一種用於防治蚜蟲和溫室白粉蝨的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑配方及製備方法

2023-05-16 07:41:31

專利名稱：一種用於防治蚜蟲和溫室白粉蝨的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑配方及製備方法
技術領域：
本發明是一種用於防治蚜蟲和溫室白粉蝨的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑配方及製備方法。
背景技術：
蠟蚧輪枝菌[KertciWi鵬Jec朋h' (Zimmerman)Viegas]是一種常見的蟲生真菌，寄 生於同翅目、鱗翅目、纓翅目等昆蟲。20世紀80年代中後期，英國、荷蘭等國就已經相繼 有了該菌商品製劑問世，如lXl(T孢子/mL Mycotal可溼性粉劑和1 X 10"'孢子/mL Vertalec可溼性粉劑等，用於溫室蔬菜和花卉害蟲防治。20世紀90年代以來，該菌的研究 得到極大重視。我國經過10餘年的科技攻關，已有"一種蠟蚧輪枝菌及其培養方法與應用" (200410058017.9)和"蠟階輪枝菌及其培養方法與應用"(200410058016.4) 2項專利登 記。
本發明如果將蠟階輪枝菌加工成水分散粒劑生物農藥，與可溼性粉劑、乳油等其他農 藥劑型相比，具有對施藥者安全、有效成分含量高(可達80%-90°/。)、易計量、貯運方便、 低環境汙染、入水易崩解、分散性好、懸浮率高、再懸浮性好、貨架壽命長等優點。

發明內容
本發明的目的是將蠟蚧輪枝菌加工成水分散粒劑，避免使用有機溶劑，提高製劑中 蠟蚧輪枝菌的含量和穩定性，提高藥效及貨架壽命，便於貯運和施用。
本發明所採用的生防菌VL17菌株是分離於染菌的溫室岈蟲體表的蠟階輪枝菌，將其純 化後轉移至斜面作母菌劑，並在塑膠袋內進行固體發酵培養，得到含蠟階輪枝菌VL17孢子 粉的培養基。所採用的固體發酵培養基成分為大米，在12rC下滅菌30分鐘，發酵溫度 24°C-26°C，發酵時間13-15天，以固體培養基表面長滿白色蠟階輪枝菌VL17孢子粉即可。 將含菌培養基塑膠袋置於4'C冷藏保存備用。使用時將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上 洗脫，過濾，配製成lX10"'孢子/mL孢子懸浮液。
蠟蚧輪枝菌水分散粒劑組成成分按重量比為
蠟蚧輪枝菌VL17菌株孢子懸浮液(lXl(T孢子/mL) 4-13 溼潤劑-木質素磺酸鈉或十二烷基磺酸鈉 1-15黏結劑-聚乙烯醇 1-19 崩解劑-尿素或氯化鋁或羧甲基纖維素鈉 3-11 分散劑-十二烷基磺酸鈉或磷酸二氫鈉或丙烯酸胺或丙烯酸均聚物鈉鹽 1-13 穩定劑-磷酸氫二鈉或丁二酸或葡萄糖 1-7 載體-膨潤土或高嶺土或輕質碳酸鈣 20-55 水 5-20
先按重量比將分散劑、溼潤劑、崩解劑和載體混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲 得超細粉。將黏結劑、穩定劑按重量比用水溶解，再加入上述超細粉中，然後加入蠟階輪 枝菌孢子懸浮液，在捏合機中常溫(25。C)下捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進 擠壓造粒機中，常溫(25°C)下進行造粒。自然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾，篩分，檢 驗合格後包裝，製成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
本發明微生物農藥的有益效果如下1.依據微生態學原理，通過微生物孢子著落 於蟲體表面，孢子萌發，菌絲鋪展，侵入表皮、侵害發展，形成次生分生孢子，從而有效
地控制蟲害發生。2.微生物農藥具有化學藥劑所不具備的優點，其殺蟲作用機制主要為
孢子萌發過程中產生蛋白酶、幾丁質酶和脂肪酶，酶和機械作用共同降解昆蟲體壁，致使
昆蟲死亡。3.本發明產品既能發揮最佳殺蟲作用、又能減少化學農藥的使用量和使用次 數。4.經測試表明，本發明產品具有藥效穩定，對環境安全，對小白鼠無致病性，對蜜 蜂、柞蠶、異色瓢蟲、赤子勝愛蚯蚓、小球藻、魚等安全的特點。5.本發明產品劑型兼 具可溼性粉劑和乳劑的特點，施藥方便，無環境汙染。既具有粒劑的優點，又具有懸浮劑 高分散性的性能，還能避免如甲苯、二甲苯等有機溶劑的使用。
具體實施例方式
實施例h
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26X:下培養4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到107孢子/mL的蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液。
所採用的固體發酵培養基製作方法為將大米煮至半熟，風乾，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑膠袋內，每袋200克，在12rC下滅菌30分鐘。將上述蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發酵培養基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發酵溫度24。C，發酵時間15天，以固體培養基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上用無菌水洗脫，過濾，配製 成lXlO"'孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸胺lg、溼潤劑木質素磺酸鈉lg、崩解劑羧甲基纖維素鈉3g 和載體輕質碳酸鈣20g混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑聚乙烯 醇lg、穩定劑磷酸氫二鈉lg用5mL水溶解，加入上述超細粉中，然後加入lXl(T孢子/mL 蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液4mL，在捏合機中常溫(25°C)下捏合，製成可塑形的物料；再將 此物料送進擠壓造粒機中，常溫(25'C)下進行造粒。自然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾， 篩分，檢驗合格後包裝，製成l. 1Xl(f孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
實施例2:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26。C下培養4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟階輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到10'孢子/mL的蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液。
所採用的固體發酵培養基製作方法為將大米煮至半熟，風乾，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑膠袋內，每袋200克，在121'C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發酵培養基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發酵溫度25'C，發酵時間14天，以固體培養基表面長滿白色蠟階 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上用無菌水洗脫，過濾，配製 成1X1(T孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸胺3g、溼潤劑木質素磺酸鈉15g、崩解劑羧甲基纖維素鈉6g 和載體輕質碳酸鈣45g混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑聚乙烯 醇9g、穩定劑磷酸氫二鈉7g用15mL水溶解，加入上述超細粉中，然後加入lXl(T孢子/niL 蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液10mL，在捏合機中常溫(25°C)下捏合，製成可塑形的物料；再將 此物料送進擠壓造粒機中，常溫(25'C)下進行造粒。自然乾燥或在低於40。C烘箱中烘乾， 篩分，檢驗合格後包裝，製成0.9X109孢子/g蠟階輪枝菌水分散粒劑。
實施例3:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升)平板上，26'C下培養4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到l(^孢子/mL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所採用的固體發酵培養基製作方法為將大米煮至半熟，風乾，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑膠袋內，每袋200克，在121。C下滅菌30分鐘。
將上述蠟階輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發酵培養基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發酵溫度26'C，發酵時間13天，以固體培養基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上用無菌水洗脫，過濾，配製 成l X 10'°孢子AnL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑磷酸二氫鈉6g、溼潤劑十二垸基磺酸鈉7g、崩解劑氯化鋁6g和載體 高嶺土40g混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑聚乙烯醇8g、穩定 劑丁二酸3g用llmL水溶解，加入上述超細粉中，然後加入lX10"'孢子/mL蠟蚧輪枝菌孢子 懸浮液lOmL，在捏合機中常溫(25°C)下捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進擠壓 造粒機中，常溫(25°C)下進行造粒。自然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾，篩分，檢驗合 格後包裝，製成O. 9X 109孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
實施例4:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26'C下培養4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟階輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到l(/孢子/rnL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所採用的固體發酵培養基製作方法為將大米煮至半熟，風乾，將在直徑20cm、長30cm 的耐高溫、高壓塑膠袋內，每袋200克，在121。C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發酵培養基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發酵溫度26。C，發酵時間13天，以固體培養基表面長滿白色蠟階 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上用無菌水洗脫，過濾，配製 成l X 10'"孢子/mL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑丙烯酸均聚物鈉鹽6g、溼潤劑木質素磺酸鈣6g、崩解劑尿素9g和載 體膨潤土33 g混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑聚乙烯醇12g、 穩定劑葡萄糖4g用10tnL水溶解，加入上述超細粉中，然後加入lXl(T孢子AiL蠟階輪枝菌 孢子懸浮液8mL，在捏合機中常溫(25°C)下捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進擠壓造粒機中，常溫(25°C)下進行造粒。自然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾，篩分，檢 驗合格後包裝，製成O. 9X 109孢子/g蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。
將本發明的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑稀釋1000倍後對溫室白粉蝨噴霧處理，藥後第15、 20、 30天蟲口減退率分別為51. 1%、 73.9%、 81.5%。
實施例5:
取蠟蚧輪枝菌VL17斜面，接種到PDA培養基(馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、 水1000毫升)平板上，26'C下培養4天，得到長滿白色蠟蚧輪枝菌VL17的平板，用無菌水 將蠟蚧輪枝菌VL17從平板上洗脫，得到10'孢子/mL的蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液。
所採用的固體發酵培養基製作方法為將大米煮至半熟，風乾，將在直徑20cra、長30cm 的耐高溫、高壓塑膠袋內，每袋200克，在121'C下滅菌30分鐘。
將上述蠟蚧輪枝菌VL17菌懸浮液在無菌操作條件下接種到上述固體發酵培養基中，每 袋接種菌懸浮液150mL，發酵溫度24'C，發酵時間15天，以固體培養基表面長滿白色蠟蚧 輪枝菌VL17孢子粉即可。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉從培養基上用無菌水洗脫，過濾，配製 成l X 101"孢子AnL孢子懸浮液。
按重量比將分散劑十二烷基磺酸鈉13g、溼潤劑木質素磺酸鈉15g、崩解劑尿素llg和 載體高嶺土55g混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑聚乙烯醇19g、 穩定劑丁二酸7g用20mL水溶解，加入上述超細粉中，然後加入lXl(T孢子/mL蠟階輪枝菌 孢子懸浮液13mL，在捏合機中常溫(25°C)下捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進 擠壓造粒機中，常溫(25°C)下進行造粒。自然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾，篩分，檢 驗合格後包裝，製成O. 9X 109孢子/g蠟階輪枝菌水分散粒劑。
按上述實施例生產的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑，經水稀釋1000倍後對蚜蟲噴霧處理，藥 後第IO、 15、 20天蟲口減退率分別為52.0%、 71.5%、 80.1%。
權利要求
1. 一種用於防治蚜蟲和溫室白粉蝨的蠟蚧輪枝菌水分散粒劑，其特徵是所含各種成分及重量比為蠟蚧輪枝菌VL17菌株孢子懸浮液(1×1010孢子/mL) 4-13溼潤劑-木質素磺酸鈉或十二烷基磺酸鈉 1-15黏結劑-聚乙烯醇 1-19崩解劑-尿素或氯化鋁或羧甲基纖維素鈉 3-11分散劑-十二烷基磺酸鈉或磷酸二氫鈉或丙烯酸胺或丙烯酸均聚物鈉鹽 1-13穩定劑-磷酸氫二鈉或丁二酸或葡萄糖 1-7載體-膨潤土或高嶺土或輕質碳酸鈣 20-55水 5-20。
2.—種如權利要求1所述的防治蚜蟲和溫室白粉蝨的蠟階輪枝菌水分散粒劑的製備方 法，其特徵是利用從染菌的溫室蚜蟲體表分離到的蠟蚧輪枝菌VL17菌株，採用固體發酵 培養，得到含蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉的培養基。將蠟階輪枝菌VL17孢子粉用水從培養基上 洗脫，過濾，配製成lX10"'孢子/mL孢子懸浮液。先按重量比將分散劑、溼潤劑、崩解劑 和載體混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑、穩定劑按重量比用水 溶解，加入上述超細粉中，然後加入蠟階輪枝菌孢子懸浮液，在捏合機中常溫(25°C)下 捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進擠壓造粒機中，常溫(25")下進行造粒，自 然乾燥或在低於4(TC烘箱中烘乾，篩分，檢驗合格後包裝，製成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑;其中固體發酵所用培養基成分為大米，在12rC下滅菌30分鐘，發酵溫度24。C-26 'C，發酵時間13-15天，以固體培養基表面長滿白色蠟階輪枝菌孢子粉即可。將含菌培養 基塑膠袋置於4'C冷藏保存備用。
全文摘要
蠟蚧輪枝菌[Verticillium lecanii(Zimmerman)Viegas]VL17菌株由染菌的溫室蚜蟲體表分離獲得，對蚜蟲、溫室白粉蝨具有高毒力。採用固體發酵培養，得到含蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉的培養基。將蠟蚧輪枝菌VL17孢子粉用水從培養基上洗脫，過濾，配製成1×1010孢子/ml孢子懸浮液。先按重量比將分散劑、溼潤劑、崩解劑和載體混合，然後將混合物進行超細粉碎，獲得超細粉。將黏結劑、穩定劑用水溶解，加入上述超細粉中，然後加入蠟蚧輪枝菌孢子懸浮液，在捏合機中常溫(25℃)下捏合，製成可塑形的物料；再將此物料送進擠壓造粒機中，常溫(25℃)下進行造粒。自然乾燥或在低於40℃烘箱中烘乾，篩分，檢驗合格後包裝，製成蠟蚧輪枝菌水分散粒劑。此水分散粒劑用於防治蚜蟲和溫室白粉蝨具有使用方便，無環境汙染，對人、畜安全，貨架壽命較長，易於包裝貯運等特點。
文檔編號A01N63/00GK101444226SQ200810230170
公開日2009年6月3日 申請日期2008年12月26日 優先權日2008年12月26日
發明者楊 張, 李興海, 王英姿, 祁之秋, 紀明山, 谷祖敏, 魏松紅 申請人:瀋陽農業大學