一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法
2023-05-05 04:29:06
一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法
【專利摘要】本發明公開了一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，本發明的樣品處理為取一定量的藥物加水或者有機溶劑溶解後經活化的C18固相萃取柱過濾，取續濾液作為供試品溶液。分析方法採用離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱，淋洗液為甲基磺酸溶液，柱後補液為氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液。本發明的主要優點有：1）本方法無需對鹽酸羥胺進行衍生化反應，採取直接測定的方法，操作簡單，有效的避免幹擾；2）樣品前期處理採用C18固相萃取柱過濾，可以有效除去相關有機物，減少對陽離子交換色譜柱的傷害和對測定產生的幹擾；3）樣品取樣量少，檢測靈敏度提高了一個數量級，重現性好。
【專利說明】一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於分析化學領域，具體涉及一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法。【背景技術】
[0002]鹽酸羥胺主要用作還原劑和顯像劑，有機合成中用於製備肟，也用作合成抗癌藥(羥基脲)、磺胺藥(新諾明)和農藥(滅多威)的原料。近年來用於合成抗生素如:阿奇黴素，克拉黴素，羅紅黴素等藥物。
[0003]鹽酸羥胺具有遺傳毒性和致基因突變作用，檢測其在藥物中的殘留、控制其限度是確保用藥安全、有效，保證藥物質量的一個重要方面。關於鹽酸羥胺的測定，目前主要有氧化還原滴定法、酸鹼滴定法和分光光度法等，上述方法均需要對鹽酸羥胺進行衍生化反應間接測定鹽酸羥胺的含量，操作複雜，相關共存離子容易對測定產生幹擾，且其靈敏度較低，取樣量較大。因此急需研發一種操作簡單，靈敏度高的測定方法。
【發明內容】
[0004]發明目的:為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法。
[0005]技術方案:為解決上述技術問題，本發明提供的一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，所述測定方法包括如下步驟:
(1)供試樣品的製備:稱取一定含量的樣品藥物，加入水或者有機溶解後經活化的C18固相萃取柱過濾，取續濾液作為供試品溶液；
(2)對照品貯備液的製備:取鹽酸羥胺，用與溶解供試品相同的溶劑溶解並稀釋成得到鹽酸羥胺溶液；
(3)離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱；淋洗液為甲基磺酸溶液，柱後補液為鹼性溶液；檢測器為安培檢測器，以Au為電極，Ag-AgCl電極為參比電極，波形為Carbohydrates,柱溫為室溫；
(4)打開Chromeleon工作站,進入在線工作站,設置參比電極,選擇波形,設置流速柱
溫，走基線；
(5)進樣:當基線平穩時，開始進樣，採集分析結束後，即出峰結束後，停止採樣；定量分析採用外標法，將對照品貯備液配製不同濃度的對照品溶液進樣，檢測結果，得到鹽酸羥胺的峰面積，並繪製出峰面積；在與對照品貯備液相同的進樣條件下進供試品溶液，得到鹽酸羥胺的峰面積，從標準曲線上就可得知相應的濃度。
[0006]進一步地，甲基磺酸溶液為25-35mmol/L，流速為0.8-1.2mL/min。
[0007]進一步地，柱後補液的鹼性溶液為氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液的一種或幾種，濃度為 200 mmol/T-500 mmol/L。
[0008]進一步地，C18固相萃取柱使用前需至少3倍柱體積的甲醇活化。
[0009]進一步地，柱後補液的流速為0.2-0.5 mL/min。[0010]進一步地，經柱後補液後，溶液的pH值在10-14之間。
[0011]進一步地，所述步驟(5)中的進樣量為15-50 μ L。
[0012]進一步地，所述CS16陽離子交換柱的規格為0.5Χ 250mm。
[0013]有益效果:本發明相對於現有技術而言，具有以下優勢:
(I)勿需對鹽酸羥胺進行衍生化反應來間接測定鹽酸羥胺的含量，操作簡單，克服了現有技術中相關共存離子容易對測定產生幹擾的技術問題。
[0014](2)樣品前期處理採用C18固相萃取柱過濾，可以有效除去相關有機物，減少對陽離子交換色譜柱的傷害和對測定產生的幹擾。
[0015]( 3 )樣品取樣量少，檢測靈敏度提高了 一個數量級，重現性好。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0016]圖1為實施例1空白溶劑的離子色譜圖。
[0017]圖2為實施例1鹽酸羥胺0.5ppm對照品溶液的離子色譜圖。
[0018]圖3為實施例1為供試品利培酮溶液的離子色譜圖。
[0019]圖4為實施例1含0.5ppm鹽酸羥胺對照品的利培酮溶液離子色譜圖。
[0020]圖5為實施例1鹽酸羥胺濃度與峰面積的變化曲線。其中橫軸為鹽酸羥胺濃度(ppm),縱軸為峰面積(nC*min)。
【具體實施方式】
[0021]下面結合附圖對本發明作更進一步的說明。
[0022]本發明的具體實施例中取抗精神病藥利培酮作為供試樣品。
[0023]實施例1
一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，所述測定方法包括如下步驟:
供試樣品的製備:取利培酮0.1g加4mL甲醇溶解後，用水稀釋成每ImL含IOmg的溶液經活化的C18固相萃取柱過濾後，即得。
[0024]對照品貯備液的製備:取鹽酸羥胺適量，用40%甲醇溶解並稀釋成每ImL含IOppm的鹽酸羥胺溶液。
[0025]對照品溶液的製備:吸取對照品貯備液2.5mL至50mL量瓶中，用40%甲醇溶解並稀釋成每ImL含0.5ppm的鹽酸輕胺對照品溶液。
[0026]0.5ppm鹽酸羥胺對照品的利培酮溶液的製備:取利培酮0.1g至IOmL量瓶中加4mL甲醇溶解後，吸取對照品貯備液0.5mL至此容量瓶中，用40%甲醇溶液稀釋並定容至刻度，搖勻及得。
[0027]離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱(0.5X 250mm);淋洗液為30mmol/L甲基磺酸溶液,流速為1.0mL/min,柱後補液為300mmol/L氫氧化鈉溶液，流速為0.3mL/min。檢測器為安培檢測器，以Au為電極,Ag-AgCl電極為參比電極，波形為Carbohydrates,柱溫為室溫,進樣量為25 μ L。
[0028]打開Chromeleon工作站,進入在線工作站,輸入恰當的文字和參數,走基線。
[0029]當基線平穩時，開始進樣，採集分析結束後，即出峰結束後，停止採樣。
[0030]在上述條件下分別進40%的甲醇溶液作為空白溶液，結果見圖1，進鹽酸羥胺0.5ppm對照品溶液結果見圖2，進供試品溶液結果見圖3，進含0.5ppm鹽酸羥胺對照品的利培酮溶液結果見圖4。
[0031]定量分析採用外標法，將對照品貯備液配製成一系列濃度的對照品溶液進樣，得到鹽酸羥胺的峰面積，並繪製出峰面積——組分濃度的標準曲線，結果見圖5。將供試品溶液中鹽酸羥胺的峰面積帶入圖5標準曲線，即可得到供試品中鹽酸羥胺的濃度。
[0032]實施例2
一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，所述測定方法包括如下步驟:
供試樣品的製備:取羥基脲0.1g加水溶解後，用水稀釋成每ImL含IOmg的溶液經活化的C18固相萃取柱過濾後，即得。
[0033]對照品貯備液的製備:取鹽酸羥胺適量，加水溶解並稀釋成每ImL含IOppm的鹽酸羥胺溶液。
[0034]離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱(0.5X 250mm);淋洗液為35mmol/L甲基磺酸溶液,流速為1.2mL/min,柱後補液為500mmol/L氫氧化鉀溶液，流速為0.2mL/min。檢測器為安培檢測器，以Au為電極,Ag-AgCl電極為參比電極，波形為Carbohydrates,柱溫為室溫,進樣量為15 μ L。
[0035]打開Chromeleon工作站,進入在線工作站,輸入恰當的文字和參數,走基線。
[0036]當基線平穩時，開始進樣，採集分析結束後，即出峰結束後，停止採樣。定量分析採用外標法，去對照品貯備液配製不同濃度的對照品溶液進樣，檢測結果，得到鹽酸羥胺的峰面積，並繪製出峰面積一組分濃度的標準曲線。
[0037]在相同條件下進供試品溶液，得到鹽酸羥胺的峰面積，從標準曲線上就可得知相應的濃度。
[0038]實施例3
一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，所述測定方法包括如下步驟:
供試樣品的製備:取羅紅黴素0.1g加5mL乙醇溶解後，用水稀釋成每ImL含IOmg的溶液經活化的C18固相萃取柱過濾後，即得
對照品貯備液的製備:取鹽酸羥胺適量，加50%乙醇溶解並稀釋成每ImL含IOppm的鹽酸羥胺溶液。
[0039]離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱(0.5X 250mm);淋洗液為25mmol/L甲基磺酸溶液,流速為0.8mL/min,柱後補液為200mmol/L氫氧化鉀溶液，流速為0.5mL/min。檢測器為安培檢測器，以Au為電極,Ag-AgCl電極為參比電極，波形為Carbohydrates,柱溫為室溫,進樣量為25 μ L。
[0040]打開Chromeleon工作站,進入在線工作站,輸入恰當的文字和參數,走基線。
[0041 ]當基線平穩時，開始進樣，採集分析結束後，即出峰結束後，停止採樣。定量分析採用外標法，去對照品貯備液配製不同濃度的對照品溶液進樣，檢測結果，得到鹽酸羥胺的峰面積，並繪製出峰面積一組分濃度的標準曲線。
[0042]在相同條件下進供試品溶液，得到鹽酸羥胺的峰面積，從標準曲線上就可得知相應的濃度。
[0043]以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出:對於本【技術領域】的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。
【權利要求】
1.一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於：所述測定方法包括如下步驟：(1)供試樣品的製備：稱取樣品藥物，加入水或者有機溶解後經活化的C18固相萃取柱 過濾，取續濾液作為供試品溶液；(2)對照品貯備液的製備：取鹽酸羥胺，用與溶解供試品相同的溶劑溶解並稀釋成得到 鹽酸羥胺溶液；(3)離子色譜法，採用柱後補液衍生的方法，用CS16陽離子交換色譜柱；淋洗液為甲基 磺酸溶液，柱後補液為鹼性溶液；檢測器為安培檢測器，以Au為電極，Ag-AgCl電極為參比 電極，波形為Carbohydrates,柱溫為室溫；(4)打開Chromeleon工作站,進入在線工作站,設置參比電極,選擇波形,設置流速柱溫，走基線；(5)進樣：當基線平穩時，開始進樣，採集分析結束後，即出峰結束後，停止採樣；定量 分析採用外標法，將對照品貯備液配製各種濃度的對照品溶液進樣，檢測結果，得到鹽酸羥 胺的峰面積，並繪製出峰面積；在與對照品貯備液相同的進樣條件下進供試品溶液，得到鹽 酸羥胺的峰面積，從標準曲線上就可得知相應的濃度。
2.根據權利要求I所述的一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於：所 述步驟（3)中的甲基磺酸溶液為25-35mmol/L，流速為O. 8-1. 2mL/min。
3.根據權利要求I所述的一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於： 柱後補液的鹼性溶液為氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液的一種或幾種，濃度為200 mmol/L-500 mmol/L0
4.根據權利要求I所述的一種檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於：C18 固相萃取柱使用前需至少3倍柱體積的甲醇活化。
5.根據權利要求I或者4所述的檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於： 柱後補液的流速為.O. 2-0. 5 mL/min。
6.根據權利要求4或者5所述的檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於： 經柱後補液後，溶液的PH值在10-14之間。
7.根據權利要求I所述的檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於：所述步 驟（5)中的進樣量為15-50 μ L。
8.根據權利要求I所述的檢測藥物中痕量鹽酸羥胺的測定方法，其特徵在於：所述 CS16陽離子交換柱的規格為O. 5 X 250mm。
【文檔編號】G01N30/02GK103558318SQ201310520900
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年10月29日 優先權日:2013年10月29日
【發明者】陳國廣, 苗燕飛, 歐陽平凱 申請人:南京工業大學