用於治療腎病症候群和有關病症的方法

2023-04-24 06:08:46 1

專利名稱：用於治療腎病症候群和有關病症的方法
用於治療腎病症候群和有關病症的方法
關於聯邦資助研究的聲明
聯邦政府為本文所述的工作提供了資金支持，政府具有本發明的某些權利。技術領域
本公開內容涉及用於治療和預防腎病症候群及其相關病症(例如，但不限於，蛋白尿和水腫)的方法。
背景技術：
腎病症候群(NS)是表不尿中蛋白損失(蛋白尿)、聞脂血症(聞膽固醇血症和聞甘油三酯血症)和水腫的一般術語。腎病症候群涉及腎中的細胞(諸如足細胞)的病理學變化。蛋白尿被定義為，過量血清蛋白在尿中的存在。白蛋白尿(蛋白尿的一種特定類型)是這樣的病理學狀況:其中白蛋白存在於尿中。
足細胞(或內臟上皮細胞)是在腎的腎小球毛細血管袢的外層中的細胞。腎小球過濾血液，阻擋大分子(諸如蛋白)，並允許小分子(諸如水、鹽和糖)穿過，作為形成尿的第一步。足細胞的長突或「足突」圍繞毛細血管，並接近以停留在腎小球基膜上。足突通過稱作裂孔隔膜的多孔結構相·連。腎小球毛細血管袢的最內層由有孔的內皮細胞組成。受腎病症候群影響的腎具有腎小球毛細血管袢的異常，所述異常會造成血液蛋白質的滲漏，從而導致蛋白尿。
當蛋白損失在尿中時，它的血漿濃度下降，因而允許水遷移進身體的其它部位，這導致腫脹(稱作水腫)。水腫常見於腳和腿、腰部或腹部(腹水)和眼周圍，但是可以發生在任何地方，特別是響應於重力。另外，因為這種停留在體內的額外流體，人們經常增加體重、經歷疲勞，且可能發現他們經常排尿更少。
許多病症被歸類為腎病症候群，包括輕微改變型腎病(MCD)、局灶性節段性腎小球硬化症(FSGS)、膜性腎病(麗)(也稱作膜性腎小球腎炎，MGN)和膜性增生性腎小球腎炎(MPGN)0多年來，當在光學顯微鏡下觀察樣本時，病理學家沒有發現MCD組織中的變化，因此得名輕微改變型腎病。隨著電子顯微術的出現，現在已知是該疾病的標誌的變化包括:足細胞足突的擴散損失，足細胞足突的空泡形成，和微絨毛在內臟上皮細胞上的生長。糖尿病腎病是腎病症候群的最常見原因。
降解甘油三酯的酶(諸如脂蛋白脂肪酶(LPL))的活性的變化，可能引起高甘油三酯血症(2-4)。在腎病症候群和蛋白尿的病原學中涉及的某些蛋白質，諸如血管生成素-樣4 (Angptl4)，會抑制LPL的活性。
腎病症候群的分子基礎是未知的。已經在腎病症候群(諸如MCD、MN/MGN和MPGN)中觀察到Angptl4水平的增加，但是增加的Angptl4循環水平尚未與腎病症候群中的蛋白尿的原因相關聯。但是，以前尚未報導Angptl4在腎病症候群(諸如但不限於、MCD、FSGS、MN/MGN和MPGN)和相關病症(例如，但不限於，蛋白尿)中的作用。此外，有待確立蛋白尿和糖皮質激素敏感性在腎病症候群中的聯繫以及蛋白尿和高甘油三酯血症(腎病症候群的2種關鍵組分)之間的關聯。設計成減輕蛋白尿的療法，進一步使疾病機理的研究複雜化。例如，用於治療MCD中的蛋白尿的糖皮質激素會獨立地升高血漿甘油三酯水平(5)，且在某些形式的腎病症候群(諸如MCD)中，血漿甘油三酯水平的正常化落後於蛋白尿對糖皮質激素的應答(6)。
本公開內容證實，增加的Angptl4循環水平會減輕腎病症候群及其相關病症(諸如但不限於、蛋白尿)的嚴重性。結果，本公開內容提供了用於治療和/或預防腎病症候群(諸如但不限於、MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN)和糖尿病腎病的方法，以及減輕與腎病症候群有關的徵狀(包括、但不限於蛋白尿和水腫)的方法。本公開內容另外提供了用於減輕蛋白尿和水腫的方法。


圖1顯示了 aP2-Angptl4TG大鼠的開發和表徵。
圖1A顯示了 200yg人血漿的二維凝膠分析(n=4位患者/組，顯示了裁切的代表性印跡)，並證實了與MCD緩解的患者(B卩非蛋白尿患者)相比，在具有復發的輕微改變型腎病(MCD)的患者中和在具有膜性腎病(MN)的患者中，存在增加的Angpt 14循環水平(用箭頭指示)。
圖1B顯示了 Angptl4的脂肪組織特異性過表達的轉基因(TG)大鼠模型(aP2-Angplt4TG)。
圖1C顯示了 Angptl4mRNA在aP2_Angptl4TG大鼠中的組織特異性的過表達(n=3隻大鼠/組)。WAT是白色脂肪組織，BAT是褐色脂肪組織。***P〈0.001。
圖1D顯示了 200μ g血漿的二維凝膠電泳，隨後進行Angptl4的蛋白質印跡，並證實，雜合的aP2-Angptl4TG大鼠具有比野生型大鼠更高的Angptl4循環水平(3個月齡，n=3印跡/組)。
圖1E顯示了 200 μ g血漿的二維凝膠電泳，隨後進行抗-V5和抗_Angptl4抗體的蛋白質印跡，並證實了脂肪組織分泌的V5標記的Angptl4在aP2_Angptl4TG大鼠的血眾中的存在。`
圖1F顯示了來自aP2-Angptl4TG大鼠血漿的抗-N-端Angptl4免疫沉澱物的二維凝膠電泳，隨後使用凝集素SNA I和抗-Angptl4抗體進行蛋白質印跡法，並證實了循環的唾液酸化的Angptl4在aP2-Angptl4中的存在。
圖1G顯示了來自3個月齡雜合的aP2-Angptl4TG大鼠(n=3隻大鼠/組)的PAS染色的切片，並證實了正常的腎小球形態學(放大率400x)。
圖1H顯示了在3個月雜合的aP2_Angplt4TG雄性大鼠中用抗_V5抗體來特異性地檢測轉基因蛋白的免疫金EM，並證實了在aP2-Angptl4TG大鼠的內皮表面上的選擇性的金顆粒(用箭頭指示)。
圖2顯示了增加的Angptl4循環水平與蛋白尿/白蛋白尿的關聯。
圖2A顯示了通過GelCode藍染色的SDS PAGE評估在不同的人和實驗性疾病條件下的尿蛋白排洩(3 μ g/泳道，除了 MCD緩解以外)，並證實在aP2-Angptl4TG大鼠中缺失顯著的蛋白尿(用*標記的泳道，箭頭顯示了在約70kDa處的完整白蛋白)。
圖2B顯示了通過ELISA來評估白蛋白尿，並揭示，雜合的雌性aP2_Angptl4TG大鼠具有比野生型同胞仔更低的白蛋白尿(n=6隻大鼠/組)。
圖2C顯示了通過ELISA來評估白蛋白尿，並揭示，雜合的雄性aP2_Angptl4TG大鼠具有比野生型同胞仔更低的白蛋白尿(n=6隻大鼠/組)。
圖2D顯示了在野生型和aP2_Angptl4TG大鼠中誘導嘌羅黴素腎病(PAN)(—種腎病症候群模型)，並證實在aP2-Angptl4TG大鼠中比野生型同胞仔更少的蛋白尿(n=8隻大鼠/組)。*P〈0.05, * * P〈0.01，相對於對應的對照。
圖2E顯示 了重組Angptl4對培養的腎小球內皮細胞(GEnC)具有保護作用。* *Ρ〈0.01, * * *Ρ〈0.001，相對於對應的對照。
圖2F顯示了在第6天Angptl4在野生型大鼠疾病模型(如PAN)中的增量調節僅是腎小球的，而在第10天(此時蛋白尿和腎小球Angptl4表達都處於下降),觀察到Angptl4在脂肪組織中的增量調節(n=3大鼠/樣品)。* * P〈0.01，* * *P〈0.001，相對於對應的對照。
圖2G顯示了在aP2_Angptl4TG大鼠中在基線時和在誘導PAN以後增加的Angptl4循環水平會導致與野生型大鼠相比增加的血漿甘油三酯水平。*P〈0.05，相對於對應的對照。
圖2H顯示了在aP2_Angptl4TG大鼠中在基線時和在誘導PAN以後增加的Angptl4循環水平會導致與野生型大鼠相比降低的肝素後脂蛋白脂肪酶(LPL)活性。*P〈0.05，相對於對應的對照。
圖3顯示了用於Taqman實時PCR的引物和探針(SEQ ID N0.11_22)。
圖4顯示了重組Angptl4會減輕人腎小球疾病動物模型中的蛋白尿。
圖4B顯示了在Thyl.1腎炎(腎小球繫膜損傷的一種短期模型)中的蛋白尿的減輕。在雄性Wistar大鼠中誘導Thyl.1腎炎(n=4隻大鼠/組,在第O天注射)。在證實蛋白尿的誘導(第I天)以後，連續2天(第I天和第2天，箭頭)靜脈內地注射來自AngptlUI定細胞系或對照細胞系的濃縮上清液蛋白，隨後評估蛋白尿。在Angptl4治療的大鼠中，蛋白尿自始至終更低，且在第5天是統計上顯著的。*P〈0.05; **P〈0.01。所有值都是平均值土SE。
圖4B顯示了在Thyl.1腎炎(腎小球繫膜損傷的一種短期模型)中的蛋白尿的減輕。在雄性Wistar大鼠中誘導Thyl.1腎炎(n=4隻大鼠/組)。在評估基線蛋白尿(第I天)以後,給Buffalo Mna大鼠(n=4隻大鼠/組)連續2天(第I天和第2天,箭頭)腹膜內地注射來自Angptl4穩定細胞系或對照細胞系的濃縮上清液蛋白，隨後評估蛋白尿。在Angptl4治療的大鼠中，蛋白尿自始至終更低，且在第5天是統計上顯著的。*P〈0.05; **P〈0.01。所有值都是平均值土SE。
圖5顯示了來自不同物種的Angptl4的胺基酸和cDNA序列。SEQ IDN0.1和2顯示了來自人的胺基酸和cDNA序列(蛋白變體I同種型a，長形式；在位置40和161-164處的標有下劃線的胺基酸序列)；SEQ ID N0.3和4顯示了來自人的胺基酸和cDNA序列(蛋白變體3同種型b，短形式；在位置40和161-164處的標有下劃線的胺基酸序列);SEQ ID N0.5和6顯示了來自大鼠的胺基酸和cDNA序列；SEQ ID NO:7和8顯示了來自小鼠的胺基酸和cDNA ;正向測序引物標有下劃線。反向測序引物為粗體。發明內容
在第一方面，本公開內容提供了治療和/或預防腎病症候群的方法。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN或糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MSGS0在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID N0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4或Angptl4多肽衍生物相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生 物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來治療腎病症候群。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療腎病症候群。
在第二方面，本公開內容提供了治療和/或預防MCD的方法。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID N0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來治療MCD。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療MCD。
在第三方面，本公開內容提供了減輕腎病症候群的一種或多種徵狀(例如，但不限於，蛋白尿、高膽固醇血症、高甘油三酯血症和水腫)的方法。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ IDN0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕腎病症候群的一種或多種徵狀。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕腎病症候群的一種或多種徵狀。
在第四方面，本公開內容提供了用於減輕受試者中的蛋白尿的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述受試者正在遭受以蛋白尿為特徵的障礙。在另一個實施方案中，所述受試者正在遭受糖尿病病症。在另一個實施方案中，所述蛋白尿是由FSGS造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕蛋白尿。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕蛋白尿。
在第五方面，本公開內容提供了減輕受試者的水腫的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在一個具體的實施方案中，所述水腫是由降低的血漿蛋白(諸如白蛋白)循環水平造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。通過施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物來減輕蛋白尿,會減輕蛋白尿，升高血漿蛋白水平，並從而減輕水腫。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ IDN0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕水腫。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如,但不限於,表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕水腫。
在第六方面，本公開內容提供了減輕受試者的高膽固醇血症和/或高甘油三酯血症的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中,所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕高膽固醇血症和/或高甘油三酯血症。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如,但不限於,表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕高膽固醇血症和/或高甘油三酯血症。
在第七方面，本公開 內容提供了治療和/或預防糖尿病病症的方法。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來治療前述病症。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療前述病症。
在第八方面，本公開內容提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物用於第一方面至第八方面的方法中。所述組合物包含一種或多種Anptl4多肽或多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。
具體實施方式
在下面的討論中，將為了背景和介紹目的而描述某些物品和方法。本文包含的任何內容都不應解釋為現有技術的「承認」。申請人明確地保留下述權利:在適當時，在適用的法律允許下，證實在本文中提及的物品和方法不構成現有技術。
在研究腎病症候群的過程中，發現了由足細胞分泌的Angptl4會誘導蛋白尿。更重要的是，如本文所述，循環的Angptl4會在轉基因動物模型中減輕蛋白尿。已經在腎病症候群(諸如MCD和麗)中觀察到增加的Angptl4水平，但是尚未將增加的Angptl4循環水平與腎病症候群的原因相關聯。
儘管證實了增加的Angptl4水平會治療腎病症候群和減輕有關的蛋白尿，已經觀察到增加的循環Angptl4會誘導高脂血症(高甘油三酯血症)，例如，但不限於，通過LPL的抑制。有利的是，提供增加的Angptl4循環水平的益處，且沒有高脂血症的不利後果。使用本文公開的Angptl4多肽衍生物，這樣的方案是可能的。
血管生成素-樣蛋白已經涉入高甘油三酯血症的形成和腫瘤轉移，且在功能上不同於血管生成素。Angptl4是在肝和脂肪組織中高度表達的PPARy (8)和PPARa (9)靶基因，在白脂肪組織和肝中被禁食強烈誘導，且是在含氧量正常條件下血管內皮細胞的細胞凋亡存活因子(10)。Angpt 14是的一種有效的LPL抑制劑(11 )，其在靜脈內注射或腺病毒介導的表達以後，誘導顯著的高甘油三酯血症(12，13)。其它研究證實了 Angptl4在心肌細胞和骨骼肌中的更少表達，並通過RNA印跡分析證實了在全腎中的低水平表達(8)。最近的基於人群的ANGPTL4基因研究揭示了影響人類的甘油三酯水平的變體(14，15)。
本公開內容證實了循環Angptl4的減輕在腎病症候群(例如，但不限於，MCD、FSGS、麗、MPGN和糖尿病腎病)中觀察到的蛋白尿的確定作用。
定義
本文使用的術語「預防」、「抑制」表示，在疾病或病症的徵狀、表現或特徵出現之前，開始動作過程(諸如施用化合物或藥物組合物)，從而預防或減輕這樣的徵狀、表現或特徵。這樣的預防和抑制不需要是絕對有用的。
本文使用的術語「治療」表示，在疾病或病症的徵狀、表現或特徵出現之後，開始動作過程(諸如施用化合物或藥物組合物)，從而消除或減輕這樣的徵狀、表現或特徵。這樣的治療不需要是絕對有用的。
本文使用的術語「需要治療」表示，看護人員做出的患者需要治療或將受益於治療的判斷。該判斷是基於多種因素而做出，所述因素是在看護人員經驗範圍內，但是所述經驗包括患者患病或將患病的知識，所述患病是本公開內容的方法或化合物可治療的疾病或病症的結果。
本文使用的術語「 需要預防」表示，看護人員做出的患者需要預防或將受益於預防的判斷。該判斷是基於多種因素而做出，所述因素是在看護人員經驗範圍內，但是所述經驗包括患者患病或將患病的知識，所述患病是本公開內容的方法或化合物可治療的疾病或病症的結果。
本文使用的術語「個體」、「受試者」或「患者」表示任意動物，包括哺乳動物，諸如小鼠、大鼠、其它嚙齒類動物、兔、狗、貓、豬、牛、綿羊、馬或靈長類動物和人類。該術語可以特指雄性或雌性或二者，或排除雄性或雌性。
本文使用的術語「治療有效量」表示，單獨的或作為藥物組合物的一部分的化合物的量，所述量能夠對疾病或病症的任何徵狀、表現或特徵產生任何可檢測的積極作用。這樣的作用不需要是絕對有益的。當提及Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物時，術語「治療有效量」表示，足以減輕受試者的蛋白尿的這種多肽的量。
術語「藥學上可接受的衍生物」是指，本公開內容的Angptl4多肽或多肽衍生物的任何藥學上可接受的鹽、酯、酯的鹽、溶劑化物或其它衍生物，其在施用給受試者以後，能夠(直接地或間接地)提供野生型Angptl4的功能；在特定實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物顯示出降低的耐受切割的LPL抑制活性。特別有利的衍生物是這樣的衍生物:當這種多肽被施用給受試者時，其會增加本公開內容的Angptl4多肽或多肽衍生物的生物利用度(例如，通過允許口服施用的化合物更容易地吸收進血液中)，增強這種多肽向給定的生物學隔室的遞送，增加溶解度以允許注射給藥，改變代謝或改變排洩速率。在一個實施方案中，所述衍生物是前體藥物。
除非另有說明，否則術語「藥學上可接受的鹽」包括，可能存在於本公開內容的Angptl4多肽或多肽衍生物中的酸性或鹼性基團的鹽。
術語「約」和「大約」應通常表示，對於描述測量的屬性和精密度的測量的量而言，可接受程度的誤差或變異。通常，誤差或變異的示例性程度是在給定值或者數值範圍的20 %以內，優選10 %以內，更優選在5 %以內。對於生物學系統，術語「約」表示可接受的誤差標準差，優選地不超過給定值的2倍。除非另有說明，否則本文給出的數值的量都是近似的，這意味著，在沒有明確地表明時，也可以推測術語「約」或「大約」。
治療和預防方法
本公開內容提供了治療和/或預防腎病症候群的方法。本公開內容另外提供了治療和/或預防MCD、FSGS和/或具有腎小球繫膜損傷的病症(諸如糖尿病)的方法。本公開內容另外提供了治療和/或預防糖尿病病症的的方法。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。本公開內容另外提供了減輕腎炎症候群的一種或多種徵狀(例如,但不限於,蛋白尿、高膽固醇血症、高甘油三酯血症和水腫)的方法。此外，本公開內容提供了減輕蛋白尿的方法。此外，本公開內容提供了減輕水腫的方法。本公開內容另外提供了藥物組合物，所述藥物組合物包含一種或多種Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。
在一個實施方案中，本公開內容的教導提供了需要這種治療或預防的受試者的腎病症候群的治療和/或預防。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS,MN/MGN和MPGN。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angp114多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來治療腎病症候群。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如,但不限於,表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療腎病症候群。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在一個替代實施方案中，本公開內容的教導提供了需要這種治療或預防的受試者的MCD的治療和/或預防。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供 Angptl4功能來治療MCD。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如,但不限於,表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療MCD。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在其它實施方案中，本公開內容的教導提供了減輕腎病症候群的一種或多種徵狀(例如，但不限於，蛋白尿、高膽固醇血症、高甘油三酯血症和水腫)的方法。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟 給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕腎病症候群的一種或多種徵狀。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕腎病症候群的一種或多種徵狀。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在另一個實施方案中，本公開內容的教導提供了減少受試者的蛋白尿的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID N0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕蛋白尿。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕蛋白尿。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在另一個實施方案中，本公開內容的教導提供了減輕受試者的水腫的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN、MPGN和糖尿病腎病。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。在一個具體的實施方案中，所述水腫是由降低的血漿蛋白(諸如白蛋白)循環水平造成。通過施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物來減輕蛋白尿，會減輕蛋白尿，升高血漿蛋白水平，並從而減輕水腫。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID N0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型AngptH相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕水腫。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕水腫。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在另一個實施方案中，本公`開內容的教導提供了減輕受試者的高膽固醇血症和/或高甘油三酯血症的方法。在一個實施方案中，所述受試者正在遭受腎病症候群。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD、FSGS, MN/MGN和MPGN。在另一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由FSGS造成。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID N0:l、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來減輕蛋白尿。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來減輕蛋白尿。這種方法可以另外包括:鑑別需要這種治療和/或預防的受試者。
在另一個實施方案中，本公開內容的教導提供了用於治療和/或預防由糖尿病病症造成的腎病症候群的方法。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。所述方法包括下述步驟:給受試者施用Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽包含SEQ ID NO: 1、3、5、7、9或10的序列。在一個替代方案中，所述胺基酸序列是任意前述序列的片段，所述片段具有與野生型Angptl4相當的活性。在另一個實施方案中，所述Angptl4多肽衍生物是本文所述的衍生物，且已經被修飾成具有降低的LPL抑制活性，可耐受切割，或前述特徵的組合。在一個實施方案中，所述Angptl4多肽或多肽衍生物被唾液酸化。這樣的衍生物可以基於本文所述的任一種Angplt4多肽。所述Angptl4多肽或多肽衍生物可以以治療有效劑量施用，單獨地施用，作為藥物組合物的一部分施用，或與第二種藥劑聯合施用。在一個實施方案中，這樣的施用通過提供Angptl4功能來治療前述病症。在一個替代實施方案中，這樣的施用通過提供修改的Angptl4功能(例如，但不限於，表現出減少的LPL抑制或可耐受切割的Angptl4功能)來治療前述病症。
篩詵方法
本公開內容也涉及一種用於鑑別化合物的方法，所述化合物可有效地治療或預防腎病症候群或其有關病症，例如，但不限於，蛋白尿、高膽固醇血症、高甘油三酯血症或水腫。在一個實施方案中，所述腎病症候群被表徵為MCD或MN。在另一個實施方案中,所述腎病症候群被表徵為MCD。在另一個實施方案中,所述腎病症候群被表徵為FSGS。在另一個實施方案中，所述腎病症候群是由糖尿病病症造成。在一個實施方案中，所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病。這樣的化合物可以用作被包含在藥物組合物中的活性成分，或用於單獨施用。在一個實施方案中，所述方法包括:測定在腎病症候群的病原學中涉及的多肽(例如，但不限於，Angptl4)的水平。
一般而言，這樣的篩選方法包括下述步驟:提供一種試驗系統(在下面更詳細地描述)，所述系統會表達在腎病症候群的病原學中涉及的多肽(例如，但不限於，Angptl4)，向所述試驗系統中引入要測試的實驗化合物，並測定所述實驗化合物對所述多肽水平的影響。所述方法包括:鑑別會影響所述多肽的唾液酸化水平的候選物或實驗化合物或藥劑(多肽、功能核酸、碳水化合物、抗體、小分子或其它分子)。然後可以在適當的系統(例如，但不限於，本文所述的動物模型系統)中進一步測試這樣的化合物，以測定鑑別的化合物的活性。
使用多種試驗來鑑別候選化合物，例如，但不限於，採用表達在腎病症候群的病原學中涉及的多肽(例如，但不限於，Angptl4)的細胞的試驗。或使用分離的多肽的試驗。各種試驗可以採用這種多肽的多種變體(例如，全長、生物活性片段或包括目標多肽的全部或一部分的融合蛋白)。此外，這種多 肽可以源自任意合適的哺乳動物物種(例如，人、大鼠或小鼠)；在一個具體的實施方案中，所述多肽源自人類。
在試驗包括使用完整細胞的情況下，所述細胞可以天然地表達在腎病症候群的病原學中涉及的多肽(例如，但不限於，Angptl4)，或可以修飾成來表達它們。在後一種情況下，通過常規分子生物學技術，諸如通過用包含這種多肽的病毒感染細胞，可以修飾細胞來表達所需多肽。所述細胞也可以是已經用編碼這種多肽的核苷酸序列轉染的原核或真核細胞。在前一種情況下，可以使用全長多肽、片段或含有這種多肽的至少一部分的融合蛋白。在本說明書中描述了示例性的試驗系統。
各種篩選試驗可以與體內試驗相組合，所述體內試驗需要測量實驗化合物對本文討論的疾病狀態和病症的徵狀的影響。在這樣的一個實施方案中，可以評價化合物，以確定它們是否影響與腎病症候群或其相關病症(例如，但不限於，蛋白尿或水腫)有關的參數。這樣的參數包括、但不限於:1)在腎病症候群和相關病症的病原學中涉及的多肽(例如，但不限於，Angptl4)的水平，和2)蛋白排洩水平，無論是總水平，還是關於特定組分的水平。
在一個實施方案中，這樣的篩選試驗可以如下進行:例如，通過測定多肽(例如，但不限於，Angptl4)的水平，並檢測與實驗化合物不存在相比，在有實驗化合物存在下，這種多肽的水平的差異。這樣的篩選試驗可以是體外的、體內的或離體的，且可以以細胞培養物為基礎(使用完整細胞或裂解物)，或可以以動物模型為基礎。本公開內容的任何試驗可以用於前述方法中。
適用於所述篩選方法中的實驗化合物，可以從任意合適的來源(諸如常規化合物文庫)得到。使用本領域已知的組合文庫方法的眾多方案中的任一種，也可以得到實驗化合物，所述方案包括:生物學文庫，空間上可接近的平行固相或溶液相文庫，需要解卷積的合成文庫方法，「一個珠子一種化合物」文庫方法，和使用親和色譜法選擇的合成文庫方法。所述生物學文庫方案限於肽文庫，而其它4種方案適用於肽、非肽寡聚體或小分子化合物文庫。在本領域中可以找到用於合成分子文庫的方法的實例。化合物文庫可以存在於溶液中或珠子、細菌、孢子、質 粒或噬菌體上。
本公開內容也提供了用於實現本公開內容的任意方法的試劑盒，所述試劑盒可以含有本文公開的任意化合物和/或組合物，或以其它方式用於實現本公開內容的方法。
Angptl4多狀衍牛物的律立和詵擇
血管生成素相關蛋白4是一種在人類中由ANGPTL4基因編碼的多肽。該基因是血管生成素/血管生成素-樣基因家族的成員，並編碼糖基化的分泌型蛋白，所述蛋白具有:N-端信號序列(SEQ ID NO:1的胺基酸殘基1-22)、捲曲螺旋結構域(SEQ ID NO:1的胺基酸殘基23-170)、接頭區域(SEQ ID NO:1的胺基酸殘基171-185)和纖維蛋白原C-端結構域(SEQ ID NO:1的胺基酸殘基186-406)。該基因在低氧條件下在內皮細胞中誘導，且是過氧化物酶體增殖活化劑的靶標。編碼的蛋白是血清激素，所述血清激素直接參與調節葡萄糖體內穩態、脂類代謝和胰島素敏感性，並也起血管內皮細胞的細胞凋亡存活因子的作用。已經描述了編碼不同同種型的交替剪接的轉錄物變體。該基因以前被稱作ANGPTL2，但是已經被更名為ANGPTL4。
Angptl4會通過斷裂LPL 二聚體分子而抑制LPL。已經明確地確認Angptl4為血眾甘油三酯(TG)清除的有效抑制劑，其會造成血漿TG水平的升高。最近的證據指示，Angptl4多肽序列中的變化會影響對甘油三酯的作用，其中某些突變會賦予降低的甘油三酯水平，這暗示降低的LPL抑制(33和34，它們每篇通過弓I用併入，用於教導Angpt 14變體)。此外，已經報導，Angptl4多肽以寡聚體形式存在，並且LPL活性的抑制需要寡聚化。從細胞中分泌以後，所述寡聚體形式在切割位點(SEQ ID NO:1和3的R161RKR164)處被切割，以提供單體C-端形式和寡聚的N-端形式(34)。發現Angptl4肽的N-端殘基1-187足以抑制LPL(33)。
人、大鼠和小鼠的胺基酸和cDNA序列提供在圖5中，並指定SEQ ID NO: 1_8。本公開內容預見到Angptl4多肽和多肽衍生物在本文公開的方法(諸如但不限於，治療和預防方法)中的用途。如本文所定義的，Angptl4多肽衍生物表示，與SEQ ID NO:1或3所示的人多肽的胺基酸序列相比包括一個或多個插入、缺失和/或置換的Angptl4多肽，或在SEQID N0:5或7中所示的多肽。在一個實施方案中，去除野生型Angptl4多肽的胺基酸殘基，並用不同的胺基酸殘基替代。可以如本文所述或如本領域已知地構建變體。使用本文所述的用於篩選活性的方法和試驗，可以評價如此構建的變體。
當在本文中使用時，用於表示胺基酸的單個字母具有下述含義:
G~j甘氨酸|p~I脯氨酸
權利要求
1.一種用於治療或預防受試者的腎病症候群的方法，所述方法包括下述步驟:給所述受試者施用Angptl4多肽、Angptl4多肽衍生物或前述的組合。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述腎病症候群被表徵為輕微改變型腎病、局灶性節段性腎小球硬化症、膜性腎病/膜性腎小球腎炎、膜性增生性腎小球腎炎或糖尿病病症。
3.根據 權利要求1所述的方法，其中所述方法包括施用Angptl4多肽的步驟。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述Angptl4多肽包含SEQID NO:1或3的序列。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述Angptl4多肽包含SEQID N0:5或7的序列。
6.根據權利要求1所述的方法，其中所述方法包括施用Angptl4多肽衍生物的步驟。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有降低的脂蛋白脂肪酶抑制活性、可耐受切割或前述的組合。
8.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有降低的脂蛋白脂肪酶抑制活性。
9.根據權利要求8所述的方法，其中與野生型Angptl4多肽相比，所述Angptl4多肽衍生物含有在位置40處的胺基酸置換。
10.根據權利要求8所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物含有E40K置換。
11.根據權利要求8所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物含有E40A置換。
12.根據權利要求10或11所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物另外含有D39K或D39A置換。
13.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物可耐受切割。
14.根據權利要求13所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物含有在位置161、162、163或164中的一個或多個處的胺基酸置換。
15.根據權利要求13所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物含有至少一個胺基酸置換，其中在位置161、162和164中的一個或多個處的精氨酸殘基被中性胺基酸置換，且在位置163處的賴氨酸殘基被中性胺基酸置換。
16.根據權利要求13所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物含有至少一個胺基酸置換，其中在位置161、162和164中的一個或多個處的精氨酸殘基被D、R、K、G、A、V或S置換，且在位置163處的賴氨酸殘基被D、R、K、G、A、V或S置換。
17.根據權利要求13所述的方法，其中所述Angpt14多肽衍生物含有R161RKR164至G161SGS164 置換。
18.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有SEQID NO: 9或10的序列，其中X39是D，X4tl是A或K，X76和X80是C，且X161、X162、X163和X164獨立地被D、R、K、G、A、V或S置換，任選地條件是，X161、X162、X163和X164中的至少一個是在SEQ ID NO:1或3中不存在的胺基酸。
19.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有SEQID NO: 9或10的序列，其中X39是D，X4tl是A或K，X76和X8tl之一是A或S，且X76和X8tl中的另一個是C，且X161 > X162> X163 和 X164 獨立地被 D、R、K、G、A、V 或 S 置換，任選地條件是，X161、X162> X163 和 X164中的至少一個是在SEQ ID ΝΟ:1或3中不存在的胺基酸。
20.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有SEQID NO: 9或10的序列，其中X39是A或K，X40是E，X76和X80是C，且X161、X162、X163和X164獨立地被D、R、K、G、A、V或S置換，任選地條件是，X161、X162、X163和X164中的至少一個是在SEQ ID NO:1或3中不存在的胺基酸。
21.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有SEQID NO: 9或10 的序列，其中 X39 是 D，X40 是 K，X76 和 X80 是 C，且 X161、X162、X163 和 X164 獨立地被 D、R、K、G、A、V或S置換，任選地條件是，X161、X162> X163和X164中的至少一個是在SEQ ID NO:1或3中不存在的胺基酸。
22.根據權利要求6所述的方法，其中所述Angptl4多肽衍生物具有SEQID NO: 9或10的序列，其中是D, X40是K, X76和X8tl之一是A或S,且X76和X8tl中的另一個是C,且X161、X162> X163和X164獨立地被D、R、K、G、A、V或S置換，任選地條件是，X161 > X162> X163和X164中的至少一個是在SEQ ID NO:1或3中不存在的胺基酸。
23.根據權利要求1所述的方法，其中所述Angptl4多肽或所述Angptl4多肽衍生物以治療有效量施用。
24.根據權利要求1所述的方法，其中所述施用減輕水腫、減輕蛋白尿、增加血漿白蛋白水平、減輕高膽固醇血症、減輕高甘油三酯血症、或前述的組合。
25.根據權利要求1所述的方法，其中所述Angptl4多肽或所述Angptl4多肽衍生物被唾液酸化。
26.根據權利要求1所述的方法，其中所述腎病是輕微改變型腎病。
27.根據權利要求2所述的方法，其中所述糖尿病病症是糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病 。
全文摘要
本公開內容提供了一種用於治療和/或預防腎病症候群(諸如但不限於MCD和MN)和與腎病症候群有關的病症(諸如但不限於、蛋白尿和水腫)以及糖尿病腎病、糖尿病、狼瘡腎炎或原發性腎小球疾病的方法。本公開內容另外提供了用於減輕蛋白尿和本文討論的其它疾病狀態的方法。這樣的方法包括給受試者治療性遞送Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。
文檔編號A61K38/16GK103140234SQ201180034162
公開日2013年6月5日 申請日期2011年6月6日 優先權日2010年6月5日
發明者蘇曼特·丘格 申請人:Uab研究基金會