一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法

2023-04-29 07:06:36

一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，包括：以新鮮的人心果葉子為原料，以55～65％(v/v)乙醇為溶劑，採用勻漿一負壓空化技術進行聯合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液經離心或抽濾分離，得到分離液；重複所述勻漿一負壓空化和離心或抽濾步驟至少2次，並合併所述分離液；合併的上述分離液進行真空濃縮後，用水溶解，並經過超聲震蕩製得料液濃度為10～15mg/mL的混懸液；然後用大孔吸附樹脂對所述混懸液進行富集分離，並用70～80％(v/v)的乙醇水溶液作為洗脫劑進行洗脫，並收集洗脫液；將所述洗脫液蒸餾得到天然抗氧化物質濃縮溶液；所述天然抗氧化物濃縮溶液經真空冷凍乾燥得到固體的天然抗氧化物質提取物。得到的提取物主要為酚酸類化合物；且提取物具有較強的體外抗氧化能力和抑菌能力。
【專利說明】一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬於天然抗氧化物質的提取領域，具體涉及從人心果葉子提取天然抗氧化 物質的方法。

【背景技術】
[0002] 人心果（Manikara zapodiIla)亦稱吳鳳柿、沙漠吉拉，為山欖科（Sapotaceae)鐵 線子屬（Manilkara Adans)的常綠果樹，原產墨西哥南部中美洲、西印度群島一帶，因人心 果外形長得像人的心臟，故因而得名。我國於1990年首先引種至福建，此後廣東、臺灣相繼 引種成功。目前人心果主要分布在臺灣、海南、福建、廣東、廣西等省份。果實可食，味甜可 口，富含多種營養成分，具有降血脂、抗炎和抗腫瘤等多種保健功效；樹幹之乳汁為口香糖 原料；種仁含油率20% ;樹皮含植物鹼，可治熱症。
[0003] 長期以來，人們為了保鮮和防止氧化，大多使用合成的抗菌劑和抗氧化劑。但是人 工合成的抗菌劑、抗氧化劑雖然具有高效的特點，但是其高毒性慢慢引起人們的關注，隨著 人們健康意識和環保意識的增強，開發新的天然抗菌劑、抗氧化劑就取代合成抗菌劑、抗氧 化劑成為食品抗菌劑、抗氧化劑研究的方向，而且天然抗菌劑、抗氧化劑具有實用、高效、低 毒的特點。


【發明內容】

[0004] 為了彌補有關人心果葉子中活性物質的提取及其抗氧化和抑菌活性研究的空白， 本發明提供了一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，該方法可獲得並高效濃縮了 人心果葉子中的天然活性物質，同時大大提高了提取物中抗氧化和抑菌物質的含量。
[0005] 根據本發明的一個實施方式，提供了一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方 法，包括以下步驟：以新鮮的人心果葉子為原料，以55?65% (v/v)乙醇為溶劑，採用勻 漿-負壓空化技術進行聯合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液經離心或抽濾分 離，得到分離液；重複勻漿-負壓空化聯合提取和離心或抽濾步驟至少2次，並合併所述 分離液；合併的所述分離液進行真空濃縮後，用水溶解，並經過超聲震蕩製得料液濃度為 10?15mg/mL的混懸液；然後用大孔吸附樹脂對所述混懸液進行富集分離，並用70?80% (v/v)的乙醇水溶液作為洗脫劑進行洗脫，並收集洗脫液；將所述洗脫液蒸餾得到天然抗 氧化物質濃縮溶液；所述天然抗氧化物質濃縮溶液經真空冷凍乾燥得到固體的天然抗氧化 物質提取物。
[0006] 所述勻漿-負壓空化技術是由勻漿誘導後直接進行負壓空化提取。勻漿誘導所用 的提取溶劑為55?65% (v/v)的色譜級乙醇，所用的提取溶劑體積（mL)與所述人心果葉 子的質量（g)之比為25 : 1?30 : 1，勻漿提取時間為40?50s。負壓空化提取時間為 15 ?20min，負壓壓強為-0· 06 ?-0· 08MPa。
[0007] 所述大孔吸附樹脂選自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520。
[0008] 所述真空冷凍乾燥的時間為12?18小時，冷凍乾燥的溫度為-45±2°C，真空度為 15±3Pa。
[0009] 根據上述本發明的提取方法，提取過程以乙醇水為溶劑，採用勻漿-負壓空化技 術聯合提取，提取率較高，提取時間較短，操作簡單，所用試劑毒性低，用量少，且以人心果 的葉子作為生產原料，來源廣泛、可再生，提高了其生物利用度。因此，應用本發明方法可實 現從人心果葉子中提取天然抗氧化物質的廣泛生產。由此所獲得的產品中抗氧化和抑菌物 質含量高，且活性較強。
[0010] 由上述方法提取的高濃度活性物質可用於開發高含量的新型天然人心果抗氧化 劑和抑菌劑，以用於保健功能，並可作為食品等的天然添加劑，實現人心果高附加值綜合利 用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0011] 圖1是370nm波長下檢測的根據本發明的方法提取的目標產物中多酚物質的HPLC 色譜圖。
[0012] 圖2是勻漿-負壓空化聯合提取的裝置示意圖。

【具體實施方式】
[0013] 根據本發明的實施方式，提供一種人心果葉子提取物及提取方法和應用，具體如 下：以新鮮的人心果葉子為原料，以55?65% (v/v)，優選60% (v/v)的乙醇為溶劑，採用 勻漿-負壓空化技術進行聯合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液經離心或抽濾 分離，得到澄清的分離液；重複所述勻漿-負壓空化和離心或抽濾步驟至少2次，並合併所 述分離液；合併的所述分離液進行真空濃縮，用水溶解，並經過超聲震蕩混懸；然後用大孔 吸附樹脂進行富集分離，並用70?80% (v/v)的乙醇水溶液作為洗脫劑進行洗脫，並收集 洗脫液；將所述洗脫液蒸餾得到天然抗氧化物質濃縮溶液；所述天然抗氧化物質濃縮溶液 經真空冷凍乾燥得到固體的天然抗氧化物質提取物。
[0014] 上述提取步驟中所用的溶劑為55?65% (v/v)，優選60% (v/v)乙醇，優選為色 譜級乙醇。
[0015] 優選地，在根據本發明的從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法中，勻漿-負 壓空化技術是由勻漿誘導後直接進行負壓空化提取。其中，勻漿誘導所用的提取溶劑為 60% (v/v)的色譜級乙醇，所用的提取溶劑體積與所述人心果葉子的質量比為25 : 1? 30 : 1，勻漿提取時間為40?50s。此外，負壓空化提取時間為15?20min，負壓壓強 為-0· 06 ?-0· 08MPa。
[0016] 勻漿-負壓空化技術採用本領域常用的勻漿-負壓空化聯合裝置進行。優選地， 如圖2所示，將人心果葉子與提取溶劑（例如60%的乙醇）一起加入勻漿裝置①中，經勻漿 後直接導入至負壓空化提取裝置②中。在負壓空化提取裝置②中通入氮氣，經負壓空化提 取後提取液進入收集裝置③中進行收集，隨後通過泵④輸出。
[0017] 在根據本發明的從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法中，大孔吸附樹脂選自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520,經提取率及抗氧化活性和抑 菌活性驗證，優選出DM130作為富集分離所用的大孔吸附樹脂。
[0018] 此外，合併的分離液在用大孔吸附樹脂進行富集分離之前，優選進行濃縮，例如通 過蒸餾或真空濃縮。優選地，經過真空濃縮的分離液可形成為膏體。分離液經真空濃縮形成 提取浸膏後，用水溶解，並經過超聲震蕩混懸，配製成料液濃度為10?15mg/mL的混懸液， 然後再用大孔吸附樹脂進行富集分離。由於提取浸膏所含成分複雜，不容易用水溶解，利用 超聲震蕩混懸後，提取浸膏很均勻地與水混懸。因此，上樣後，大孔吸附樹脂可以更好地吸 附樣品，更便於後續的富集分離。
[0019] 上述真空冷凍乾燥的時間為12?18小時，冷凍乾燥的溫度為-45 ± 2°C，真空度為 15±3Pa。
[0020] 經過上述方法提取得到的天然抗氧化物質的顏色通常為深綠色。
[0021] 根據本發明的一個【具體實施方式】，上述從人心果葉子提取天然抗氧化物質的具體 方法步驟如下：
[0022] (1)取一定量的新鮮的人心果葉片，加入55?65% (v/v)的乙醇進行勻漿誘導， 所用溶劑體積（mL)與人心果葉片的質量（g)之比為25 : 1?30 : 1。勻漿提取時間為 40?50s。然後將勻漿後的溶液和材料直接導入聯合的負壓空化提取裝置中，負壓空化提 取時間為15?20min，負壓壓強為-0. 06?-0. 08MPa。將上述勻漿-負壓空化聯合提取 後的乙醇水提取液進行離心或抽濾，得到分離液。之後，重複上述提取和離心或抽濾步驟2 次，合併分離液。
[0023] (2)然後，將合併的分離液真空濃縮至膏狀，得到提取浸膏。將所得的提取浸膏加 入水，於超聲波振蕩反應器中進行溶解混懸。混懸後，配製成料液濃度為10?15mg/mL的 混懸溶液。
[0024] 同時，將大孔吸附樹脂採用溼法裝柱，保留液面，上樣量I. 0?I. 5BV，以流速 1 ±0. lmL/min條件下過吸附柱。吸附後，可選地先用純淨水3?5BV洗雜質，然後再用70? 80% (v/v)的乙醇水溶液5?8BV洗脫，收集洗脫液。
[0025] (3)將收集到的洗脫液進行蒸餾濃縮，然後再經過真空冷凍乾燥，得到固體的人心 果葉子提取物。冷凍乾燥的溫度為-45±2°C，時間為12?18小時，真空度為15±3Pa。
[0026] 由上述方法製得的固體提取物的顏色通常為深綠色。
[0027] 根據另一實施方式，提供了一種人心果葉子提取物用於製造抗氧化劑和抑菌劑的 應用。
[0028] 經檢測，根據本發明的方法提取人心果葉子得到的提取物主要成分為酚酸類化合 物。得到的人心果葉子提取物，對於DPPH自由基的清除能力較強（IC 5tl值為0. 04mg/mL)，是 Trolox的3. 7倍。對於ABTS自由基的清除能力也很強（IC5tl值為4. 67 μ g/mL)，是Trolox 的5. 48倍；對於鐵離子有較強的還原能力（2. 86mmol FeS04/g)，是Trolox的8. 8倍；同時 具有較強的抑菌活性。因此，可將根據本發明的人心果葉子提取物用於製備抗氧化劑和抑 菌劑等用途。
[0029] 根據本發明的另一【具體實施方式】，上述人心果葉子提取物的提取方法可包括：
[0030] (1)提取：取一定量的新鮮人心果葉子，加入60% (v/v)的色譜級乙醇進行勻漿誘 導，所用色譜級乙醇體積（HiL)與人心果葉子的質量（g)之比為25 : 1?30 : 1，勻漿提 取時間為40?50s，然後將勻漿後的溶液和人心果葉子直接導入聯合的負壓空化提取裝置 中，負壓空化提取時間為15?20min，負壓壓強為-0. 06?-0. 08MPa。
[0031] (2)離心或抽濾分離：提取液經離心機在轉速10000 ± IOOrpm下離心20 ±2min，分 離出上清液，棄去沉澱物；或者提取液經抽濾裝置，濾得分離液。
[0032] (3)重複上述提取和離心或抽濾步驟2次，合併分離液。然後將其真空濃縮至膏 狀，得到提取浸膏。
[0033] (4)吸附分離：將所得的提取浸膏加入水，於超聲波振蕩反應器中進行溶解混懸。 混懸後，配製成料液濃度為10?15mg/mL的混懸溶液。同時將大孔吸附樹脂採用溼法裝柱， 保留液面，上樣量I. 〇?I. 5BV，以流速1 ±0. lmL/min條件下過吸附柱。吸附後先用純淨水 3?5BV洗雜質，然後再用70?80% (v/v)的乙醇水溶液5?8BV洗脫，收集洗脫液。用 於富集分離的大孔吸附樹脂為DM130。
[0034] (5)濃縮：將收集的洗脫液蒸出乙醇得人心果葉子提取物濃縮溶液；
[0035] (6)真空冷凍乾燥：將人心果提取物濃縮溶液經冷卻後在真空冷凍下進行脫水 乾燥，即得固體的人心果葉提取物，其中冷凍乾燥的溫度為_45±2°C，冷凍乾燥的時間為 12?18小時，真空度為15±3Pa。
[0036] 以下，將參照圖1對本發明涉及的從人心果葉中提取天然抗氧化物質的方法進行 更詳細地說明。
[0037] 實施例1
[0038] (1)將新鮮的人心果葉子Ig和60% (v/v)乙醇25mL置於勻漿-負壓空化聯合提 取裝置的勻漿裝置中，然後進行提取。勻漿提取時間為40s，然後將勻漿後的溶液和材料直 接導入聯合的負壓空化提取裝置中，負壓空化提取時間為15min，負壓壓強為-0. 06MPa，得 乙醇水提取液；
[0039] (2)將乙醇提取液冷卻後經離心機離心分離，設置離心機轉速為lOOOOrpm，離心 20min，得到分離液；
[0040] (3)重複2次上述提取和離心分離步驟，合併分離液；
[0041] (4)將上述合併的分離液真空濃縮，加水溶解後經過超聲震蕩製成料液濃度為 10mg/mL的混懸液，以5ml/min的流速加至已經過處理的DM130大孔吸附樹脂富集柱，之後 用3BV的純淨水洗柱，再用5BV的70% (v/v)的乙醇水溶液以1±0. lmL/min的流速洗脫， 且合併洗脫液。所有的操作在4°C低溫避光下進行。
[0042] (4)在常壓下（I. OlX IO5Pa)蒸餾出上述洗脫液中的乙醇，得到天然抗氧化物質濃 縮溶液。
[0043] (5)真空冷凍乾燥：將天然抗氧化物質濃縮溶液經冷卻後在真空下於_45°C進行 12小時的脫水乾燥，真空度為12Pa，即得粉狀天然抗氧化活性物質0. 125g，得率12. 5%。
[0044] 實施例2
[0045] (1)將新鮮的人心果葉子Ig和色譜級60% (v/v)色譜級乙醇30mL置於勻漿-負 壓空化聯合提取裝置中。然後進行提取，勻漿提取時間為50s，然後將勻漿後的溶液和材料 直接導入聯合的負壓空化提取裝置中，負壓空化提取時間為20min，負壓壓強為-0. 08MPa， 得乙醇水提取液。
[0046] (2)將提取液直接經抽濾裝置進行抽濾後，得澄清濾液。
[0047] (3)重複2次上述提取和抽濾分離步驟，合併濾液。
[0048] (4)將上述合併的濾液濃縮至膏體，再將該膏體加水後經過超聲震蕩製成料液濃 度為15mg/mL的混懸液，以5ml/min的流速加至已經過處理的DM130大孔樹脂富集柱，之後 用5BV純淨水洗柱，再用8BV的80% (v/v)的乙醇水溶液洗脫，合併洗脫液。
[0049] (5)在常壓下（I. 01 X IO5Pa)下從洗脫液中蒸出乙醇得到天然抗氧化物質濃縮溶 液。
[0050] (6)真空冷凍乾燥：將天然抗氧化物質濃縮溶液經冷卻後在真空下_45°C進行18 小時的脫水乾燥，真空度為12Pa，即得粉狀天然抗氧化活性物質0. 146g，得率14. 6%。
[0051] 對比例1
[0052] (1)將乾淨並粉碎的人心果葉子Ig和60% (v/v)乙醇30mL置於IOOml單頸瓶中， 然後進行攪拌回流提取，控制回流溫度為55°C，回流時間為120min，得乙醇水提取液。
[0053] (2)將乙醇提取液冷卻後經離心機離心分離，設置離心機轉速為lOOOOrpm，離心 20min，分離出上清液。
[0054] (3)重複2次上述浸提和離心分離步驟，合併上清液。
[0055] (4)將上述合併的上清液濃縮，加水後經過超聲震蕩製成混懸液，以5ml/min的流 速加至已經過處理的DM130大孔樹脂吸附富集柱，之後用3BV純淨水洗柱，再用70% (v/v) 的乙醇水溶液5BV，以1±0. lmL/min的流速洗脫，且合併洗脫液。所有的操作在4°C低溫避 光下進行。
[0056] (4)在常壓下（I. OlX IO5Pa)蒸出上述洗脫液中的乙醇，得到天然抗氧化活性物質 溶液。
[0057] (5)真空冷凍乾燥：將天然抗氧化物質溶液經冷卻後在真空下於_45°C進行脫水 乾燥12小時，真空度為12Pa，即得粉狀天然抗氧化活性物質0. 102g，得率10. 2%。
[0058] 對比例2
[0059] (1)將乾淨並粉碎的人心果葉子Ig和60% (v/v)乙醇9mL置於有蓋的玻璃試管 中，用漩渦儀混勻，然後進行超聲波水浴浸提。控制超聲波水浴溫度為40°C，超聲時間為 30min，得乙醇水提取液。
[0060] (2)將乙醇提取液冷卻後經離心機離心分離，設置離心機轉速為5000rpm，離心 30min，分離出上清液。
[0061] (3)重複2次上述提取和離心分離步驟，合併上清液。
[0062] (4)將上述合併的上清液濃縮，加水後經過超聲震蕩製成混懸液，以5ml/min的 流速加至已經過處理的DM 130大孔樹脂吸附富集柱，之後用3BV純淨水洗柱，再用5BV的 70% (v/v)的乙醇水溶液以1±0. lmL/min的流速洗脫，且合併洗脫液。所有的操作在4°C 低溫避光下進行。
[0063] (4)在常壓下（I. OlX IO5Pa)蒸出上述洗脫液中的乙醇，得到天然抗氧化活性物質 溶液。
[0064] (5)真空冷凍乾燥：將天然抗氧化物質溶液經冷卻後在真空下於_45°C進行脫水 乾燥12小時，真空度為12Pa，即得粉狀天然抗氧化活性物質0. 110g，得率11. 0%。
[0065] 對比例3
[0066] (1)將新鮮的人心果葉子Ig和色譜級60% (v/v)乙醇30mL置於勻漿-負壓空化 聯合提取裝置中，然後進行提取，勻漿提取時間為50s。然後將勻漿後的溶液和材料直接導 入聯合的負壓空化提取裝置中，負壓空化提取時間為20min，負壓壓強為-0. OSMPa得乙醇 水提取液。
[0067] (2)將提取液冷卻後經離心機離心分離，設置離心機轉速為lOOOOrpm，離心 20min，分離出上清液。
[0068] (3)重複2次上述提取和離心分離步驟，合併上清液。
[0069] (4)將上述合併的上清液濃縮，加水後經過超聲震蕩製成混懸液，以5ml/min的 流速加至預先經淨化處理的非極性的C18十八烷基固相萃取柱，之後用純淨水洗柱，再用 70% (v/v)的乙醇水溶液洗脫，合併洗脫液。
[0070] (5)在常壓下（I. 01 X IO5Pa)下從洗脫液中蒸出乙醇得到天然抗氧化物質溶液。
[0071] (6)真空冷凍乾燥：將天然抗氧化物質溶液經冷卻後在真空下_45°C進行脫水幹 燥12小時，真空度為12Pa，即得粉狀天然抗氧化活性物質0. 103g，得率10. 3%。
[0072] 在根據本發明的提取方法中，應用勻漿-負壓空化聯合提取，大孔吸附樹脂進行 富集，作為人心果葉子活性物質的提取富集方法，其優點在於：
[0073] (1)預先經過勻漿處理後，與攪拌回流及超聲波水浴浸提的方法相比，其細胞破碎 程度較大，且植物材料充分混懸於溶液中，從而增加活性成分的游離，而且相比乾燥粉碎再 提取，是環境友好型的，不會產生粉塵。
[0074] (2)同時，在根據本發明的方法中，聯合負壓空化進行提取，通過通入的氮氣在溶 液內部和固液界面產生一系列的小氣泡，氣泡隨之上升，擴大，潰滅，在固體材料表面一瞬 間潰滅產生巨大的瞬時壓強。該過程隨著氮氣的不斷通入而反覆進行，進一步破壞細胞壁， 釋放活性物質。經過釋放，傳質，進而促進活性物質在提取溶劑中的溶解。與攪拌回流的提 取方法相比，可最大程度地保護細胞中的有效成分，不至於因為高溫等因素的影響，而受到 破壞。
[0075] (3)本發明的方法再與超聲波水浴浸提的方法相比，要求的設備簡單，易於操作， 可實現大規模的生產。
[0076] (4)本發明採用大孔吸附樹脂進行富集，而非C18十八烷基固相萃取柱，因其具有 價格低、操作方便、選擇性好、再生處理方便，吸附速度快、重現性好、產品質量穩定，適合於 大規模生產等優點。而C18十八烷基固相萃取柱價格較高，多用於顏色較豐富的提取物的 純化，去除較多的色素。
[0077] 因此，應用本發明的方法獲得人心果葉活性物質的提取率較高，提取時間較短，操 作簡單，提取物活性較強。
[0078] 以下對根據實施例2的天然抗氧化活性物質進行活性物質組成及抗氧化性和抑 菌性進行測試。
[0079] 測試例1
[0080] 將實施例2得到的人心果葉提取物乾粉用於測定其多酚的組成和含量分析。
[0081] 採用高效液相色譜法測定了上述目標產物中的多酚組成。其中，高效液相色譜 (HPLC)條件為 ：
[0082] Supelco (Bellefonte，PA) Discovery C18 十八燒基固相萃取柱，柱溫 35°C ;
[0083] LC-20AD分離器單元；
[0084] SPD-20A UV/VIS 檢測器；
[0085] LC solutionl. 26SP1 色譜管理軟體；
[0086] 流動相為乙腈和10 %乙酸水溶液的混合液，流速為I. OmL/min，採用梯度洗脫；
[0087] 檢測波長為 370nm、280nm、520nm。
[0088] 同時在相同的色譜條件下繪製沒食子酸、綠原酸、表兒茶酸、花青素、香豆酸、阿魏 酸、鞣花酸、芥子酸、蘆丁、肉桂酸等標準樣品的標準曲線，從而定性和定量確定其中的多酚 組分和含量。
[0089] 目標產物中多酚物質經上述乙酸-乙腈體系分離後得到的HPLC圖譜（圖1)，再通 過與先用HPLC分析多酚物質的標準樣品比較，通過標準樣品的分離時間和最大吸收確定 目標產物中的主要成分。
[0090] 如圖1所示，在370nm波長下檢測的目標產物中多酚物質的HPLC色譜圖：
[0091] 1、沒食子酸；2、綠原酸；3、表兒茶酸；4、花青素；5、香豆酸；6、阿魏酸；7、鞣花酸； 8、芥子酸；9、蘆丁；10、肉桂酸。
[0092] 對以上色譜分析結果進行定量，並換算為各組分基於每克人心果葉子的含量示於 表1中。
[0093] 表1.人心果葉子中的多酚含量

【權利要求】
1. 一種從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，包括以下步驟： 以新鮮的人心果葉子為原料，以55?65% (v/v)乙醇為溶劑，採用勻漿-負壓空化技 術進行聯合提取，得到乙醇水提取液； 所述乙醇水提取液經離心或抽濾分離，得到分離液； 重複勻漿-負壓空化聯合提取和離心或抽濾步驟至少2次，並合併所述分離液； 合併的所述分離液進行真空濃縮後，用水溶解，並經過超聲震蕩製得料液濃度為10? 15mg/mL的混懸液； 然後用大孔吸附樹脂對所述混懸液進行富集分離，並用70?80% (v/v)的乙醇水溶液 作為洗脫劑進行洗脫，並收集洗脫液； 將所述洗脫液蒸餾得到天然抗氧化物質濃縮溶液； 所述天然抗氧化物質濃縮溶液經真空冷凍乾燥得到固體的天然抗氧化物質提取物。
2. 根據權利要求1所述的從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，其特徵在於，所 述勻漿-負壓空化技術是由勻漿誘導後直接進行負壓空化提取，其中，勻漿誘導所用的提 取溶劑為55?65% (v/v)的色譜級乙醇，所用的提取溶劑體積與所述人心果葉子的質量比 為25 : 1?30 : 1，勻漿提取時間為40?50s，負壓空化提取時間為15?20min，負壓壓 強為-〇· 06 ?-0· 08MPa。
3. 根據權利要求1所述的從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，其特徵在於，所 述大孔吸附樹脂選自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520。
4. 根據權利要求1所述的從人心果葉子提取天然抗氧化物質的方法，其特徵在於，所 述真空冷凍乾燥的時間為12?18小時，冷凍乾燥的溫度為-45±2°C，真空度為15±3Pa。
【文檔編號】A61K127/00GK104256640SQ201410521401
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月30日 優先權日:2014年9月30日
【發明者】張秀梅, 馬飛躍, 劉玉革, 塗行浩, 付瓊 申請人:中國熱帶農業科學院南亞熱帶作物研究所