ011896 NAF1-F(序列號55)NAF1-R(序列號56)骨髓白血病細胞分化蛋白- L08246 MCL1-F(序列號57)1(MCL1)MCL1-R(序列號58)信號肽酶複合物 AF061737 SPC18-F(序列號59)(18kDa)(SPC18) SPC18-R(序列號60)(2)以cDNA為模板通過PCR法擴增DNA片段使用上述給出的各個合成的寡核苷酸引物和作為內部標準實施例4-(5)合成的1-β-肌動蛋白的寡核苷酸引物AC1、AC2或上述的AC3以及用與實施例4-(4)同樣方法合成的cDNA溶液，用與實施例4-(6)同樣的方法進行PCR反應。PCR的循環數象下表表示的那樣進行30循環或35循環。反應後的樣品在分析之前一直冷凍保存在-20℃。
對各個PCR反應液5μl通過3.0％瓊脂糖凝膠電泳進行分析。結果如表6、7所示。但表中各個基因的表達量(通過來自各個基因的mRNA的cDNA的PCR擴增的程度進行評價)用從表達量少開始依次為-、+/-，+，++，+++5個階段表示。而表中的Con.表示對照(添加水組)，DGE表示添加DGE組，LPS表示添加LPS組，L+D表示添加DGE和LPS組，TPA表示添加TPA組，T+D表示添加DGE和TPA組。
表6基因 Con. DGE LPS L+DTPAT+D 循環數· 細胞因子和細胞因子受體IL-6 - - +++ - + - 30IL-1α +/-- +++ +/-+ - 30IL-1β + + +++ + ++ + 30TNFα +/-- +++/-+ +/-30IL-7r+/-- ++- - - 30· CC趨化因子MIP1β+ +/- +++ +/-++ +/-30LARC +/-+/- +++ + ++ + 30MDC - - + - - - 30· CXC趨化因子MIP2β+ + +++ ++ + 30MIP2α+/-+/- + +/-+ +/-35Gro1 + + +++ + ++ + 30
表7基因名稱Con. DGELPSL+D TPAT+D 循環數(縮寫)· 其它基因MMP-9- - - - + -30MRP8 + + +/-+ +/-+30Lyz + + +/-+ +/-+30GABArp + + +/-+ + +30IFNp15/p17 + + ++++/- + +/- 30IFNp78 + +/-++ - + +/- 30SCO2 + + - + + +30TK +/- +/-+/-+ - +30ADORA2A + +/-+++- + -35CD37 +/- +/-- + +/-+/- 35PFC + + - + + +35RGS2 +/- +/-- +/- +/-+/- 35NAF1 + - ++ +/- +/--30MCL1 + + +/-+ + +30SPC18+ + +/-+ + +30從以上結果可知DGE起著對於當將由LPS或TPA造成的應激性刺激加到細胞上時，由於該刺激表達量增大的基因會使其表達量減少，而對於表達量減少的基因會使其表達量增大的作用。即確認DGE在使生物體的恆定性恢復的方向上起作用。序列表說明序列號1和2是根據人COX2的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號3和4是根據人MIP1α的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號5和6是根據人RANTES的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號7和8是根據人β-肌動蛋白的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號9和10是根據人IL-6的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號11和12是根據人IL-1α的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號13和14是根據人IL-1β的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號15和16是根據人TNFα的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號17和18是根據人IL-7r的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號19和20是根據人MIP1β的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號21和22是根據人LARC的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號23和24是根據人MDC的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號25和26是根據人MIP2β的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號27和28是根據人MIP2α的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號29和30是根據人Gro1的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號31和32是根據人MMP-9的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號33和34是根據人MRP8的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號35和36是根據人Lyz的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號37和38是根據人GABArp的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號39和40是根據人IFNp15/p17的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號41和42是根據人IFNp78的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號43和44是根據人SCO2的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號45和46是根據人TK的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號47和48是根據人ADORA2A的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號49和50是根據人CD37的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號51和52是根據人PFC的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號53和54是根據人RGS2的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號55和56是根據人NAF1的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號57和58是根據人MCL1的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號59和60是根據人SPC18的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。
序列號61是根據人β-肌動蛋白的mRNA的鹼基序列設計的引物序列。產業上利用的可能性就像以上記載的那樣，本發明提供對生物體恆定性維持所必需的，例如白介素類的產生調節、生物體內酶的產生調節有用的基因表達調節失常矯正劑，另外提供含有矯正劑的對各種生物體內的基因表達調節失常需要進行矯正的疾病的治療劑或預防劑，可以治療或預防由於該因子的產生異常引起的疾病。
另外本發明提供生物體內的基因表達調節失常的矯正方法。該方法使用上述矯正劑等，由這些因子進行所期望的因子的產生誘導或產生抑制，使生物體內的恆定性恢復。在相關的方法中，上述矯正劑比較適合用作各種因子的產生誘導劑或產生抑制劑。另外作為本發明的一種模式也提供各種生物體內因子、例如與細胞因子類和酶有關的疾病的治療劑或預防劑的篩選方法。
序列表110寶酒造株式會社(Takara Shuzo Co.，Ltd.)120治療劑13001-011-PCT150JP 2000-49891512000-01-13150JP 2000-3037111512000-10-0316061210121117212DNA213人工序列220223根據人前列腺素G/H合成酶-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4001acggtgaaac tctggct 17210221117212DNA213人工序列220223根據人前列腺素G/H合成酶-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4002ggatgctcct gtttaag 17210321120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-1-(的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4003acattccgtc acctgctcag 20210421120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-1-(的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4004ggtcgctgac atatttctgg 20210521120212DNA213人工序列220223根據人RANTES的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4005ctccacaggt accatgaagg 20210621120212DNA213人工序列220223根據人RANTES的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4006gtaagttcag gttcaaggac 20210721120212DNA213人工序列220223根據人β-肌動蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4007tggccgtacc actggcatcg20210821122212DNA213人工序列220223根據人β-肌動蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4008tccttctgca tcctgtcggc aa 22210921120212DNA213人工序列220223根據人白介素-6的mRNA的核苷酸序列設計的引物。4009ccactcacct cttcagaacg202101021120212DNA213人工序列220223根據人白介素-6的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40010gatgagttgt catgtcctgc 202101121120212DNA213人工序列220223根據人白介素-1α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40011gctgcatgga tcaatctgtg 202101221120212DNA213人工序列220223根據人白介素-1α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40012tcttcatctt gggcagtcac 202101321120212DNA213人工序列220223根據人白介素-1β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40013tggcagaagt acctaagctc 202101421120212DNA213人工序列220223根據人白介素-1β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40014catatggacc agacatcacc 202101521120212DNA213人工序列220223根據人腫瘤壞死因子α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40015aaaggacacc atgagcactg 202101621120212DNA213人工序列220223根據人腫瘤壞死因子α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40016cgagaagatg atctgactgc 202101721120212DNA213人工序列220223根據人白介素-7受體的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40017tggagaaagt ggctatgctc 202101821120212DNA213人工序列220223根據人白介素-7受體的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40018ggcggtaagc tacatcatgc202101921120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-1-β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40019gaagcttctg agttctgcag202102021120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-1-β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40020ttcctgtctc tgagcagctc202102121120212DNA213人工序列220223根據人肝和調節激活的趨化因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40021aagagtttgc tcctggctgc 202102221120212DNA213人工序列220223根據人肝和調節激活的趨化因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40022ttggatttgc gcacacagac 202102321120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞衍生的趨化因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40023acagactgca ctcctggttg 202102421120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞衍生的趨化因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40024aggctcttca ttggctcagc 202102521119212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-2-β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40025cgtggtcact gaactgcgc192102621120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-2-β的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40026acttctctcc tgtcagttgg 202102721118212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-2-α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40027tgctgctcct gctcctgg 182102821120212DNA213人工序列220223根據人巨噬細胞炎症蛋白-2-α的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40028ctgcccattc ttgagtgtgg 202102921121212DNA213人工序列220223根據人生長調節蛋白-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40029aacatccaaa gtgtgaacgt g 212103021119212DNA213人工序列220223根據人生長調節蛋白-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40030ctctgcagct gtgtctctc192103121120212DNA213人工序列220223根據人基質金屬蛋白酶-9的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40031cttctccaga agcaactgtc 202103221120212DNA213人工序列220223根據人基質金屬蛋白酶-9的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40032accacaactc gtcatcgtcg 202103321120212DNA213人工序列220223根據人移動抑制因子相關蛋白-8的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40033tcatcgacgt ctaccacaag202103421120212DNA213人工序列220223根據人移動抑制因子相關蛋白-8的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40034accagaatga ggaactcctg202103521120212DNA213人工序列220223根據人溶菌酶的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40035tgtcctcctt tctgttacgg202103621120212DNA213人工序列220223根據人溶菌酶的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40036tgacaggcat taactgctcc 202103721120212DNA213人工序列220223根據人GABA(A)受體相關蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40037aagaagagca tccgttcgag 202103821120212DNA213人工序列220223根據人GABA(A)受體相關蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40038tggtgttcct ggtacagctg 202103921119212DNA213人工序列220223根據人幹擾素誘導17-kDa/15-kDa蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40039catgtcggtg tcagagctg192104021120212DNA213人工序列220223根據人幹擾素誘導17-kDa/15-kDa蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40040ctcacttgct gcttcaggtg 202104121120212DNA213人工序列220223根據人幹擾素誘導蛋白p78的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40041gtggctgaga acaacctgtg 202104221120212DNA213人工序列220223根據人幹擾素誘導蛋白p78的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40042agtcagatcc gggacatctc 202104321120212DNA213人工序列220223根據人SCO同系物-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40043gcagcagcaa aagcgaacag 202104421120212DNA213人工序列220223根據人SCO同系物-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40044gatgaagaca ggctgcactg 202104521120212DNA213人工序列220223根據人轉酮酶的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40045cctacgtatc agctccatcc 202104621120212DNA213人工序列220223根據人轉酮酶的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40046catacagagc cctctgacag 202104721120212DNA213人工序列220223根據人腺苷A2a受體的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40047tgtggctcaa cagcaacctg 202104821120212DNA213人工序列220223根據人腺苷A2a受體的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40048gaccacatcc tcaaagagac 202104921120212DNA213人工序列220223根據人CD37抗原的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40049gcctcatcaa gtacttcctc 202105021120212DNA213人工序列220223根據人CD37抗原的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40050atgaggactt ggaaccagtc 202105121120212DNA213人工序列220223根據人備解素P因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40051ctaccagaaa cgtagtggtg 202105221120212DNA213人工序列220223根據人備解素P因子的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40052gtgtctcctt aggttcgtgg 202105321120212DNA213人工序列220223根據人G-蛋白信號調節因子-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40053ttggctgttc aacacgactg 202105421120212DNA213人工序列220223根據人G-蛋白信號調節因子-2的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40054ggcagttgta aagcagccac 202105521120212DNA213人工序列220223根據人Nef-相關因子-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40055agcagaattc accagagagc 202105621120212DNA213人工序列220223根據人Nef-相關因子-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40056ttccatcttc ggtgagcctg 202105721120212DNA213人工序列220223根據人骨髓白血病細胞分化蛋白-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40057gcatgcttcg gaaactggac 202105821120212DNA213人工序列220223根據人骨髓白血病細胞分化蛋白-1的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40058gaagttacag cttggagtcc 202105921120212DNA213人工序列220223根據人信號肽酶複合物(18kDa)的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40059gattgtagtg gtgctcagtg 202106021120212DNA213人工序列220223根據人信號肽酶複合物(18kDa)的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40060tggcatcttc ccaggaacag 202106121121212DNA213人工序列220223根據人β-肌動蛋白的mRNA的核苷酸序列設計的引物。40061caagagatgg ccacggctgc t 2權利要求
1.基因表達調節失常矯正劑，其特徵是含有從下式(I)、(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇出的至少一種化合物作為有效成分， 式中，X和Y為H或CH2OH，其中當X為CH2OH時，Y為H，當X為H時，Y為CH2OH， 式中，R為從含有SH基化合物除去一個SH基的殘基。
2.權利要求1記載的基因表達調節失常矯正劑，其特徵是可以對從以下31種基因群中選擇出來的一種以上的基因的表達調節失常進行矯正，這31種基因是白介素-6[interleukin-6(Genbank Accession號M14584)]基因、白介素-10[interleukin-10(Genbank Accession號M57627)]基因、血紅素加氧酶-1[hemeoxygenase-1(Genbank Accession號NM002133)]基因、前列腺素G/H合成酶-2[prostaglandin G/H synthase-2(GenbankAccession號AL033533)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-1-α[macrophage inflammatory protein-1-α(Genbank Accession號M23452)]基因、RANTES[RANTES(Genbank Accession號NM002985)]基因、白介素-1α[interleukin-1α(Genbank Accession號X02851)]基因、白介素-1β[interleukin-1β(Genbank Accession號K02770)]基因、腫瘤壞死因子α[tumor necrosis factorα(Genbank Accession號M10988)]基因、白介素-7受體[interleukin-7 receptor(Genbank Accession號M29696)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-1-β[macrophage inflammatory protein-1-β(Genbank Accession號J04130)]基因、肝和激活作用調節性趨化因子[liver and activation-regulatedchemokine(Genbank Accession號D86955)]基因、巨噬細胞衍生的趨化因子[macrophage-derived chemokine(GenbankAccession號U83171)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-2-β[macrophage inflammatory protein-2-β(Genbank Accession號M36821)]基因、巨噬細胞炎症蛋白-2-α[macrophage inflammatory protein-2-α(Genbank Accession號M36820)]基因、生長調節蛋白-1[growth regulated protein-1(Genbank Accession號J03561)]基因、基質金屬蛋白酶-9[matrix metalloproteinase-9(GenbankAccession號J05070)]基因、移動抑制因子相關蛋白-8[migration inhibitory factor-relatedprotein-8(Genbank Accession號X06234)]基因、溶菌酶[lyzozyme(Genbank Accession號M21119)]基因、GABA(A)受體相關蛋白[GABA(A)receptor-associatedprotein(Genbank Accession號NM007278)]基因、幹擾素誘導17-kDa/15-kDa蛋白[interferon-induced 17-kDa/15-kDa protein(Genbank Accession號M13755)]基因、幹擾素誘導蛋白p78[interferon-induced protein p78(GenbankAccession號M33882)]基因、SCO同系物-2[SCO(cytochrome oxidase deficient，yeast)homolog-2(Genbank Accession號AL021683)]基因、轉酮酶[transketolase(Genbank Accession號L12711)]基因、腺苷A2a受體[adenosine A2a receptor(genbank Accession號S46950)]基因、CD37抗原[CD37 antigen(Genbank Accession號X14046)]基因、備解素P因子[properdin P factor，complement(Genbank Accession號M83652)]基因、G-蛋白信號傳遞的調節蛋白-2[regulator of G-proteinsignaling-2(Genbank Accession號L13463)]基因、Nef-相關因子-1[Nef-associated factor-1(Genbank Accession號AJ011896)]基因、骨髓白血病細胞分化蛋白-1[myeloid leukemia celldifferentiation protein-1(Genbank Accession號L08246)]基因和信號肽酶複合物[signal peptidase complex(18kDa)(GenbankAccession號AF061737)]基因。
3.對從權利要求2記載的基因群中選擇出1個以上的基因表達調節失常需要進行矯正的疾病的治療藥或預防藥，其特徵是含有從下式(I)、(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇出至少一種化合物作為有效成分， 式中，X和Y為H或CH2OH，其中當X為CH2OH時，Y為H，當X為H時，Y為CH2OH， 式中，R為從含有SH基化合物除去一個SH基的殘基。
4.權利要求3記載的治療藥或預防藥，其中的疾病是炎性疾病。
5.權利要求3或4記載的治療藥或預防藥，其是白介素-6產生抑制劑、白介素-10產生抑制劑、血紅素加氧酶產生誘導劑、前列腺素G/H合成酶-2產生抑制劑、巨噬細胞炎症蛋白-1-α產生抑制劑、RANTES產生抑制劑或腫瘤壞死因子α產生抑制劑。
6.基因表達調節失常的矯正方法，其特徵是投給哺乳動物以化合物，該化合物是從下式(I)、(II)表示的化合物以及它們的鹽中選擇出的至少一種化合物， 式中，X和Y為H或CH2OH，其中當X為CH2OH時，Y為H，當X為H時，Y為CH2OH， 式中，R為從含有SH基化合物除去一個SH基的殘基。
7.權利要求6記載的基因表達調節失常的矯正方法，該方法可對從權利要求2記載的基因群選擇出的一種以上的基因的表達調節失常進行矯正。
全文摘要
本發明提供以特定化合物作為有效成分為特徵的基因表達調節失常矯正劑，提供特定基因表達調節失常需要進行矯正的疾病的治療劑或預防劑，以及以將上述化合物用於哺乳動物為特徵的基因表達調節失常的矯正方法。
文檔編號A61K31/351GK1418207SQ01806550
公開日2003年5月14日 申請日期2001年1月11日 優先權日2000年1月13日
發明者榎龍嗣, 山下周作, 西村香織, 佐川裕章, 加藤鬱之進 申請人:寶生物工程株式會社