碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的應用的製作方法

2023-05-21 09:44:11

碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明涉及碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的應用，該注射劑將碳酸氫鈉與葛根素相使配伍製成含葛根素的注射劑，或者碳酸氫鈉注射劑與葛根素注射劑聯合應用，有效克服了含有葛根素注射劑的偶發性溶血不良反應，提高了葛根素注射給藥的安全性。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明涉及碳酸氫鈉的醫藥新用途，具體涉及在葛根素注射劑中的應用。 碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的應用

【背景技術】
[0002] 碳酸氫鈉又名小蘇打，分子式NaHC03，分子量84,是臨床上常用的鹼性藥，臨床應 用較廣。隨著醫藥事業的發展，碳酸氫鈉的臨床新用途越來越多，包括以下方面：治療血栓 性疾病。碳酸氫鈉靜注後可在體內釋放C0 2，提高血液中C02濃度，反射性地擴張血管、增加 血流，故用來治療血栓性疾病。治療哮喘持續狀態和喘憋性肺炎。對4例經用綜合治療未 能奏效的嚴重哮喘持續狀態患者，經碳酸氫鈉治療後，均取得顯著效果。哮喘持續狀態大多 合併有酸中毒，此時氣管對腎上腺素反應性受到抑制，增加過敏反應介質的釋放，致使過敏 個體的哮喘加劇，而碳酸氫鈉能解除這種抑制作用，使機體恢復對支氣管擴張藥物的反應 性，達到解除支氣管痙攣的作用。治療腰腿痛、頑固性、血管性頭痛。一般認為血管性頭痛 與腦組織輕微瘀血、乏氧、酸性代謝產物增多，腦血管舒縮功能失調有關，碳酸氫鈉既能使 處於舒張狀態的腦血管收縮，亦能使處於痙攣狀態的顱內血管擴張，維持血管舒縮功能平 衡。治療黴菌性腸炎。有人報導黴菌在酸性環境下生長和繁殖活躍，而在鹼性環境中則抑 制其生長繁值。治療難治性慢性腎炎。碳酸氫鈉靜脈滴注治序對激素等不敏感的各型慢性 腎炎18例。結果基本緩解12例；部分緩解5例。治療眩暈症，治療鏈黴素對顱神經的損 害。鏈黴素中毒所致第八對腦神經損害的報告頗多，主要症狀有頭痛、眩暈、耳鳴、噁心、聽 力減退、耳脹、共濟失調等。應用碳酸氫鈉靜注治療後，結果7例均在用藥後眩暈、耳鳴、惡 心等症狀全部消失（見劉加升撰寫的《碳酸氫鈉的臨床新用途》，中國醫院藥學雜誌，1989， 9(9) :395-397 頁）。
[0003] 碳酸氫鈉還有其它很多用途，如延緩衰老、鹼化尿液，防止磺胺在尿中結晶析出， 治療代謝性酸中毒、休克、高血鉀症，心肺復甦、心力衰竭、肺水腫、高碳酸血症等（見介新 撰寫的《碳酸氫鈉的臨床新用途》，國外醫學（醫院管理分冊），2002, 3 :28頁）。
[0004] 葛根素是從豆科植物野葛的乾燥根中提取的單體一異黃酮化合物，4'，7 -二羥 基-8-i3_D葡萄糖基異黃酮。臨床上廣泛用於心血管疾病的治療。目前應用於臨床的含有 葛根素的藥物製劑主要是注射劑。隨著葛根素的廣泛使用，近年來有關葛根素不良反應的 報導也越來越多，引起醫藥界廣泛關注。通過分析近20年中藥不良反應，葛根素注射液位 列第18位。國家藥品不良反應監測中心曾在2003年1月第3期《藥品不良反應信息通報》 中通報了葛根素注射液的不良反應。大多數研究者認為，葛根素注射液是以50%丙二醇為 溶媒配製而成，不可避免因提取工藝、技術等方面的差異產生純度不夠，引入雜質而導致各 種反應（見徐向輝撰寫的《對臨床使用葛根素注射液出現不良反應的分析》，上海中醫藥雜 志，2006,40(8) :71-72 ;和徐世國撰寫的《葛根素的臨床應用及不良反應》，時珍國醫國藥， 2005,16 (12) :1307-1308)。在對2000-2004年國內主要醫藥期刊報導的63例葛根素不良 反應進行分析後發現，男40例，女23例；年齡34?81 (57. 5±23. 5)歲。所有病例均為靜 脈滴注給藥。給藥劑量為0. 4?0. 6g，藥品稀釋液均為5%葡萄糖液、生理鹽水、5%葡萄糖 鹽水等。反應發生時間最快者為3min，最慢者為13d，均發生在給藥過程中。首次給藥出現 反應者47例，重複給藥出現反應者16例。統計顯示，常見不良反應有變態反應（發熱、顫 抖等，24例）、過敏性休克（4例）、溶血性貧血（13例）、肝損害、腎損害（7例）、藥物熱（10 例）、死亡（5例）。所有病例均無過敏史，反應發生後停藥經對症處理均恢復（死亡病例 除外）。用藥劑量及所用稀釋液在藥品說明書提示範圍內，所有反應均肯定為葛根素所致。 不良反應的發生與所患疾病無關，與年齡、性別無關，與藥物稀釋液無多大聯繫。與患者體 質差異有關，特別是年老體弱者易發生。反應發生時間的長短與中藥製劑起效緩慢程度有 關（見全心榮撰寫的《葛根素不良反應63例文獻分析》，現代中西醫結合雜誌，2005,14 (1): 140)。一患者靜滴葛根素約lOmin，即出現為急性腎功能不全，溶血性貧血（見關銘華撰寫 的《葛根素致溶血性貧血》，藥物不良反應雜誌，2003, 5 :291)。因此，葛根素引起的溶血性貧 血是葛根素本身所致。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的在於提供碳酸氫鈉的醫藥新用途，即碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的 應用，碳酸氫鈉可有效防治葛根素誘發的血管內溶血不良反應。
[0006] 實際上，本發明涉及碳酸氫鈉在製備葛根素注射用複方製劑時的應用，也可以和 葛根素注射劑以注射和輸液的方式臨時配合應用，或者在以注射和輸液的方式應用碳酸氫 鈉後再接著應用葛根素注射劑。
[0007] 為達到上述目的，本發明採用的技術方案是：碳酸氫鈉在製備葛根素注射劑的新 用途。碳酸氫鈉和葛根素注射劑以注射和輸液的方式臨時配合應用。在以注射和輸液的方 式應用碳酸氫鈉後再接著應用葛根素注射劑。
[0008] 上述技術方案中的有關內容解釋如下：
[0009] 1、上述方案中，所述的注射劑，含有以下重量份藥物：碳酸氫鈉1?100份，葛根素 1?100份。
[0010] 2、上述方案中，所述的注射劑，還含有輔料1?50重量份，注射用水1?10000重 量份。所述的輔料為葡萄糖液、丙二醇液、葡萄糖鹽水、氯化鈉注射液或生理鹽水。
[0011] 3、上述方案中，所述的注射劑可以是臨床上可接受的注射液、粉針或輸液。
[0012] 4、上述方案中，所述的注射劑的製備方法如下所述：
[0013] 所述的粉針，由碳酸氫鈉和葛根素混合、滅菌製得；或者由碳酸氫鈉、葛根素和氯 化鈉混合，加注射用水溶解，再用鹽酸或氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 0-8. 5,過濾，濾液滅 菌後灌封在粉狀安瓿中再次滅菌製得；
[0014] 所述的注射液。由碳酸氫鈉、葛根素和氯化鈉混合，加注射用水溶解，再用鹽酸或 氫氧化鈉溶液調整pH值5. 0-8. 5,過濾，濾液灌封在安瓿中滅菌製得。或碳酸氫鈉由5%葡 萄糖液，5%葡萄糖鹽水，丙二醇液（由丙二醇與生理鹽水按體積比（1 : 1)配置而成，內含 丙二醇0. 5mL/mL)，氯化鈉注射液或生理鹽水溶解，再與葛根素注射劑混合，過濾，濾液灌封 在安瓿中滅菌製得。
[0015] 所述的輸液，由碳酸氫鈉、葛根素和氯化鈉混合，加注射用水溶解，再用鹽酸或氫 氧化鈉溶液調整pH值5. 0-8. 5,溶解，過濾，濾液灌封在鹽水玻璃瓶中滅菌製得。或碳酸氫 鈉由5%葡萄糖液，5%葡萄糖鹽水，丙二醇液（由丙二醇與生理鹽水按體積比（1 : 1)配 置而成，內含丙二醇0. 5mL/mL)，氯化鈉注射液或生理鹽水溶解，再與葛根素注射劑混合，過 濾，濾液灌封在安瓿中滅菌製得。
[0016] 5、上述方案中，所述的臨時配合應用是指在醫院，在應用葛根素注射劑的同時與 碳酸氫鈉混合一同輸液或注射。
[0017] 6、上述方案中，所述的在以注射和輸液的方式應用碳酸氫鈉後再接著應用葛根素 注射劑，是指在醫院，以注射和輸液的方式應用碳酸氫鈉後，再接著以注射和輸液的方式應 用葛根素注射劑。
[0018] 葛根素具有有擴張冠狀動脈和腦血管、降低心肌耗氧量，改善微循環和抗血小板 聚集的作用。臨床上用於輔助治療冠心病、心絞痛、心肌梗塞、視網膜動靜脈阻塞、突發性耳 聾及缺血性腦血管病、小兒病毒性心肌炎、糖尿病等。葛根素還可以與碳酸氫鈉配伍製成復 方葛根素注射劑用於防治多種疾病，如用於防治糖尿病周圍神經病變、高血壓合併糖尿病、 糖尿病腎病、急性腦梗死、穩定型心絞痛、下肢深部靜脈血栓形成以及椎基底動脈供血不足 性眩暈等。但是，含葛根素注射劑中的葛根素極易引起血管內溶血。碳酸氫鈉具有廣泛的 生物學效應，本
【發明者】經過研究證實碳酸氫鈉還具有拮抗由葛根素誘發的血管內溶血不良 反應，提高葛根素注射給藥的安全性。
[0019] 下面結合一些試驗進一步來說明本發明的目的和所能達到的效果。
[0020] 本實驗參考《中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究的技術指導原則》對溶血試驗進 行預試驗，發現8mM葛根素能夠引起1 %的綿羊紅細胞溶血10 %，體外溶血試驗發生概率為 100%，溶血試驗結果均得到重現，說明方法可重複。該方法可用於發現注射劑的潛在的偶 發溶血現象，是進行注射劑新藥開發判斷是否存在偶發性溶血的可行試驗方法，有利於減 少不良反應的發生，提高注射劑的安全性。
[0021] 一、碳酸氫鈉拮抗含有葛根素的注射劑溶血不良反應的作用及效果
[0022] (一）葛根素注射劑溶血試驗
[0023] 研究碳酸氫鈉與葛根素合用對綿羊紅細胞的影響。取10隻小尾寒羊的紅細胞，分 別加入一定劑量的碳酸氫鈉與葛根素，l〇min後，觀察紅細胞的狀態和溶血發生率，用X2檢 驗統計分析實驗結果，探尋碳酸氫鈉對葛根素注射劑偶發性溶血的對抗作用。現將結果報 告如下：
[0024] 1實驗材料
[0025] 1. 1受試藥物
[0026] 碳酸氫鈉注射劑①，碳酸氫鈉由天津市科密歐化學試劑有限公司提供，用電子天 平準確稱取碳酸氫鈉3. 36g，溶於生理鹽水溶液，用10mL容量瓶將碳酸氫鈉溶液定容至 10mL，此為注射劑①，濃度為4mol · L'用微孔濾膜（0. 22μπι)過濾除菌，4°C保存備用。
[0027] 注射劑②：用滅菌生理鹽水將注射劑①稀釋至2mol · L_\ 10mL，4°C保存備用。
[0028] 注射劑③：用滅菌生理鹽水將注射劑①稀釋至lmol · ΙΛ 10mL，4°C保存備用。
[0029] 葛根素注射劑④：由浙江康恩貝製藥股份有限公司提供，2mL，產品批號090501， 每mL注射劑含葛根素50mg。
[0030] 葛根素注射劑（250mM)⑤：用電子天平精確稱取葛根素粉末（購自江蘇天晟藥品 有限公司）l.〇41g，用40%二甲基亞碸（DMS0，DZ0231，AMRESC0)溶解，超聲助溶，生理鹽水 溶液稀釋至9mL，容量瓶定容至10mL，溶液顏色呈無色（配置環境：超淨工作檯中進行）。溶 劑為40% DMSO溶液。用微孔濾膜（0. 22μπι)過濾除菌，4°C保存。
[0031] 複方葛根素注射劑⑥：取注射劑①0. 04mL，注射劑④0. 27mL，混勻，共0. 31mL，組 成注射劑⑥。每mL注射劑含葛根素43. 55mg、碳酸氫鈉43. 35mg。
[0032] 複方葛根素注射劑⑦：取注射劑②0. 04mL，注射劑④0. 27mL，混勻，共0. 31mL，組 成注射劑⑦。每mL注射劑含葛根素43. 55mg、碳酸氫鈉21. 68mg。
[0033] 複方葛根素注射劑⑧：取注射劑③0. 04mL，注射劑④0. 27mL，混勻，共0. 31mL，組 成注射劑⑧。每mL注射劑含葛根素43. 55mg、碳酸氫鈉10. 84mg。
[0034] 複方葛根素注射劑⑨：取注射劑①0. 04mL，注射劑⑤0. 13mL，混勻，共0. 17mL，組 成注射劑⑨。每mL注射劑含葛根素79. 61mg、碳酸氫鈉79. 06mg。
[0035] 複方葛根素注射劑⑩：取注射劑②0. 04mL，注射劑⑤0. 13mL，混勻，共0. 17mL，組 成注射劑⑩。每mL注射劑含葛根素79. 61mg、碳酸氫鈉39. 53mg。
[0036] 複方葛根素注射劑G :取注射劑③0. 04mL，注射劑⑤0. 13mL，混勻，共0. 17mL，組 成注射劑〇。每mL注射劑含葛根素79. 61mg、碳酸氫鈉19. 76mg。
[0037] 1. 2實驗動物
[0038] 小尾寒羊10隻（20?30Kg)，由西北農林科技大學動物實驗中心提供。在室溫 15?25°C，相對溼度50%條件下飼養。
[0039] 1.3試劑、儀器
[0040] 氯化鈉注射劑，批號：31213042402,石藥銀湖製藥有限公司生產；注射用水，自 制；TGL-16B高速離心機，湖南星科科學儀器有限公司；HPY-01B生化培養箱，黃石恆豐醫療 器械有限公司；BI0-RAD680酶標儀；酶標條購由江蘇海門三和興亞醫療器械廠生產，購自 陝西省楊凌寶鑫器材有限公司。
[0041] 2 方法
[0042] 2. 1紅細胞懸浮液的製備
[0043] 小尾寒羊10隻，分別進行溶血實驗。每隻綿羊採頸靜脈血10ml，肝素鈉（江蘇萬 邦生化醫藥股份有限公司）160IU抗凝後，置於刻度離心管內，以2000轉/分鐘離心10分 鍾，棄去血漿，加入適量的氯化鈉注射劑洗滌，離心棄去上清液及白細胞層。再加適量生理 鹽水搖勻、離心，如此反覆洗滌3次，至離心後上清液呈無色透明為止。將所得壓積紅細胞 用生理鹽水稀釋成11% (體積比）的紅細胞懸液。至此，紅細胞懸液準備完畢。
[0044] 2. 2葛根素溶液體外溶血實驗設計
[0045] 設葛根素溶液作用於紅細胞的濃度為8mM(0. 00333g ^171)。設陰性對照組，溶劑 對照組（用DMS0代替葛根素溶液作用於紅細胞），藥物處理組及陽性對照組。用METTLER TOLEDO臺式pH計測定葛根素溶液的pH值為7. 16。
[0046] 按照下表1中所示，分別往試管裡加入相應成分，注意加樣順序。每加完一種成分 後，都輕輕搖勻。等體系中所有成分都加入體系中後，輕輕震蕩混勻，放置37°C的生化培養 箱溫育。lOmin後觀察溶血和凝聚反應。凝聚反應判定方法：若溶液中有紅棕色或棕紅色 絮狀沉澱，振搖後不分散，表明有紅細胞凝集發生，若凝聚物振搖後又能均勻分散，則為假 凝集，若凝聚物不被搖散者則為真凝集。接著各管按照5000rpm/min條件離心，肉眼觀察上 清液顏色。取上清液，於540nm波長處檢測光吸收值（0D值）。根據2005年《中藥、天然藥 物刺激性和溶血性研究的技術指導原則》，按公式計算各組各管的溶血率:
[0047] 溶血率（％ )=(藥物處理組0D值-陰性對照組0D值）八陽性對照管組0D值-陰 性對照組0D值）
[0048] 參考評價標準：溶血率> 5%表明有溶血現象發生，並進行統計學處理。
[0049] 表1葛根素溶液與碳酸氫鈉體外溶血實驗分組設計
[0050]

【權利要求】
1. 碳酸氫鈉在葛根素注射劑中的應用。
2. 根據權利要求1所述的應用，其特徵在於：碳酸氫鈉可以和葛根素注射劑做成複方 注射劑使用，也可以和葛根素注射劑以注射和輸液的方式臨時配合同時使用，或者在以注 射和輸液的方式應用碳酸氫鈉後再接著應用葛根素注射劑。
3. 根據權利要求2所述的同時應用，其特徵在於：葛根素注射劑和碳酸氫鈉注射劑在 為患者應用前混勻，再以注射和輸液的方式應用。
4. 根據權利要求2所述的以注射和輸液的方式應用碳酸氫鈉後再接著應用葛根素注 射劑，其特徵在於：先為患者應用碳酸氫鈉注射劑結束後，再接著應用葛根素注射劑。
5. 根據權利要求1、2、3、4所述的注射劑和注射劑的應用，其特徵在於：含有以下重量 份藥物：碳酸氫鈉1?100份，葛根素1?100份。
6. 根據權利要求1、2、3、4、5所述的注射劑和注射劑的應用，其特徵在於：可以含有輔 料1?50重量份、注射用水1?10000重量份。
7. 根據權利要求1、2、3、4、5、6所述的注射劑和注射劑的應用，其特徵在於：所述的輔 料可以為葡萄糖液、葡萄糖鹽水、丙二醇液、氯化鈉注射液或生理鹽水注射液。
8. 根據權利要求1、2、3、4、5、6或7所述的注射劑和注射劑的應用，其特徵在於：所述 的注射劑和注射劑的應用可以是臨床上可接受的注射液、粉針或輸液。
【文檔編號】A61P9/10GK104042625SQ201410248192
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年5月28日 優先權日:2014年5月28日
【發明者】李新平, 周博, 寧利華, 曹統 申請人:西北農林科技大學