輔酶q10自乳化組合物及其製備方法與應用的製作方法

2023-05-13 12:44:41 1

專利名稱：：輔酶q10自乳化組合物及其製備方法與應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及醫藥
技術領域：
，具體涉及一種輔酶QIO自乳化組合物及其製備方法與應用。技術背景輔酶Q(CoenzymeQ)又名泛醌(ubiquinone)，是一種脂溶性醌類化合物，它在自然界中分布廣泛，主要存在於酵母、植物葉子、種子及動物的心、肝和腎的細胞中。其基本結構是含有類異戊二烯側鏈的2，3-二甲氧基-5-甲基苯醌核，這裡n=l~14;在人體中的輔酶Q的11=10，即輔酶QIO，1957年首次由Frederrick從牛心肌中分離得到。輔酶Q10是線粒體呼吸鏈的重要成員之一，它與線粒體內膜結合，參與細胞氧化磷酸化及ATP生成過程。它是細胞自身的天然抗氧化劑，細胞代謝的激活劑，同時與網狀內皮系統有關，能提高機體免疫力。內源性輔酶Q10在人體內的總含量為0.5-1.5mg，在心臟、肝及胰中的水平較高，且在細胞內的分布以線粒體最多(45-50%)，在細胞漿中最少(5%-10%)。內源性輔酶Q10有結合蛋白質的功能，目前已發現有三種輔酶Q10結合蛋白QPs、QPc、QPn。人到20歲時，體內輔酶Q10達到最高值，20歲以後逐漸降低。臨床研究發現，外源性輔酶Q10有抗氧化及細胞膜穩定作用，可使細胞內外環境得以維持；也能清除脂質過氧化產生的自由基，預防心肌缺血致線粒體畸變以及維持缺血心肌細胞鈣離子通道的完整性等藥理作用。臨床研究表明，幾乎所有心血管疾病患者以及某些非心血管疾病患者其組織細胞均有程度不等的輔酶Q10缺乏。動物實驗證實，當組織內輔酶Q10含量減少至75。/。時，心臟功能即明顯下降，補充外源性輔酶Q10後可糾正心肌病變組織輔酶Q10缺乏狀態，從而使患者臨床心功能症狀得到改善。因此，輔酶Q10在治療心血管疾病方面具有獨特的療效，臨床上主要用於充血性心力衰竭、缺血性心臟病、冠心病、高血壓、心律不齊、急慢性肝炎及癌症的輔助用藥，此外對膽固醇增多症、頸部外傷後遺症、腦血管疾病、出血性休克、胃潰瘍、十二脂腸潰瘍、壞血病、壞死性牙周炎、肺氣腫、支氣管哮喘、聽覺障礙、再生障礙性貧血等疾病也有療效，並且在延緩衰老和提高免疫力方面有不可替代的作用和廣闊的應用前景，而最近更發現它對愛滋病有顯著的輔助療效，是目前應用相當廣泛的藥物。除臨床應用以外，輔酶Q10可用作類似於維生素的營養性補充物或營養性助齊U，有利於抵抗衰老、增強免疫力；或用來有效地治療變應性疾病(allergicdisease)或增加運動能力。此外，作為高效抗氧化劑，可用於化妝品和護膚產品中，具有抗皺、延緩皮膚衰老等作用。儘管輔酶Q10應用越來越廣泛，但其自身水不溶性、光不穩定性等性質限制了輔酶Q10更好地被利用。例如作為藥物應用，目前國內外上市的輔酶Q10劑型很多，有口服劑型片劑和膠囊劑，注射劑，小水針等。其中片劑和膠囊劑經口服後都有首過效應，生物利用度較低；已上市的小水針採用表面活性劑吐溫80增溶，但由於輔酶Q10是脂溶性藥物，且輔酶Q10結構中存在醌基，對光和氧相當敏感，所以其穩定性不是很好，長期放置小水針會變渾濁甚至出現沉澱物，且在水溶液狀態輔酶Q10更易被光和氧降解，從而影響產品的質量，給臨床應用帶來一定隱患。因此，採用新的輔酶Q10組合物，或者採用新的方法增加輔酶Q10的水溶性，提高其生物利用度，降低個體差異的影響具有重要的意義。目前一些新的組合物或者新的方法已經被提出，如中國專利CN1226823公開的"含輔酶Q10的藥物組合物"提供了一種含輔酶Q10作為活性成分的藥物組合物，促進口服後輔酶Q10的吸收；日本專利JP59148718公開的"輔酶Q10成份"為獲得好的口服吸收性和效果，採用凍幹法將其製成微粒，但還是不能避免口服後的首過效應；中國專利CN101015524A公開的"輔酶Q10口服乳劑及其製備方法"、CN101214197公開的"一種輔酶Q10納米微囊乳液及其製備方法和應用"、CN1256939C授權公開的"含有輔酶Q10的微乳劑預濃縮物和微乳劑"、CN1857239公開的"輔酶Q10注射乳劑及製備方法"、CN1823748公開的"輔酶Q^脂質體的藥物製劑及其製備工藝"等，是採用乳劑、微乳劑、脂質體等作為輔酶Q10的載體，製成口服製劑或注射用製劑，解決輔酶Q10難溶於水，生物利用度差的問題。但是由於磷脂水解等問題，這類含水相的製劑在貯存過程中會出現粒度增大、穩定性不好的問題，進一步製成凍幹製劑雖然可以得到改善，但在凍幹過程中可能出現團聚、融合、結構破壞等問題，而且還存在凍乾重建的問題，這些都會嚴重影響了製劑的質量，進一步影響藥物使用的功效性和安全性，從而限制了上述技術的應用。
發明內容本發明的目的是提供一種輔酶Q10自乳化組合物及其製備方法。本發明所提供的輔酶QIO自乳化組合物，由下述質量份的物質組成輔酶QIO0.5-20、中鏈脂肪酸甘油三酯大於0小於等於30、磷脂0.5-50、表面活性劑5-50和助溶劑10-60。其中，所述輔酶QIO的質量份優選0.5-10，更優選0.5-5;所述中鏈脂肪酸甘油三酯的質量份優選5-15;所述磷脂的質量份優選5-30;所述表面活性劑的質量份優選20-40;所述助溶劑的質量份優選10-50。本發明中，所述中鏈脂肪酸甘油三酯是指含有8-12個支鏈碳原子的脂肪酸的甘油三酯的組合物，優選辛癸酸甘油三酯。所述磷脂可為卵磷脂，如大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；也可為氫化卵磷脂，如大豆氫化卵磷脂、蛋黃氫化卵磷脂。同時，本發明中的磷脂還可選擇溶於葵花籽油、或紅花籽油、或中鏈脂肪酸甘油酯等油類物質的磷脂(卵磷脂或氫化卵磷脂)，也可選擇用乙醇或丙二醇等短鏈醇(碳鏈中碳原子為1-3的醇)溶解的磷脂(卵磷脂或氫化卵磷脂)，如已經商品化的產品Phosal35SB、Phosal50PG、Phosal53MCT、Phosal50SA+、Phosal75SA等。所述表面活性劑可為藥學上常用的親水親油平衡值(HLB值)大於等於10的表面活性劑，具體可為吐溫20、吐溫80和HS15(聚乙二醇-12-羥基硬脂酸酯)中的至少一種；所述助溶劑為碳鏈中碳原子為1-3的醇，如乙醇、丙二醇和甘油中的至少一種。本發明所提供的輔酶Q10自乳化組合物的製備方法，是在氮氣環境中，將下述質量份的物質輔酶Q100.5-20、中鏈脂肪酸甘油三酯大於0小於等於30、磷脂0.5-50、表面活性劑5-50和助溶劑10-60，在50-55。C加熱、攪拌至混合均勻，得到輔酶Q10自乳化組合物；整個製備過程要求避光。用於本發明的輔酶Q10既可為還原型也可為氧化型。上述方法得到的輔酶Q10自乳化組合物為棕紅色油狀液體，穩定性良好。該組合物在體外加水後溫和攪拌的情況下或在體內胃腸蠕動的情況下，由於表面活性劑的存在，可自髮乳化形成乳滴，其粒徑在10200nm左右。本發明的另一個目的是提供輔酶QIO自乳化組合物的應用。本發明所提供的輔酶Q10自乳化組合物可用於製備預防和/或治療心血管疾病的藥物。由於輔酶QIO自乳化組合物中輔酶Q10的溶解性得到提高，且該組合物可自髮乳化為納米粒子，從而增加了輔酶Q10的體內吸收，提高生物利用度。本發明所提供的輔酶QIO自乳化組合物可用於製備保健品，如膳食補充劑，該保健品能起到增強人體免疫力、延緩衰老的功效。本發明所提供的輔酶Q10自乳化組合物可作為化妝品添加劑用於製備化妝品。該化妝品具有延緩皮膚衰老，緩解皺紋加重，保護脆弱肌膚，促進細胞代謝，改善暗沉肌膚等效果。並且由於本發明的輔酶QIO自乳化組合物可自髮乳化形成10200nm乳滴，利用納米粒子的小尺寸穿透效應，可增加輔酶Q10的吸收利用率和皮膚穿透性，使其效果更好發揮。本發明的再一個目的是提供一種預防和/或治療心血管疾病的藥物。該藥物的活性成分為本發明所提供的輔酶Q10自乳化組合物。需要的時候，在上述這些藥物中還可以加入一種或多種藥學上可接受的載體。所述載體包括藥學領域常規的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、溼潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等，必要時還可以加入香味劑、甜味劑、和著色劑等。用本發明輔酶QIO自乳化組合物為活性成分製備的藥物可以製成注射液、片劑、軟膠囊、口服液、微丸、微球、膏劑、霜劑等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學領域的常規方法製備。本發明將難溶性的輔酶Q10與中鏈脂肪酸酯(如辛/癸酸甘油三酯)、磷脂(如大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂)、表面活性劑(如吐溫20、吐溫80、HS15等)、以及選自丙二醇、甘油或其混合物的助溶劑混合，製成輔酶Q10自納米乳化油性組合物。該無水組合物在水性介質中可充分自乳化形成粒徑在200nm以下的納米乳，解決了輔酶Q10難溶性的問題，同時可明顯提高輔酶Q10的生物利用度，改善輔酶QIO的穩定性，可用於輔酶Q10作為活性成分的藥品、保健食品、以及化妝品添加劑使用。同時該無水組合物具有製備簡單、使用方便、穩定性良好等優點，有效解決了其它製劑貯存穩定性差、粒度指標不穩定等問題，對於輔酶Q10功效的發揮以及使用安全性具有很大的促進作用。動物實驗表明，灌胃給予本發明輔酶QIO自乳化組合物後，小鼠的運動耐力明顯提高，遊泳力竭時間明顯延長；血清中SOD活力增加、MDA含量降低。圖1為實施例7中小鼠遊泳力竭時間測定結果的柱型圖(n=10)，其中，*表示/<0.05。圖2為實施例7中小鼠血清SOD活力測定結果的柱形圖(n=10)。圖3為實施例7中小鼠血清MDA含量測定結果的柱形圖(n=10)。具體實施例方式下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業途徑獲得。實施例1、輔酶QIO自乳化組合物的製備處方輔酶QIO0.5g卵磷脂10g辛/癸酸甘油三酯5g吐溫8035g甘油33g丙二醇16.5g製成100g製法按處方量將輔酶QIO、卵磷酯、辛/癸酸甘油三酯、吐溫80、甘油、丙二醇在水浴5055'C下攪拌(避光、通N2保護)，混合均勻，過濾即得輔酶Q10自乳化組合物。將該組合物採用水相介質(生理鹽水)進行乳化，得輔酶Q10納米乳。在25士0.rC條件下，用ZetaPALS雷射動態光散射儀(美國Brookhaven儀器公司)測定納米乳的粒徑，測得其有效粒徑為13.6nm，粒度分布均勻。實施例2、輔酶Q10自乳化組合物的製備處方輔酶Q105g53MCT20g辛癸酸甘油三酯10gHS1540g甘油15g丙二醇10g製成100g製法按配方量將輔酶QIO、53MCT(Phospholipid公司，德國)、辛/癸酸廿油三酯、HS15(BASF公司，德國)、甘油、丙二醇在水浴5055X:下攪拌(避光、通N2保護)、混合均勻，過濾即得輔酶QIO自乳化組合物。將該組合物採用水相介質進行乳化，檢測其有效粒徑為15.5nm。實施例3、輔酶QIO自乳化組合物的製備處方輔酶QIO5g53MCT25g辛癸酸甘油三酯15g吐溫2025g甘油20g丙二醇10g製成100g製法按配方量將輔酶QIO、53MCT(Phospholipid公司，德國)、辛/癸酸甘油三酯、吐溫20、甘油、丙二醇在水浴5055"下攪拌(避光、通N2保護)、混合均勻，過濾即得輔酶Q10自乳化組合物。將該組合物採用水相介質進行乳化，檢測其有效粒徑為24.0nm。實施例4、輔酶Q10自乳化組合物的製備處方輔酶Q1010g50PG30g辛癸酸甘油三酯10g吐溫2035g丙二醇15g製成100g製法按配方量將輔酶Q10、50PG(Phospholipid公司，德國)、辛/癸酸甘油三酯、吐溫20、甘油、丙二醇在水浴5055"C下攪拌(避光、通N2保護)、混合均勻，過濾即得輔酶Q10自乳化組合物。將該組合物採用水相介質進行乳化，檢測其有效粒徑為63.5nm。實施例5、輔酶QIO自乳化組合物的製備處方輔酶Q1020g卵磷脂10g辛癸酸甘油三酯10g吐溫2025g吐溫8025g丙二醇10g製成100g製法按配方量將輔酶QIO、卵磷脂、辛癸酸甘油三酯、吐溫20、吐溫80、丙二醇在水浴5055'C下攪拌(避光、通N2保護)、混合均勻，過濾即得輔酶Q10自乳化組合物。將該組合物採用水相介質進行乳化，檢測其有效粒徑為132.5nm。實施例6、輔酶QIO自乳化組合物的製備處方輔酶QIO15g卵磷脂2g辛癸酸甘油三酯10g吐溫2020g吐溫8020gHS1510g甘油23g製成100g製法:按配方量將輔酶QIO、卵磷脂、辛/癸酸甘油三酯、吐溫20、吐溫80、、HS15(BASF公司，德國)、甘油在水浴5055。C下攪拌(避光、通N2保護)、混合均勻，過濾即得輔酶Q10自乳化組合物。將該組合物採用水相介質進行乳化，檢測其有效粒徑為140.0nm。實施例7、輔酶QIO自乳化組合物的藥效試驗採用小鼠負重遊泳模型，研究輔酶QIO自乳化組合物的抗疲勞、抗氧化作用，測定遊泳力竭時間以及抗氧化相關生化指標(血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量變化)，對輔酶QIO自乳化組合物的相關作用進行評價。1、實驗動物及分組雄性昆明種小鼠，體重(20士2)g。小鼠適應性餵養3d後，隨機分為2組，即對照組(生理鹽水組)和輔酶QIO自乳化組合物組(以實施例3的組合物給藥，以輔酶Q10計，給藥劑量為50mg/kg體重)。連續灌胃第30天時進行運動耐力試驗並測定相應指標。2、實驗方法運動耐力實驗以負重遊泳的方式建立疲勞模型，於末次灌胃30min後，在小鼠尾根部負重5y。(g/g)體重的鉛絲，放入水溫為25士rC、水深不低於30cm的自製遊泳箱中，進行耐力試驗。以秒表記時，遊泳開始至沉入水底(不少於8s)的時間為小鼠負重遊泳時間(s)。血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量的測定末次灌胃30min後，將小鼠置於水溫為30°C的遊泳箱中不負重遊泳90min後，摘眼球採血，分離血清，測定血中SOD活力和MDA含量。SOD和MDA測定方法按試劑盒說明書操作。3、實驗結果各組小鼠在給藥30天後，遊泳力竭時間、SOD活力、MDA含量測定結果見表，各測定結果的柱形圖分別如圖1、2、3所示。結果表明，與對照組相比，灌胃給予輔酶QIO自乳化組合物後，小鼠的運動耐力明顯提高，遊泳力竭時間明顯延長(p<0.05);血清中SOD活力增加、MDA含量降低。表1各項指標測定結tableseeoriginaldocumentpage10權利要求1、一種輔酶Q10自乳化組合物，由下述質量份的物質組成輔酶Q100.5-20、中鏈脂肪酸甘油三酯大於0小於等於30、磷脂0.5-50、表面活性劑5-50和助溶劑10-60；所述表面活性劑為親水親油平衡值大於等於10的表面活性劑，所述助溶劑為碳鏈中碳原子為1-3的醇。2、根據權利要求1所述的輔酶QIO自乳化組合物，其特徵在於所述輔酶QIO的質量份為0.5-10，優選0.5-5;所述中鏈脂肪酸甘油三酯的質量份為5-15;所述磷脂的質量份為5-30;所述表面活性劑的質量份為20-40;所述助溶劑的質量份為10-50。3、根據權利要求1或2所述的輔酶Q10自乳化組合物，其特徵在於所述表面活性劑為吐溫20、吐溫80和HS15中的至少一種。4、根據權利要求1-3中任一所述的輔酶Q10自乳化組合物，其特徵在於所述中鏈脂肪酸甘油三酯為辛癸酸甘油三酯；所述助溶劑為乙醇、丙二醇和甘油中的至少一種；所述磷脂為卵磷脂和/或氫化卵磷脂。5、根據權利要求1-4中任一所述的輔酶Q10自乳化組合物，其特徵在於所述輔酶Q10為還原型輔酶Q10或氧化型輔酶QIO。6、權利要求1-5中任一所述輔酶QIO自乳化組合物的製備方法，其特徵在於在氮氣環境中，將權利要求1-5中任一所述質量份的輔酶Q10、中鏈脂肪酸甘油三酯、磷脂、表面活性劑以及助溶劑在50-55X:加熱、攪拌至混合均勻，得到輔酶QIO自乳化組合物；整個製備過程要求避光操作。7、權利要求1-5中任一所述的輔酶Q10自乳化組合物在製備預防和/或治療心血管疾病藥物中的應用。8、權利要求1-5中任一所述的輔酶QIO自乳化組合物在製備保健品中的應用。9、權利要求1-5中任一所述的輔酶QIO自乳化組合物作為化妝品添加劑的應用。10、一種預防和/或治療心血管疾病的藥物，其活性成分為權利要求1-5中任一所述的輔酶QIO自乳化組合物。全文摘要本發明公開了一種輔酶Q10自乳化組合物及其製備方法與應用。該組合物由下述質量份的物質組成輔酶Q100.5-20、中鏈脂肪酸甘油三酯大於0小於等於30、磷脂0.5-50、表面活性劑5-50、助溶劑10-60；所述表面活性劑為親水親油平衡值大於等於10的表面活性劑，所述助溶劑為碳鏈中碳原子為1-3的醇。將上述組分在50-55℃加熱、攪拌至混合均勻，即得輔酶Q10自乳化組合物；整個製備過程要求避光操作。本發明的輔酶Q10自乳化組合物在水性介質中可充分自乳化形成粒徑在200nm以下的納米乳，解決了輔酶Q10難溶性的問題，同時可明顯提高輔酶Q10的生物利用度，改善輔酶Q10的穩定性，可用於輔酶Q10作為活性成分的藥品、保健食品、以及化妝品添加劑使用。文檔編號A61Q19/08GK101596177SQ20091009000公開日2009年12月9日申請日期2009年7月24日優先權日2009年7月24日發明者孫敏敏,張小寧,文邰,郝豔麗,黃志起申請人:清華大學