一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法
2023-05-15 05:02:26
一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法
【專利摘要】本發明公開了一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，11種有效成分為新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山梔苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷和斷氧化馬錢子苷，該方法採用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(3.0×*100mm，1.8um)，流動相為乙腈(A)-0.1％磷酸(B)，梯度洗脫，流速0.35-0.45mL·min-1，檢測波長324-326nm和236-238nm，柱溫：25-35℃。本發明方法準確快捷靈敏，進一步提高了熱毒寧注射液質量控制水平。
【專利說明】一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬於中藥【技術領域】，具體涉及一種同時測定熱毒寧注射液中11種成分的 方法。
【背景技術】
[0002] 熱毒寧注射液處方由金銀花、青蒿、桅子組成，具有清熱、疏風、解毒功效，臨床上 用於治療上呼吸道感染[1]。熱毒寧注射液成分研究表明，其主要含有咖啡醯奎寧酸類和環 烯醚萜類化合物[2]。前期研究建立了熱毒寧注射液HPLC指紋圖譜[3]和一測多評法測定熱 毒寧注射液中的9種成分[4]，上述HPLC和一測多評方法運行時間較長，不利於工業化大生 產過程中對產品的快速檢測，並且只檢測了桅子苷這一種環烯醚萜類成分，而環烯醚萜類 物質在處方藥材桅子中含量較高[M]，包括羥異桅子苷、山桅苷、京尼平龍膽雙糖苷等其他 成分，這些成分對上呼吸道感染均具有一定程度的治療作用，僅檢測桅子苷含量不能更好 的反映產品的質量和療效。因此，本發明建立了一種新的UPLC方法，增加檢測桅子中山桅 苷、京尼平苷酸和京尼平龍膽雙糖苷等多種藥效指標成分，實現熱毒寧注射液中6種有機 酸成分和5種環烯醚萜類成分的同時測定，達到縮短實際生產中的檢測時間，增加與產品 療效相關的指標，進一步提升熱毒寧注射液的質控標準的目的。
【發明內容】
[0003] 本發明的目的是克服上述不足之處提供一種UPLC方法，可以同時測定熱毒寧注 射液中11種成分（包括6種有機酚酸類物質和山桅苷、京尼平苷酸和京尼平龍膽雙糖苷等 5種環烯醚萜類物質）。該方法是採用UPLC-DAD法同時測定熱毒寧注射液中新綠原酸、綠 原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山桅苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖 苷、桅子苷、斷氧化馬錢子苷11種有效成分的含量。該方法與現有技術相比，可以大大縮短 分析時間，提1?分析的靈敏度和解析度，並增加了控制指標，進一步提1? 了熱毒寧注射液 質控水平。
[0004] 本發明的目的是通過以下方式實現的：
[0005] -種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，該方法包括以下步驟：
[0006] a、對照品溶液的製備：分別精密稱取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、 異綠原酸B、異綠原酸C、山桅苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、桅子苷和斷氧化馬錢 子苷對照品適量，加濃度為50 %?100 %的甲醇製成濃度分別為0. 12-0. 25,0. 28-0. 58， 0. 12-0. 25,0. 01-0. 04,0. 02-0. 06,0. 02-0. 05,0. 01-0. 04,0. 02-0. 05,0. 23-0. 48， 0? 40-0. 81，0. 05-0. 12mg ? ml-1 的混合對照品溶液。
[0007] b、供試品溶液的製備
[0008] 精密吸取Iml熱毒寧注射液置容量瓶中，用濃度為50%?100%的甲醇溶解並稀 釋至IOOml，搖勻，離心，上清液通過微孔濾膜濾過，即得。
[0009] c、測定法：採用UPLC-DAD法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色 譜儀，測定，即得；
[0010] 色譜條件：色譜柱Agilent ZORBAX SB-C18 (3. OX 100mm，I. 8um);以乙腈為流動相 A，以0? 1 %磷酸為流動相B，按照下表進行梯度洗脫；檢測波長：324-326nm和236-238nm ; 流速：0? 35-0. 45mL. mirT1 ;柱溫：25-35°C。
[0011]
【權利要求】
1. 一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，其特徵在於該方法包括 以下步驟： a、 對照品溶液的製備：分別精密稱取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原 酸B、異綠原酸C、山桅苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、桅子苷和斷氧化馬錢子苷對照 品適量，加濃度為50% -100%的甲醇製成濃度分別為-0? 12-0. 25,0? 28-0. 58,0? 12-0. 25， 0. 01-0. 04,0. 02-0. 06,0. 02-0. 05,0. 01-0. 04,0. 02-0. 05,0. 23-0. 48,0. 40-0. 81, 0? 05-0. 12mg?ml-1的混合對照品溶液。 b、 供試品溶液的製備 精密吸取lml熱毒寧注射液置容量瓶中，用濃度為50% -100%的甲醇溶解並稀釋至 100ml，搖勻，離心，上清液通過微孔濾膜濾過，即得。 c、 測定法：採用UPLC-DAD法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜 儀，測定，即得； 色譜條件：色譜柱AgilentZORBAXSB-C18 ;以乙腈為流動相A，以0. 1%磷酸為流動相B，按照下表進行梯度洗脫；檢測波長：324-326nm和236-238nm;流速：0. 35-0. 45mL.mirT1 ; 柱溫：25-35 °C。
2. 根據權利要求1所述的同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，其特徵 在於所述的甲醇均為濃度為50?70%的甲醇。
3. 根據權利要求1所述的同時測定熱毒寧注射液中11種成分的方法，其特徵在於該方 法包括以下步驟： a、 對照品溶液的製備：分別精密稱取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠 原酸B、異綠原酸C、山桅苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、桅子苷和斷氧化馬錢子苷 對照品適量，加濃度為50%的甲醇製成濃度分別為0. 12-0. 15、0. 28-0. 30、0. 12-0. 15、 0. 01-0. 02,0. 02-0. 04,0. 02-0. 03,0. 01-0. 03,0. 02-0. 03,0. 23-0. 30,0. 40-0. 50, 0? 05-0. 08mg?ml-1的混合對照品溶液。 b、 供試品溶液的製備 精密吸取lml熱毒寧注射液置容量瓶中，用濃度為50%甲醇溶解並稀釋至100ml，搖 勻，離心，上清液過〇? 22um微孔濾膜濾過，即得。 c、 測定法：採用UPLC-DAD法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜 儀，測定，即得； 色譜條件：色譜柱AgilentZORBAXSB-C18 ;以乙腈為流動相A，以0. 1%磷酸為流動相B，按照下表進行梯度洗脫，然後再運行10_12min;檢測波長：324-326nm和236-238nm;流 速：0? 4mL.mirT1 ;柱溫：30°C。
【文檔編號】G01N30/02GK104407072SQ201410717303
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月29日 優先權日:2014年11月29日
【發明者】蕭偉, 畢宇安, 吳建雄, 王振中, 吳莎, 吳亞男, 劉啟安 申請人:江蘇康緣藥業股份有限公司