一種乳製品中抗生素水解殘留物的檢測方法
2023-05-25 05:51:31
專利名稱：一種乳製品中抗生素水解殘留物的檢測方法
技術領域：
本發明提供了一種檢測方法，尤其是指乳製品中牛奶分解劑及抗生素水解 殘留物的檢測，具體為一種市售牛奶抗生素分解劑作用於抗生素後水解殘留物 的檢測方法。
背景技術：
由於國標中規定原料奶收購時必須"無抗"， 一些不法奶站便人為使用抗生 素酶水解乳中殘留的抗生素，這類水解酶製劑及酶水解產物沒有做過相關的安 全性評價，對於消費者存在直接或間接的安全隱患。奶牛在飼養過程中，用於預防和治療作用的藥物主要是抗生素類藥物。但 是這類藥物在停藥後一段時間內，在分泌的牛奶中仍有殘留。使用抗生素殘留 超標的牛奶，不僅會給產品的生產帶來影響，產品質量無法保障，而且對消費 者的健康存在眾多不利影響。國外很多國家都對不同種類抗生素的最大殘留量(MRL)做了具體規定，明確要求抗生素殘留超標的牛乳嚴禁收售。國內多數 乳品企業對於不同程度抗生素殘留超標的牛乳釆取降價收購和拒收的原則。出 於經濟利益的驅動，為謀求經濟利益，市場上出現了人為使用一些生物製劑去 降解牛乳中殘留抗生素的"無抗奶，即生產了"人造"無抗奶。從2005年至今就有 數家公司公開出售分解牛乳中殘留抗生素的酶製劑。市售的抗生素分解劑是一 種黃色液體，其主要成份是青黴素酶，每瓶約4mL左右，在8-C-l(TC條件下放置一晚或反應12小時，即可以使3-4噸有抗奶轉變為"人造"無抗奶。
針對高濃度的抗生素藥品，其分解產物的檢測方法一般有高效液相色譜法， 分光光度法；殘留級的抗生素水解殘留物的檢測則至今未有相關報導。而且， 液相色譜法或分光光度法都不利於在生產企業推廣應用，設備成本大，檢測費 用高，對檢測人員的要求也高，不利於在收奶和產品檢測中推廣應用。
由於殘留在原料乳中的抗生素經牛奶分解劑作用後，僅僅是其內部P _內醯 胺環的一個N-C鍵的斷開，因而其抑菌特性依然存在。利用這個特性，在這種"人 造"無抗乳中添加一定量的發酵劑，在43'C下恆溫培養， 一定時間後根據酸度的 變化大小就可以判斷出原料乳是否是"人造"無抗奶或產品。
由於乳製品中青黴素類抗生素酶解殘留物的檢測方法未見報導，為了確保 原奶及其產品的質量和安全，本領域急需一種可以檢測乳和乳製品中牛奶分解 劑及抗生素水解殘留物的方法。
發明內容
為了滿足乳品企業及質量監控檢測機構的需求，確保乳原料和乳製品的質 量安全和消費者的健康，本發明人開發了一種抗生素水解殘留物的檢測方法， 尤其是指乳製品中抗生素酶解殘留物的檢測方法，該方法能夠有效地檢測乳制
品，尤其是乳中殘留的獸藥抗生素水解產物殘留物。
本發明的目的在於提供一種原料乳及乳製品中抗生素水解殘留物的檢測方 法，該方法採用殘留物^t發酵的影響來確認樣品中是否含有的抗生素水解殘留 物，可以有效地檢測乳和乳製品中殘留的抗生素水解殘留物，並可根據酸度的 相對變化值來定量其濃度範圍。
本發明提供了一種殘留的抗生素水解產物的檢測方法，其過程包括將待測的乳製品和作為空白對照的無抗奶樣品殺菌處理，優選用巴士殺菌法殺菌，冷
卻後加入發酵劑，測定其起始的發酵液pH值，然後在43。C下保溫1小時，測定發 酵液的pH值，計算發酵前後pH值的變化與無抗奶對照樣變化值的差值，當差值 大於等於0.03時，判定該樣品為陽性樣品，即其中含有抗生素水解殘留物，為不 合格的"人造"無抗奶。
上述乳製品包括液態乳製品和固態乳製品，液態乳製品包括液態的原奶和還 原奶，固態乳製品包括奶粉等，若是固態乳製品則需要先用水還原成液態還原 奶。
上述檢測方法中採用的發酵劑為含有乳酸菌的發酵劑。 乳酸菌指發酵糖類，產生乳酸的一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌的總稱。 在其發酵產物中只有乳酸的稱為同型乳酸發酵，而產物中除乳酸外還有較多乙 酸、乙醇、C02等物質的稱為異型乳酸發酵。乳酸菌從形態上分類主要有球狀和 杆狀兩大類，主要包括乳酸鏈球菌(Streptococceae)和乳酸桿菌(Lactobacilleae)。 多數種可發酵乳糖，發酵後可將pH下降至6.0以下。乳酸桿菌中以乳酸桿菌屬 (Lactobacillus)最為重要。
本發明所用的發酵劑中含有的乳酸菌優選含有乳稈菌屬、鏈球菌屬任一或 其組合的菌屬的乳酸菌，鏈球菌屬的乳酸菌優選嗜熱鏈球菌Oftre內oco"^ AemcpMw",乳稈菌屬的乳酸菌優選保加利亞乳桿菌(Zfl"o6a"7/ws &w/gaWcwW。 在本發明的優選實施例中，上述的發酵劑為含有嗜熱鏈球菌OSfreptococaw Aenwop/w7w)、保加利亞乳桿菌fla"o6a"7/w 6w/gar/cu^任一或其混合的乳酸菌 的發酵劑；更優選為含有嗜熱鏈球菌fS^/ tococc船f/iemiop/n7一和保加利亞乳杆 菌(Xacto6ac!說"6M/gahcwW的乳酸菌的工業發酵劑。本發明所述的檢測方法中所加入的發酵劑的量為0.2-0.8U/L，以待測的乳制 品或作為空白對照樣品為基數，即每升待測的樣品溶液中加入0.2-0.8U/L，優選 0.4-0.7U/L，更優選加入0.6U/L;其中，所述的U為發酵劑中菌的活力單位。 本發明所述的檢測方法具體的步驟包括
(1) .樣品的處理
取待測的液態乳製品樣品100ml， 75。C以上(優選75-98。C)加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻備用；
若樣品為奶粉類固體或粉狀樣品時，稱取10-15g固體或者粉末狀樣品，用去 離子水溶解定容至100ml;
同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；
(2) .發酵
在上述製備好的待測液態乳製品樣品和空白對照樣品中添加發酵劑，該發 酵劑為含有嗜熱鏈球菌fS"加ptocoa^ Aemo/^7z^ 、保加利亞乳桿菌 (IflctoZ)a"7/w 6M/gfln'cM)至少一種的乳酸菌的發酵劑，添加量約為0.4-0.7U/L， 搖勻，測定發酵前的初始pH值；
然後將樣品置入40-45。C恆溫培養箱，發酵，取出冷卻；
(3) .測定pH值
待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差，與空白對照樣品的發酵 結束後的pH值與發酵初始的pH之差，以二者之差是否大於0.03來判定該樣品是 否為曾經使用過抗生素的乳製品。
在本發明的優選實施例中，通過以下技術方案來實現本發明的目的
l.樣品的處理取待測的液態乳製品樣品lOOmI， 95'C加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻到40'C-45"C之間備用；
若樣品為奶粉類固體或粉狀樣品時，稱取13g固體或者粉末狀樣品，用去離 子水溶解定容至100ml;
同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；
2. 發酵
在上述製備好的待測的液態乳製品樣品和空白對照樣品中添加發酵劑，例如 是經過篩選的嗜熱鏈球菌OS^^tococc^ Awmo; /n7^)和保加利亞乳桿菌 (^"0^"7/^^/^^"力混合乳酸菌發酵劑^-1，添加量約為0.6U/L，搖勻，測 定發酵前的初始pH值；
然後將樣品置入43。C恆溫培養箱，發酵，優選0.5 — 2小時，更優選發酵l小 時，取出冷卻，終止發酵；
3. 測定pH值
待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH2)，與空白對照樣品 的發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH。， pHi和pH2二者之差^).03時， 即可判定該樣品為陽性，即為"人造"無抗乳製品，即認為待測樣品為人為添 加牛奶抗生素分解劑分解抗生素的乳製品，也就是說，其為含有抗生素的原料 乳或用含有抗生素的原料乳生產的乳製品。 用計算式表示為 pHt 二pH, —pH01 (空白對照樣品發酵前後pH值之差) pH2=pH2—pHo2 (檢測樣品發酵前後pH值之差)
當ApH, — ApH2》0.03時，判定為陽性樣品，即待測乳製品為含有抗生素的乳製品。
上述步驟(2)中採用的發酵劑為含有的乳酸菌的發酵劑，該乳酸菌為含有 乳稈菌屬、鏈球菌屬任一或其組合的菌屬的乳酸菌。
在本發明的檢測方法中，用於檢測乳中抗生素的酶解產物，所述的抗生素包 括e-內醯胺類(青黴素類和頭孢類)，四環素類(四環素、金黴素、土黴素等)， 氨基糖苷類(慶大黴素和鏈黴素等)，氯黴素類，大環內酯類(紅黴素和螺旋 黴素等)。
本發明的方法可以檢測的酶解產物的濃度下限為10ppb。
發明方法的原理是基於抗生素及水解殘留物對微生物具有抑制作用，並利用 乳酸菌對乳的發酵特性，選取特殊的乳酸菌對樣品進行發酵處理，跟蹤發酵過 程，根據其發酵特性來判斷樣品中有無抗生素的水解殘留物。該檢測判定方法 經濟、簡便、快捷、準確，適合乳品企業的原料奶質量安全控制和工業原料品 質控制及產品安全控制。實用性非常強。
本發明的大量的篩選實驗其中較有代表性和說服力的實驗數據如下，均以業 內普遍使用的青黴素類抗生素類為例
l.發酵劑產酸能力的比較，選擇最佳發酵劑
選擇目前國內、外市場上發酵快、產酸能力強的乳酸菌作為發酵劑，共選擇 六種不同的市售商品，其區別在於含有不同種類和不同組合的菌屬，作為實驗 用乳酸菌發酵劑，通過對比一定時間內產酸量的多少，選出一定時間內產酸能 力強的發酵劑。
方法
①滅菌乳的製備取無抗奶於三角瓶中，114。C滅菌15min。冷卻到45。C備用。
②樣品的製備
菌粉的添加方法
稱取0.04g菌粉，溶解於10ml滅菌乳中，充分混勻，取2.5mL接入250mL滅菌奶中。
按上述菌粉的添加方法向六個裝有滅菌奶的三角瓶中依次接入所選發酵劑。 之後於43。C恆溫培養箱中培養。分別於Omin、 50min、 110min、 170min測試樣品 的pH值，從而確定不同發酵劑的產酸能力。
對比後可以看出代號為YF-1和G-061的發酵劑在1小時後表現出最強的和 較強的產酸能力；YF-1和G-061均含有嗜熱鏈球菌(5^e; tococms決"mo屍W/w^、 保加利亞乳桿菌(Xa"o6a"7/w ^/gafr/cmj至少一種。
2.產酸能力強的發酵劑對抗生素水解產物的感受性試驗
根據試驗目的，應選擇產酸能力強、且對抗生素水解產物敏感的發酵劑。即 使用上一實驗選出的兩種產酸最強YF-1與G-061,進行感受性實驗。因為本方 法發明的意圖就是要開發快速的檢測方法，所以要選擇在最短的時間內表現出 最強的產酸性能的發酵劑。
方法
① 滅菌乳的製備
取無抗奶於三角瓶中，114。C滅菌15min。冷卻到45。C備用。
② 青黴噻唑酸鉀稀釋液的配製
精密稱取2.5g青黴素鉀於100mL容量瓶中，加入0.5mL (過量)抗生素分 解劑後用去離子水定容後搖勻，室溫放置4個小時，標記為稀釋液①。取10ml稀釋液①於100mL容量瓶中，定容後搖勻，標記為稀釋液②。取lmL稀釋液② 於100mL容量瓶中，用去離子水定容後搖勻，標記為稀釋液③，其濃度為 25mg/L。
③樣品的製備 菌粉的添加方法-
稱取0.04g菌粉，溶解於10mL滅菌乳中，充分混勻，取2.5mL接入250mL
滅菌奶中。
陰性樣品的製備
將YF-1與G-061及對照(以L-812為代號)三種發酵劑按上述菌粉的添加 方法分別接入到滅菌乳中，作為陰性對照。 陽性樣品的製備
將YF-1與G-061及對照(以L-812為代號)三種發酵劑按上述方法分別接 入到滅菌乳中，再分別向其中添加lml稀釋液③。三個樣品中的青黴噻唑酸鉀 濃度均為10(^g/L。分別標記。由得出的數據曲線可以看出，YF-1對抗生素水 解產物的感受性強於G-061和L812。該YF-1為同時含有嗜熱鏈球菌 f5Vre/ fococcM51決em70/ /zr7i^)禾口保力口禾!j亞孚L桿菌(Iacfo6acz7/ws 6w/garz'cw"的發酵 劑。
3.最佳接種量試驗
分別向滅菌奶中添加接種量為標準推薦量(0.2U/L)的1倍、2倍、3倍的YF-1， 用對照樣與標準推薦量試驗組，進行發酵試驗(43'C下發酵1小時)，以確定最 快速發酵的發酵劑使用劑量。
方法(1) 滅菌乳的製備
取無抗奶於三角瓶中，114。C滅菌15min。冷卻到45。C備用。
(2) 青黴噻唑酸鉀稀釋液的配製 精密稱取1.00g青黴素鉀於100mL容量瓶中，加入0.5mL抗生素分解劑後用
去離子水定容後搖勻，室溫放置4小時後標記為稀釋液①。取10mL稀釋液①於 100mL容量瓶中，定容後搖勻，標記為稀釋液②。取lmL稀釋液②於100ml容量 瓶中，用去離子水定容後搖勻，標記為稀釋液③。取lmL稀釋液③於10mL容量 瓶中，用去離子水定容後搖勻，標記為稀釋液④。
精密稱取2.50g青黴素鉀於100mL容量瓶中，加入0.5mL抗生素分解劑後用 去離子水定容後搖勻，室溫放置4小時後標記為稀釋液⑤。取10mL稀釋液⑤於 100mL容量瓶中，定容後搖勻，標記為稀釋液⑥。取lmL稀釋液⑥於100ml容量 瓶中，用去離子水定容後搖勻，標記為稀釋液⑦，其濃度為25mg/L。
(3) 樣品的製備 陰性對照樣的製備
分別稱取其他發酵劑0.04g(0.2U)、 0.08g (0.4U)、 0.12g (0.6U)溶解於10mL 滅菌乳中，充分混勻，取2.5mL接入250mL滅菌奶中。由得出的數據曲線可以看 出，YF-1發酵劑在0.6U/L的添加量時發酵速度最快。 4.方法有效性的驗證
樣品如下表所示0-6為自配濃度從10ppm至100ppb的添加抗生素水解殘 留物樣品，B為對照空白組。
樣品用95'C， 10min殺菌後，接種YF-1發酵劑，測定並記錄初始的pH值。置 入43X:恆溫培養箱發酵60min。起始pH值為6.67。0123456B
1000ppm50ppm10ppmOppmlppm100ppb10ppb0
6.556.536.516.506.496.486.476.44
實驗結果接菌種量為0.6U/L最佳，本領域技術人員均可以推測並且實 驗證明(本發明已經有實驗數據來證實)0.55-0.65U/L，以及0.4-0.7U/L、甚 至0.2-0.8U/L也可以實現本發明。 1)發酵前後pH、值的變化
6.67-6.55=0.12 6.67-6.53=0.14 6,67-6.51=0.16 6.67-6.50=0.17 6.67-6.49=0.18 6,67-6.48=0.19 6.67-6.47=0.20 B. 6.67-6.44=0.23
2)對照樣pH變化量與待檢樣pH變化量的差值:
0) B-0=0.23-0.12=0.11
1) B-l= 0.23-0.14=0.09
2) B-2=0.23-0.16=0.07
3) B-3=0.23-0.17=0.06
4) B-4=0.23-0.18=0.04
5) B-5=0.23-0.19=0.04
6) B—6=0.23—0.20=0.033)判定結果0-6號樣中均含有抗生素水解殘留物且最小檢測濃度為10ppb。
上述本發明的檢測方法可以定性乳或乳製品中是否含有殘留的抗生素酶解 殘留物，對原料乳和乳製品的品質安全檢測提供可靠的依據，對於乳品企業控 制原奶質量提供強有力的檢測手段和方法，使當前不法奶站對原奶做手腳等現 象得到完全控制，對於出口奶粉的安全性檢測提供有力的方法支持。該方法具 有樣品前處理簡單、快速、定性準確、重複性好的特點，方法簡便，對操作無 特殊要求，易於推廣。
具體實施例方式
以下結合實施例詳細說明本發明，但不限定本發明的實施範圍。 本發明用於檢測乳中抗生素的酶解產物，所述的抗生素包括p-內醯胺類(青 黴素類和頭孢類)，四環素類(四環素、金黴素、土黴素等)，氨基糖苷類(慶 大黴素和鏈黴素等)，氯黴素類，大環內酯類(紅黴素和螺旋黴素等)，在本 發明的下述實施例中，均以業內普遍使用的青黴素類抗生素類為例。
實施例l:
以牛奶為待測產品。
1. 樣品的處理
取待測的牛奶樣品100ml， 95'C加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻到4CTC-45'C之間備用；
同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；
2. 發酵
在上述製備好的待測的液態乳製品樣品和空白對照樣品中添加0.6U/L的 YF-1發酵劑，搖勻，測定發酵前的初始pH值；所述的YF-1發酵劑為含有嗜熱鏈球菌f5^re/7tococci^ ^er附o/ /2z7wj」禾口保力口禾IJ亞乳桿菌(Zacto6"c/〃Ms few/gan'ct^」的發 酵劑，由科漢森(CHRHansen)公司提供。
然後將樣品置入43。C恆溫培養箱，發酵l小時，取出冷卻，終止發酵；
3，測定pH值
待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH2)，與空白對照樣品 的發酵結朿後的pH值與發酵初始的pH之差(pH,)， pH2和pH!二者之差^).03時， 即可判定該樣品為"人造無抗乳製品"，即認為待測樣品為人為添加牛奶抗生素 分解劑分解抗生素的乳製品，也就是說，其為曾經使用過抗生素乳製品。
實施例2:
以奶粉為待測產品。
1. 樣品的處理
稱取13g固體或者粉末狀樣品,用去離子水溶解定容至100ml (還原乳)；. 取待測的還原乳樣品100ml， 95。C加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻到4(TC-45。C之間備用； 同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；
2. 發酵
在上述製備好的待測的樣品和空白對照樣品中添加0.6U/L的含有嗜熱鏈球 菌(S^pfococ"/5f/ emo; Mw)的發酵劑，搖勻，測定發酵前的初始pH值； 然後將樣品置入43。C恆溫培養箱，發酵l小時，取出冷卻，終止發酵；
3. 測定pH值
待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH2)，與空白對照樣品 的發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH。 ， pH2和p!^二者之差^).03時，即可判定該樣品為人為添加牛奶抗生素分解劑分解抗生素的乳製品，也就是說， 其為曾經使用過抗生素乳製品。 實施例3:
以牛奶為待測產品。
1. 樣品的處理
取待測的牛奶樣品100ml， 95'C加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻到40'C-45'C之間備用； 同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；
2. 發酵
在上述製備好的待測的樣品和空白對照樣品中添加0.6U/L的含有保加利亞 乳桿菌(LactoZ^"7/^6"/g^7'c—的發酵劑，搖勻，測定發酵前的初始pH值； 然後將樣品置入43。C恆溫培養箱，發酵l小時，取出冷卻，終止發酵；
3. 測定pH值
待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH2)，與空白對照樣 品的發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差(pH。 ， pH2和pH,二者之差^).03 時，即可判定該樣品為人為添加牛奶抗生素分解劑分解抗生素的乳製品，也就 是說，其為曾經使用過抗生素乳製品。
實施例1的同時含有嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亞乳杆 菌(Lactobacillus bulgaricus)的發酵劑對抗生素水解產物的感受性強於實施例2和 3所採用的發酵劑。
實驗證明，無論是液態奶還是固態奶(例如奶粉、奶酪或者奶片)，只要 曾經加入過抗生素並且試圖用酶解的方式掩蓋抗生素的存在，即使酶解產物的量很小(痕量)，採用本發明的方法也完全可以檢測出乳和乳製品中是否添加 過抗生素，從源頭上確保了乳和乳製品及其進一步的加工產品的質量安全。
權利要求
1.一種殘留的抗生素水解產物的檢測方法，其特徵在於，該方法包括將待測的乳製品和作為空白對照的無抗奶樣品殺菌、冷卻後加發酵劑，加入的量為0.2-0.8U/L，測定其起始的發酵液pH值，然後在40-45℃下恆溫培養1小時，測定發酵液的pH值，計算樣品發酵前後pH值的變化與無抗奶對照樣發酵前後的變化的差值。
2. 如權利要求1所述的檢測方法，其中，所述的方法中採用的乳製品包括液 態乳製品和固態乳製品。
3. 如權利要求2所述的檢測方法，其中，所述的方法中採用的液態乳製品包括液態的原奶和還原奶，固態乳製品包括奶粉。
4. 如權利要求l所述的檢測方法，其中，所述的方法中採用的發酵劑為含有 乳酸菌的發酵劑。
5. 如權利要求4所述的檢測方法，其中，所述的方法中採用的發酵劑中含有 的乳酸菌為乳稈菌屬、鏈球菌屬任一或其組合的菌屬的乳酸菌。
6. 如權利要求4所述的檢測方法，其中，所述的鏈球菌屬的乳酸菌為嗜熱鏈 球菌，乳稈菌屬的乳酸菌為保加利亞乳桿菌。
7. 如權利要求l所述的檢測方法，其中，所述的方法中所加入的發酵劑的量 為0.4-0.7U/L;該U為菌的活力單位，該L為待測的乳製品或空白對照樣品的容積 單位。
8. 如權利要求1所述的檢測方法，其中，該方法包括 (1).樣品的處理取待測的液態乳製品樣品100ml， 95。C以上加熱10min; 將殺菌後的樣品冷卻到40'C-45。C之間備用；若樣品為奶粉類固體或粉狀樣品時，稱取10-15g固體或者粉末狀樣品，用 去離子水溶解定容至100ml;同時設置無抗奶為空白對照樣品，按同樣的上述方法處理待用；(2) .發酵在上述製備好的待測的液態乳製品樣品和空白對照樣品中添加發酵劑，搖勻，測定發酵前的初始pH值；然後將樣品置入43。C恆溫培養箱，發酵，取出冷卻；(3) .測定pH值待測樣品發酵結束後的pH值與發酵初始的pH之差，與空白對照樣品的發酵 結束後的pH值與發酵初始的pH之差，以二者之差是否大於0.03來判定該樣品是否為曾經使用過抗生素的乳製品。
9. 如權利要求8所述的檢測方法，其中，所述的方法步驟(2)中採用的發酵劑為含有的乳酸菌的發酵劑，該乳酸菌為含有乳稈菌屬、乳酸鏈球菌屬任一 或其組合的菌屬的乳酸菌。
10. 如權利要求1所述的檢測方法，其中，該殘留的抗生素水解產物包括|3-內醯胺類、四環素類、氨基糖苷類、氯黴素類和/或大環內酯類。
全文摘要
本發明提供了一種殘留的抗生素水解產物的檢測方法，其特徵在於，該方法包括將待測的乳製品和空白對照無抗奶樣品經殺菌、冷卻後加入發酵劑，測定其起始的發酵液pH值，然後在40-45℃下保溫1小時，測定發酵液的pH值，計算發酵前後pH值的變化與無抗奶對照樣變化值的差值，差值大於等於0.3時判定為陽性樣品；該發明可以檢測出的酶解產物的最低濃度是10ppb，可以靈敏準確地檢測乳製品中抗生素酶解殘留物。
文檔編號C12Q1/02GK101307349SQ20081013181
公開日2008年11月19日 申請日期2008年6月24日 優先權日2008年6月24日
發明者穎 安, 張志一 申請人:內蒙古伊利實業集團股份有限公司