草莓的莖尖離體快速培養方法
2023-05-01 16:05:36 3
專利名稱：草莓的莖尖離體快速培養方法
技術領域：
本發明涉及一種草莓的莖尖離體快速培養方法，利用當年抽生的匍匐莖上的莖尖生長點經消毒後誘導叢生芽，再經過培養後得到完整的試管苗，屬於草莓培養方法技術領域。
背景技術：
草莓是一種優質高檔水果，營養豐富，經濟價值高。長久以來，草莓的繁殖方式一直以分株繁殖和腋芽扦插繁殖為主，但這些傳統的繁殖方式很容易使草莓感染病毒，使其產量和質量下降，無法滿足生產用種苗之需。
發明內容
本發明的目的是提供一種繁殖率高、繁殖速度快、繁殖效果優異的草莓培養方法。為了達到上述目的，本發明提供了一種草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，具體步驟為
第一步選取草莓當年萌發的匍匐莖，衝洗乾淨，消毒備用；
第二步將消毒乾淨的草莓匍匐莖在解剖鏡下切取0. 1 0. 5mm長的莖尖，接種於發生培養基中進行生芽培養，待莖尖上長出0. 5 1. 5cm長的新芽後，將新芽切下，接種到增殖培養基中進行叢生芽誘導，其中，所述發生培養基是在MS培養基的基礎上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)，所述增殖培養基是在MS培養基的基礎上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、激動素(KT)和吲哚丁酸(IBA)；
第三步將叢生芽切成單芽，接種於生根培養基中進行生根培養，所述生根培養基是在 1/2MS培養基的基礎上添加了萘乙酸(NAA)；
第四步，將生根的試管苗移入由質量比為4 6 :1的珍珠巖和泥炭混合而成的基質中， 澆足水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼，5 9天後揭開薄膜逐步煉苗，每天葉面噴水2 3次， 10 20天後施加肥料液，50 70天後將幼苗移至灌滿純泥炭的塑料穴盤，澆水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼，經1. 5 2. 5個月培養後直接移栽至大田中。優選地，所述第一步中的消毒的具體操作為在超淨工作檯上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然後用0. 05 0. 15vol%的潔爾敏溶液消毒，最後用0. 05 0. 15vd%氯化汞溶液消毒，用無菌水衝洗，再用無菌濾紙吸乾水分。優選地，所述發生培養基中6-苄基氨基嘌呤的濃度為1 :3mg/L，萘乙酸的濃度為 0. 1 0. 3mg/L, pH 值為 5 6。優選地，所述增殖培養基中6-苄基氨基嘌呤的濃度為0. 1 1. Omg/L,激動素的濃度為0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的濃度為0. 1 0. 3mg/L。優選地，所述生根培養基中萘乙酸的濃度為0. 1 1. Omg/L。所述第一步中生芽培養是在20 30°C、光照強度2000 3000LX以及光照時間 8 16小時/天的條件下進行。
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所述第二步中叢生芽誘導是在20 30°C、光照強度3000 4000LX以及光照時間 8 16小時/天的條件下進行。所述第二步進行叢生芽誘導後進行繼代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率為1 3-4。所述第三步中生根培養是在20 30°C、光照強度3000 4000LX，光照時間8 16小時/天的條件下進行。所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15襯％硝酸銨和0. 05 0. 15襯％磷
酸二氫鉀。與現有技術相比，本發明具有如下有益效果
1、脫毒率高(採用解剖鏡下剝取0. 3mm大小莖尖)，莖尖生長快，莖尖發生率高，一般高達96%。繁殖率高，繁殖速度快，可以在短時期內工廠化生產種苗。2、試管苗生長旺盛，可消除「玻璃化」現象。3、試管苗生根率高，一般可達99%。
具體實施例方式下面結合實施例來具體說明本發明。實施例1
MS培養基成分如下
權利要求
1.一種草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，具體步驟為第一步選取草莓當年萌發的匍匐莖，衝洗乾淨，消毒備用；第二步將消毒乾淨的草莓匍匐莖在解剖鏡下切取0. 1 0. 5mm長的莖尖，接種於發生培養基中進行生芽培養，待莖尖上長出0. 5 1. 5cm長的新芽後，將新芽切下，接種到增殖培養基中進行叢生芽誘導，其中，所述發生培養基是在MS培養基的基礎上添加了 6-苄基氨基嘌呤和萘乙酸，所述增殖培養基是在MS培養基的基礎上添加了 6-苄基氨基嘌呤、激動素和吲哚丁酸；第三步將叢生芽切成單芽，接種於生根培養基中進行生根培養，所述生根培養基是在 1/2MS培養基的基礎上添加了萘乙酸；第四步，將生根的試管苗移入由質量比為4 6 :1的珍珠巖和泥炭混合而成的基質中， 澆足水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼，5 9天後揭開薄膜逐步煉苗，每天葉面噴水2 3次， 10 20天後施加肥料液，50 70天後將幼苗移至灌滿純泥炭的塑料穴盤，澆水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼，經1. 5 2. 5個月培養後直接移栽至大田中。
2.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第一步中的消毒的具體操作為在超淨工作檯上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然後用0. 05 0. 15vol%的潔爾敏溶液消毒，最後用0. 05 0. 15vol%氯化汞溶液消毒，用無菌水衝洗，再用無菌濾紙吸乾水分。
3.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述發生培養基中6-苄基氨基嘌呤的濃度為1 :3mg/L，萘乙酸的濃度為0. 1 0. 3mg/L, pH值為5 6。
4.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述增殖培養基中6-苄基氨基嘌呤的濃度為0. 1 1. Omg/L,激動素的濃度為0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的濃度為0. 1 0. 3mg/L。
5.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述生根培養基中萘乙酸的濃度為0. 1 1. Omg/L。
6.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第二步中生芽培養是在20 30°C、光照強度2000 3000LX以及光照時間8 16小時/天的條件下進行。
7.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第二步中叢生芽誘導是在20 30°C、光照強度3000 4000LX以及光照時間8 16小時/天的條件下進行。
8.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第三步中生根培養是在20 30°C、光照強度3000 4000LX，光照時間8 16小時/天的條件下進行。
9.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第二步進行叢生芽誘導後進行繼代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率為1 :3-4。
10.如權利要求1所述的草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15wt%硝酸銨和0. 05 0. 15wt%磷酸二氫鉀。
全文摘要
本發明提供了一種草莓的莖尖離體快速培養方法，其特徵在於，具體步驟為第一步選取草莓當年萌發的匍匐莖，衝洗乾淨，消毒備用；第二步將消毒乾淨的草莓匍匐莖在解剖鏡下切取0.1～0.5mm長的莖尖，接種於發生培養基中進行生芽培養，待莖尖上長出0.5～1.5cm長的新芽後，將新芽切下，接種到增殖培養基中進行叢生芽誘導；第三步將叢生芽切成單芽，接種於生根培養基中進行生根培養；將生根的試管苗移入珍珠巖和泥炭混合而成的基質中，澆足水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼揭開薄膜逐步煉苗，將幼苗移至灌滿純泥炭的塑料穴盤，澆水後用塑料薄膜覆蓋保溫保溼，培養後移栽至大田中。本發明具有繁殖率高，繁殖速度快、存活率高的優點。
文檔編號A01H4/00GK102422816SQ20111032742
公開日2012年4月25日 申請日期2011年10月25日 優先權日2011年10月25日
發明者張媁, 胡海峰 申請人:上海航育種子基地場