用於由積雪草製備高純度積雪草苷組合物的方法及其應用方法
2023-05-04 15:15:41 3
專利名稱：用於由積雪草製備高純度積雪草苷組合物的方法及其應用方法
技術領域：
本發明涉及來自積雪草(Centella Asiatica)的積雪草苷(積雪草阜苷，asiaticoside)提取物，並且更具體地涉及其在用於處理炎性腸病、治療幽門螺桿菌(Helicobacter Pylori)、預防胃病和胃癌中的應用。
背景技術：
從積雪草中提取的積雪草苷是各公司商業上可獲得的分析參照標準材料，諸如，例如，Yick-Vic公司已通過HPLC確定積雪草苷的純度為92.8%，Tauto生物技術公司已通過HPLC確定積雪草苷的純度為約97%，寶雞(Baoji)草本植物生物技術公司的積雪草苷測定高於98%。然而，這些產品特別適合於用作參考標準在研究實驗室中用於研究目的，而沒有找到植物積雪草的提取物。這些積雪草苷產品在商業上不能用作藥物組合物。現有技術中適合用於由積雪草製備積雪草苷的方法要求純度範圍在50%_97%之間。例如，美國公開號2008/0194499教導了包括範圍在15%_50%之間的積雪草苷組合物的藥物五環萜類苷。而且，美國公開號2006/0177516公開了具有約40%積雪草苷組合物的萜烯混合物。此外，美國專利號6，417，349提供了具有4:6到6:4的範圍以構成97%或更多提取物的積雪草提取物。此外，中國專利號CN1520824披露了用於純度為92.8%的積雪草苷的提取和分離方法。然而，現有技術中沒有一個嘗試由積雪草專用地提取高純度積雪草苷。積雪草或積雪草苷的傳統用途包括促進傷口癒合、治療皮膚疾病(skindisease)、皮膚病(皮膚失調，skin disorder)和慢性炎性疾病。例如，中國專利號CN101129393披露了積雪草苷液體在傷口癒合中的應用。此外，美國公開號2009/0060985教導了積雪草都市提取物作為藥品物質用於治療皮膚病的應用。可以看到現有技術中有其中將積雪草苷或積雪草用於非傳統`用途的少數嘗試。例如，美國公開號2008/0194499教導了萜類苷優選積雪草苷和羥基積雪草苷可選地連同賦形劑用於控制抑鬱症的應用。此外，美國公開號2006/0177516提供了食品補充劑，其顯示出積雪草苷用於治療貧血症的應用。然而，積雪草苷或積雪草用於處理與胃腸道相關的疾病諸如炎性腸病和幽門螺桿菌的應用，相對而言是未知的。可以看到現有技術中有其中將積雪草苷用於治療肝病的少數嘗試。例如，中國專利號CN1439376和CN1520824披露了積雪草苷用於預防和治療肝纖維化的應用。此外，美國公開號2004/0097463披露了積雪草苷用於治療與肝、結腸和胰腺相關的癌症的應用。此外，Cheng等人在2004年(「The healing effects of Centellaextract and asiaticoside on acetic acid induced gastric ulcers in rats，，，LifeSciences, vol.74，pp.2237-2249)討論了積雪草水提取物對大鼠中的乙酸誘導的胃潰瘍的癒合作用。而且，Cheng 等人在 2000 年(「Effects ofCentella asiatica on ethanolinduced gastric mucosal lesions in rats，，,Life Sciences, vol.67,pp.2647-2653)教導了積雪草水提取物對乙醇誘導的胃黏膜病變的離體實驗的預防作用。然而，現有技術所述的胃潰瘍局限於化學製品或藥物誘導的潰瘍模型。此外，這些模型通過在胃部局部應用刺激物(乙酸)而造成特定的病變，這未必能處理結腸疾病如炎性腸病。此外，現有技術中聲稱積雪草苷產品用於治療潰瘍，但是沒有說明積雪草苷用於預防潰瘍的用途。炎性腸病的特徵是頑固的慢性炎症性病症如潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病(Crohn’s Disease)，其表現出例如使人痛苦的症狀，腹痛、腹瀉、嘔吐、便血(糞便帶血)、食慾降低、體重減輕、發燒和各種相關併發症如肛裂、瘻(瘻管，fistulas)、直腸周膿腫、痔瘡。潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病通常通過疾病活性指數評價，其包括排便次數、存在便血、內窺鏡表現以及內科醫師的整體評價。上面病症的持續會導致慢性炎症，隨後變成發展為結腸癌的誘發因素。現有的用於治療炎性腸病的方法包括減輕腹痛、腹瀉、疲勞、貧血、營養不足、黏膜炎症、腸外表現、住院治療、手術和併發症如膿腫、瘻、感染和惡性腫瘤。炎性腸病的治療由柳氮磺胺吡啶、免疫抑制劑和皮質類固醇的口服給予組成。通常，優選柳氮磺胺吡啶用於輕度至中度潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病的第一線治療。然而，副作用如藥物不耐性、削弱葉酸攝取、腎臟的不良影響使得柳氮磺胺吡啶不期望用於炎性腸病治療。此外，柳氮磺胺吡啶對於結腸的有效性是有限的，因為它被胃部吸收，隨後在小便中排出。急性病症中的潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病，需要用皮質類固醇治療，但是這些藥物不能預防緩解。長期使用皮質類固醇會造成皮膚變薄、對裂傷的敏感性、體重增加、血壓升高、糖尿病及相關的有害病症。在潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病的長期治療中，免疫抑制劑是有效的。這些藥物也有嚴重的副作用，如骨髓抑制、淋巴瘤(在腎移植病人中)、皮膚癌和胰腺炎。在嚴重情況下炎性腸病需要外科手術，如腸切除術、狹窄整形術或臨時性或永久性的結腸造口術或迴腸造口術，其涉及使用全身麻醉以及術後恢復的併發症。由黏膜損害的胃腸道潰瘍是炎性腸病的相關併發症。炎性腸病和相關炎性疾病的慢性的特性需要長期的控制治療。當前炎性腸病的治療方法對於該疾病的持續性治療和高危險性緩解具有有害副作用的局限性。由病原菌如幽門螺桿菌誘導的炎症助長了炎性腸病症狀的惡化。此外，環境因素如壓力、食物和飲酒增強了幽門螺桿菌的活性。世界衛生組織(WHO)已經把幽門螺桿菌分類為促進胃癌的I組致癌物。幽門螺桿菌感染引發損害上皮細胞的慢性炎症反應，接著誘導胃萎縮，其最終導致胃癌。胃惡性腫瘤(胃癌，gastric carcinoma)或胃癌(gastriccancer)的治療具有高度致命的治療選擇，諸如，例如，通過胃切除術手術切除癌性組織、部分/完全切除胃、化學療法、放射療法和化學放射療法。然而，這些治療具有極其嚴重的副作用，其導致患者生命質量下降。而且，由於存在較高的惡性腫瘤復發概率，所以這些治療也不能保證完全恢復。為了從感染的胃黏膜中根除幽門螺桿菌，及時的診斷和治療可能大大地降低胃癌的風險。使用者可以領會用於根除幽門螺桿菌感染的有效手段可以間接輔助預防幽門螺桿菌感染誘導的胃癌。需要一種用於從積雪草提取積雪草苷的商業上可行的方法，積雪草苷要具有非常高的純度以有效地用作藥物組 合物。進一步需要這樣的積雪草苷組合物，其提供更有益(更容易處理，kinder)和更溫和的方法，用於有效長期處理伴隨幽門螺桿菌的炎性腸病。進一步需要積雪草苷組合物，其預防由於炎性腸病誘導的胃病和結腸癌。進一步需要積雪草苷組合物用於有效根除幽門螺桿菌感染，其預防胃癌。
發明內容
本發明的主要目的是提供一種來源於積雪草的具有至少99%純度的積雪草苷的藥物組合物的製備方法或過程(方法，process)。本發明的另一個目的是提供積雪草苷可選地連同可接受的藥物賦形劑的藥物組合物，用於治療炎性腸病如潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病。本發明的又一個目的是提供積雪草苷可選地連同可接受的藥物賦形劑的藥物組合物，用於治療炎性腸病相關的併發症，例如但不限於痔瘡、肛裂、瘻。本發明的又一個目的是提供積雪草苷可選地連同可接受的藥物賦形劑的藥物組合物，用於預防結腸癌。本發明的又一個目的是使用積雪草苷可選地連同可接受的藥物賦形劑的藥物組合物，用於治療幽門螺桿菌。本發明的又一個目的是使用積雪草苷可選地連同可接受的藥物賦形劑的藥物組合物，用於預防胃病和胃癌。發明綜述本發明披露了從植物材料積雪草提取的具有至少99%純度的商業上可行的藥物等級的積雪草苷組合物。本發明披露了在人和動物中的體內治療方法，其中該治療方法包括口服給予適合於治療炎性腸病，治療痔瘡、肛裂和瘻，預防結腸潰瘍和結腸癌，根除治療幽門螺桿菌感染，預防胃病和預防胃癌的積雪草苷組合物。
具體實施例方式在本發明的範圍內，本文所披露的積雪草苷化合物具有以下結構:積雪草苷:
權利要求
1.一種從植物材料積雪草中提取的具有至少99%純度的藥物等級積雪草苷組合物，所述積雪草苷組合物具有分子式C48H78O19，所述積雪草苷組合物適合用於治療以下幽門螺桿菌、胃病、胃癌、炎性腸病以及與炎性腸病相關的併發症中的一種或多種。
2.根據權利要求1所述的積雪草苷組合物，其中，所述提取適合於在約20°C至30° C的溫度範圍和約8h至24h的時間段下進行。
3.根據權利要求1所述的積雪草苷組合物，其中，所述提取適合於通過第一溶劑進行，以除去脂肪物質、葉綠素以及其他色素。
4.根據權利要求1所述的積雪草苷組合物，其中，所述提取適合於通過第二溶劑進行，以提取生物活性分子並獲得基本上澄清的提取物或濾液。
5.根據權利要求3所述的積雪草苷組合物，其中，所述第一溶劑選自脂肪族化合物、酮類、醇類、亞硝酸鹽/酯類、酯類、醚類以及它們中一種或多種的混合物的組。
6.根據權利要求3所述的 積雪草苷組合物，其中，所述第一溶劑是石油醚或甲基異丁基酮。
7.根據權利要求4所述的積雪草苷組合物，其中，所述第二溶劑是單獨或以60%至99%範圍的比率與水組合的選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇的脂肪醇。
8.根據權利要求4所述的積雪草苷組合物，其中，所述基本上澄清的提取物適合於在減壓下蒸餾以形成糊劑。
9.根據權利要求8所述的積雪草苷組合物，其中，所述糊劑適合於溶解在軟化水中，以獲得基本上澄清的水層。
10.根據權利要求9所述的積雪草苷組合物，其中，所述基本上澄清的水層適合於用第三溶劑提取，以除去酸性物質。
11.根據權利要求10所述的積雪草苷組合物，其中，所述第三溶劑是甲基異丁基酮。
12.根據權利要求9所述的積雪草苷組合物，其中，所述基本上澄清的水層適合於經受樹脂床處理，接著用醇溶劑洗脫，以獲得溶劑洗脫液。
13.根據權利要求12所述的積雪草苷組合物，其中，所述溶劑洗脫液適合於在約50° C-60° C的溫度範圍下在真空下濃縮。
14.根據權利要求12所述的積雪草苷組合物，其中，濃縮的所述溶劑洗脫液適合於再溶解在含水醇中，接著進行冷卻結晶。
15.根據權利要求14所述的積雪草苷組合物，其中，所述冷卻結晶適合於在約0°C至-15° C的溫度範圍下進行。
16.一種配製用於在人類和動物中治療的劑型，包括治療有效量的根據權利要求1所述的積雪草苷組合物的口服給予。
17.根據權利要求16所述的積雪草苷組合物，其中，所述劑型適合於選自片劑、含片、錠劑、水性或油性懸液、軟膏劑、貼片、凝膠劑、洗劑、潔齒劑、膠囊劑、乳劑、乳膏劑、噴霧劑、滴劑、可分散性粉劑或粒劑、處於硬或軟膠囊中的乳劑、糖漿劑、酏劑、植物性物質、營養製品和食品的組。
18.根據權利要求16所述的積雪草苷組合物，其中，所述劑型適合於連同藥物等級的賦形劑一起口服給予，所述藥物等級的賦形劑選自成粒劑、粘合劑、潤滑劑、崩解劑、甜味齊U、助流劑、抗粘劑、抗靜電劑、表面活性劑、抗氧化劑、樹膠、塗布劑、著色劑、調味劑、增塑齊U、防腐劑、懸浮劑、乳化劑和滾圓劑的組。
19.根據權利要求16所述的積雪草苷組合物，其中，動物中的劑量範圍基本上是l_360mg/kg。
20.根據權利要求16所述的積雪草苷組合物，其中，人類中的劑量範圍基本上是l_60mg/kg。
21.一種在人類和動物中的體內治療方法，所述方法包括以下步驟: 口服給予有效量的至少99%純度的積雪草苷組合物作為用於有效治療患病部位的治療或預防劑量。
22.根據權利要求21所述的治療方法，其中，所述方法適合於治療以下炎性腸病、痔、肛裂、瘻中的一種或多種，以及根除幽門螺桿菌感染。
23.根據權利要求21所述的治療方法，其中，所述方法適合於預防以下結腸潰瘍、結腸癌、胃病和胃癌中的一種或多種。
24.根據權利要求22所述的治療方法，其中，所述炎性腸病是以下三硝基苯磺酸誘導的炎性腸病、乙酸誘導的炎性腸病、潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病中的一種或多種。
25.根據權利要求 23所述的治療方法，其中，所述胃病是以下應激誘導的潰瘍、組胺誘導的潰瘍和乙醇誘導的潰瘍中的一種或多種。
26.根據權利要求22所述的治療方法，其中，所述幽門螺桿菌感染是通過潰瘍面積中的劑量依賴性和時間依賴性降低確定的非留體抗炎藥誘導的幽門螺桿菌感染。
27.根據權利要求23所述的治療方法，其中，通過根除幽門螺桿菌感染預防所述胃癌。
28.根據權利要求21所述的治療方法，其中，所述積雪草苷組合物適合於促進針對藥物致潰瘍作用的預防作用。
29.—種來自植物材料積雪草的至少99%純度的積雪草苷組合物的製備方法，所述方法包括以下步驟: a)在提取器中用第一溶劑提取磨成粉狀的積雪草植物材料； b)用第二溶劑提取生物活性分子，以獲得澄清的提取物或濾液； c)蒸餾並用第三溶劑提取所述澄清的提取物，以獲得澄清的水層； d)通過樹脂床處理所述澄清的水層，接著用醇溶劑洗脫，以獲得溶劑洗脫液； e)在真空下濃縮所述溶劑洗脫液，接著將所述溶劑洗脫液再溶解在含水醇中，以形成溶液；以及 f )將所述溶液冷卻結晶，以獲得至少99%純度的積雪草苷組合物。
30.根據權利要求29所述的製備方法，其中，所述提取適合於在約20°C至30° C的溫度範圍和約8h至24h的時間段下進行。
31.根據權利要求29所述的製備方法，其中，所述溶劑洗脫液適合於在約50° C-60° C的溫度範圍下在真空下濃縮。
32.根據權利要求29所述的製備方法，其中，所述冷卻結晶適合於在約0°C至-15° C的溫度範圍下進行。
33.根據權利要求29所述的製備方法，其中，冷卻結晶之後獲得的所述積雪草苷組合物適合於過濾並用冷水洗滌。
34.根據權利要求33所述的製備方法，其中，過濾之後獲得的積雪草苷晶體適合於在高溫下乾燥以形成具有 至少99%HPLC純度的積雪草苷組合物的自由流動性粉末。
全文摘要
本發明公開了商業上可行的具有至少99%純度的來源於植物積雪草的積雪草苷組合物及其製造方法。本發明進一步教導了用於口服給予治療有效量的積雪草苷的方法和模型，用於口服給予治療有效量的積雪草苷組合物用於治療炎性腸病，如潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病以及炎性腸病相關的併發症如痔瘡、肛裂、瘻的模型。本發明進一步提供了用於口服給予治療有效量的積雪草苷組合物用於治療幽門螺桿菌的方法和模型。本發明進一步提供了用於口服給予治療有效量的積雪草苷組合物用於預防結腸癌、胃病和胃癌的方法和模型。
文檔編號A61K31/704GK103079573SQ201080068596
公開日2013年5月1日 申請日期2010年8月31日 優先權日2010年6月10日
發明者布哈斯卡拉恩·蘇尼爾, 維什瓦拉曼·莫漢 申請人:梧桐生物技術私人有限公司