生物利用度提高的包含難溶性藥物的微球及其製備方法
2023-05-18 02:58:36
專利名稱：生物利用度提高的包含難溶性藥物的微球及其製備方法
生物利用度提高的包含難溶性藥物的微球及其製備方法
技術領域：
本發明涉及包含難溶性藥物的微球、包含所述微球的藥物組合物以及製備所述微球的方法。更特別地，本發明涉及難溶性藥物的生物利用度提高的包含所述難溶性藥物的微球，包含所述微球的口服製劑以及製備所述微球的方法。
背景技術：
由於大多數新開發的藥物是難溶性的，所以需要提高溶解度或吸收。增加現有的難溶性藥物的溶解度的方法包括化學修飾和物理修飾。所述化學修飾包括鹽加成、水性前藥法等，所述物理修飾包括修飾粒度或晶型、形成多晶型、使用表面活性劑或環糊精形成複合物、使用分散劑進行藥物分散等。為了增加藥物的溶解度或吸收，已提出了諸如微粉化、非晶化、形成固體分散體等的藥物製劑方法，其中形成固體分散體已作為將藥物分散在非活性載體中的方法被廣泛檢驗。已提出了數種方法作為固體分散體的製備方法，特別是溶劑法是一種實用的方法。根據所述溶劑法，將藥物和水性聚合物載體溶解於諸如有機溶劑等的溶劑中並通過蒸餾除去所述溶劑，或者將藥物溶解於溶劑中並且分散在載體中，並通過蒸餾除去所述溶劑以製備固體分散體。對於所述溶劑法，第3-1288號日本專利申請和第3(^8404號日本專利中報導將難溶性藥物硝苯地平和聚合物基質例如聚乙烯吡咯烷酮、羥甲基纖維素、甲基纖維素等溶解於有機溶劑中，將該溶液噴霧乾燥以獲得微粒形式的固體分散體，其中乳糖等與水性聚合物例如羥丙基纖維素組合。難溶性藥物非諾貝特具有非常低的水溶性。非諾貝特(244-(4-氯苯甲醯基)苯氧基]-2-甲基丙酸1-甲基乙基酯)是貝特類藥物之一。已付出了許多努力來改善非諾貝特製劑，特別是非諾貝特的生物利用度。第4，895，726號和第5，880，148號美國專利公開了與表面活性劑共微粉化的非諾貝特。數個專利公開了微粉化的非諾貝特和特定聚合物添加劑或表面活性劑添加劑的特定製劑，而其它專利公開了非諾貝特乳劑和混懸劑。第200302M059號美國專利公開了由具有低水溶性的活性藥物成分和可升華載體的固體溶液形成的微粉化顆粒，包含所述顆粒的給藥系統及其製備方法。非諾貝特的微粉化或表面活性劑和微粉化非諾貝特的組合可在一定程度上增加非諾貝特的生物利用度，因此減少其給藥量同時維持服藥時的生物利用度。但是，由於非諾貝特的實際生物利用度仍然較低並且表面活性劑的使用可能引起對人體的毒性，因此仍然需要進行改進。發明概述本發明提供能夠顯著增加難溶性藥物的水溶性從而增加其生物利用度的技術。本發明的一方面提供固體分散體形式的包含難溶性藥物的微球，其中通過噴霧乾燥使所述難溶性藥物以非晶體形式分散在水性聚合物載體中。
另一方面提供包含所述含有難溶性藥物的微球的口服製劑。另一方面提供製備包含難溶性藥物的微球的方法，其包括a)將水溶性聚合物載體和難溶性藥物溶解於水和有機溶劑中以製備混合溶液；和b)將所述混合溶液噴霧乾燥。
圖1是實驗例1的溶出度結果圖。圖2是實施例5的微球的SEM照片。圖3是實驗例2的溶出度結果圖。圖4是實驗例3的溶出度結果圖。圖5是實驗例4的溶出度結果圖。圖6是實驗例5的溶出度結果圖。圖7是實驗例6的溶出度結果圖。
具體實施方式本發明提供固體分散體形式的包含難溶性藥物的微球，其中通過噴霧乾燥使難溶性藥物以非晶體形式分散在水性聚合物載體中。本發明還提供製備所述包含難溶性藥物的微球的方法，其包括將水溶性聚合物載體和難溶性藥物溶解於水和有機溶劑中以製備混合溶液；和將所述混合溶液噴霧乾燥。本發明將水和有機溶劑一起使用以完全溶解難溶性藥物和水溶性聚合物，並且通過將所述完全溶解的溶液噴霧乾燥獲得微球。具體而言，在本發明的包含難溶性藥物的微球中，通過噴霧乾燥混合溶液(其中水溶性聚合物載體和難溶性藥物溶解於水和有機溶劑中)使所述難溶性藥物以非晶體形式分散在所述水溶性聚合物載體中。本發明的一方面涉及固體分散體形式的包含難溶性藥物的微球，其中所述難溶性藥物以非晶體形式分散在水溶性聚合物載體中，所述微球通過將包含所述難溶性藥物、所述水溶性聚合物載體、水和有機溶劑的混合溶液噴霧乾燥獲得。所述混合溶液可為所述水溶性聚合物載體溶解於水中的水溶液和所述難溶性藥物溶解於所述有機溶劑中的溶液的混合溶液；或為其中所述難溶性藥物溶解於所述水溶性聚合物載體溶解於所述有機溶劑和水的混合溶劑中的溶液中的混合溶液。所述難溶性藥物的水溶性可低於l-10mg/ml。一個實例包括對應於BCS (生物藥劑學分類系統)IV類的藥物，具體的實例可包括但不限於阿昔洛韋、別嘌醇、胺碘酮、硫唑嘌呤、貝那普利、骨化三醇、坎地沙坦、依普羅沙坦、卡比多巴/左旋多巴、克拉黴素、氯氮平、 醋酸去氨加壓素、雙氯芬酸、依那普利、法莫替丁、非洛地平、非諾貝特、芬太尼、非索非那定、福辛普利、呋塞米、格列本脲、莨菪鹼、丙咪嗪、伊曲康唑、左甲狀腺素、阿託伐他汀、洛伐他汀、美克洛嗪、甲地孕酮、巰嘌呤、美託拉宗、莫米松、萘丁美酮(nabumetaone)、奧美拉唑、 帕羅西汀、普羅帕酮、喹那普利、辛伐他汀、西羅莫司、他克莫司、替扎尼定以及它們的組合。 更具體而言，其可包括阿託伐他汀、辛伐他汀、坎地沙坦、依普羅沙坦、非諾貝特、西羅莫司、 他克莫司等。所述水溶性聚合物可包括任何載體，只要它常用於提高難溶性藥物的溶解度。根據本發明的一個實施方案，其可包括藥學可接受的水溶性聚合物，特別是選自以下的一種或多種羥丙基甲基纖維素(HPMC，例如重量平均分子量約10，000-1，500，000的那些)、聚乙二醇(PEG，例如重量平均分子量為3，000-9, 000的那些)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP，例如重量平均分子量為2，500-2，500，000的那些)、纖維素及其組合，更特別的是HPMC。所述難溶性藥物以非晶體形式分散於所述水溶性聚合物載體中。優選地，所述羥丙基甲基纖維素(HPMC)可為其中約16. 5_30%，特別是約觀-30% 的羥基被甲氧基化，並且約4-32%，特別是約7-12%的羥基被羥基丙基取代的那些。所述 HPMC 的平均分子量可為 10，000-1, 500, 000g/mol。根據本發明的一個實施方案，所述微球中難溶性藥物和水溶性聚合物載體的重量比可為1 1-1 15，優選1 1-1 10，最優選1 1-1 5。如果所述水溶性聚合物載體少於1 1，則藥物可能不會充分地分散並且因此可能不會提高溶解度。而且，如果其超過了 1 15，所述水溶性載體引起粘度增加，因此對進行噴霧乾燥帶來問題，而且可能不能再增加溶解度。根據一個實施方案，所述微球還可包含選自以下的至少一種崩解劑、穩定劑、 藥學可接受的潤滑劑、遮光劑、著色劑、藥學可接受的賦形劑等，特別是滑石。以包含難溶性藥物、水溶性聚合物載體、水和有機溶劑的混合溶液的總重計，所述賦形劑的含量可為 0. Ol-IOwt %，優選l-5wt%。如果該含量低於上述範圍，則可能不能獲得令人滿意的賦形劑功能，如果其超過了上述範圍，則其可能會破壞微球的性質。本發明的包含以非晶體形式分散的難溶性藥物的微球可具有均勻的球體大小，並且粒度(平均粒徑)可為500 μ m或更小，特別是350 μ m或更小，更特別地是100 μ m或更小。通過將所述難溶性藥物溶解於溶劑中，可使所述藥物非晶化並且以該狀態分散於所述載體中，因此可提高溶解度和吸收。例如，所述微球的平均粒徑可為Iy m-500 μ m，特別是 10 μ m-350 μ m,更特另Ij地是 10 μ m-100 μ m。本發明提供製備微球的方法，其包括a)將難溶性藥物和水溶性聚合物載體溶解於有機溶劑和水中以製備混合溶液；和b)將所述混合溶液噴霧乾燥。根據本發明，通過將其中溶解了所述難溶性藥物和水溶性聚合物的混合溶液噴霧乾燥可順利地形成相對為球形的微球，而無需使用用於形成顆粒的種子。並且，通過同時使用有機溶劑和水，可使難溶性藥物均勻地分散在水溶性聚合物載體中，而無需使用通常用於提高溶解度並且可能對人體產生毒性的表面活性劑。在微球的製備中，為了獲得球形的均勻的顆粒，通常通過對種子進行包衣來製備顆粒。但是，如果種子或顆粒包含於溶液中，會難以在均勻分散的同時進行噴霧乾燥，因此可能不能確保混合的均勻性。另外，如果使用混合均勻性應用流化床包衣法，可能要求大量的時間和成本。因此，為了不使用種子而形成相對為球形的均勻的顆粒，可能需要在噴霧乾燥時適當地控制處理條件。在製備步驟中使用的難溶性藥物和水溶性聚合物載體的類型和含量如上文所述。所述有機溶劑可選自(^-(；直鏈醇或支鏈醇(例如乙醇、甲醇等)、二氯甲烷或它們的組合，優選乙醇。用有機溶劑溶解難溶性藥物並且用水溶解所述水溶性聚合物載體後可將所述有機溶劑和水混合，或者以水和有機溶劑的混合溶劑(共溶劑)的形式將它們用於溶解所述水溶性聚合物載體和所述難溶性藥物。根據本發明的一個實施方案，所述有機溶劑和水的重量比可為0.5 1-5 1，優選1 1-3 1(有機溶劑的重量水的重量)。如果所述有機溶劑的含量大於上述範圍，則所述水溶性聚合物載體可能不能溶解。而且，如果水的含量大於上述範圍，則藥物可能會沉澱。如果所述載體沒有完全溶解於所述溶劑中， 可能由於高粘度而難以進行噴霧，並且可能不能獲得均勻的顆粒。但是，如果在本發明中同時使用水和所述有機溶劑，則所述水溶性聚合物載體和所述難溶性藥物可完全溶解於溶劑中並且因此有助於噴霧乾燥。在包含所述難溶性藥物、所述水溶性聚合物載體、所述有機溶劑和水的混合溶液中，所述難溶性藥物和所述水溶性聚合物載體的濃度可為l_20wt %，特別是3-15wt %，更特別地是5-10wt%。如果所述藥物和所述聚合物的濃度低於lwt%，，則噴霧乾燥時間可能變長，如果其超過了 20wt%，則可能由於高粘度而無法進行噴霧乾燥。根據一個實施方案，步驟a)可包括將所述水溶性聚合物載體溶解於水中以製備所述聚合物載體的水溶液，將所述難溶性藥物溶解於有機溶劑中以製備所述難溶性藥物的溶液，並且將所述聚合物載體的水溶液和所述難溶性藥物的溶液混合以製備所述混合溶液。或者，其可包括將所述水溶性聚合物載體溶解於水和有機溶劑的共溶劑中以製備所述聚合物載體的溶液，並且將所述難溶性藥物溶解於所述聚合物載體的溶液中以製備混合溶液。在步驟b)中，將步驟a)的混合溶液噴霧乾燥，並且可使用噴嘴型噴霧乾燥器或霧化器型噴霧乾燥器等進行所述噴霧方法。在噴嘴型噴霧乾燥中，為了形成均勻且具有適當大小的顆粒，噴射溫度可為 80-120°C，特別是90-110°C，並且噴射速度可為l-10ml/min，特別是3_5ml/min。在霧化器型噴霧乾燥中，為了形成均勻且具有適當大小的顆粒，噴霧溫度可控制在 80-120°C，特別是 90-110°C。而且，噴霧速度可為 3000_5000rpm，特別是;3500-4500rpm， 所述混合溶液的噴射速度可為lO-lOOml/min，特別是40-70ml/min。如果使用霧化器型噴霧乾燥器，則可製備均勻的顆粒並且因此有利於提高溶出度。根據本發明的一個實施方案，在所述混合溶液的步驟a)噴霧之前，可向所述混合溶液中加入包括滑石在內的賦形劑。以所述混合溶液的總重計，所述賦形劑的含量可為 0. Ol-IOwt %，優選l-5wt%。如果所述賦形劑的含量低於上述範圍，則可能不能獲得令人滿意的賦形劑功能，如果其超過了上述範圍，則可能破壞微球的性質。同時，本發明的另一方面涉及包含所述微球的口服製劑。根據本發明的一個實施方案，將所述微球製備成口服製劑。而且，可向所製備的微球中加入藥學可接受的賦形劑、崩解劑、粘合劑、著色劑、穩定劑、甜味劑、潤滑劑等以製備散劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑等。優選的劑型是片劑。如果將所述微球製備成片劑形式，可根據製備速溶口服片或包衣片形式的片劑的常用方法包含包衣劑和/或增塑劑。所述難溶性藥物的劑量可根據藥物的類型、疾病的類型和嚴重度、患者的年齡等而變化。本發明的包含難溶性藥物的微球是固體分散體形式的微球，其中所述難溶性藥物以非晶體形式分散於水溶性聚合物載體中。與使用微粉化的難溶性藥物來提高溶解度的劑型相比，所述微球可顯著提高溶解度。並且，根據本發明，可不使用種子製備球形的噴霧乾燥的微球，並且不使用可能對人體產生毒性的表面活性劑來提高溶解度。根據本發明的一個實施方案，提供了包含含有難溶性藥物的微球的組合物，在所述微球中，非諾貝特以非晶體形式分散於水溶性聚合物載體中，所述微球通過同時使用有機溶劑和水進行噴霧乾燥製備。具體而言，所述微球包含的所述非諾貝特和所述水溶性聚合物載體的重量比可為1 1-1 15，優選1 1-1 10，最優選1 1-1 5，由此顯示出以下溶出模式。具體而言，當根據第9次修訂版的韓國藥典的第二種方法(槳法100轉每分鐘，三蒸水500ml)進行試驗時，其可具有以下溶出模式10wt%或更多、優選20wt%或更多的所包含的非諾貝特在5分鐘內溶出，30wt%或更多、優選50wt%或更多在15分鐘內溶出，並且40wt %或更多、優選70wt %或更多在30分鐘內溶出。本發明的包含難溶性藥物的微球可提高難溶性藥物的水溶性並由此提高所述難溶性藥物的生物利用度。實施例下文中參考以下實施例詳細說明本發明。儘管結合實用的示例性實施方案描述本發明，但是應理解可在所附權利要求的精神和範圍內進行各種修改和改變。除了上文所說明的實施方案，所附權利要求還包括各種實施方案。實施例1將IOg HPMC(四10系列，ShinEtsu Chemical，下文中相同)與90g水混合併攪拌以製備完全溶解的10% w/w溶液。將2g非諾貝特與200g乙醇混合併攪拌以使其完全溶解。 將兩種溶液混合併再次攪拌以製備無沉澱的溶液。非諾貝特和HPMC的重量比為1 5(非諾貝特的重量HPMC的重量)。以90°C的噴射溫度和3mL/min的噴射量用噴嘴型噴霧乾燥器(小型噴霧乾燥器 B-290, Buchi)將溶液噴霧乾燥，以獲得平均粒度為50 μ m的相對為球形的包含非諾貝特的微球。實施例2將450g HPMC和2550g水混合併攪拌以製備完全溶解的15% w/w溶液。將90g非諾貝特與^OOg乙醇混合併攪拌以使其完全溶解。將兩種溶液混合併再次攪拌以製備無沉澱的溶液。非諾貝特和HPMC的重量比為1 5。以110°C的噴霧溫度、45mL/min的噴射量和3500rpm的霧化器速度用霧化器型噴霧乾燥器(DJE-003R，Donjin Spray Drying Technology)將溶液噴霧乾燥，以獲得 50 μ m 大小的相對為球形的包含非諾貝特的微球。比較例1使用晶體非諾貝特替代將其製備成微球。比較例2僅使用乙醇或者僅使用水作為溶劑，使用與實施例2相同的非諾貝特、HPMC和溶劑量，用霧化器型噴霧乾燥器製備包含非諾貝特的微球。但是，HPMC和非諾貝特不能溶解於僅有的乙醇或僅有的水中，因此不能製備微球。實驗例1對於實施例1、實施例2和比較例1獲得的微球，在以下條件下進行溶出度試驗，結果顯示於圖1。溶出度試驗條件如下
-試驗方法第9次修訂版的韓國藥典的第二種方法(槳法)-儀器LABFINE溶出度測定儀(型號 DST-810，Wrap Fine Co. Ltd)-溶出溶液500mL水-溫度37士 0.5 °C-槳轉速IOOrpm在體外溶出度試驗中，與晶體的難溶性藥物(比較例1)相比，具有均勻分布的包含難溶性藥物的微球(實施例1和幻表現出出色的溶出度。實施例3按照與實施例2相同的方法以表1中描述的組成比例將以下成分混合以製備淺黃色、澄清的混合溶液，將其靜置使氣泡消失。表1
權利要求
1.包含難溶性藥物的微球，其包含水溶性聚合物載體和難溶性藥物，其中通過將所述水溶性聚合物載體和所述難溶性藥物的混合溶液噴霧乾燥使所述難溶性藥物以非晶體形式分散在所述水溶性聚合物載體中，在所述混合溶液中所述水溶性聚合物載體和所述難溶性藥物溶解於水和有機溶劑的混合溶劑中。
2.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述微球不包含種子。
3.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述水溶性聚合物載體是選自以下的一種或多種羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、纖維素聚合物以及它們的組合。
4.權利要求3的包含難溶性藥物的微球，其中所述水溶性聚合物載體是羥丙基甲基纖會佳·ο
5.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述難溶性藥物和所述水溶性聚合物的重量比是1 1-1 15。
6.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述有機溶劑選自C1-C4直鏈醇或支鏈醇、二氯甲烷以及它們的組合。
7.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述有機溶劑和水的重量比是 0. 5 1-5 1。
8.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述難溶性藥物是選自以下的一種或多種阿昔洛韋、別嘌醇、胺碘酮、硫唑嘌呤、貝那普利、骨化三醇、坎地沙坦、依普羅沙坦、卡比多巴/左旋多巴、克拉黴素、氯氮平、醋酸去氨加壓素、雙氯芬酸、依那普利、法莫替丁、非洛地平、非諾貝特、芬太尼、非索非那定、福辛普利、呋塞米、格列本脲、莨菪鹼、丙咪嗪、伊曲康唑、左甲狀腺素、阿託伐他汀、洛伐他汀、美克洛嗪、甲地孕酮、巰嘌呤、美託拉宗、莫米松、萘丁美酮、奧美拉唑、帕羅西汀、普羅帕酮、喹那普利、辛伐他汀、西羅莫司、他克莫司、替扎尼定以及它們的組合。
9.權利要求1的包含難溶性藥物的微球，其中所述微球的平均粒徑為500μπι或更小。
10.權利要求1-9中任一項的包含難溶性藥物的微球，其中所述混合溶液是所述聚合物載體的水溶液和所述難溶性藥物的溶液的混合溶液，在所述聚合物載體的水溶液中，所述水溶性聚合物載體溶解於水中，在所述難溶性藥物的溶液中，所述難溶性藥物溶解於所述有機溶劑中；或者所述難溶性藥物溶解於所述聚合物載體的溶液中的混合溶液，在所述聚合物載體的溶液中，所述水溶性聚合物載體溶解於所述有機溶劑和水的混合溶劑中。
11.口服製劑，其包含權利要求1-9中任一項的包含難溶性藥物的微球。
12.製備包含難溶性藥物的微球的方法，其包括a)將水溶性聚合物載體和難溶性藥物溶解於水和有機溶劑中以製備混合溶液；和b)將所述混合溶液噴霧乾燥。
13.權利要求12的方法，其中不使用種子和表面活性劑。
14.權利要求12的方法，其中所述水溶性聚合物載體是選自以下的一種或多種羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、纖維素聚合物以及它們的組合。
15.權利要求14的方法，其中所述水溶性聚合物載體是羥丙基甲基纖維素。
16.權利要求12的方法，其中所述難溶性藥物和所述水溶性聚合物載體的重量比是 1:1-1: 15。
17.權利要求12的方法，其中所述有機溶劑選自C1-C4直鏈醇或支鏈醇、二氯甲烷以及它們的組合。
18.權利要求12的方法，其中所述有機溶劑和水的重量比是0.5 1-5 1。
19.權利要求12的方法，其中所述難溶性藥物是選自以下的一種或多種阿昔洛韋、 別嘌醇、碘胺酮、硫唑嘌呤、貝那普利、骨化三醇、坎地沙坦、依普羅沙坦、卡比多巴/左旋多巴、克拉黴素、氯氮平、醋酸去氨加壓素、雙氯芬酸、依那普利、法莫替丁、非洛地平、非諾貝特、芬太尼、非索非那定、福辛普禾U、呋塞米、格列本脲、莨菪鹼、丙咪嗪、伊曲康唑、左甲狀腺素、阿託伐他汀、洛伐他汀、美克洛嗪、甲地孕酮、巰嘌呤、美託拉宗、莫米松、萘丁美酮、奧美拉唑、帕羅西汀、普羅帕酮、喹那普利、辛伐他汀、西羅莫司、他克莫司、替扎尼定以及它們的組合。
20.權利要求12的方法，其中使用噴嘴型噴霧乾燥器以80-120°C的噴射溫度、I-IOml/ min的噴射速度進行b)噴霧乾燥，或者使用霧化器型噴霧乾燥器以80-120°C的噴霧溫度、 3000-5000rpm的噴霧速度和10-100ml/min的噴射速度進行b)噴霧乾燥。
21.權利要求12-20中任一項的方法，其中步驟a)包括將所述水溶性聚合物載體溶解於水中以製備所述聚合物載體的水溶液，將所述難溶性藥物溶解於有機溶劑中以製備所述難溶性藥物的溶液，以及將所述聚合物載體的水溶液和所述難溶性藥物的溶液混合以製備混合溶液；或者將所述水溶性聚合物載體溶解於水和有機溶劑的混合溶劑中以製備所述聚合物載體的溶液，以及將所述難溶性藥物溶解於所述聚合物載體的溶液中以製備混合溶液。
22.包含非諾貝特的微球，其包含水溶性聚合物載體和非諾貝特，其中通過噴霧乾燥使非諾貝特以非晶體形式分散在所述水溶性聚合物載體中，並且當根據第9次修訂版的韓國藥典的第二種方法(槳法100轉每分鐘，三蒸水500ml)進行試驗時，所述微球具有以下溶出模式10wt%或更多的所包含的非諾貝特在5分鐘內溶出，30wt%或更多在15分鐘內溶出， 並且40wt %或更多在30分鐘內溶出。
23.口服製劑，其包含權利要求22的包含非諾貝特的微球。
全文摘要
本文提供了生物利用度提高的包含難溶性藥物的微球、包含所述微球的口服製劑以及製備所述微球的方法。所述包含難溶性藥物的微球是通過噴霧乾燥方法使難溶性藥物以非晶體形式分散於水溶性高分子載體中的固體分散體，因此具有提高了難溶性藥物的生物利用度的優點。
文檔編號A61K47/38GK102458373SQ201080029072
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月27日 優先權日2009年5月27日
發明者李炫紀, 裵哲民, 金京熙, 黃俊碩, 黃守鍾 申請人:株式會社三養生物製藥