一種從西洋參葉中提取分離人參皂苷混合物的方法
2023-04-24 04:38:36
專利名稱：一種從西洋參葉中提取分離人參皂苷混合物的方法
技術領域：
本發明涉及從西洋參葉中提取分離不同人參皂苷的混合物的方法，即製備二醇組人參皂苷和含有擬人參皂苷F11的三醇組人參皂苷的方法，屬於天然藥物化學研究領域。
背景技術：
到目前為止人們從西洋參葉中分得多種人參皂苷，包括人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等二醇組人參皂苷和人參皂苷Re、人參皂苷Rg1等三醇組人參皂苷以及擬人參皂苷F11，其中人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd、人參皂苷Re以及擬人參皂苷F11含量較高。西洋參葉是人參屬植物中到目前為止發現含有較大量的擬人參皂苷F11的藥用部位，因此是獲得擬人參皂苷F11的最佳原料。
發明內容
將西洋參葉中的人參皂苷分成主要含有擬人參皂苷F11、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1的部分(簡稱西洋參葉分組皂苷A或三醇組人參皂苷)和主要含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等的部分(簡稱西洋參葉分組皂苷B或二醇組人參皂苷)，這樣不僅有可能獲得具有新的生物活性的有效部位，也便於從中分離擬人參皂苷F11、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等人參皂苷單體。
本發明提供一種將西洋參葉中的人參皂苷Rg1、人參皂苷Re以及擬人參皂苷F11同其他人參皂苷分離的簡便方法，從而從西洋參葉中獲得主要含有人參皂苷Rg1、人參皂苷Re等三醇組人參皂苷和擬人參皂苷F11的西洋參葉分組皂苷A以及主要含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等二醇組人參皂苷的西洋參葉分組皂苷B。獲得的西洋參葉分組皂苷A以及西洋參葉分組皂苷B可用於製備藥物組合物、保健食品或人參皂苷單體，具體如下。
西洋參葉加水煎煮提取，提取液過大孔吸附樹脂吸附，先用較低濃度的有機溶劑的水溶液洗脫，此時洗脫下來的是人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11，其他成分仍然被吸附在樹脂上，從而得到西洋參葉分組皂苷A。然後用較高濃度的有機溶劑的水溶液洗脫，洗脫下其他人參皂苷，得到西洋參葉分組皂苷B。
西洋參葉分組皂苷A中主要含有人參皂苷Re、人參皂苷Rg11和擬人參皂苷F11，其組成與西洋參葉本身組成相同。
西洋參葉分組皂苷B中主要含有人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc人參皂苷、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2，不含或含有少量殘留的人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11。是否殘留有人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11，與用較低濃度的有機溶劑的水溶液洗脫程度有關，如果洗脫徹底，西洋參葉分組皂苷B中不含人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11。
上述洗脫過程中可以使用的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或者是它們的混合物。為了只洗脫下人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11，所用的乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們的混合物的水溶液的濃度不能過高，但也不能過低。如果使用的乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們的混合物的水溶液的濃度過高則會洗脫下人參皂苷Rd、人參皂苷Rc等二醇組人參皂苷；如果所用的乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們的混合物的水溶液的濃度過低會洗脫不下人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11。經過反覆研究，發現它們的濃度在15％-40％之間為好，最好是20％左右。另外乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們的混合物的水溶液的最佳濃度與使用的大孔吸附樹脂的種類有關，最終應根據大孔吸附樹脂的極性高低，選擇適當的濃度。
完成第一步洗脫後人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11溶解在低濃度的有機溶劑的水溶液中，這種溶液難於濃縮，為了解決這個問題本發明採用了如下方法。即將含有西洋參葉分組皂苷A的水溶液直接或用水稀釋後重新過大孔吸附樹脂吸附，這時溶解在溶液中的人參皂苷Re、人參皂苷Rg1和擬人參皂苷F11將會重新被吸附在大孔吸附樹脂上，然後再用高濃度乙醇洗脫後回收溶劑即可。
本發明中所述的大孔吸附樹脂可以是AB-8、D4020、860021、D101、D102、D103、HP-20等常用大孔吸附樹脂或具有相同或相似性能的其他廠家、其它牌號的吸附樹脂。
具體實施例方式
實施例1西洋參葉7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分別是西洋參葉重量的16、12、8倍，煎煮時間分別是2、1.5、1小時，合併煎煮液，過D4020大孔吸附樹脂吸附，用水衝淨，18％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1後改用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Rd和人參皂苷Rb3為止(矽膠薄層層析檢測，正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5，上層，10％硫酸噴霧，105℃加熱顯色，以下相同)，分別收集洗脫液。18％乙醇洗脫液重新過AB-8大孔吸附樹脂吸附，然後用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1為止，回收乙醇，得西洋參葉分組皂苷A 298克，經TLC檢測，西洋參葉分組皂苷A中主要含人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1。85％乙醇洗脫液直接回收乙醇，獲得西洋參葉分組皂苷B456克，經TLC檢測，西洋參葉分組皂苷B中主要含人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2。
實施例2西洋參葉7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分別是西洋參葉重量的14、12、8倍，煎煮時間分別是2、1.5、1小時，合併煎煮液，過D4020大孔吸附樹脂吸附，用水衝淨，22％甲醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1改用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Rd和人參皂苷Rb1為止，分別收集洗脫液。22％甲醇洗脫液重新過AB-8大孔吸附樹脂吸附，然後用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1，洗脫液回收乙醇，得西洋參葉分組皂苷A 328克。85％乙醇洗脫液直接回收乙醇，獲得西洋參葉分組皂苷B 498克。
實施例3西洋參葉7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分別是西洋參葉重量的18、12、8倍，煎煮時間分別是2、1.5、1小時，合併煎煮液，過AB-8大孔吸附樹脂吸附，用水衝淨，19％丙酮洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1後改用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Rd和人參皂苷Rb1為止，分別收集洗脫液。19％丙酮洗脫液重新過AB-8大孔吸附樹脂吸附，然後用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1，洗脫液回收乙醇，得西洋參葉分組皂苷A 287克。85％乙醇洗脫液直接回收乙醇，獲得西洋參葉分組皂苷B 413克。
實施例4
西洋參葉7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分別是西洋參葉重量的18、12、8倍，煎煮時間分別是2、1.5、1小時，合併煎煮液，過D101大孔吸附樹脂吸附，用水衝淨，17％異丙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1後改用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Rd和人參皂苷Rb1為止，分別收集洗脫液。17％異丙醇洗脫液重新過AB-8大孔吸附樹脂吸附，然後用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1，洗脫液回收乙醇，得西洋參葉分組皂苷A 317克。85％乙醇洗脫液直接回收乙醇，獲得西洋參葉分組皂苷B 463克。
實施例5西洋參葉7公斤，加水煎煮提取三次，每次加水量分別是西洋參葉重量的18、12、8倍，煎煮時間分別是2、1.5、1小時，合併煎煮液，過D102大孔吸附樹脂吸附，用水衝淨，19％正丙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1，然後改用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Rd和人參皂苷Rb1為止，分別收集洗脫液。19％正丙醇洗脫液重新過AB-8大孔吸附樹脂吸附，然後用85％乙醇洗脫至洗脫液中檢測不到人參皂苷Re、擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1，洗脫液回收乙醇，得西洋參葉分組皂苷A 307克。85％乙醇洗脫液直接回收乙醇，獲得西洋參葉分組皂苷B 463克。
實施例6取西洋參葉分組皂苷B 10克，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5，上層為流動相進行矽膠柱層析分離，得人參皂苷Rb33.0g、人參皂苷Rc0.5g、人參皂苷Rd2.1g。
實施例7取西洋參葉分組皂苷A 10克，以乙酸乙酯∶甲醇＝9∶1為流動相進行矽膠柱層析分離，得人參皂苷Rg10.5g、人參皂苷Re0.9g和擬人參皂苷F112.6g。
本發明的方法具有分離方法簡便，生產成本低、操作簡單、無環境汙染等優點。得到的西洋參葉分組皂苷A和西洋參葉分組皂苷B，可用於研製開發新藥及保健食品，也可用於提取分離各種人參皂苷單體。
權利要求
1.一種從西洋參葉製備主要由人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和擬人參皂苷F11組成的混合皂苷的方法，其特徵在於將西洋參葉提取物用大孔吸附樹脂吸附後用低濃度有機溶劑的水溶液洗脫。
2.一種從西洋參葉製備主要由人參皂苷Rb3、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1和人參皂苷Rb2組成的混合皂苷的方法，其特徵在於將西洋參葉提取物用大孔吸附樹脂吸附，先用低濃度有機溶劑的水溶液將人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和擬人參皂苷F11洗脫完全後用高濃度有機溶劑的水溶液洗脫。
3.權利要求1和2所述的任何一項製備方法，其特徵在於所述的有機溶劑選自乙醇、甲醇、丙酮、正丙醇、異丙醇或它們的兩種或兩種以上混合物。
4.權利要求1所述的製備方法，其特徵在於所述的低濃度是體積百分比濃度小於40％。
5.權利要求2所述的製備方法，其特徵在於所述的高濃度是體積百分比濃度大於45％。
6.權利要求1和2所述的任何一項製備方法，其特徵在於所述的大孔吸附樹脂吸附選自AB-8、D4020、860021、D101、D102、D103、HP20的一種或一種以上。
7.權利要求1和2所述的任何一項製備方法獲得的混合皂苷在製備藥物組合物、保健食品及人參皂苷單體中的應用。
全文摘要
本發明公開了從西洋參葉中提取分離主要由人參皂苷Rb
文檔編號C07J21/00GK1869049SQ20061009360
公開日2006年11月29日 申請日期2006年6月21日 優先權日2006年6月21日
發明者桂明玉, 金永日, 李緒文 申請人:海南亞洲製藥有限公司