用於製備加工人參以獲得增加的人參皂甙rg5含量的新穎方法

2023-05-15 08:39:06 1

專利名稱：：用於製備加工人參以獲得增加的人參皂甙rg5含量的新穎方法
技術領域：
：本發明涉及一種用於製備新穎的加工人參以獲得增加的人參皂武Rg5含量的方法。更具體地說，本發明涉及一種通過在特定的壓力和溫度範圍內處理人參而製備含有更多人參皂甙Rg5的加工人參產品及其提取物的方法。
背景技術：
：已發現，人參對心理壓力具有非特異性的抵抗力，並且顯示出對人體內平衡的保持效果以及其他有效藥理學活性，例如，高血壓的減輕、胰島素的加強活性、血糖降低活性、肝臟RNA合成的刺激效果、蛋白質、葡萄糖及類脂化合物代謝作用或抗癌活性。有很多種屬於五加科的人參屬植物，例如，分布於遠東地區或在遠東地區培植的人參、北美和加拿大的西洋參、中國的田七、北美東部地區的三葉參、日本、中國和尼泊爾的竹節參、尼泊爾的喜馬拉雅參、越南的峨嵋參、PanaxElegatior、狹葉竹節參和羽葉三七等。有三種人參產品已在市場上銷售，即四年參齡、五年參齡和六年參齡人參，並且有報告稱，秋季培植的六年參齡人參產品是這三種人參中最有效的。具體地說，未去皮人參的皮含有許多皂角苷，其顯示了有效活性。從具有與幾種糖類連接的達瑪烷骨架的人參分離的人參皂甙皂角苷不同於從其他植物分離的人參皂甙皂角苷。具體地說，有報告稱，人參含有大約30種皂角苷成分，尤其是人參皂甙Rbl、Rb2、Rc、Rd、Rg、Re等，作為主要的成分。那些皂角苷化合物顯示了各種基於其化學結構的藥理學活性和效力，其中，人參皂甙Rg5最近己經作為一種藥物而突現了其作用，這是因為其具有有效的免疫增強活性以及血管舒張活性、抗癌活性、神經元細胞保護活性等。目前，已嘗試加工傳統的人參，以通過在加工過程中改變人參皂角苷的結構而獲得更強的功效或效用。韓國專利註冊第10-0192678號公開了一種通過進行高溫處理來製備加工人參的工藝，該人參產品具有高含量的人參皂甙Rg5，以獲得經加工的人參，其具有不同於原始人參形式的改進的效力。但這種加工方法無法就人參皂甙Rg5的含量變化與溫度及內部壓力變化之間的關係提供相關的信息，並且這種方法需要有毒的有機溶劑，例如丁醇。為了獲得安全、一致的人參產品，本發明的發明人己就新的加工方法進行了深入的科學研究。通過研究，本發明人已發現了用於製備藥理學上有效的人參產品的新穎加工方法，通過與傳統的人參及現有技術中公開的加工人參產品比較證實，本發明的人參產品具有更高的人參皂甙Rg5含量，並且他們最終完成了本發明。
發明內容技術問題因此，本發明的目的是提供一種用於製備藥理學上有效的人參產品的加工方法，這種人參產品具有增加的人參皂甙Rg5含量。技術方案[10]本發明提供了一種用於製備藥理學上有效的人參產品及其提取物的加工方法，其可以最大程度地提高人參皂甙Rg5的含量，該方法的特徵在於，以選定範圍的壓力和溫度處理人參。[11]明確地說，本發明提供了一種用於製備藥理學上有效的人參產品的加工方法，其由以下步驟所組成將重量大約相當於人參重量的1到3倍的水添加到五到七年參齡的人參材料中，優選地是六年參齡的人參材料；在1.10到4.00kgf/cm2的內部壓力範圍內，優選地，在未去皮人參的情況下是1.20到1.50kgf/cm2，而在去皮人參的情況下是2.30至lj3.00kgf/cm2，並且在約70到150°C的溫度範圍內，優選地是110到H0。C，處理1至lj5小時的時間，優選地是大約2小時，以獲得具有大量人參皂甙Rg5的目標加工人參。[12]在未去皮人參的情況下，通過上述加工方法，本發明的最終人參產品含有多得多的人參皂甙Rg5含量，大約兩到五倍，明確地說，大約是通過韓國專利註冊第10-0192678號公開的方法製備的加工人參的4.4倍。[13]在去皮人參的情況下，通過上述加工方法，本發明的最終人參產品含有多得多的人參皂甙Rg5含量，大約兩到五倍，明確地說，大約是通過韓國專利註冊第10-0192678號公開的方法製備的加工人參的3.3倍。[14]本發明還提供了一種用於提取加工人參的提取物的方法，其由以下步驟所組成採用回流提取法以有機溶劑的混合物提取通過上述步驟製備的加工人參材料，優選地是採用甲醇和二氯甲烷的混合物，更優選地是以0.60:1.40到1.20:0.80的混合比率混合的甲醇和二氯甲烷的混合物，更優選地是大約l:l(v/v)的甲醇和二氯甲烷混合物，持續時間為1小時到兩天，優選地是1小時以上；進行過濾，以獲得濾液，將濾液濃縮，以除去剩餘的溶劑，並進行乾燥，以獲得具有大量人參皂甙Rg5的有效人參提取物。[15]本發明優選地使用本文公開的六年參齡"人參材料"，因為六年參齡人參顯示了比四年參齡人參更高的人參皂甙Rg5含量，這一點可以通過本發明人執行的以下實驗予以確認。[16]本文公開的"人參材料"包括其葉子(有報告稱葉子是無用的)以及本發明的人參的根部，因為經確認，本發明的人參的經加工的葉子顯示了與人參根部同等的人參皂甙Rg5含量，這一點可以通過木發明人執行的以下實驗予以確認。[17]如此加工的人參或其提取物可以通過已知的方式乾燥，以獲得乾燥的加工人參，例如，在低溫下乾燥，即低於70°C的溫度，乾燥時間為48至'J60小時或採用冷凍乾燥方法，並且如有必要，其可以通過本領域眾所周知的方法進一歩加工，以粉碎或粉化成更小的尺寸，優選地，尺寸範圍為50到200微米，以通過醫藥上可接受的載劑或佐劑製備市售的最終產品，例如膠囊劑、片劑等。[18]本發明的新穎加工人參含有豐富的人參皂甙Rg5，其顯示了有效藥理學活性，例如血管舒張活性、免疫增強活性、抗癌活性、神經元細胞保護活性等，尤其是抗癌活性。[19]因此，本發明還提供了一種醫藥組成物，其包括通過上述加工方法製備的人參提取物以及醫藥上可接受的載劑或佐劑，用於治療或預防癌病，並且本發明的方法可以通過採用選定範圍的壓力和溫度而最大程度地提高人參皂甙Rg5的含量。[20]本文所述的術語"癌"包括各種癌，例如胃癌、肝癌、肺癌、宮頸癌、皮膚癌或胸癌，特別是皮膚癌。[21]本發明的人參提取物具有有效的抗癌活性，因此，本發明的醫藥組成物可以用於治療或預防各種癌病。[22]本發明還將通過上述加工方法製備的人參提取物用於製造治療或預防各種癌症用的藥物，例如胃癌、肝癌、男性肺癌和宮頸癌、皮膚癌、胸癌。[23]根據本發明的另一方面，還提供了種治療或預防各種癌症的方法，例如胃癌、肝癌、男性肺癌和宮頸癌、胸癌，其中，該方法包括服用通過上述加工方法製備的一定量有療效的人參提取物。[24]本發明的組成物可以根據使用方法額外地包括傳統的載劑、佐劑或稀釋劑。優選地，根據用途及應用方法將該載劑用作適當的物質，但不限於此。Remington'sPharmaceuticalScience(賓夕》去尼亞州伊其j屯頁MackPublishing公司)的書面文本中列出了適當的稀釋劑。[25]下文的配製方法及賦形劑只是舉例說明，絕非限制本發明。[26]根據本發明的組成物可以作為醫藥組成物提供，其含有醫藥上可接受的載劑、佐劑或稀釋劑，例如，乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藻糖醇、麥芽糖醇、澱粉、阿拉伯樹膠、藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、矽酸鈣、纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羥苯甲酯、羥苯丙酯、滑石、硬脂酸鎂及礦物油。配方可以額外地包括填充物、抗粘劑、潤滑劑、潤溼劑、調味劑、乳化劑、防腐劑等。可以通過本領域眾所周知的任何過程配製本發明的組成物，以便在病人服用這些組成物之後，快速、持續或延遲釋放活性組分。[27]例如，本發明的組成物可以溶解在油、丙二醇或其他常用於生產注射劑的溶劑。.載劑的適當例子包括生理鹽水、聚乙二醇、乙醇、植物油、豆蔻酸異丙酯等，但不限於這些物質。對於局部給藥，本發明的化合物可以以軟膏和霜劑的形式配製。[28]含有本組成物的醫藥配方可以任何形式製備，例如，口服劑型(散劑、粉劑、顆粒、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、液體藥劑、糖漿、酏劑丸劑、溶液、香囊、顆粒)或局部製劑(霜劑、軟膏、洗劑、凝膠、香油、貼片、糊劑、噴霧液、氣溶膠等)，或可注射製劑(溶液、懸浮劑、乳劑、注射劑)。[29]本發明的醫藥劑型組成物可以以其醫藥上可接受的鹽的形式使用，也可以單獨或者適當組合使用，以及與其他具有醫藥活性的化合物結合使用。[30]本發明的提取物或組成物的所需劑量根據病人的狀況和體重、嚴重性、藥物劑型、給藥途徑和周期而變化，並且可以由本領域的技術人員選擇。但是，為了獲得理想的效果，一般建議以0.2-200mg/kg的劑量給藥，優選地是2到100mg/kg，這是以單位體重每天服用的本發明的新穎提取物或化合物計算的。該劑量可以每天一次或者每天分成幾次給藥。就組成物而言，應存在以重量計佔0.01到80%的複合草本組成物，優選地是以組成物的總重量計佔0.5到50%。[31]本發明的醫藥組成物可以通過各種途徑向患病的動物給藥，例如，哺乳動物(老鼠、家畜或人)。本發明涵蓋所有給藥模式，例如，口服、直腸投藥或通過靜脈、肌內、皮下、皮內、胸內、硬膜外或側腦室注射給藥。[32]因此，本發明的另一個目的是提供一種保健食品，其含有通過以上加工方法製備的上述提取物以及營養學上可接受的添加劑，以防止各種疾病。[33]上述組成物可以用於預防或減輕各種癌病。為了預防或減輕各種癌病，其中，上述提取物的含量一般可以為保健食品組成物的食品總重量的約0.1到15w/w%，優選地為1至U10w/w%，並且以100g的保健飲料組成物的比率計算為1到30g，優選地為3到10g。本發明的組成物可以通過各種途徑向患病的動物給藥，例如，哺乳動物(老鼠、家畜或人)。本發明涵蓋所有給藥模式，例如，口服、直腸投藥或通過任何形式的靜脈、肌內、皮下、皮內、胸內、硬膜外或側腦室注射給藥，例如口服劑型(散劑、粉劑、顆粒、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、糖漿、酏劑丸劑、溶液或香囊)。[34]假如本發明的保健飲料組成物含有指定比率的上述提取物作為必要成分，則對其他液體成分沒有特別限制，其中，其他成分可以是各種除臭劑或天然糖等，例如傳統的飲料。上述天然糖的例子是單糖，例如葡萄糖、果糖等；二糖，例如麥芽糖、蔗糖等；傳統糖類，例如糊精、環式糊精；以及糖醇，例如木糖醇、赤藻糖醇等。作為除上述除臭劑以外的其他除臭劑，可以使用天然除臭劑，例如Taumatin;甜葉菊提取物，例如LevaudiosideA、甘草甜素等；以及合成除臭劑，例如糖精、阿斯巴甜等。以100g本發明的飲料組成物的比率計算，上述天然糖的含量一般為約1到20g，優選地為5到12g。[35]除上述成分以外的其他成分為各種營養、維生素、礦物質或電解液、合成調味劑、著色劑和改良劑(在乾酪巧克力等的情況下)、果膠酸及其鹽、褐藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠粘劑、pH控制劑、穩定劑、防腐劑、甘油、酒精、碳酸飲料等所用的增碳劑。除上述成分以外的其他成分可以是用於製備天然果汁、果汁飲料和蔬菜飲料的果汁，其中，該成分可以單獨或結合使用。該成分的比率不是很重要，但其範圍一般為每100w/w%本組成物約0到20w/w%。[36]含有上述提取物的可添加食品的例子是各種食品、飲料、口香糖、複合維生素、保健食品等。[37]本領域的技術人員應明白，可以在不脫離本發明的主旨或範圍的情況下，對本發明的組成、使用及製備進行各種修改和變化。有利效果[38]根據本發明的用於製備加工人參的方法可以通過施加選定的特定壓力和溫度而提供豐富的人參皂甙Rg5，其顯示了各種藥理學活性，並且含有加工人參及其提取物的組成物可以用作藥劑或保健食品，以預防或治療各種疾病，尤其是癌症。[39]根據以下結合附圖所作的詳細說明，可以更清楚地了解本發明的上述及其他目的、特徵和其他優點，所附圖形包括[40]圖1顯示了人參提取物(Gl-1)[41]圖2顯示了人參提取物(Gl-2)[42]圖3顯示了人參提取物(Gl-3)[43]圖4顯示了人參提取物(Gl-4)[44]圖5顯示了人參提取物(Gl-5)[45]圖6顯示了人參提取物(Gl-6)[46]圖7顯示了人參提取物(Gl-7)[47]圖8顯示了人參提取物(G2-l)[48]圖9顯示了人參提取物(G2-2)[49]圖10顯示了人參提取物(G2-3)的液相色譜和質譜分析的結果；[50]圖11顯示了人參提取物(G3)的液相色譜和質譜分析的結果；[51]圖12顯示了人參提取物(G4)的液相色譜和質譜分析的結果；[52]圖13顯示了人參提取物(STD)的液相色譜和質譜分析的結果；[53]圖14表示人參提取物的抗癌活性。具體實施方式[54]本發明將通過以下示例予以更明確地說明。但應了解，本發明不以任何方式限於這些示例。["]比較示例1:根據韓國專利註冊第10-0192678號公開的過程製備加工人[56]將非乾燥及切片的lkg人參根部放入天然藥提取裝置(20L/Kukje-kigong，韓國)中，然後以130°C的蒸汽加熱2小時。將受蒸的人參在50-60。C下乾燥，並粉碎成粉末尺寸為50-200微米的細粉，以獲得195g人參粉末，用作比較樣本(下稱"STD")。的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果的液相色譜和質譜分析的結果[57]示例1:製備本發明的未去皮人參提取物[58]1-1.製備人參提取物(Gl-1)[59]將浸入600mL蒸餾水中的風乾及切片的300g六年參齡未去皮人參根部放入天然藥提取裝置(20L/Kukje-kigong，韓國)，然後加熱2小時，同時保持內部溫度範圍126。C妾lj130°C及內部壓力範圍1.4至U1.5kgf/cm2。將加工人參與水分離，並在60-70。C下乾燥，並且粉碎成粉末尺寸為50-200微米的細粉，以獲得255g人參粉末(產率85.0%)，以用作樣本(下稱"Gl-l")。[60]1-2.製備人參提取物(Gl-2)[61]除了將內部溫度改為103°C至U107。C以及將內部壓力改為1.40至lj1.50kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得280g人參粉末(產率93.3%)，以用作樣本(下稱"Gl-2")。[62]1-3.製備人參提取物(Gl-3)[63]除了將內部溫度改為110°C至U114°C以及將內部壓力改為1.40到1.50kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得260g人參粉末(產率86.7%)，以用作樣本(下稱"Gl-3")。[64]1-4.製備人參提取物(Gl-4)[65]除了將內部溫度改為126°C至lj130°C以及將內部壓力改為1.85到2.00kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得245g人參粉末(產率81.7%)，以用作樣本(下稱"Gl-4")。[66]1-5.製備人參提取物(Gl-5)[67]除了將內部溫度改為126°C到130°C以及將內部壓力改為2.30到2.50kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得240g人參粉末(產率:80.0°/。)，以用作樣本(下稱"G1畫5")。[68]1-6.製備人參提取物(Gl-6)[69]除了將內部溫度改為126°C到130°C以及將內部壓力改為2.80到3.00kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得235g人參粉末(產率78.3%)，以用作樣本(下稱"Gl-6")。[70]1-7.製備人參提取物(Gl-7)[71]除了將內部溫度改為133°C到137°C以及將內部壓力改為3.30到3.50kgPCm2之外，所有過程都類似於示例1-1中所述的情況，以獲得162g參粉末(產率:54.0%)，以用作樣本(下稱"G1畫7")。[72]示例2:製備本發明的去皮人參提取物[73]2-1.製備人參提取物(G2-l)[74]將浸入600mL蒸餾水中的風乾及切片的300g六年參齡去皮人參根部放入天然藥提取裝置(20L/Kukje-kigong，韓國)，然後加熱2小時，同時保持內部溫度範圍126°C到130°C及內部壓力範圍2.80至U3.00kgf/cm2。將加工人參與水分離，並在60-70°C下乾燥，並且粉碎成粉末尺寸為50-200微米的細粉，以獲得249g人參粉末(產率83.0%)，以用作樣本(下稱"G2-1")。[75]2-2.製備人參提取物(G2-2)[76]除了將內部溫度改為126°C到130°C以及將內部壓力改為1.40到1.50kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例2-1中所述的情況，以獲得260g人參粉末(產率86.7%)，以用作樣本(下稱"G2-2")。[77]2-3.製備人參提取物(G2-3)[78]除了將內部溫度改為133°C到137°C以及將內部壓力改為3.30到3.50kgf/cm2之外，所有過程都類似於示例2-1中所述的情況，以獲得220g人參粉末(產率73.3%)，以用作樣本(下稱"G2-3")。[79]示例3:製備本發明的人參(G3)[80]除了使用300g四年參齡未去皮圓形人參及將提取條件中的內部溫度和內部壓力調整為126°C至lj130°C及1.40至U1.50kgf/cm2以外，所有過程都類似於示例1中所述的情況，以獲得236g人參粉末(產率78.7%)，以用作樣本(下稱"G3")。[81]示例6:製備本發明的人參(G4)[82]除了使用300g六年參齡未去皮二級人參及將提取條件中的內部溫度和內部壓力調整為126°C至lj130°C及1.40至lj1.50kgf/cm2以外，所有過程都類似於示例1中所述的情況，以獲得250g人參粉末(產率83.3%)，以用作樣本(下稱"G4")。[83]實驗示例1:成分及含量分析[84]樣本製備[85]將20ml甲醇和20ml二氯甲烷添加到每2g從比較示例及示例製備的樣本中並執行回流提取60分鐘。對溶液進行冷卻、過濾以除去不可溶的物質並將上層清液濃縮，以獲得其殘留物。每種最終樣本提取物的重量分別為0.183g(Gl-l)、0.110(Gl畫2)、0.160(Gl-3)、0.154g(Gl陽4)、0.131g(Gl-5)、0.192g(Gl-6)、0.079g(Gl-7)、0.148g(G2-l)、0.070(G2畫2)、0.061g(G2畫3)、0.079g(G3)、0.083g(G4)及0.124g(STD)。[86]液相色譜-質譜分析[87]將甲醇和二氯甲烷的溶劑混合物(1:1)添加到步驟1-1製備的測試樣本中，其用量分別為18.3ml(Gl-1)、11.0ml(Gl-2)、16.0ml(Gl-3)、15.4ml(Gl-4)、13.1ml(Gl-5)、19.2ml(Gl-6)、7.9ml(Gl-7)、14.8mL(G2畫l)、7.0ml(G2-2)、6.1ml(G2-3)、7.9ml(G3)、8.3ml(G4)禾Q12.4ml(STD)，以確保將每種樣本的最終樣本濃度調整為彼此相同。對3ml的每種樣本進行微離心過濾，轉速為1300rpm，持續時間為15分鐘。在表1所示的條件下將5微升的每種上層清液注入液相色譜質譜分析裝置，並且結果顯示於圖1至13中。網表1液相色譜-質譜分析模型AGILENT:1100SeriesLC/MSD色譜柱MicrobondaPak-NH2;3.0x390mm(水)流動相CH3CN:H20:i-PrOH=80:5:15流速1.5ml/min檢測波長280■[89]與每種樣本的比較結果顯示於表2中。[90]如表1所示，可以確認，示例中製備的人參皂甙Rg5的含量與比較示例相比要高出大約4.4及3.3倍。[91]因此，可以確認，本發明的製備方法優於現有技術中公開的方法。[92]表2tableseeoriginaldocumentpage11tableseeoriginaldocumentpage12[93]另外，本發明人研究發現了最佳的提取條件，尤其是通過在0.60:1.40至1.20:0.80的範圍內改變甲醇和二氯甲垸的混合物體積比而研究提取溶劑系統的混合物比率，並最終發現，其中最有效的提取條件是導電常數為20.75的甲醇和二氯甲垸(1:1)的溶劑混合物。[94]因此，我們已經確認，用於獲得豐富人參皂甙Rg5的最有效的提取溶劑系統是用於獲得豐富人參皂甙Rg5的甲醇和二氯甲烷(1:1)的溶劑混合物。[95]實驗示例2:抗癌活性的確定[96]通過以下實驗確定實驗示例1中製備的富含人參皂甙Rg5的人參提取物的抗癌活性。[97]樣本製備[98]將通過根據示例2-1所述的過程的方法製備、使用甲醇和二氯甲烷溶劑混合物(1:1)提取的本發明的人參提取物通過溶解於蒸餾水(5mg/ml)而用作測試樣本(下稱"GMM")。[99〗測試動物[100]將在相同環境下飼養的重10-15g的四周齡C57BL/6老鼠分成兩組，即80隻老鼠作為測試組，20隻老鼠作為對照組。以B16黑素瘤細胞株對測試組進行注射，以使其發生癌症，而對照組不進行這種注射。將測試組進一步分成兩組，即僅以蒸餾水治療的測試組(1)以及在第5周以等量本發明GMM提取物治療的測試組(2);並且將對照組也分成兩組，即僅以蒸餾水治療的對照組(1)以及在第5周以等量本發明的提取物治療的對照組(2)。[101]測試過程[102]在對照組(2)和測試組(2)中，在相同環境下飼養的重10-15g的四周齡C57BL/6老鼠在斷乳之後(出生後四周)可以自由地飲用含有通過上述步驟製備的本發明的溶液。在發生癌症的組中，以B16黑素瘤細胞對老鼠的腹部進行皮下注射。[103]在C02培養器中對B16黑素瘤細胞進行次培養1周，並將含有胎牛血清的浮動細胞稀釋RMPI1640培養基(調整為1x106個細胞/ml)注入O.lml。[104]每隔五天，在每個組的注射及存活期之後，通過癌的尺寸確定癌生長率及存活期。將癌生長率與癌的重量進行比較，並通過以下數學公式1計算結果。[105]數學公式17'/w"^gA/Q/ow究/ewg^i二^^C^"乂zAQ^"》"K^^wg"^m柳)s^^dewgW,^/^^"'^^"g,A(附"o[106]測試結果[107]如圖14所示，第1周，測試組(1)有55%的老鼠發生癌症，而測試組(2)有25%的老鼠發生癌症。在第12天和第17天，測試組(1)屮分別有80%和95%的老鼠發生癌症，同時測試組(2)中分別有35%和42.5%發生癌症。在第24天，測試組(1)中有100%的老鼠發生癌症，而測試組(2)中有52.5%的老鼠發生癌症。[108]如表3所示，在注射癌細胞株之後1周，平均癌重量未顯示顯著的差異(平均癌重量O.lg)，但測試組之間的平均癌重量的差異逐漸增加，即測試組(1)和(2)中的平均癌重量在第12天時為0.4g和0.3g，在第17天時為L8士0.3g和1.5士0.2g，在第22天時為5.1士0.2g禾n3.3士1.0g，而在第57天時為22.4士5.3g和9.8士2.1g。[109]另外，在第12天時，測試組(1)和(2)中未顯示死老鼠，而在第17天，測試組(1)中死了一隻老鼠。在注射了癌細胞之後，測試組(2)中85%的老鼠存活了42天以上，而測試組(1)中大約50%的老鼠存活。在第60天，測試組(1)中的所有老鼠都死了，而測試組(2)中60%的老鼠存活。tableseeoriginaldocumentpage13tableseeoriginaldocumentpage14[111]因此，可以確認，通過本發明的新穎方法製備的人參提取物顯示了有效的抗癌活性，因為本發明的方法可以提供豐富的人參皂甙Rg5，其顯示了有效的抗癌活性。[112]實驗示例3:毒性測試[113]方法[114]適用本發明的提取物對SD老鼠(平均體重25士5g)及Sprague-Dawley大鼠(235±10g)進行急性毒性測試。每個由3隻老鼠或大鼠組成的組分別口月艮lg/kg的測試樣本或溶劑(0.2g，i.p.)並觀察24小時。[115]結果[116]在任何組或性別中，對死亡率、臨床徵象、體重變化及重大發現沒有與治療相關的影響，並且己經確認，口服的本發明的提取物的LD50超過lg/kg。這些結果表明，本發明製備的新穎提取物是有效的、安全的。[117]下文說明了配製方法及多種賦形劑，但不發明不限於此。以下說明了代表性的製備示例。[118]粉劑製備[119]示例1的乾燥粉末(Gl-l)20mg[120]乳糖100mg[121]滑石10mg[122]通過混合上述成分並填充密封包裝來製備粉末製劑。[123]片劑製備[124]示例1的乾燥粉末(Gl-1)10mg[125]玉米澱粉100mg[126]乳糖100mg200680011768.2說明書第13/15頁:127:i28:129no:i3i:132:133■134劑':135:136137:1381392m:140"I143:144:145146147148制:149150硬脂酸鎂2mg通過混合上述成分並做成藥片來製備片劑。膠囊劑製備示例1的乾燥粉末(Gl-1)10mg結晶纖維素100mg乳糖100mg硬脂酸鎂2mg通過混合上述成分並通過傳統的凝膠製備方法填充凝膠膠囊劑而製備膠注射劑製備示例2的提取物(G2-l)10mg注射用的蒸餾水最佳量PH控制劑最佳量通過傳統的注射劑製備方法溶解活性成分、將pH控制在約7.5、然後以填充所有成分並進行消毒，從而製備注射製劑。液體製備示例2的提取物(G2-1)0.180g糖5-10g檸檬酸0.05-0.3%焦糖0.005-0.02%維生素C0.1-1%蒸餾水79-94%C02氣體0.5-0.82%通過傳統的液體製備方法溶解活性成分、填充所有成分並消毒來製備液體IJ。保健食品的製備示例1的提取物(G2-l)1000mg151]維生素混合物最佳量—152]維生素A醋酸鹽70mg153]維生素El.Omg154]維生素Bl0.13mg155]維生素B20.15mg156]維生素B60.5mg157]維生素B120.2mg158]維生素C10mg159]生物素10mg160]煙酸胺1.7mg16]葉酸50mg162]泛酸鈣0.5mg163]礦物質混合物最佳量164]硫酸亞鐵1.75mg165]氧化鋅0.82mg—166]碳酸鎂25.3mg—167]磷酸一鉀15mg—168]磷酸二鈣55mg169]檸檬酸鉀90mg170]碳酸鈣lOOmg171]氯化鎂24.8mg172]上述維生素和礦物質混合物可以多種方式變化。這種變化不應視為脫離本發明的主旨和範圍。173]保健飲料的製備—174]示例1的提取物(G2-2)1000mg—175]檸檬酸lOOOmg176]寡糖100g[177]杏濃縮物2g[178]牛磺酸lg[179]蒸餾水900g[180]通過傳統的保健飲料製備方法溶解活性成分，混合，在85°C下攪拌1小時，過濾，然後以lOOOg填充所有成分並進行消毒，從而製備保健飲料。[181]上文已對本發明進行了描述，顯然，本發明可以許多方式修改。這種變化不應視為脫離本發明的精神和範圍，並且對本領域的技術人員而言顯見的所有這種修改都要包括在以下權利要求書的範圍內。工業適用性[182]根據本發明的用於製備加工人參的方法可以通過施加選定的特定壓力和溫度而提供豐富的人參皂甙Rg5，其顯示了各種藥理學活性，並且含有所述加工人參及其提取物的組成物可以用作藥劑或保健食品，以預防或治療各種疾病，尤其是癌症。權利要求1.一種用於製備藥理學上有效的人參產品的方法，其由以下步驟所組成將相當於人參重量1到3倍的水添加到五到七年參齡的人參材料中，並且對於未去皮人參的情況是在1.20到1.50kgf/cm2的內部壓力下，而對於去皮人參的情況是在2.30到3.00kgf/cm2的內部壓力下，在大約110到130℃的溫度範圍內，處理1到5小時，以獲得具有大量人參皂甙Rg5的目標加工人參。2.如權利要求1所述的方法，所述人參材料為六年參齡的未去皮人參或去皮人參。3.—種用於提取加工人參的提取物的方法，其由以下步驟所組成使用回流提取方法，通過由甲醇和二氯甲垸混合的有機溶劑混合物，對從權利要求1所述的方法製備的加工人參材料進行提取，持續時間為1小時至兩天；進行過濾，以獲得濾液，將濾液濃縮，以除去剩餘的溶劑並進行乾燥，以獲得富含人參皂甙Rg5的有效人參提取物。4.如權利要求3所述的方法，所述溶劑混合物是甲醇和二氯甲烷以0.60:1.40至1.20:0.80的混合體積比混合的溶劑混合物。5.—種含有從權利要求1或3所述的方法製備的人參提取物及醫藥上可接受的載劑或佐劑的醫藥組成物，用於治療或預防癌病。6.如權利要求5所述的醫藥組成物，其中，所述組成物作為散劑、粉劑、顆粒、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、液體藥劑、糖漿、酏劑丸劑、溶液、香囊、霜齊U、軟膏、洗齊"凝膠、香油、貼片、糊劑、噴霧液、氣溶膠或注射劑提供。7.—種含有通過權利要求1或3所述的方法製備的提取物的保健食品，其顯示了有效的抗癌活性及營養學上可接受的食品添加劑。8.如權利要求7所述的保健食品，其中，所述保健食品作為片劑、膠囊劑、散劑、粉劑或顆粒提供。全文摘要本發明涉及一種通過施加選定範圍的壓力和溫度製備可提供豐富人參皂甙Rg5的藥理學上有效的人參產品及其提取物的加工方法，所述人參皂甙Rg5顯示了各種藥理學活性，因此，含有本發明的加工人參及其提取物的組成物可以用作藥劑或保健食品，以預防或治療各種疾病，尤其是癌病。文檔編號A23L1/212GK101155521SQ200680011768公開日2008年4月2日申請日期2006年4月11日優先權日2005年4月12日發明者崔鎮華,鄭侑燮申請人:百奧生物醫藥化學基因有限公司;鄭侑燮