外來豚草天敵廣聚螢葉甲的半人工飼料及其製備方法

2023-05-05 00:39:31

專利名稱：：外來豚草天敵廣聚螢葉甲的半人工飼料及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及到一種入侵生物(豚草)的天敵——廣聚螢葉甲(OphraellacommimaLeSage)半人工飼料的配方及其製備方法，屬於有害生物的生物防治領域，專用於大規模飼養繁殖害草天敵廣聚螢葉甲，可代替依賴種植植物或季節性植物短缺時大量飼養廣聚螢葉甲。二
背景技術：
：豚草Ambrosiaartemisiifolia原產於北美，是廣泛傳播的世界性惡性害草。二十世紀三十年代已入侵我國，後以瀋陽、南京、武漢、南昌等4個擴散中心向周邊蔓延危害，現已分布到東北、華北、華中和華東等約20多個省、市、自治區。豚草的花粉能引起人的過敏性反應——"枯草熱病"，人得此病後，眼、耳、鼻奇癢，陣發性噴嚏，流眼淚及大量清水樣或粘性鼻涕，哮喘，呼吸困難，症狀很像感冒，重者可喪失勞動力，有時還伴有支氣管的痙攣，枯草熱病已成為世界性的公害；豚草所披短毛也可引起人體過敏、哮喘、過敏性皮炎等症；花粉、幼嫩的莖葉，可做羊和兔的飼料，但奶牛吃豚草葉子後，可使牛奶和奶製品產生不愉快的氣味和不適口的味道；豚草對於土壤中的線蟲類和蚯蚓類有一定地抑制作用；豚草吸肥能力和再生能力極強，可侵入各種農作物田，如大麻、玉米、大豆田等，吸收大量的肥水，造成土壤乾旱貧瘠，還遮擋陽光，壓抑作物，阻礙農業操作，使作物不能正常生長，影響作物產量。所以豚草在入侵地對生態環境、農牧業生產和人類健康構成了嚴重威脅。我國19871990年由中國農業科學院生防所曾先後從加拿大、澳大利亞和前蘇聯引進豚草條紋葉甲(Zygogrammasuturalis)、豚草巻蛾(Epiblemastre皿ana)、豚草夜娥(Tarachidiacandefacta)、月豕草實蟲雖(Eimrestabella)禾口月豕草莉馬(Xiothipssp.)5種天敵昆蟲。經初步研究在湖南、北京、遼寧等地釋放了引進的豚草條紋葉甲和豚草巻蛾用於防治豚草，但迄今只有豚草巻蛾生存了下來，並未取得滿意的防治效果。自1997年在日本首次發現原產於北美的廣聚螢葉甲(OphraellacommunaLeSage)(孟玲和李保平，2006)傳入亞洲，隨後在韓國、我國臺灣和大陸的江蘇、湖北、湖南、江西、安徽、浙江等省相繼發現，到目前為止廣東、福建等省也有分布。廣聚螢葉甲屬鞘翅目Coleoprera、葉甲科Chrysomelidae、螢葉甲亞科Galercinae，此蟲在野外聚集取食豚草，可將整株葉片食盡致使植株死亡。通過對野外生態寄主範圍的調查和進行選擇性與非選擇性的寄主專一性測定，廣聚螢葉甲是較為安全的具有控害潛力的豚草有效天敵，由於該葉甲對豚草的專食性和貪食性，在加拿大南部用於防治豚草，目前我國湖南、江西、廣西、廣東等省也大量繁殖廣聚螢葉甲用於豚草的生物防治。鑑於此，為保持和延續廣聚螢葉甲的種群數量和大量繁殖和釋放，合適的半人工飼料配方及其製備方法是解決廣聚螢葉甲大量飼養繁殖的關鍵。用半人工飼料飼養，不僅可以使天敵昆蟲發育整齊、生理一致，而且在很多情況下是解決季節性飼料短缺的主要途徑。
發明內容技術問題本發明所要解決的技術問題是針對目前大力防除外來有害豚草中大量繁殖廣聚螢葉甲常會出現季節性飼料短缺及需要大量種植豚草所花費的人力、地力和物力的問題，研製廣聚螢葉甲半人工飼料配方及製備技術，是為解決防控豚草所需的大規模飼養廣聚螢葉甲的關鍵技術。技術方案一種外來惡性豚草天敵——廣聚螢葉甲半人工飼料配方關鍵因子的確定，其特徵在於影響廣聚螢葉甲成蟲壽命的8種關鍵成分依次是麥胚、10XK0H、葡萄糖、尼伯金、豚草葉粉、瓊脂、膽固醇、大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發育的8種關鍵成分依次是燕麥片、瓊脂、麥胚、葡萄糖、氯化膽鹼、10%KOH、蒸餾水、大豆油。此結果為研製廣聚螢葉甲人工飼料提供了基礎。廣聚螢葉甲成蟲的半人工飼料，其配方為瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉1lg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。廣聚螢葉甲幼蟲的半人工飼料，其配方為瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VC0.5g，酪蛋白25g，|3_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽鹼lg，10%KO朋ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配製方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。廣聚螢葉甲半人工飼料的製備方法1>製取新鮮豚草葉粉從野外採集新鮮豚草葉片帶回室內。將採回的新鮮葉片洗淨、瀝乾，裝入牛皮紙信封袋中，採用真空冷凍乾燥。如無此條件，也可在電熱鼓風乾燥箱內8(TC烘乾10h(含水量在5X以下)。將乾燥處理後的豚草幹葉取出，加入攪拌機磨碎成100目以上或細度在147um以下的細粉，得到的豚草葉粉裝入自封袋中，放冰箱中(t=0°C)乾燥冷藏。2〉半人工飼料的製備將瓊脂、蒸餾水(350ml)歸為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽鹼、蒸餾水(50ml)歸為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水(100ml)歸為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解。第二步Y組中的混合物隨後慢慢加入X組中，充分攪拌(事先將Y組中各成分混合攪拌均勻，並完全溶解在蒸餾水中待用)。第三步待以上混合物溫度降到5055。C時，加入混合均勻的Z組的成分。將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻後轉至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成。3>半人工飼料滅菌採用表面消毒，將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌IO個小時。滅菌後的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱(t=4°C)冷藏待用，通常飼料可貯藏一周不影響飼餵效果。有益效果本發明的廣聚螢葉甲半人工飼料配方和製備方法填補了大規模用人工飼料繁殖廣聚螢葉甲防治有害豚草的空白，與現有人工種植豚草飼餵廣聚螢葉甲的技術相比，用半人工飼料飼養，不僅可以使天敵昆蟲發育整齊、生理一致、便於飼養、節約飼養空間，而且在很多情況下還可解決季節性飼料短缺，也是節約人力、地力、物力等投資的重要途徑，為大規模人工繁殖提供技術支撐。具體實施例方式1、新鮮豚草葉粉的製取從野外採集新鮮豚草葉片帶回室內。將採回的新鮮葉片洗淨、瀝乾，裝入牛皮紙信封袋中，採用真空冷凍乾燥。如無此條件，也可在電熱鼓風乾燥箱內8(TC烘乾10h，鼓風待其乾燥，要求含水量在5%以下。將乾燥處理後的豚草幹葉取出，加入攪拌機磨碎，使其成為100目以上或細度在147um以下的細粉。得到的豚草葉粉裝入自封袋中，放冰箱中(t=0°C)乾燥冷藏。韋氏鹽的配比表l韋氏鹽的配方成分添加量(mg)成分添力口量(mg)CaC03210KC1120CuS04'5H200.39KH2P04310Fe3(P04)3H2014.7KI0.050024]—MnS040.2NaCl-105MgS0490NaF0.57K2AL(S04)2H200.09Ca(P04)2149維生素混合物配比表2複合維生素的配方成分添加量(mg)成分添加量(mg)煙醯胺維生素B,維生素82維生素B652.1613.1226.2413.12維生素B12葉酸泛酸鈣生物素0.3213.1252.161.282、廣聚螢葉甲半人工飼料的配方根據廣聚螢葉甲的食性，參考鞘翅目的柳蘭葉甲Plagioderaversicolors馬鈴薯葉甲、黃瓜條紋葉甲、黃瓜星葉甲和玉米根螢葉甲半人工飼料或人工飼料配方，選取19種營養成分，將其中5個成分設計成4個水平，將其它成分設計成2個水平，共32個處理組合，即採用混水平正交試驗L32(45X216)，對各水平進行隨機化處理，確定出正交試驗方案(表3)，篩選出影響廣聚螢葉甲成蟲壽命的8種關鍵成分是麥胚>10%KOH>葡萄糖>尼伯金>豚草葉粉>瓊脂>膽固醇>大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發育的8種關鍵成分是燕麥片>瓊脂>麥胚>葡萄糖>氯化膽鹼>10%KOH>蒸餾水>大豆油。表3廣聚螢葉甲半人工飼料正交試驗因子水平表(單位g;或ml)5水平l水平2水平3水平4麥胚10152520酪蛋白20152510豚草葉粉1530252010%K0H6789葡萄糖15102025瓊脂910蒸餾水500500燕麥片1520酵母105韋氏鹽56膽固醇0.40.3氯化膽鹼11.5尼泊金0.30.4山梨酸0.50.4vc谷甾醇大豆油抗壞血酸鈉2.250.150.251,212.52.50.20.5213.5優化的廣聚螢葉甲半人工飼料配方是在對廣聚螢葉甲半人工飼料正交試驗所得配方的基礎上，依據所測得的豚草主要營養成分的測定結果(表4)和黃瓜條紋葉甲的半人工飼料配方(表5)進行了調整優化，確定了廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛O.8ml，麥胚22g，山梨酸O.5g，酪蛋白26g，豚草粉1lg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。廣聚螢葉甲幼蟲半人工飼料配方凍脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸0.3g，燕麥片20g，VC0.5g，酪蛋白25g，P_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽鹼lg，10%K0H6ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配製方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。表4豚草中營養成分含量測定結果6tableseeoriginaldocumentpage73、廣聚螢葉甲半人工飼料的製備按優化的廣聚螢葉甲半人工飼料配方方案，分別稱取各成分。將瓊脂、蒸餾水(350ml)為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽鹼、蒸餾水(50ml)為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%K0H、蒸餾水(100ml)為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解。第二步Y組中的混合物隨後慢慢加入X組中，充分攪拌(事先將Y組中各成分混合攪拌均勻，並完全溶解在蒸餾水中待用)。第三步待以上混合物溫度降到5055。C時，加入混合均勻的Z組的成分。將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻後轉至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用。半人工飼料滅菌採用表面消毒，將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌IO個小時。滅菌後的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱(t=4°C)冷藏待用，通常飼料可貯藏一周不影響飼餵效果。實施例按優化的廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方方案1)分別稱取瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉llg，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10%K0H8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。2)將瓊脂在蒸餾水(350ml)中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；3)隨後把麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽鹼等混合加入蒸餾水(50ml)，充分攪拌，使完全溶解在蒸餾水中後再倒入瓊脂液攪拌均勻，離開加熱源；4)待以上混合物溫度降到50。C時，加入混合均勻的酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水(100ml)，將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻後轉至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用，即製成成蟲半人工飼料。用此飼料飼餵廣聚螢葉甲成蟲平均產卵61.25±9.24粒，存活天數為34.47士0.81d，與對照豚草葉片飼養的成蟲(存活天數為35.ll士O.99d)相比，存活天數與對照無顯著差異顯著，即該飼料配方在成蟲壽命方面已達到與天然飼料有著同樣好的效果。按優化的廣聚螢葉甲幼蟲的半人工飼料配方方案，1)分別稱取瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VCO.5g，酪蛋白25g，13-谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽鹼lg，10%K0H6ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml(抗壞血酸鈉配製方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得)，韋氏鹽6g。2)將瓊脂在蒸餾水(350ml)中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；3)隨後把麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽鹼等混合物加入蒸餾水(50ml)，充分攪拌，使完全溶解在蒸餾水中後再倒入瓊脂液攪拌均勻，離開加熱源；4)待以上混合物溫度降到50。C時，加入混合均勻的酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10XK0H、蒸餾水(100ml)，將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻後轉至滅菌的瓷盤中，混合物冷凝即成，放入4t:冰箱中冷藏待用，即製成幼蟲半人工飼料。用此飼料飼餵廣聚螢葉甲幼蟲可以使該蟲完成幼蟲和蛹的發育，存活率可達到8.9%。此蟲主要在初齡時死亡率很高，豚草鮮葉片飼養的l齡幼蟲也只有38.7%的存活率。權利要求一種外來惡性豚草的天敵——廣聚螢葉甲的半人工飼料，其特徵在於廣聚螢葉甲成蟲半人工飼料配方，其成分配比為瓊脂11.6g，苯甲酸甲酯0.8g，蒸餾水672ml，甲醛0.8ml，麥胚22g，山梨酸0.5g，酪蛋白26g，豚草粉11g，蔗糖26g，維生素混合物0.4g，膽固醇0.05g，10％KOH8ml，韋氏鹽7.4g，蠅蛆粉0.02g，豆油0.2ml。2.—種外來惡性豚草的天敵——廣聚螢葉甲的半人工飼料，其特徵在於廣聚螢葉甲幼蟲半人工飼料配方，其成分配比為瓊脂9g，豚草粉30g，蒸餾水400ml，尼伯金2g，麥胚20g山梨酸O.3g，燕麥片20g，VCO.5g，酪蛋白25g，|3_谷甾醇2.25g，蔗糖25g，豆油2ml，膽固醇0.3g，橄欖油2ml，氯化膽鹼lg，腦KO朋ml，酵母5g，抗壞血酸鈉13.5ml，韋氏鹽6g，其中抗壞血酸鈉配製方法4.2g碳酸鈉和9.4gVC.溶解在100ml蒸餾水中配得。3.權利要求1或2所述廣聚螢葉甲半人工飼料的製備方法，包括1)製取新鮮豚草葉粉從野外採集新鮮豚草葉片帶回室內，8(TC烘乾10h至含水量在5%以下，加入攪拌機磨碎成100目以上或細度在147um以下的細粉。2)半人工飼料的製備將瓊脂、蒸餾水350ml歸為X組；麥胚、燕麥片、酪蛋白、蔗糖、膽固醇、氯化膽鹼、蒸餾水50ml歸為Y組；酵母、韋氏鹽、谷甾醇、豚草葉粉、蠅蛆粉、大豆油、橄欖油、尼伯金、甲醛、山梨酸、維生素混合物、酵母、抗壞血酸鈉、10%KOH、蒸餾水100ml歸為Z組。第一步將X組中的瓊脂在蒸餾水中浸泡，用微波爐加熱使瓊脂完全溶解；第二步將Y組中各成分混合攪拌均勻，並完全溶解在蒸餾水中，Y組中的混合物隨後慢慢加入X組中，充分攪拌；第三步待以上混合物溫度降到5055。C時，加入混合均勻的Z組的成分；將混合物攪拌15-20分鐘，混合均勻後混合物冷凝即成；3)人工飼料滅菌將配好的半人工飼料用保鮮膜封好，暴露在紫外燈下滅菌10個小時，菌後的半人工飼料可以新鮮使用或者放入冰箱4t:冷藏待用。全文摘要本發明涉及豚草的天敵廣聚螢葉甲的半人工飼料及其製備方法，屬於生物防治領域，其8種關鍵成分依次是麥胚、10％KOH、葡萄糖、尼伯金、豚草葉粉、瓊脂、膽固醇、大豆油；影響廣聚螢葉甲幼蟲生長發育的8種關鍵成分依次是燕麥片、瓊脂、麥胚、葡萄糖、氯化膽鹼、10％KOH、蒸餾水、大豆油。在半人工飼料製備過程中，對豚草葉粉的製取、各成分配製時的前後順序和配製方法以及滅菌保存的方法進行了規範，可用於大規模飼養繁殖豚草的天敵廣聚螢葉甲。文檔編號A23K1/18GK101744156SQ20101011309公開日2010年6月23日申請日期2010年2月24日優先權日2010年2月24日發明者劉芳,孟玲,李保平申請人:南京農業大學