抗感染症藥和大腦代謝促進藥及其製備方法
2023-05-05 00:26:51 2
專利名稱：抗感染症藥和大腦代謝促進藥及其製備方法
技術領域：
本發明涉及抗感染症藥及大腦代謝促進藥，更詳細地是有關對免疫力低下、愛滋病(後天性免疫不全綜合症)等感染症具有免疫力恢復及預防作用的抗感染症藥和大腦代謝促進藥以及它們的製造方法。
迄今為止，對流感、肝炎、麻疹、日本腦炎、成人T細胞白血病或是愛滋病等感染性症狀的有效藥物很少且具體藥效也還不很明確。
其中，愛滋病是HIV感染作為生物體內免疫防禦中心的T4淋巴細胞並在細胞內增殖，使細胞壞死，人體陷入嚴重的免疫不全症狀。因此，在通常情況下不誘發疾病的微生物此時以蔓延、氣管肺炎、多發性出血性肉腫等免疫抵抗力下降的基礎疾病為後期症狀，發病後幾年內幾乎所有患者都死亡。
但是，對愛滋病未發現有效的治療方法，現有的方法效果很差，且大多有副作用並對人體也有危險。
此外，作為愛滋病毒感染症的治療藥，還需考慮該病毒具有的特殊性。即，由於HIV從其感染初期起，需要長時間，有時甚至是一生的連續服藥，因此服用藥物應是副作用少的口服藥或是有一定效果的食品。
另外，愛滋病還包括感染腦神經系統細胞的腦症狀，因此服用物的效果最好是能達到大腦的物質，且此物質在從感染初期起應有抑制HIV對細胞的吸附、從感染細胞的增殖及阻止發病的作用，並應具有長期的提高免疫力但無副作用的功能。
迄今為止已知的腦代謝促進劑具有很強的副作用，因此迫切期待開發無副作用的物質。
如上所述，本發明的目的在於提供能抑制愛滋病菌對細胞的吸附及增殖，效力可達腦神經系統，改善腦症狀，並促進大腦代謝，可長期服用無副作用，可以日常飲食的方式起到預防效果的抗感染症藥及大腦代謝促進藥。
中國四川省一帶出產的杜仲樹皮及其葉，將其乾燥並用熱水提取後製成的產物，對保養肝臟、防止肥胖、衰老、降低血壓、解除疲勞等非常有效，是中國人傳統飲用物。本發明著眼於此，將其成分及製法反覆深入研究後發現將杜仲樹皮、樹葉熱水提取後的殘渣用鹼水溶液提取處理，得到的產品可抑制愛滋病菌的感染、阻止愛滋病菌對細胞的傷害，該產品對促進大腦代謝也具有顯著的效果，且長期服用也無副作用，解決了上述問題，從而完成了本發明。
綜上所述，本發明為將由杜仲樹皮用熱水提取後所得的殘渣再用鹼溶液提取所得的抗感染症藥、大腦代謝促進藥及其製造方法，更具體的是指將杜仲樹皮或樹葉用熱水提取，在得到的熱水提取後的殘渣(莖、葉、根)中加入Na2CO3、NaHCO3、KOH、NaOH、NH4OH，氨水中的任一種鹼水溶液，攪拌、振動，經過濾後，將提取液進行分離，得到的物質可作為抗感染症藥及大腦代謝促進藥，以及其製備方法。
附圖簡單說明
圖1為表1、2的結果表示圖、圖2為表3、4的結果表示圖、圖3為表示大腦代謝促進狀況圖。
主要產地在中國西南部四川省地區的杜仲樹是自然生長的落葉樹，將高度達20米的杜仲樹皮剝下使用，或將樹葉乾燥粉碎後使用。
熱水提取為常用方法，例如在上述的杜仲粉碎物中加入2—100倍的50—100℃的熱水，提取3分鐘—3小時，得到熱水提取殘渣。提取溶劑除水以外，還可使用乙醇、丙酮等。
在得到的熱水提取液的殘渣中加入氨等鹼溶液攪拌，進行鹼提取，此時，從熱水提取殘渣能數次提取更好。然後，將提取液過濾，在濾液中加入乙酸或鹽酸等中和處理，透析後將提取液進行冷凍乾燥等處理除去，得到粉末狀的提取物。另外，可以不經過熱水提取的過程而直接進行鹼提取，也可得到鹼提取物。
所用鹼溶液例如有Na2CO3、NaHCO3、KOH、NaOH、NH4OH氨水等，提取方法可用加熱提取等慣用方法。提取液的分離可用通常方法，如加綿過濾、傾析法或離心分離等常用方法。提取溶劑除水以外還可以使用乙醇、丙酮等，提取溶劑的除去可用冷凍乾燥等常用方法。
本組合物是將有效成分與生理學上容許的載體、賦形劑、粘合劑、稀釋劑等混合，製成例如顆粒劑、粉劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、塗敷劑、糖漿劑、栓劑、注射劑等劑形，用於口服或非口服，或是加入茶中服用，或是直接以溶液、粉末顆粒、片劑、乳劑、膠狀物等任意的形態單獨給藥，另外還可利用濃縮液或與其他飲食物混合服用。
投用量因給藥對象的疾病的種類、程度的不同而不同，但作為常用飲料服用時，優選服用1mg—10g/l的溶液20—500ml。另外，以提取物的粉末物形式服用時，優選服用0.2mg—1g/日。
使用杜仲樹皮、樹葉的鹼提取物，對大鼠做急性毒性試驗，無死亡例，另外在生物化學的血液檢查及病理組織學的檢查中也未發現異常。
實施例製造例1採用生長在中國西南部四川省的落葉樹杜仲，從高達20米的杜仲樹上剝下杜仲樹皮，然後進行乾燥粉碎加工，在1kg的粉碎物中加入4升水，沸騰30分鐘後進行過濾，得到熱水提取殘渣。
在得到的熱水提取液的殘渣中加入10升0.85％的氨水溶液，在40℃下攪拌4小時。將此工序重複2次，然後過濾處理提取液。在9.5升的濾液裡加入醋酸或鹽酸，使溶液中和為pH6.5。透析後將回收物用冷凍乾燥法進行乾燥處理，得到粉末狀的酸性多糖類提取物A。收率為每1kg的粉碎物可以得到50g的鹼提取物乾燥粉末。製造例2在製造例1的前提下，用杜仲樹葉代替樹皮，按製造例1的方法，得到粉末狀的酸性多糖類提取物B。收率為每1kg的杜仲粉碎物可以得到120g的粉末提取物。製造例3採用中國西南部四川省自然生長的高達20米的落葉樹杜仲，將其樹皮剝離後進行乾燥粉碎加工。在1kg杜仲粉碎物中裡加入10升的0.8％的氨水溶液，在40℃下攪拌4小時。將此工序重複2次，然後過濾處理提取液，在9.5升的濾液中加入醋酸或鹽酸，使溶液中和為pH6.5。透析後將回收物通過冷凍乾燥法進行乾燥處理，得到粉末狀的酸性多糖類提取物C。收率為每1kg的粉碎物可以得到130g鹼提取物乾燥粉末。利用提取物進行抗愛滋病毒的試驗方法使作為成人T細胞白血病病毒的HTLV—1陽性細胞樣的MT—4細胞感染上作為愛滋病起因病毒的HIV，在細胞質內由於出現HIV抗原蛋白質，使細胞的DNA合成被抑制，由此產生的對細胞的阻礙效果使感染細胞死亡，利用此現象可以測定抗HIV效果。
將由製造例1、2得到的提取物A、B以不同濃度加入該感染細胞進行試驗，通過對被病毒感染的細胞傷害的阻止力來評價其抗HIV感染。實施例1在96孔的試驗盤裡加入不同濃度的由製造例1及2得到的杜仲樹皮(A)、葉(B)的提取物，同時加入感染了HIV HTLV—111B或HIV—2ROD的MT4細胞(1.5×105/Well.MOI0.01)，要在感染後立即加入。
同時為了檢驗製造例1及2的提取物A、B本身對於MT4細胞的細胞毒性，將未感染病毒的非感染細胞同樣與不同濃度的提取物A、B一起進行培養。
試驗方法在CO2培養器內注入含10％牛胎兒血清的RPMT1640培養基，在37℃條件下培養5天後，通過在活細胞的線粒體內膜中存在的呼吸鏈，使MTT(3-(4，5-二甲基唑-2-基)-2，5-二苯基-四唑鎓)開裂，通過生成MTT甲，按比例測定活細胞數。
此時，如果存在添加了A、B的提取液的培養細胞，則提取液A、B由於細胞內酶的作用變為青褐色的甲，培養液也隨之變為青褐色。以吸光光度計測定該色調的變化，算出細胞生存率。〔Pauwels，R，J Virol.Methods.16，171—185(1987)〕。
所得結果如表1—4及與其對應的圖(圖1、圖2)所示。圖1、圖2中，橫軸表示提取物A、B的濃度，縱軸表示活細胞數(相對於對照組的％)。另外，圖1、圖2中的黑色柱狀圖為有關未感染病毒細胞的試驗結果，以未加入本發明提取物A、B的結果(表2、表4)為100％來相對地表示活細胞數。帶斜線的柱狀圖表示感染了愛滋病毒的細胞的試驗結果(表1、表3)，以上述對照組結果為100％來相對地表示活細胞數。
由圖表可清楚知道隨著杜仲樹皮、樹葉提取物A、B濃度的上升，活細胞數也相應增加，提取物對感染上HIV—1及HIV-2而產生的細胞障礙有抑制作用。另外，由未感染愛滋病毒細胞的實驗結果(黑色柱狀圖)可以看出，由杜仲樹皮得到的提取液A的抗病毒活性為163μg/ml—260μg/ml，由杜仲葉得到的提取液B的抗病毒活性為169μg/ml—242μg/ml，各自的有效濃度為90％。另外，提取物C的抗病毒活性為200μg/ml—280μg/ml，有效濃度為90％。實施例2將由製造例1得到的提取物A冷凍乾燥後，通常將此提取乾燥物以林格爾液溶解成一定濃度(10mg/ml)，經過一定時間(約1—2小時)後，將此溶液以0.1mg/10g體重(body weight)的量注射入大鼠(SD系雄性)腹腔內，以微透析(miorodialysis)法來檢測神經傳遞物質的變動。此時的微透析法是將微型透析管專用的引導插管手術埋入，手術經過20小時以上後，將微型透析管插入引導插管，通過透析來檢測腦內神經傳遞物質的變動。因為可以在微型透析管內通過透析來測定新進入的神經傳遞物質的濃度，所以可與高效液相色譜儀(HPLC)連接，以電化學檢測器自動檢測出促進大腦代謝的狀況，其結果如圖3所示。
根據本發明，可以提供抑制愛滋病毒對細胞的附著、增殖，並達到腦神經系統，改善大腦症狀，促進大腦代謝，且長期服用無副作用的，即使以日常飲食的形式也可以作為具有預防效果的抗感染症藥及大腦代謝促進藥。
表1實驗物樹皮感染上HIV的MT-4細胞(HIV strain；HTLV-IIIB)
表2實驗物樹皮未被感染的MT-4細胞
50％ 有效濃度 (EC50) 163.6473ug/ml90％ 有效濃度 (EC90) 260.4923ug/ml50％ 阻止細胞傷害濃度(CC50) ＞1000 ug/ml有效係數(SI＝CC50/EC50) ＞6
表3實驗物葉感染上HIV的MT-4細胞(HIV strain；HTLV-IIIB)
表4實驗物葉未被感染的MT-4細胞
50％ 有效濃度(EC50) 169.0177ug/ml90％ 有效濃度(EC90) 242.4697ug/ml50％ 阻止細胞傷害濃度(CC50) 865.1597ug/ml有效係數(SI＝CC50/EC50) 權利要求
1.一種抗感染症藥，是以由杜仲樹皮或樹葉用鹼提取得到的提取物作為有效成分。
2.抗感染症藥的製造方法，其特徵在於，用熱水提取杜仲樹皮或樹葉，在得到的熱水提取後的殘渣中加入鹼水溶液進行攪拌，過濾後，將提取液中和處理，然後將提取液分離。
3.權利要求2中記載的抗感染症藥的製造方法，其特徵在於，感染症為愛滋病毒感染症。
4.權利要求2或3中記載的抗感染症藥的製造方法，其中的鹼水溶液為碳酸鈉(Na2CO3)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、氫氧化鉀(KOH)、氫氧化鈉(NaOH)、氫氧化銨(NH4OH)、氨水(NH3)中的任意一種。
5.一種大腦代謝促進藥，是以由杜仲樹皮或樹葉用鹼提取得到的提取物作為有效成分。
6.大腦代謝促進藥的製造方法，其特徵在於，用熱水提取杜仲樹皮或樹葉，在得到的熱水提取後的殘渣中加入鹼水溶液進行攪拌，過濾後，將提取液中和處理，然後將提取液分離。
7.權利要求6中記載的大腦代謝促進藥的製造方法，其特徵在於，其中的鹼水溶液為碳酸鈉(Na2CO3)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、氫氧化鉀(KOH)、氫氧化鈉(NaOH)、氫氧化銨(NH4OH)、氨水(NH3)中的任意一種。
全文摘要
抗感染症藥及大腦代謝促進藥及其製造方法，其特徵在於，用熱水提取杜仲樹皮或樹葉，在得到的熱水提取液的殘渣中加入鹼水溶液，攪拌，過濾後將提取液中和處理，然後將提取液分離。該提取物可抑制愛滋病毒對細胞的附著及增殖，並能達到腦神經系統，改變大腦症狀，還可促進大腦代謝。另外，長期使用無副作用，因此可以作為日常飲食來達到預防效果。
文檔編號A61K36/00GK1129909SQ95190464
公開日1996年8月28日 申請日期1995年9月18日 優先權日1994年9月19日
發明者中野昌俊, 吉原將純, 中島秀喜, 柏幸成 申請人:柏幸成, 吉原將純, 中野昌俊