鐵皮石斛芽誘導培養基的製備方法
2023-05-20 11:40:46 1
鐵皮石斛芽誘導培養基的製備方法
【專利摘要】本發明提供一種鐵皮石斛芽誘導培養基的製備方法，芽誘導培養基的製備方法，在MS基本培養基中添加誘導成分。
【專利說明】鐵皮石斛芽誘導培養基的製備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於鐵皮石斛的培養技術，更具體涉及鐵皮石斛芽誘導培養基的製備方法。
【背景技術】
[0002]鐵皮石斛產於安徽西南部以及浙江、福建、廣西、貴州、雲南等地，分布於海拔可達1600 m左右的山地半陰溼巖石上。每個鐵皮石斛蒴果內均含有幾萬到十幾萬粒種子，種子細如粉塵，無胚乳，難存活，導致鐵皮石斛自然繁殖率極低，難以獲得實生苗，加上濫採亂挖和生境破壞，其野生資源已瀕臨滅絕。
【發明內容】
[0003]技術方案
本發明涉及一種鐵皮石斛的培養基的製備方法，其特徵在於:所述方法的具體步驟包括:芽誘導培養基的製備方法。
[0004]本發明涉及一種鐵皮石斛的芽誘導培養基的製備方法，其特徵在於:所述方法的具體步驟包括: 1)取材方法:選取當年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，採摘後，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導培養:誘導培養:在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種於所述芽誘導培養基上；100~150 g的芽誘導培養基接種2-5個去掉培乳的胚；
所述誘導培養的培養條件:培養室溫度為25±2°C,光照時間10~16 h/d,光照強度1000~2000 Lx ;誘導培養的時間3~8天；
3)芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:丹參多糖10-20mg/L，甘草多糖10-2 Omg/L,所述芽誘導培養基,滅菌冷卻後形成固體厚度為1.2~1.6 cm。
【具體實施方式】
[0005]實施例1
1)取材方法:取當年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子共400粒，平均分為4組供實施例1-4使用，採摘後，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導培養:誘導培養:在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種於所述芽誘導培養基上；150 g的芽誘導培養基接種5個去掉培乳的胚；
所述誘導培養的培養條件:培養室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強度1500Lx ;誘導培養的時間5天；
3)芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:丹參多糖10mg/L,甘草多糖10mg/L,所述芽誘導培養基,滅菌冷卻後形成固體厚度為1.4 cm。
[0006]100個胚,共有73個胚誘導出芽,每個胚的平均誘導芽數為5個。
[0007]實施例2
1)取材方法:選取當年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，採摘後，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導培養:誘導培養:在無菌的條件下取飽滿的胚，去掉培乳，將消毒過的雞蛋清與去掉培乳的胚混合均勻；直接接種於所述芽誘導培養基上；100 g的芽誘導培養基接種3個去掉培乳的胚；
所述誘導培養的培養條件:培養室溫度為23°C，光照時間12 h/d，光照強度1800 Lx ；誘導培養的時間5天；
3)芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:丹參多糖20mg/L,甘草多糖20mg/L,所述芽誘導培養基,滅菌冷卻後形成固體厚度為1.5 cm。
[0008]100個胚，共有80個胚誘導出芽，每個胚的平均誘導芽數為6個。
[0009]實施例3
1)取材方法:取當年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，採摘後，消毒處理；
2)芽誘導培養:誘導培養:在無菌的條件下取飽滿的胚，直接接種於所述芽誘導培養基上；150 g的芽誘導培養基接種5個胚；
所述誘導培養的培養條件:培養室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強度1500 Lx ；誘導培養的時間18天；
3)芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:NAA(0.lmg/L) +IAA (1.0mg/L)+AgCL (8.5g/L)，所述芽誘導培養基，滅菌冷卻後形成固體厚度為1.4 cm。
[0010]100個胚，共有24個胚誘導出芽，每個胚的平均誘導芽數為I個。
[0011]實施例4
1)取材方法:選取當年籽粒飽滿的鐵皮石斛種子，採摘後，消毒處理，將消毒過的雞蛋清與鐵皮石斛種子混合均勻；
2)芽誘導培養:誘導培養:在無菌的條件下取飽滿的胚，直接接種於所述芽誘導培養基上；150 g的芽誘導培養基接種5個胚；
所述誘導培養的培養條件:培養室溫度為25°C，光照時間10 h/d，光照強度1500Lx ;誘導培養的時間18天；
3)芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:丹參多糖20mg/L，甘草多糖20mg/L，所述芽誘導培養基，滅菌冷卻後形成固體厚度為1.5 cm。
[0012]100個胚，共有45個胚誘導出芽，每個胚的平均誘導芽數為3個。
【權利要求】
1.一種鐵皮石斛的培養基的製備方法，其特徵在於:所述方法的具體步驟包括:芽誘導培養基的製備方法，在MS基本培養基中添加誘導成分。
2.一種鐵皮石斛的芽誘導培養基的製備方法，其特徵在於:芽誘導培養基的配製:在MS基本培養基中添加:丹參多糖10-20 mg/L，甘草多糖10-20 mg/L，所述芽誘導培養基，滅菌冷卻後 形成固體厚度為1.4~1.6 cm。
【文檔編號】A01H4/00GK103734002SQ201310729834
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月26日 優先權日:2013年12月26日
【發明者】崔鎧, 李玲玲 申請人:崔鎧