製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯的方法
2023-05-18 05:54:36
製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯的方法
【專利摘要】本發明涉及由巨大戟二萜醇或巨大戟二萜醇衍生物製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯的方法。
【專利說明】製備巨大戟二瞄醇-3-當歸酸醒的方法
[0001] 本發明提供了由巨大戟二聰醇製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法。 發明背景
[0002] 巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋W前已經被描述為可用於治療多種疾病，特別是光化 性角化病。該化合物可W從天然來源分離出，並且W相對小的量存在於大戟屬巧uphorbia) 植物家族中。然而，相關化合物巨大戟二聰醇可較大的量從天然來源中分離出。因此， 本發明提供了由巨大戟二聰醇開始製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法。
[000引發明簡述
[0004] 本發明提供了其中W含有至少一個酶輔助步驟的方法由巨大戟二聰醇合成巨大 戟二聰醇-3-當歸酸醋（本文還稱為"PEP005")的方法。
[0005] 在一項實施方案中，本發明提供了製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法，該方 法包括巨大戟二聰醇的醜化和任選地繼之W二醜化巨大戟二聰醇衍生物的脫醜化，其中至 少一個步驟是通過酶催化的。
[0006] 本發明提供了用於由巨大戟二聰醇製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的一步、兩步 或H步反應，其包括至少一個酶催化反應。
[0007] 本發明提供了製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法，該方法包括通過酶催化進 行的二醜化巨大戟二聰醇衍生物的脫醜化。
[0008] 本發明提供了如上所述的方法，其中二醜化化合物是巨大戟二聰醇-3,20-二當 歸酸醋。
[0009] 本發明提供了如上所述的方法，其中二醜化化合物在20位含有不同於當歸醜基 的醜基。
[0010] 本發明提供了如上所述的方法，其中20位醜基是R-C = 0-，且R選自取代或未取 代的Ci-Cw-焼基且其中焼基可W是直鏈或支鏈的、取代或未取代的C2-Cw-鏈帰基或者取 代或未取代的C4-C,-環焼基、取代或未取代的芳基或取代或未取代的雜芳基。
[0011] 本發明提供了化合物巨大戟二聰醇-3，20-二當歸酸醋和3-0-當歸醜 基-20-0-己醜基-巨大戟二聰醇，和在20位含有不同於當歸醜基的醜基的巨大戟二聰醇 化合物，例如如上所述的那些。本發明提供了所述化合物及其在如上所述的製備巨大戟二 聰醇-3-當歸酸醋的方法中作為中間體的用途。
[001引本發明提供了如上所述的方法，其中酶是來自皺落假絲酵母（Candida rugosa)的 脂酶A或脂酶B。
[0013] 本發明提供了如上所述的方法，其中反應在庚焼或MTBE中進行。
[0014] 本發明提供了如上所述的方法，其中溶劑是庚焼。
[0015] 本發明提供了如上所述的方法，其中反應在親核試劑的存在下進行。
[0016] 本發明提供了如上所述的方法，其中親核試劑是醇。
[0017] 本發明提供了如上所述的方法，其中醇選自1-下醇、1-戊醇、1-己醇和1-辛醇。
[0018] 本發明提供了如上文任一項所述的方法，其中親核試劑W低於約2. 5% v/v的濃 度存在。
[0019] 本發明提供了如上所述的方法，其中親核試劑W約1% v/v的濃度存在。
[0020] 本發明提供了如上文任一項所述的方法，其中酶是來自皺落假絲酵母的脂酶A，溶 劑是庚焼，親核試劑是約1 % v/v濃度的1-下醇、1-戊醇、1-己醇或1-辛醇。
[0021] 本發明提供了製備二醜化巨大戟二聰醇衍生物的方法，該方法包括在醜基供體的 存在下和任選在酶的存在下的巨大戟二聰醇的反應。
[0022] 本發明提供了如上所述的方法，其中醜基供體是當歸酸酢。
[0023] 本發明提供了如上所述的方法，其中醜基供體W 4當量加入。
[0024] 本發明提供了如上所述的方法，其中酶選自來自產鹼菌屬（Alcaligenes sp.)的 脂酶A、B、C、D、E或F，來自施氏假單胞菌（Pseudomonas S化tzeri)的脂酶，來自洋蔥假單 胞菌（Pseudomonas cepacia)的脂酶，來自皺落假絲酵母的脂酶A或B，來自番木瓜（Carica Papaya)的脂酶，來自沙口柏乾酪青黴（Penicillium camembertii)的脂酶，來自枯草芽抱 桿菌炬acillus subtilis)的蛋白酶C,來自英光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens)的 脂酶，來自洋蔥伯克霍爾德菌炬ur化olderia cepacia)的脂酶A和B，或無花果蛋白酶。
[0025] 本發明提供了如上所述的方法，其中酶是來自產鹼菌屬的脂酶A、C或E。
[0026] 本發明提供了如上所述的方法，其中反應在有機溶劑中進行。
[0027] 本發明提供了如上所述的方法，其中溶劑是庚焼或己焼。
[0028] 本發明提供了如上文任一項所述的方法，其中反應在升高溫度下進行。
[0029] 本發明提供了如上所述的方法，其中溫度為約5(TC。
[0030] 本發明提供了由巨大戟二聰醇製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法，該方法採 用醜基供體W酶催化的一步反應進行。
[0031] 本發明提供了如上所述的方法，其中反應採用當歸酸酢作為醜基供體。
[0032] 本發明提供了如上所述的方法，其中酶是水解酶來自番木瓜的脂酶、來自沙口柏 乾酪青黴的脂酶、來自枯草芽抱桿菌的蛋白酶C、來自洋蔥伯克霍爾德菌的脂酶A和B、無花 果蛋白酶或Lipobond洋蔥假單胞菌（Lipobond P. Cepacia)。
[0033] 本發明提供了如上所述的方法，其中酶是Lipobond洋蔥假單胞菌。
[0034] 本發明提供了如上所述的方法，其中溶劑是己膳。
[0035] 本發明提供了如上所述的方法，其中反應混合物含有表面活性劑。
[0036] 本發明提供了如上所述的方法，其中表面活性劑選自CTAC、TTAB、CPC、BZT、BAC、 DDAC'DDAB。
[0037] 本發明提供了如上所述的方法，其中表面活性劑是CPC或BZT。
[0038] 附圖簡述
[0039] 圖1 ;在庚焼中經由巨大戟二聰醇-3,20-二當歸酸醋初始合成的巨大戟二聰 醇-3-當歸酸醋單罐合成的總反應時間對比於％轉化的圖。
[0040] 發明詳述
[0041] 本發明在由巨大戟二聰醇製備巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋的方法中採用了酶。酶 能夠W特定方式催化化學反應。該特徵在本發明中證明是有價值的，因為不僅是巨大戟二 聰醇、而且還有巨大戟二聰醇-3-當歸酸醋具有多個立體中也，但是巨大戟二聰醇自身也 具有總共4個輕基。該些輕基中有兩個是仲醇，並且具有相當的反應活性。但是，在巨大戟 二聰醇-3-當歸酸醋中，僅巨大戟二聰醇的3-位應當被當歸醜基衍生化。另外，巨大戟二 聰醇還含有伯醇，其不應當與當歸醜基部分反應，但是伯醇的反應活性經常是非常活躍的。 而且還存在叔醇，其不意欲被衍生化。雖然將一個輕基而不是其它輕基特異性地衍生化在 化學上是困難的，但是現在已經證明酶能夠W特定方式催化該類反應。
[0042] 本發明提供了一步、兩步或H步反應的巨大戟二聰醇向巨大戟二聰醇-3-當歸酸 醋的水解酶催化選擇性醜化。
[0043] 本發明所追隨的反應是巨大戟二聰醇的水解酶催化選擇性醜化。水解酶催化化學 鍵的水解。它們可W按照它們所水解的化合物的類型進一步細分。脂酶催化脂質中的醋鍵 的水解，蛋白酶催化膚鍵等的水解。除了在水性介質中的選擇性水解外，水解酶可用於進行 在非水介質中的選擇性醜化。酶可W分離自天然來源，它們可W被衍生化為具有適宜的特 徵。
[0044] 優選地，酶對於巨大戟二聰醇祀標和所產生的終產物而言應當是特異性的，W可 接受的純度和產率提供終產物。同樣，酶在化學反應可接受的條件下應當是功能性的。通 常，該指有機溶劑和升高的溫度。同樣，對於商業產物規模而言，酶應當優選W較大的量供 應用於工業製藥用途。
[0045] 下文概括了本發明的方法：
[0046]
【權利要求】
1. 製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯的方法，該方法包括巨大戟二萜醇的醯化和任選繼 之以二醯化巨大戟二萜醇衍生物的脫醯化，其中至少一步步驟是通過酶催化的。
2. 權利要求1的方法，其中二醯化化合物是巨大戟二萜醇_3, 20-二當歸酸酯。
3. 權利要求1的方法，其中二醯化巨大戟二萜醇化合物在20位含有不同於當歸醯基的 醯基。
4. 權利要求3的方法，其中20位醯基是R-C = 0-，且R選自取代或未取代的-烷 基且其中烷基可以是直鏈或支鏈的、取代或未取代的C2-C1(l-鏈烯基或者取代或未取代的 c4-c7-環烷基、取代或未取代的芳基或取代或未取代的雜芳基。
5. 權利要求1-4任一項的方法，其中酶是來自皺落假絲酵母的脂酶A或脂酶B。
6. 權利要求1-5任一項的方法，其中酶是來自皺落假絲酵母的脂酶B。
7. 權利要求1-6任一項的方法，其中酶以多於100% w/w酶裝載的量存在。
8. 權利要求7的方法，其中酶以多於500% w/w酶裝載的量存在。
9. 權利要求1-8任一項的方法，其中反應在乙腈、庚烷、甲苯或MTBE中進行。
10. 權利要求9的方法，其中溶劑是庚烷。
11. 權利要求1-10任一項的方法，其中反應在親核試劑的存在下進行。
12. 權利要求11的方法，其中親核試劑是H20或醇。
13. 權利要求12的方法，其中醇選自1-丁醇、1-戊醇、1-己醇和1-辛醇。
14. 權利要求11-13任一項的方法，其中親核試劑以低於約10% v/v的濃度存在。
15. 權利要求14的方法，其中親核試劑以低於約5% v/v、例如低於1% v/v的濃度存 在。
16. 權利要求1-15任一項的方法，其中酶是來自皺落假絲酵母的脂酶A，溶劑是庚烷， 親核試劑是濃度為約1 % v/v的1-丁醇、1-戊醇、1-己醇或1-辛醇。
17. 權利要求1的方法，其中二醯化巨大戟二萜醇衍生物的製備包括在醯基供體的存 在下和任選在酶的存在下的巨大戟二萜醇。
18. 權利要求17的方法，其中醯基供體是當歸酸酐。
19. 權利要求18的方法，其中醯基供體以4當量加入。
20. 權利要求17-19任一項的方法，其中酶選自來自產鹼菌屬的脂酶A、B、C、D、E或F， 來自施氏假單胞菌的脂酶，來自洋蔥假單胞菌的脂酶、來自皺落假絲酵母的脂酶A或B，來 自番木瓜的脂酶，來自沙門柏乾酪青黴的脂酶，來自枯草芽孢桿菌的蛋白酶C，來自螢光假 單胞菌的脂酶，來自洋蔥伯克霍爾德菌的脂酶A和B，或者無花果蛋白酶。
21. 權利要求20的方法，其中酶是來自產鹼菌屬的脂酶A、C或E。
22. 權利要求17-21任一項的方法，其中反應在有機溶劑中進行。
23. 權利要求22的方法，其中溶劑是庚烷或己烷。
24. 權利要求17-23任一項的方法，其中反應在升高溫度下進行。
25. 權利要求24的方法，其中溫度為約50°C。
26. 根據權利要求1的方法，其中巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯由巨大戟二萜醇用醯基供 體以一步酶催化反應製得。
27. 權利要求26的方法，其中反應採用當歸酸酐作為醯基供體。
28. 權利要求26-27任一項的方法，其中酶是水解酶來自番木瓜的脂酶、來自沙門柏幹 酪青黴的脂酶、來自枯草芽孢桿菌的蛋白酶C、來自洋蔥伯克霍爾德菌的脂酶A和B、無花果 蛋白酶或者Lipobond洋蔥假單胞菌。
29. 權利要求28的方法，其中酶是Lipobond洋蔥假單胞菌。
30. 權利要求26-29任一項的方法，其中溶劑是乙腈。
31. 權利要求26-30任一項的方法，其中反應混合物含有表面活性劑。
32. 根據權利要求31的方法，其中表面活性劑選自CTAC、TTAB、CPC、BZT、BAC、DDAC、 DDAB。
33. 根據權利要求32的方法，其中表面活性劑是CPC或BZT。
34. 巨大戟二萜醇-3, 20-二當歸酸酯或巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯-20-醯基作為中 間體在製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯中的用途。
35. 巨大戟二萜醇-3, 20-二當歸酸酯或巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯-20-醯基在權利 要求1的製備巨大戟二萜醇-3-當歸酸酯的方法中的用途。
【文檔編號】C12P15/00GK104395477SQ201380006809
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2013年1月25日 優先權日:2012年1月25日
【發明者】梁錫福, T·赫貝爾, G·格魯-索倫森, T·S·穆迪, A·S·羅恩 申請人:利奧實驗室有限公司