一種提取5-羥基色氨酸方法
2023-05-14 04:49:36 1
專利名稱：一種提取5-羥基色氨酸方法
技術領域：
本發明屬於天然產物分離領域，特別是涉及一種提取5-羥基色氨酸方法。
背景技術：
5-羥基色氨酸，英文名稱為5-hydroxytryptopHan，化學名5_羥基_3_吲哚基-氨基丙酸，分子式=C11H12N2O3,分子量220. 23。5-羥基色氨酸是人體內一種賀爾蒙叫做serotonin的前驅物質，可以幫助人體內這種賀爾蒙的生產，5-羥色氨是重要的抑制神經傳遞素複合胺(5-HT)的前體。在腦部、血小板、腸胃、中樞神經系統中均有複合胺，在情緒變化時，會相應分泌複合胺，它是腦部控制情緒、行為、胃口、睡眠、衝動的重要化學物質。5-羥色氨能有效幫助產生複合胺，因此可促進情緒、神經系統的健康。研究表明，5-羥色氨酸具有降血壓、抗抑鬱、鎮靜催眠等作用，研究還表明5-羥色氨酸提高性興奮功能。目前5-羥基色氨酸主要有天然提取法、化學合成和發酵法製得。天然提取法是從非洲加納籽中提取得來。加納籽為豆科灌木植物加納穀物Griffonia simplicifolia的乾燥種子，種子長圓形，長約1. 5釐米，寬約1釐米，種皮呈黑色，有皺紋，胚乳黃綠色，略帶豆香味。西非地區的人們就有把加納籽作為治療疾病的歷史，葉子以及其汁可用來治療傷口和腎病，也可用作灌腸劑和壯陽藥；搗碎的樹皮可做成藥膏治療軟下疳等。經過研究發現，該種植物的主要活性物質是5-羥基色氨酸，其種子中含量很高，含量可達到10 %。胺基酸提取方法，多是以水或醇為溶劑，陽離子樹脂交換樹脂純化。5-羥基色氨酸的提取方法有文獻「加納籽中5-羥基色氨酸的樹脂純化研究」，公開的方法是加納籽粉碎，加水回流提取，提取液加入G6104陽離子樹脂吸附，30%氨水洗脫，所得產品含量達69. 1%。文獻「從加納籽中提取、分離純化5-羥基色氨酸的工藝研究」，該文獻最佳工藝是加納籽脫脂粉過20目篩；蒸餾水熱回流加攪拌動態提取；提取溫度80°C;提取次數2次；料液比1 15(m/v)提取時間池，通過對加納籽水提液澄清除雜、大孔吸附樹脂層析、活性炭脫色、結晶、重結晶等分離純化步驟對5-羥基色氨酸粗品進一步純化。文獻「從非洲加納籽提取、純化5-羥基色氨酸的工藝」，方法是80%乙醇以 10 l(v/w)的料液比，在70°C下提取池，共提取2次，最佳純化工藝為提取液以等體積石油醚(60 90° )萃取後濃縮，結晶，結晶物以3% (w/w)活性炭脫色30min，產品總收率達9. 25%，含量超過98%。中國專利「一種從加納籽中提取並製備高純度五羥基色氨酸的生產工藝」，該專利公開的方法是以非洲產加納籽為原料，超臨界萃取除油，除油後物料再用水或醇類溶劑或水與醇類溶劑的混合溶液提取3-5次，合併提取液，微濾、超濾，經離子交換樹脂吸附，洗脫，真空濃縮，低溫結晶，離心分離，微波乾燥後得到高純度五羥基色氨酸乾粉。如上所述， 現有工藝存在著生產成本高和收率低的缺點。
發明內容
本發明要解決技術問題是提供一種低成本、高收率的提取5-羥基色氨酸方法。本發明技術解決方案如下一種提取5-羥基色氨酸方法，其特徵在於包含以下步驟1)取加納籽原料粉碎，加入8-15倍量酸性水和焦亞硫酸鈉浸泡提取2-3次，每次浸泡4-10小時，得提取液；2)上述提取液加入陽離子交換樹脂柱吸附，用去離子水洗至無糖色，再用洗脫劑洗脫，收集洗脫液；3)上述洗脫液調至pH2-4，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至中性，取4-6BV40-60%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液；4)上述洗脫液加入活性炭脫色，回收乙醇，脫色液濃縮至密度1.4-1. 6，放置結晶，結晶物濾出，乾燥得產品。所述步驟1)的酸性水為pH2-3的鹽酸溶液，焦亞硫酸鈉加入量是提取液的1_5%0。所述步驟2)中的陽離子交換樹脂為強酸性陽離子交換樹脂，洗脫劑為10-15%的氨水溶液(含有1_3%。焦亞硫酸鈉)，用量為樹脂柱體積的4-6倍量。所述步驟3)中大孔樹脂型號可選HZ818、AB-8、LSA-20和HPD-100中的一種。本發明的優勢在於酸水浸泡提取，是利用胺基酸溶於性質，解決了加熱易糊化難過濾，而且比醇提成本低，上樹脂柱也無需濃縮，可直接上柱；提取液和洗脫劑中加入焦亞硫酸鈉，有保護5-羥基色氨酸在提取純化過程中不被破壞，提高了產品收率；陽離子樹脂和大孔樹脂聯合使用，減少活性炭脫色次數和結晶次數，縮短了生產周期，比單純離子樹脂和大孔樹脂分離效果好；整個工藝無毒性試劑使用，所得產品符合藥品食品生產要求。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式
具體實施例方式實施例1 加納籽原料粉碎20-40目，取2kg加入30kgpH3的鹽酸水溶液和30g焦亞硫酸鈉，攪拌浸泡提取10小時，抽上清液，再加16kg鹽酸水浸泡4小時，濾過合併提取液，加入 3LHD-8陽離子交換樹脂柱吸附後，用去離子水洗至無糖色，再用18L10%的氨水溶液(含有 1%。焦亞硫酸鈉)洗脫，收集洗脫液鹽酸調至pH2，再加入2LHZ818大孔樹脂柱吸附，水洗至樹脂柱中性，12L40%乙醇溶液洗脫有效成分，得醇洗脫液。洗脫液加入120g活性炭回流脫色，濾除活性炭，脫色液濃縮至密度1. 5，放置結晶，結晶物濾出，真空乾燥得白色5-羥基色氨酸，含量98. 5%，收率89.2%。實施例2 加納籽原料粉碎20-40目，取2kg加入20kgpH2的鹽酸水溶液和40g焦亞硫酸鈉，攪拌浸泡提取6小時，抽上清液，再加20kg鹽酸水浸泡6小時，濾過合併提取液，加入 4L003X7陽離子交換樹脂柱吸附後，用去離子水洗至無糖色，再用16L15%的氨水溶液(含有3%。焦亞硫酸鈉)洗脫，收集洗脫液鹽酸調至pH3，再加入2LAB-8大孔樹脂柱吸附，水洗至樹脂柱中性，8L60%乙醇溶液洗脫有效成分，得醇洗脫液。洗脫液加入IOOg活性炭回流脫色，濾除活性炭，脫色液濃縮至密度1.6，放置結晶，結晶物濾出，真空乾燥得白色5-羥基色氨酸，含量99. 1%，收率91.3%。實施例3 加納籽原料粉碎20-40目，取5kg加入50kgpH3的鹽酸水溶液和50g焦亞硫酸鈉， 攪拌浸泡提取8小時，抽上清液，再加50kg鹽酸水浸泡4小時提取兩次，濾過合併提取液， 加入8LHD-8陽離子交換樹脂柱吸附後，用去離子水洗至無糖色，再用40L12%的氨水溶液 (含有2%。焦亞硫酸鈉)洗脫，收集洗脫液鹽酸調至pH4，再加入6L LSA-20大孔樹脂柱吸附，水洗至樹脂柱中性，30L50%乙醇溶液洗脫有效成分，得醇洗脫液。洗脫液加入300g活性炭回流脫色，濾除活性炭，脫色液濃縮至密度1.4，放置結晶，結晶物濾出，真空乾燥得白色5-羥基色氨酸，含量98. 2 %，收率88. 3 %。
權利要求
1.一種提取5-羥基色氨酸方法，其特徵在於包含以下步驟1)取加納籽原料粉碎，加入8-15倍量酸性水和焦亞硫酸鈉浸泡提取2-3次，每次浸泡 4-10小時，得提取液；2)上述提取液加入陽離子交換樹脂柱吸附，用去離子水洗至無糖色，再用洗脫劑洗脫， 收集洗脫液；3)上述洗脫液調至pH2-4，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至中性，取4-6BV40-60%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液；4)上述洗脫液加入活性炭脫色，回收乙醇，脫色液濃縮至密度1.4-1.6，放置結晶，結晶物濾出，乾燥得產品。
2.如權利要求1所述提取5-羥基色氨酸方法，其特徵在於所述步驟1)的酸性水為 PH2-3的鹽酸溶液，焦亞硫酸鈉的用量是提取液的1_5%0。
3.如權利要求1所述提取5-羥基色氨酸方法，其特徵在於所述步驟2)中的陽離子交換樹脂為強酸性陽離子交換樹脂，洗脫劑為10-15%的氨水溶液(含有1-3%。焦亞硫酸鈉)， 用量為樹脂柱體積的4-6倍量。
4.如權利要求1所述提取5-羥基色氨酸方法，其特徵在於所述步驟幻中大孔樹脂型號可選 HZ818、AB-8、LSA-20 和 HPD-100 中的一種。
全文摘要
本發明涉及了一種提取5-羥基色氨酸方法。本方法優勢是加入抗氧化劑保護及離子交換樹脂、大孔樹脂聯用，提高了產品得率，降低了能耗。方法是將加納籽原料粉碎，加入8-15倍量酸性水和焦亞硫酸鈉浸泡提取2-3次，每次浸泡4-10小時，提取液加入陽離子交換樹脂柱吸附，用去離子水洗至無糖色，再用10-15％的氨水溶液(含有1-3‰焦亞硫酸鈉)，洗脫液調至pH2-4，加入大孔樹脂柱吸附，水洗至中性，取4-6BV40-60％乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入活性炭脫色，回收乙醇，脫色液濃縮至密度1.4-1.6，放置結晶，結晶物濾出，乾燥得產品。本方法操作簡單，適合工業化生產。
文檔編號C07D209/20GK102464602SQ20101054978
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月19日 優先權日2010年11月19日
發明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請人:蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司