一種熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑的製備方法和用途的製作方法

2023-05-17 21:19:16

專利名稱：一種熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑的製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及中藥製劑的製備方法，具體涉及一種熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑 的製備方法和用途。
背景技術：
目前中藥注射劑越來越受到更多的關注，但由於成分複雜，工藝落後，質量標準欠 缺，臨床使用不良反應較多，已被公認為是高風險產品。究其原因，主要是有效成分提取純 度不高，無效成分和未知成分不明確。熊膽粉為熊科動物黑熊或棕熊膽汁的乾燥品，採用天然熊膽汁或人工引流熊膽 汁。熊膽粉具有清熱鎮驚、明目殺蟲功效。含有膽汁酸類、膽色素類、胺基酸類等多種成分， 其中膽汁酸類為其主要有效成分，有清熱解毒、止咳化痰、利膽作用，多以牛磺酸或甘氨酸 的結合物形式存在，水解後可得到多種游離膽汁酸，如熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、膽酸、去氧 膽酸等，其中熊去氧膽酸含量最高，鵝去氧膽酸次之，二者為同分異構體，往往不易分離。從 藥理作用看，熊去氧膽酸與鵝去氧膽酸均具有抗菌、抗炎、解熱、止咳和溶解膽石作用，但熊 去氧膽酸的效果要強於鵝去氧膽酸，況且鵝去氧膽酸的副作用較明顯，口服給藥時會出現 腹痛、腹瀉現象，靜脈給藥時會產生一定的溶血性，而熊去氧膽酸在正常用量下基本無不良 反應。因此在生產熊去氧膽酸時要儘可能降低其所含鵝去氧膽酸的含量。熊膽粉用於注射劑的製備已有報導及產品上市，但其提取的目的物一般是以牛磺 熊去氧膽酸和牛磺鵝去氧膽酸為主的總結合膽汁酸，雖然工藝簡便，但不易提純，尤其不能 控制兩種主要結合膽汁酸的比例，副作用較大。目前從熊膽粉中提取熊去氧膽酸的方法主要是通過鹼水解皂化、中和酸化、乙酸 乙醋提取、乙酸乙酯結晶及重結晶等步驟來完成，收率約10%，所得結晶物中熊去氧膽酸的 含量較低，一般在60%左右，鵝去氧膽酸含量較高，一般在25%以上，並且結晶物的顏色較 深，一般為黃色或淡黃色，說明雜質含量較多，不適於用於一些特殊劑型的藥品，如注射劑寸。

發明內容
本發明的目的之一是提供一種熊膽粉總膽酸提取物的製備方法，該方法能夠提高 熊膽粉總膽酸提取物中熊去氧膽酸提取收率和純度，同時降低鵝去氧膽酸的含量。本發明的另一目的是提供用上述熊膽粉總膽酸提取物製成注射劑的方法。本發明的又一目的是提供上述方法製備的熊膽粉總膽酸提取物及其注射製劑的 製藥用途，主要用於抗菌、抗病毒、止咳化痰和保肝利膽等方面的製藥用途。本發明熊膽粉總膽酸提取物製備方法具體是通過以下技術方案來實現的。一種熊膽粉總膽酸提取物的製備方法，其包括如下步驟a、乙醇提取將熊膽粉與乙醇和活性炭混合，加熱沸騰回流提取0. 5-2小時；b、皂化反應將乙醇提取液回收乙醇至無醇味，濃縮液加水稀釋，再加固體氫氧化鈉，攪拌溶解，在90-120°C下進行皂化反應，反應時間為16-24小時；C、中和反應皂化反應結束後加入鹽酸調節pH值至1-6，析出沉澱，過濾得到熊膽 粉提取物粗品；d、粗品乾燥熊膽粉提取物粗品採用100°C以下溫度乾燥；e、乙酸乙酯提取將粗品乾燥後粉碎，加入活性炭和乙酸乙酯回流提取2-4次，提 取時間為0. 5-1. 5小時；f、乙酸乙酯結晶將步驟e中乙酸乙酯提取液合併，回收乙酸乙酯，0-30°C放置， 析出結晶；g、乙醇結晶將乙酸乙酯結晶物加乙醇溶解製得溶液，加入活性炭脫色，過濾，醇 液濃縮，析出結晶，過濾，結晶乾燥即得。其中，在步驟a中，所述乙醇濃度為50% -95%,乙醇用量為熊膽粉重量的5_15 倍，活性炭用量為熊膽粉重量的10% -20%。其中，在步驟b中，所述濃縮液加水稀釋至熊膽粉重量的8-12倍，氫氧化鈉重量為 稀釋藥液重量的10% -20%。其中，在步驟c的中和反應中，所述鹽酸濃度為2M-12M。其中，在步驟e中，所述活性炭用量為粗品用量的10% -20%，乙酸乙酯用量為粗 品用量的5-15倍。其中，在步驟f中還可以增加用乙酸乙酯重結晶的步驟。其中，在步驟f中，乙酸乙酯提取液合併溶液量為粗品重量的2-8倍。其中，在步驟g中，加入乙醇的用量為乙酸乙酯結晶物重量的4-8倍，加入活性炭 為溶液重量的_5%，醇液濃縮的液量為乙酸乙酯結晶物重量的2-4倍。以上用量均按照重量計算，所用乙醇可用甲醇替代，所用鹽酸可用硫酸替代，相應 的工藝條件不變。本發明還提供了將上述方法製得的熊膽粉總膽酸提取物製成注射劑的方法，包括 如下步驟將上述方法製得的熊膽粉總膽酸提取物加注射用水，用氫氧化鈉溶液調節PH值 至7-8，補加注射用水後用活性炭脫色，脫炭過濾，精濾，放涼，灌裝，封口，滅菌即得。其中，熊膽粉總膽酸提取物用量按照熊去氧膽酸含量計算，注射劑裝量2_20ml/ 支。本發明的熊膽粉總膽酸注射劑優選含量規格為20mg/ml (以熊去氧膽酸計)，使用 劑量根據病情和個體情況相應調整。本發明還提供了上述方法製備的熊膽粉總膽酸提取物及其注射製劑在製備抗菌、 抗病毒、止咳化痰和保肝利膽藥物中的用途。為了克服現有技術的不足，採用安全無毒、簡單實用的方法，提供了一種既能夠提 高熊膽粉總膽酸提取物中熊去氧膽酸提取收率和純度，同時降低鵝去氧膽酸含量的方法， 使熊膽粉總膽酸提取物中熊去氧膽酸的含量不低於70%，鵝去氧膽酸含量不高於20%。為 達到發明目的，本發明先將熊膽粉用乙醇回流提取，提取液回收乙醇濃縮後，再進行鹼水 解、中和酸化、乙酸乙酯提取、乙酸乙酯結晶、乙醇結晶，得熊膽粉總膽酸提取物。另外，本發 明還提供了以熊總膽酸提取物為原料製成注射劑的方法。
與現有技術比較，本發明有以下優點第一、熊膽粉總膽酸製備增加了乙醇提取步驟，可有效去除所含的蛋白質、氨基 酸、色素、部分脂肪、無機鹽等雜質，達到初步精製的目的，提高了水解皂化效果，更有利於 進一步的分離純化；第二、熊膽粉總膽酸製備增加了乙醇結晶步驟，利用熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸在 乙醇中溶解度的差異，通過乙醇結晶，可有效降低結晶物中鵝去氧膽酸的含量，提高熊去氧 膽酸的含量；第三、本發明不但熊總膽酸提取物中熊去氧膽酸含量較高，而且收率高，一般在 18%以上，從而使有限的資源得到更為科學合理的利用，降低了生產成本；第四、本法以熊膽粉為原料製備熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸複合物不經過氧化和還 原反應過程，對生產條件要求不高，對環境無汙染，適合工業化大規模生產；第五、以熊總膽酸提取物製成的注射劑中固形物所含可測成分和結構明確成分含 量高，均達到80 %以上，顏色淺，近無色，質量穩定可控。本發明方法製備的熊總膽酸提取物及其注射劑的藥理學研究如下。1、解熱作用研究取體重120 225kg健康家兔若干只，實驗室溫度控制在25°C左右。於試驗前3d， 每日測正常肛溫2次，選取體溫變動不高於0. 3°C的家兔50隻，隨機分為5組。給藥前測定 3次肛溫(每30min 1次)，以體溫平均值為基礎體溫。給藥組按表1劑量iv，正常對照組 同法給等容積生理鹽水，陽性對照採用精氨酸阿斯匹林。同時各組動物耳緣靜脈注射(iv) 內毒素5EU/kg。於內毒素攻擊後l、2、3、4、5h測定家兔肛溫。實驗顯示，熊總膽酸注射劑各 劑量組能明顯抑制內毒素所致家兔體溫的升高，其中、高劑量組的作用時間和強度明顯優 於低劑量組，與對照組比較差異有顯著性(P < 0. 05、P < 0. 01)，表明熊總膽酸注射劑具有 明顯的解熱作用，結果見表1。表1熊總膽酸注射劑對內毒素所致家兔發熱的解熱作用(η = 10，χ士s) ⑴與對照組比較，P < 0. 05 ；⑵P < 0. 012、抗菌作用研究取小鼠100隻，體重(18 士 1) g，雌雄各半，隨機分成5組，每組20隻，均給以金黃色 葡萄球菌的30個LD5tl攻擊量，然後按表2藥物及劑量分組(熊總膽酸組劑量按熊去氧膽酸 計)，靜脈注射給藥(iv)，對照組iv等體積生理鹽水，陽性對照採用阿莫西林注射液。每日 一次，連續給藥5天。觀察記錄感染後5內各組動物的死亡數。實驗結果表明，熊總膽酸注 射劑各劑量組對金黃色葡萄球菌感染小鼠致死均有不同程度的保護作用，見表2。表2熊總膽酸注射劑對金黃色葡萄球菌感染所致小鼠死亡的保護作用 3、抗病毒作用研究
(1)、對流感病毒FM1致小鼠肺炎的影響取小鼠60隻，體重(15 士 1) g，按表2隨機分成6組，每組10隻；除正常對照組外， 其餘以15倍LD5tl的流感病毒FM1靜脈注射。給藥組按表2劑量，於感染前Id開始注射給 藥，每天1次，連續5d，正常對照組同法給等容積生理鹽水，陽性對照採用病毒唑注射液。第 6天稱體重(禁水8h)，處死動物，解剖取肺清洗，去除氣管、肺門淋巴結等組織，用濾紙吸乾 水分，稱重，按以下公式逐個計算肺指數和抑制率肺指數=肺重(g)/體重(g) XlOO ；肺指 數抑制率(％) =1病毒對照組平均肺指數-試驗組平均肺指數1/病毒對照組平均肺指 數X100%。實驗表明，各劑量組對流感病毒FM1株所致肺病變有明顯抑制作用，與病毒對 照組比較差異有顯著性(P < 0. 05、P < 0. 01)，結果見表3。表3對流感病毒FM1致小鼠肺炎的影響(η = 10) ⑴與正常對照組比較，P < 0. 01 ；(2)與病毒對照組比較，P < 0. 05，⑶P < 0. 01⑵(2)、對流感病毒FM1感染小鼠的死亡保護作用取小鼠120隻，體重(15 士 1) g，按表4隨機分成6組，每組20隻，除正常對照組外， 其餘以30倍LD5tl流感病毒靜脈注射，每隻0. 05ml。給藥組按表4劑量，於感染前Id開始 靜脈注射給藥，每天1次，連續5d，正常對照組同法給等容積生理鹽水，陽性對照採用病毒 唑注射液。從感染病毒之日起連續觀察14d，逐日記錄動物症狀及死亡數。按以下公式計算 死亡保護率(％ )、延長生命率(％ )死亡保護率(％ )=(病毒對照組死亡率-試驗組死 亡率)X 100%;延長生命率(％) =1試驗組平均存活天數-對照組平均存活天數1/對照 組平均存活天數X 100%。實驗結果，與病毒對照組比較，熊總膽酸注射劑能明顯延長感染 小鼠的平均存活天數，提高死亡保護率(P < 0. 05，P < 0. 01)，對流感病毒FM1感染小鼠具 有死亡保護作用，表明熊總膽酸注射劑對小鼠具有明顯的體內抗病毒作用。結果見表4。表4對小鼠流感病毒FM1毒株感染的死亡保護作用 ⑴與病毒對照組比較，P < 0. 05 ； (2)P < 0. 014、止咳化痰作用研究(1)、止咳作用取昆明種小鼠100隻，隨機分為5組，每組20隻。實驗前小鼠禁食不禁水12h，然 後各組小鼠按表5劑量給藥，1次/d，共5d，其中正常對照組給予等體積蒸餾水，陽性對照採 用磷酸可待因注射液。末次給藥後lh，將小鼠放入固定容器中，並使小鼠接受恆壓氨水刺激 至預定時間引咳，氨霧刺激時間的對數間距為0. 1，刺激停止後立即取出小鼠，觀察Imin內 咳嗽次數。用序貫法(上下法)求出引起半數小鼠咳嗽的噴霧時間(EDT5tl),並計算R值， 若R值大於130%，說明藥物有止咳作用；若R值大於150%，則說明有顯著止咳作用。實驗 結果表明熊總膽酸注射劑各劑量組R值均大於130%，且R值隨劑量的增加而增大。見表 5。表5熊總膽酸注射劑的止咳作用 (2)、化痰作用取SD大鼠75隻，隨機分為5組，每組15隻。實驗前大鼠禁食不禁水12h，用烏拉 坦腹腔注射麻醉後，仰位固定，剪開頸中部皮膚，分離出氣管，在甲狀軟骨下緣上中兩軟骨 環之間用注射針尖扎一小孔，然後向氣管內向心方向插入內徑0. 8mm玻璃毛細管一根，使 毛細管剛好接觸氣管底部表面，以吸取氣管後部之痰液。記錄給藥前2h的正常分泌量，然 後按表6劑量靜脈注射給藥，其中正常對照組給等體積蒸餾水，陽性對照採用鹽酸溴己新 注射液，再觀察給藥後2h內痰液分泌量，以考察藥物的化痰作用。結果表明熊總膽酸注射 劑各劑量組給藥後排痰量與給藥前比較，差異具有統計學意義(P < 0. 05或P < 0. 01)，而 正常對照組給藥前後無顯著性差異。見表6。表6熊總膽酸注射劑的化痰作用 ⑴給藥後與給藥前比較，P < 0. 05 ； (2)P < 0. 015、保肝利膽作用研究(1)、熊總膽酸注射劑對大鼠四氯化碳急性肝損傷模型保護作用取SD大鼠90隻，雌雄各半，隨機分6組，每組15隻。造模方法為正常組腹腔注 射等容量的生理鹽水，陽性對照採用甘利欣注射液，其餘各組注射40% CCl4溶液(橄欖油 溶解)，每周給2次，共計15天。結果表明，熊總膽酸注射劑等各劑量組的ALT、AST水平較之模型組均明顯降低(P < 0. 05，P < 0. 01)。見表7。表7熊總膽酸注射劑對模型大鼠血清ALT和AST的影響(〒土 ，n = 15) ⑴與正常對照組比較，P <0.01 ；(2)與模型組比較，P < 0. 01，(3)P < 0. 05。(2)、熊總膽酸注射劑對大鼠異硫氰酸-1-萘酯急性黃疸型肝損傷模型保護作用取SD雄性大鼠90隻，隨機分6組，每組15隻。異硫氰酸萘酯以橄欖油溶解。 正常組和模型組腹腔注射等容量的生理鹽水，陽性對照採用茵桅黃注射液，熊總膽酸注射 劑等各組腹腔注射給藥連續7天，每日1次。結果表明，與模型組相比，熊總膽酸注射劑各 劑量組均可明顯降低TBIL、DBIL和IBIL的水平(P < 0. 05，P < 0. 01)，並存在一定量效關 系。見表8。表8痰熱清對模型大鼠TBIL、DBIL和IBIL的影響(〒±s,n= 15) ⑴與正常對照組比較，P <0.01 ；(2)與模型組比較，P < 0. 01，(3)P < 0. 05(3)、熊總膽酸注射劑對大鼠膽汁流量的促進作用取體重180 220g雄性大鼠75隻，隨機分為15組。實驗前12h禁食不禁水。實 驗時每鼠以水合氯醛0. 60mg/kg腹腔注射麻醉後，仰位固定於固定板上，沿腹正中線切開 2cm，打開腹腔，在十二指腸降部腸繫膜中找到白色有韌性的膽管，在其下穿2根絲線，結紮 乳頭部，向肝臟方向作「V」形切口，插入塑料管，用小燒杯收集膽汁。先收集30min膽汁，然 後各組大鼠由十二指腸按表9給予藥物，正常對照組注入等容量生理鹽水，陽性對照採用 精氨酸阿斯匹林。給藥後每隔30min收集膽汁1次，共3次，記錄膽汁流量，計算給藥後膽 汁流量增加百分率。結果顯示，與給藥前比較，熊總膽酸注射劑各劑量組均能明顯提高膽汁 流量，差異有顯著性意義P <0.05。提示熊總膽酸注射劑具有增加膽汁流量的作用。見表 9。表9熊總膽酸注射劑對大鼠膽汁流量的影響(〒±s,n = 15) (1)各組與給藥前比較 P < 0. 01，(2)P < 0. 05。


圖1為本發明熊總膽酸提取物熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸含量測定色譜2為本發明熊總膽酸注射劑熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸含量測定色譜圖含量測定採用HPLC-ELSD 以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以0. 05%三氟乙 酸為流動相 A(t = Omin, c = 50% ) (t = IOmin, c = 0)，乙腈為流動相 B(t = Omin, c = 50% ) (t = IOmin, c = 100% )，梯度洗脫。其中，保留時間4. 6分鐘處為熊去氧膽酸，保留時間6. 4分鐘處為鵝去氧膽酸。
具體實施例方式以下通過實施例詳細說明本發明熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑的製備方法，但 並不用於限定本發明的保護範圍。實施例1.熊膽粉總膽酸提取物的製備取熊膽粉lOOOg，加入5倍量50 %乙醇和熊膽粉量10 %的活性炭，攪拌加熱回流提 取0. 5小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮液加水稀釋至藥材8倍量得到稀釋藥液，加 入藥液量10%的固體氫氧化鈉，攪拌溶解，90°C下加熱水解16小時。水解液攪拌下加入2M 鹽酸調節pH值至1. 0，析出沉澱，濾過，取沉澱物，用水洗至中性，100°C乾燥，粉碎，得粗品 496g。將粗品中加入粗品量10%的活性炭，混合均勻，加粗品5倍量乙酸乙酯回流提取2次，
12每次0. 5小時，趁熱濾過，合併提取液，濾液回收乙酸乙酯至粗品2倍量，0°C靜置24小時； 濾過，得沉澱245g，沉澱加4倍量乙醇溶解得到藥液，加入藥液量1 %的活性炭攪拌脫色，濾 過，醇液濃縮至490ml，靜置，析出白色結晶，濾過，結晶乾燥，粉碎，即得熊膽粉提取物，收率 為24.6%。其中熊去氧膽酸的含量為78.8%，鵝去氧膽酸的含量為14.5%。實施例2.熊膽粉總膽酸提取物的製備取熊膽粉lOOOg，加入10倍量75%乙醇和熊膽粉量15%的活性炭，攪拌加熱回流 提取1. 5小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮液加水稀釋至藥材10倍量得到稀釋藥 液，加入藥液量15%的固體氫氧化鈉，攪拌溶解，105°C下加熱水解20小時。水解液攪拌下 加入8M鹽酸調節pH值至1. 5，析出沉澱，濾過，取沉澱物，用水洗至中性，20°C真空乾燥，粉 碎，得粗品514g。將粗品中加入粗品量15%的活性炭，混合均勻，加粗品10倍量乙酸乙酯回 流提取3次，每次1小時，趁熱濾過，合併提取液，濾液回收乙酸乙酯至粗品3倍量，20°C靜 置24小時；濾過，得沉澱256g，沉澱加6倍量乙醇溶解得到藥液，加入藥液量3%的活性炭 攪拌脫色，濾過，醇液濃縮至768ml，靜置，析出白色結晶，濾過，結晶乾燥，粉碎，即得熊膽粉 提取物。收率為22.2%。其中熊去氧膽酸的含量為80.9%，鵝去氧膽酸的含量為13.2%。實施例3.熊膽粉總膽酸提取物的製備取熊膽粉lOOOg，加入15倍量95%乙醇和熊膽粉量20%的活性炭，攪拌加熱回流 提取2小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮液加水稀釋至藥材12倍量得到稀釋藥液， 加入藥液量20%的固體氫氧化鈉，攪拌溶解，120°C下加熱水解24小時。水解液攪拌下加入 12M鹽酸調節pH值至2，析出沉澱，濾過，取沉澱物，用水洗至中性，-45°C冷凍乾燥，粉碎，得 粗品502g。將粗品中加入粗品量20%的活性炭，混合均勻，加粗品15倍量乙酸乙酯回流提 取4次，每次1. 5小時，趁熱濾過，合併提取液，濾液回收乙酸乙酯至粗品5倍量，30°C靜置 24小時；濾過，得沉澱252g，沉澱加8倍量乙醇溶解得到藥液，加入藥液量5%的活性炭攪 拌脫色，濾過，醇液濃縮至1008ml，靜置，析出白色結晶，濾過，結晶乾燥，粉碎，即得熊膽粉 提取物。收率為19.6%。其中熊去氧膽酸的含量為82.0%，鵝去氧膽酸的含量為12.8%。實施例4.熊膽粉總膽酸注射劑的製備取熊膽粉總膽酸提取物20g(以熊去氧膽酸計)，加注射用水500ml，用10%氫氧 化鈉溶液調節PH值至7. 5，加熱使溶解完全，放涼，補加水至1000ml，加入3g針用活性炭， 85°C保溫脫色30分鐘，鈦棒過濾，微孔濾膜過濾，放涼，灌裝(10ml/支)，封口，滅菌，即得。以上對本發明所提供的熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑的製備方法以及製藥用 途進行了詳細介紹。需要指出的是，具體實施方式
所描述的內容是為更好的實施本發明而 優選的實施方式，本發明的保護範圍不限於上述實施方式所述的技術方案，而應以權利要 求書所述的實質內容為準，任何可能的工藝上的改變只要不脫離本發明權利要求的實質內 容均屬於本發明所保護的範圍。
權利要求
一種熊膽粉總膽酸提取物的製備方法，其特徵在於包括如下步驟a、乙醇提取將熊膽粉與乙醇和活性炭混合，加熱沸騰回流提取0.5 2小時；b、皂化反應將乙醇提取液回收乙醇至無醇味，濃縮液加水稀釋，再加固體氫氧化鈉，攪拌溶解，在90 120℃下進行皂化反應，反應時間為16 24小時；c、中和反應皂化反應結束後加入鹽酸調節pH值至1 6，析出沉澱，過濾得到熊膽粉提取物粗品；d、粗品乾燥熊膽粉提取物粗品採用100℃以下溫度乾燥；e、乙酸乙酯提取將粗品乾燥後粉碎，加入活性炭和乙酸乙酯回流提取2 4次，提取時間為0.5 1.5小時；f、乙酸乙酯結晶將步驟e中乙酸乙酯提取液合併，回收乙酸乙酯，0 30℃放置，析出結晶；g、乙醇結晶將乙酸乙酯結晶物加乙醇溶解製得溶液，加入活性炭脫色，過濾，醇液濃縮，析出結晶，過濾，結晶乾燥即得。
2.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟a中，所述乙醇濃度為 50% -95%，乙醇用量為熊膽粉重量的5-15倍，活性炭用量為熊膽粉重量的10% -20%。
3.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟b中，所述濃縮液加水稀釋至 熊膽粉重量的8-12倍，氫氧化鈉重量為稀釋藥液重量的10% -20%。
4.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟c的中和反應中，所述鹽酸濃 度為 2M-12M。
5.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟e中，所述活性炭用量為粗品 用量的10% -20%，乙酸乙酯用量為粗品用量的5-15倍。
6.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟f中增加用乙酸乙酯重結晶的步驟。
7.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟f中，乙酸乙酯提取液合併溶 液量為粗品重量的2-8倍。
8.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟g中，加入乙醇的用量為乙酸 乙酯結晶物重量的4-8倍，加入活性炭為溶液重量的1 % -5%，醇液濃縮的液量為乙酸乙酯 結晶物重量的2-4倍。
9.根據權利要求1-8任一項所述方法製得的熊膽粉總膽酸提取物製成注射劑的方法， 包括如下步驟將製得的熊膽粉總膽酸提取物加注射用水，用氫氧化鈉溶液調節PH值至7-8，補加注 射用水後用活性炭脫色，脫炭過濾，精濾，放涼，灌裝，封口，滅菌即得。
10.根據權利要求1-8任一項所述方法製得的熊膽粉總膽酸提取物及權利要求9所述 方法製備的注射劑在製備抗菌、抗病毒、止咳化痰和保肝利膽藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及一種熊膽粉總膽酸提取物及其注射劑的製備方法和用途。本發明先將熊膽粉用乙醇回流提取，提取液回收乙醇濃縮後，再進行鹼水解、中和酸化、乙酸乙酯提取、乙酸乙酯結晶、乙醇結晶，得熊膽粉總膽酸提取物。本發明還提供了以熊總膽酸提取物為原料製成注射劑的方法。本發明方法製備的熊膽粉總膽酸提取物及其注射製劑可用於製備抗菌、抗病毒、止咳化痰和保肝利膽的藥物。本發明既能夠提高熊膽粉總膽酸提取物中熊去氧膽酸提取收率和純度，同時降低鵝去氧膽酸含量的方法，使熊膽粉總膽酸提取物中熊去氧膽酸的含量不低於70％，鵝去氧膽酸含量不高於20％。本發明不但熊總膽酸提取物中熊去氧膽酸含量較高，而且收率高，一般在18％以上。
文檔編號A61K9/08GK101890048SQ20091014324
公開日2010年11月24日 申請日期2009年5月21日 優先權日2009年5月21日
發明者薛東升 申請人:上海凱寶藥業股份有限公司