一種白藜蘆醇自微乳製劑及其製備方法與流程
2023-05-06 04:22:36
本發明屬於生物化學分離純化技術領域，具體涉及的是一種白藜蘆醇自微乳製劑及其製備方法。
背景技術：
白藜蘆醇（Resveratrol，Res）是一種含有芪類結構的非黃酮類多酚化合物，大量存在於葡萄、花生等一些人們常吃的食物中。白藜蘆醇對維護人類的健康有重要作用，具有抗炎、抗癌、抗菌、抗氧化和保護心血管的作用。由於白藜蘆醇具有難溶於水、穩定性差、生物利用度低、半衰期短、代謝和消除速率快等特性，大大限制了其臨床應用。本發明根據白藜蘆醇的疏水性，製成自微乳製劑，旨在顯著提高白藜蘆醇的水溶性、穩定性和生物利用度。
影響自微乳給藥系統形成的因素有很多，但關鍵在於其組成各部分的物理化學和
生物理化性質，如油相、乳化劑、助乳化劑的種類選擇、油相與乳化劑之間的比例以及藥物的油水分配係數、藥物的極性等，其中影響較大的還是油相、乳化劑、助乳化劑這三個成分的選擇。
油相在自微乳給藥系統中具有重要的作用，不僅能溶解難溶性藥物，增大藥物的溶解度和提高藥物的細胞膜滲透性，還能促進藥物在胃腸道系統中的轉運。通常，選擇中鏈/ 長鏈的飽和、不飽和或局部飽和的碳氫化合物作為油相，包括植物油、礦物油、脂肪酸等。
乳化劑的選擇也是形成自微乳的關鍵，因為乳化劑的特性如親水/ 親油平衡值(HLB)、濁點、粘度、與油相的親和力、乳化劑在自微乳體系中的比例，這些性質極大影響到自微乳體系的形成及自微乳滴的粒徑大小。一般，選擇HLB 較高的非離子型乳化劑，如聚氧乙烯氫化蓖麻油、吐溫、司盤、泊洛沙姆、十二烷基硫酸鈉(SLS)、磷脂、膽固醇、十二烷基苯磺酸鈉(Lab) 等。
助乳化劑能輔助溶解藥物，嵌入乳化劑分子中，兩者形成微乳的界面膜，增大界面膜流動性，從而提高載藥量，調節自微乳體系的乳化時間，控制自微乳液滴形成大小。常用的助乳化劑有乙醇、丙二醇、異丙醇、聚乙二醇、甘油、乙二醇單乙醚等物質。
技術實現要素：
本發明的目的在於提供一種白藜蘆醇自微乳製劑，將水溶性差的白藜蘆醇製備成自微乳製劑，增大白藜蘆醇的溶解度，提高白藜蘆醇的口服生物利用度。
本發明的另一目的在於提供這種白藜蘆醇自微乳製劑的製備方法。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案如下：
一種白藜蘆醇自微乳製劑，它是由三乙酸甘油酯作為油相、聚氧乙烯蓖麻油（Cremophor EL）、聚氧乙烯氫化蓖麻油（CremophorRH40）、異丙醇組成，各組分之間的質量比為三乙酸甘油酯：Cremophor EL：Cremophor RH40：異丙醇=1: 1-1.5: 0.5-0.7:1.5-2.0。
一種白藜蘆醇自微乳製劑的製備方法，包括以下製備步驟：
(1)按權利要求1 所述的處方組成及比例，稱取三乙酸甘油酯、Cremophor EL、Cremophor RH40、異丙醇，在37℃水浴、攪拌下混合均勻；
(2)加入處方量的白藜蘆醇原料藥，在(37±2)℃水浴攪拌下混合均勻，得白藜蘆醇自微乳製劑。
上述的白藜蘆醇自微乳製劑能製成微乳液或軟膠囊劑型，或者作為粘合劑製備成顆粒劑、片劑或微丸劑型。
具體實施方式
實施例1
(1) 稱取三乙酸甘油酯1g、Cremophor EL1.5g、Cremophor RH40 0.5g、異丙醇1.5g，在37℃水浴、磁力攪拌作用下混合均勻。
(2)、加入0.4g 白藜蘆醇原料藥，在37℃水浴、磁力攪拌作用下，混合均勻，得白藜蘆醇自微乳製劑。
實施例2
(1)稱取三乙酸甘油酯1g、Cremophor EL1g、Cremophor RH40 0.7g、異丙醇2.0g，在37℃水浴、磁力攪拌作用下混合均勻。
(2)加入0.4g 白藜蘆醇原料藥，在37℃水浴、磁力攪拌作用下，混合均勻，得白藜蘆醇自微乳製劑。
實施例3
(1)稱取三乙酸甘油酯1g、Cremophor EL1.25g、Cremophor RH40 0.6g、異丙醇1.75g，在37℃水浴、磁力攪拌作用下混合均勻。。
(2)加入0.4g 白藜蘆醇原料藥，在37℃水浴、磁力攪拌作用下，混合均勻，得白藜蘆醇自微乳製劑。
實施例3 白藜蘆醇自微乳的鑑定
採用透射電鏡和粒徑檢測方法對白藜蘆醇自微乳的形成進行驗證。
採用透射電鏡和粒徑檢測方法對白藜蘆醇自微乳進行驗證。透射電鏡結果顯示，形成的納米乳液滴，外觀圓整，大小均一，粒徑在15nm左右。採用馬爾文粒度儀檢測粒徑，結果顯示粒徑在13—15nm，符合納米乳要求。表明白藜蘆醇自微乳製備成功。
實施例4 白藜蘆醇自微乳的質量研究
建立HPLC法測定白藜蘆醇自微乳的含量和溶出度，並進行方法學考察。以外觀、含量為指標進行影響因素和加速試驗，考察其穩定性情況。
結果表明，在10μg/mL～200μg/mL範圍內白藜蘆醇濃度與峰面積有良好的線性關係，回收率、穩定性、精密度均符合方法學要求。白藜蘆醇自微乳穩定性試驗表明，在高溫40℃，相對溼度75%的條件下，其外觀仍為淡黃色澄清溶液，含量也無明顯變化。但在光照條件下，雖然外觀無明顯變化，但含量變化明顯，原因是白藜蘆醇在光照條件下會發生順反異構反應和降解反應，故需避光操作和保存。
實施例5 大鼠在體單向腸灌流試驗及藥物動力學試驗
以SD大鼠為受試動物，自製白藜蘆醇混懸液為參比製劑。採用HPLC法測定腸灌流液中白藜蘆醇的濃度，通過重量法計算腸吸收速率、表觀分布係數，並對白藜蘆醇自微乳和混懸液的腸吸收情況進行比較。
藥物動力學試驗：以SD大鼠為受試動物，自製白藜蘆醇混懸液為參比製劑。採用HPLC法測定灌胃白藜蘆醇自微乳後大鼠血液中的藥物濃度，對藥物動力學參數和相對生物利用度進行研究。
通過大鼠在體單向腸灌流試驗得出，白藜蘆醇自微乳的吸收速率常數（Ka）（×10-2min-1）和表觀分布係數（Papp）（×10-3cm/min）分別為1.352±0.05860,1.497±0.07827；白藜蘆醇混懸液的吸收速率常數（Ka）（×10-2min-1）和表觀分布係數（Papp）（×10-3cm/min）分別為0.659±0.08570,0.657±0.08991，且具有顯著性差異（P＜0.05）。結果表明，白藜蘆醇自微乳的腸吸收情況明顯好於白藜蘆醇混懸液。
通過大鼠藥物動力學試驗得出，白藜蘆醇的血管外給藥符合單室模型，自製白藜蘆醇自微乳與白藜蘆醇混懸劑相比，血藥峰時間Tmax和MRT有所延長，峰濃度Cmax和AUC明顯增加。結果表明：白藜蘆醇自微乳的處方製備工藝，簡單可行，且重現性好。有效提高了白藜蘆醇的溶解性，在一定程度上改善了白藜蘆醇光照易分解的特性，增加了白藜蘆醇體內吸收率，顯著提高其生物利用度，為今後白藜蘆醇的廣泛應用，奠下了理論和實驗基礎。另一方面，本發明表明自微乳可以應用於提高難溶性藥物的生物利用度，拓展難溶性藥物的臨床應用。