一種抗腫瘤的異甘草素片劑的製作方法

2023-05-07 02:20:16

專利名稱：：一種抗腫瘤的異甘草素片劑的製作方法
技術領域：
：本發明涉及製藥領域，更具體涉及一種抗腫瘤的異甘草素片劑。適用於人宮頸癌細胞、前列腺癌細胞、Sm)瘤株、艾氏腹水癌細胞、人A549肺癌細胞、口腔表皮癌KB細胞、KM-12結腸癌細胞、BEL-7402肝癌細胞和MCF-7乳腺癌細胞。
背景技術：
：1.腫瘤已成為威脅人類健康的頭號殺手腫瘤是嚴重威脅人類生命的常見病和多發病之一，其發病率逐年增高。據世界衛生組織調査表明，全世界每年新發現癌症患者近1000萬人。每年因癌症死亡的人數近700萬人。最近統計資料表明，我國每年新發現癌症患者約2000萬人，近150萬人死於癌症。癌症的死亡人數佔總死亡數的1/5。因此防癌、治癌，已成為一項迫在眉睫的艱苦任務。2.當前治療腫瘤的方法較多，但都存在一定的局限性治療腫瘤的傳統方法有手術切除、放射治療和化療。但對於很多病人，可能在被確診為腫瘤時，就已經失去了手術切除的機會；而放射治療則存在局部的限制性和對正常組織的損傷性；化學(藥物)普遍存在細胞毒性作用，特別對肝、腎、骨髓和消化系統毒副作用嚴重，因此，大大制約了它們在臨床上的使用。新興的介入治療對原發灶有一定的作用，但難以對付不斷散發的轉移灶；現代分子耙向性(基因)治療給腫瘤患者帶來曙光，但其載體構建、載體與彈頭的交聯及其在機體分布、代謝過程中的變化等諸多問題還在探討之中。3.黃酮類化合物的抗腫瘤作用黃酮類化合物是一類多酚化合物，廣泛存在於多種綠色蔬菜、水果和藥用植物中。近年來，黃酮類化合物在維持人體正常生理功能及防治疾病方面的作用受到了廣泛的重視。流行病學調查顯示，經常攝入富含黃酮類化合物的蔬菜和水果可以降低肺癌、大腸癌和乳腺癌等癌症的發病率(ArmstrongB，DollR.Environmentalfactorsandcancerincidenceandmortalityindifferentcountries,withspecialreferencetodietarypractices[J].IntJCancer.1975,15(4):617-631.)。由於黃酮類化合物的抗腫瘤活性往往具有高效低毒等特點，許多發達國家如美國不斷在進行黃酮類化合物抗腫瘤作用的篩選工作。黃酮類化合物具有抗腫瘤作用的發現促使人們試圖從天然植物中製備腫瘤化學藥物的熱情。到目前為止,研究結果是令人鼓舞的(l)黃酮類化合物抑制細胞增殖，主要是使細胞周期停止,對腫瘤細胞有細胞毒作用，而對正常細胞無毒性和致突作用，反而有抗氧化和正向的免疫調節作用；(2)黃酮類化合物促進腫瘤細胞凋亡；(3)黃酮類化合物能抑制細胞信號轉導過程中的酪氨酸蛋白激酶、蛋白激酶C、磷脂醯肌醇一3激酶活性；(4)黃酮類化合物具有抗炎、抗氧化壓力和促進抑癌基因表達而抑制癌基因表達的作用。目前，黃酮類化合物抗腫瘤作用的篩選工作仍在不斷進行，我國是一個具有豐富中草藥資源的國家，充分開發黃酮類化合物為人類健康服務是我國的優勢。異甘草素為甘草中的一種有效單體，屬黃酮類化合物，具有抗腫瘤、抗病毒、抗自由基、抑制脂質過氧化等生物活性(IiT,SatomiY,KatohD,etal.Inductionofcellcyclearrestandp21CIPl/WAFlexpressioninhumanlungcancercellsbyisoliquiritigenin[J].CancerLett,2004，207(1):27—35;HaraguchiH，IshikawaH,MizutaniK，etal.AntioxidativeandsuperoxidescavengingactivitiesofretrochalconesinGlycyrrhizainflata.[J].BioorgMedChem,1998,6(3):339-347)。近年來國外文獻報導，異甘草素能抑制肺癌、乳腺癌和前列腺癌等多種腫瘤細胞增殖(KanazawaM,SatomiY,MizutaniY,etal.Isoliquiritigenininhibitsthegrowthofprostatecancer[J].EurUrol,2003,43(5):580-586;HsuYL,KuoPL,ChiangLC,etal.Isoliquiritigenininhibitstheproliferationandinducestheapoptosisofhumannon-smallcelllungcancerA549cells[J],ClinExpPharmacolPhysiol,2004,31(7):414-418)。另外，我們的研究還表明ISL能抑制宮頸癌細胞的增殖(張晶，等.異甘草素對人宮頸癌細胞增殖的抑制作用.中國藥理學與毒理學雜誌，2005,19(6):436-442)。但是，迄今為止，經檢索沒有異甘草素抗腫瘤片劑或膠囊劑等口服製劑的製備方法被公開或使用。
發明內容本發明的目的是在於提供一種抗腫瘤的異甘草素片劑，它由異甘草素、填充劑、粘合劑、崩解劑、潤溼劑、潤滑劑按一定比例構成，配方合理，使用方便，對人體無毒，無刺激性，使用安全，效果良好。異甘草素(isoliquiritigemn,ISL)，其化學結構為2，，4'，4，-三羥基査耳酮，為甘草中的一種有效單體，屬黃酮類化合物(化學結構式請見I)，具有抗腫瘤、抗病毒、抗自由基、抑制脂質過氧化等生物活性。近年來文獻報導，ISL能抑制肺癌、乳腺癌、前列腺癌和宮頸癌等多種腫瘤細胞增殖。但是，迄今為止，經檢索沒有異甘草素抗腫瘤片劑的製備方法被公開或使用。異甘草素的分子結構為0(I)異甘草素的來源異甘草素來源廣泛，既可以化學合成，也可以從甘草中分離提取，而且市場上均有購置。本發明將異甘草素用於製備抗腫瘤的片劑。為了實現本發明採用以下技術方案該片劑由下述原料按重量百分比製成；原料重量百分比(％)異甘草素1015填充劑7185粘合劑18崩解劑18潤溼劑16潤滑劑12其製備步驟如下①加入輔料向異甘草素中分別加入填充劑、粘合劑和崩解劑後加入潤溼劑混勻製成軟材；②制粒將混勻的軟材過50-200目尼龍篩制粒，7080°C烘乾30分鐘，過50-200目鐵篩整粒；③壓片加入潤滑劑壓片製成片劑。所述的填充劑為澱粉、糊精、糖粉、預膠化澱粉、乳糖、葡萄糖、微晶纖維素、碳酸鈣、硫酸鈣、碳酸氫鈣或其他藥學上可接受的填充劑的其中一種或其中二到十種或任意組合；所述的粘合劑為液狀葡萄糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素或其他藥學上可接受的粘合劑的其中一種或其中二到五種或任意組合；所述的崩解劑為交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、羧甲基澱粉鈉、羥丙基澱粉、低取代羥丙基纖維素、檸檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氫鈉、碳酸鈉或其他藥學上可接受的崩解劑的其中一種或其中二到九種或任意組合；所述的潤溼劑為水、乙醇或其組合；所述的潤滑劑為硬脂酸鎂、滑石粉、液狀石蠟、聚乙二醇或其他藥學上可接受的潤滑劑的其中一種或其中二到四種或任意組合。本發明的優點1.異甘草素來源廣泛，既可以化學合成，也可以從甘草中分離提取，而且市場有售。2.本發明釆用常規口服劑型，技術成熟，生產工藝簡單易行。3.本發明釆用口服給藥方式，給藥方便，無痛苦。4.異甘草素片劑對人體毒副作用小，使用安全，抑瘤率可達到47.374.9%，效果良好。5.本發明採用的異甘草素片劑不僅有明顯的抑瘤作用而且減毒增效作用明顯。具體實施方式下面將描述本發明的實施例，但本發明的內容完全不限於此。tableseeoriginaldocumentpage8其製備步驟如下:①加入輔料向異甘草素中分別加入填充劑、粘合劑和崩解劑後加入潤溼劑混勻製成軟材；②制粒將混勻的軟材過50-200目尼龍篩制粒，7080。C烘乾30分鐘，過50-200目鐵篩整粒；③壓片加入潤滑劑壓片製成片劑。所述的填充劑為澱粉、糊精、糖粉、預膠化澱粉、乳糖、葡萄糖、微晶纖維素、碳酸鈣、硫酸鈣、碳酸氫鈣或其他藥學上可接受的填充劑的其中一種或其中二到十種或任意組合；所述的粘合劑為液狀葡萄糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素或其他藥學上可接受的粘合劑的其中一種或其中二到五種或任意組合；所述的崩解劑為交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、羧甲基澱粉鈉、羥丙基澱粉、低取代羥丙基纖維素檸檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氫鈉、碳酸鈉或其他藥學上可接受的填充劑的其中一種或其中二到九種或任意組合；所述的潤溼劑為水、乙醇或其組合；所述的潤滑劑為硬脂酸鎂、滑石粉、液狀石蠟、聚乙二醇或其他藥學上可接受的填充劑的其中一種或其中二到四種或任意組合。藥效學實驗為了公開本發明的實質，結合本發明從抑瘤作用和減毒增效等方面對異甘草素製劑進行藥效學研究(一)實驗材料1、藥品異甘草素片劑由武漢大學藥物非臨床研究中心提供，批號030401;呋喃氟脲嘧啶(FT207)由濟南製藥廠生產，批號031003;環磷醯胺由江西恆瑞醫藥股份有限公司生產，批號21156—21160;複方阿膠漿由山東阿膠股份有限公司生產，批號040672。2、動物昆明種小鼠、BALB/c小鼠、SD種大鼠，雌雄兼用，由武漢大學實驗動物中心提供，許可證號SCXK(鄂)2003—0004。3、癌細胞株和靶細胞Sm)瘤株、艾氏腹水癌細胞，A549肺癌細胞、口腔表皮癌KB細胞、KM-12結腸癌細胞、BEL-7402肝癌細胞和MCF-7乳腺癌細胞株，由中國醫科院藥物所弓I進並傳代。4、試劑與儀器MTT由Sigma公司提供；450型酶標儀由美國BioRad生產。(二)實驗方法與結果1.抑瘤試驗1.1對多種癌細胞系的體外抑制作用用異甘草素片劑20、100、500mg.kg"處理小鼠，製備含藥血清；用0.25%胰酶消化、傳代細胞。用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養液調整細胞濃度至2Xl4個.mr1，96孔培養板每孔加入100pl，37。C，5XC02孵育24h，棄培養液，加入10%過濾除菌的含藥血清，37。C，5XC02共孵育18h，採用MTT法檢測細胞增殖。結果見表1。表l.異甘草素對不同癌細胞株細胞生長的影響(3^±&77=10)tableseeoriginaldocumentpage10與空白對照組比較，**P<0.01表1結果可見，與空白對照組比較，異甘草素大、中、小三個劑量組對人A549肺癌細胞、口腔表皮癌KB細胞、KM-12結腸癌細胞、BEL-7402肝癌細胞和MCF-7乳腺癌細胞的生長均有明顯的抑制作用，且存在一定的量效關係。1.2對S咖肉瘤株的抑制作用取腫瘤細胞(荷瘤小鼠腹腔S18Q肉瘤細胞2X1S個接種於雄性健康BALB/c裸鼠腋下，隨機分組。於接種後第2天開始灌胃給異甘草素，l次/天，劑量分別為20mg.kg"、lOOmg.kg"、500mg.kg—1，對照給予相應體積的溶媒，連續灌胃10天，於試驗結束時眼眶取血，摘瘤、稱瘤重。結果見表2。異甘草素大、中、小三個劑量組的抑瘤率分別為53.6%、45.7%和36.2%且存在一定的量效關係。表2.異甘草素對S哪荷瘤小鼠瘤體生長的影響(i士"tableseeoriginaldocumentpage10與空白對照組比較，*P<0.05，**P<0.011.3對艾氏腹水癌小鼠生存期的影響表3結果表明異甘草素大、中劑量組均延長艾氏腹水癌小鼠存活期，與荷瘤組比較有顯著性差異；小劑量t組的作用不明顯。三次試驗結果均表明異甘草素可延長荷瘤小鼠生存期。表3異甘草素對艾氏腹水癌小鼠生存期的影響(7±&"=10)tableseeoriginaldocumentpage112.減毒增效試驗2.1減毒試驗表4結果表明，大鼠注射環磷醯胺後，可使骨髓有核細胞數顯著下降，與正常對照組比較降低48.9%:而異甘草素大、中劑量t可明顯改善環磷醯胺引起的大鼠骨髓有核細胞數降低，與模型組比較具有顯著性差異。說明大、中劑量的異甘草素對化療藥造成的骨髓造血功能抑制具有一定的治療效果。表4異甘草素對環磷醯胺大鼠骨髓有核細胞數的影響(f±&77=10)tableseeoriginaldocumentpage11表5結果表明，大鼠注射環磷醯胺後白細胞和血小板數顯著下降，異甘草素大、中劑量組的白細胞和血小板數降低幅度較小，與模型對照組相比，有顯著性差別。提示異甘草素大、中劑量對環磷醯胺造成的白細胞和血小板減少有較好的對抗作用，可以在一定程度上減輕化療藥的毒副作用。表5異甘草素對環磷醯胺大鼠外周血血液學指標的影響(3f±A77=10)tableseeoriginaldocumentpage12與正常對照組比，AP<0.05，AAP<0.01;與模型對照組比，'P<0.05，"P<0.052.2增效試驗結果見表6。單獨用環磷醯胺(25mg/kg)和異甘草素(20mg/kg)組的抑瘤率分別為28.3%和29.8%,而聯合使用環磷醯胺(25mg/kg)+異甘草素(20mg/kg)的抑瘤率達到72.7%，與單獨用藥組比較，抑瘤率均顯著提高。以上結果可以看出，異甘草素與小劑量的化療藥合用，可提高抑瘤率，顯示了聯合用藥的優勢。表6異甘草素與環磷醯胺合用對Sm)瘤株生長的影響(3士s,/7=10)tableseeoriginaldocumentpage12與生理鹽水組比較，"P<0.01;(三)結論上述實驗結果表明，異甘草素不僅具有明顯抑制腫瘤生長的作用，而且與化療藥合用時具有減輕其毒副作用和增強其抑瘤作用的效果。權利要求1、一種抗腫瘤的異甘草素片劑，它由下述原料按重量百分比製成原料重量百分比異甘草素10～15％填充劑71～85％粘合劑1～8％崩解劑1～8％潤溼劑1～6％潤滑劑1～2％；其製備步驟是①向異甘草素中分別加入填充劑、粘合劑和崩解劑後加入潤溼劑混勻製成軟材；②制粒將混勻的軟材過50-200目尼龍篩制粒，70～80℃烘乾30分鐘，過50-200目鐵篩整粒；③壓片加入潤滑劑壓片製成片劑；所述的填充劑為澱粉、糊精、糖粉、預膠化澱粉、乳糖、葡萄糖、微晶纖維素、碳酸鈣、硫酸鈣、碳酸氫鈣或其他藥學上可接受的填充劑的其中一種或二到十種或任意組合；所述的粘合劑為液狀葡萄糖、阿拉伯膠、明膠、羥甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素或其他藥學上可接受的粘合劑的其中一種或二到五種或任意組合；所述的崩解劑為交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、羧甲基澱粉鈉、羥丙基澱粉、低取代羥丙基纖維素、檸檬酸、酒石酸、酸酐、碳酸氫鈉、碳酸鈉或其他藥學上可接受的崩解劑的其中一種或二到九種或任意組合；所述的潤溼劑為水、乙醇或其組合；所述的潤滑劑為硬脂酸鎂、滑石粉、液狀石蠟、聚乙二醇或其他藥學上可接受的潤滑劑的其中一種或二到四種或任意組合。2、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素10%，澱粉85%，阿拉伯膠2%，交聯羧甲基纖維素鈉1%，乙醇1%，硬脂酸鎂1%。3、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素10.5%，糊精84%，羥甲基纖維素2%，羧甲基澱粉鈉1%,乙醇1%，聚乙二醇1%。4、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素11.0%，澱粉83%，阿拉伯膠3%，羥丙基澱粉1%，乙醇1%，聚乙二醇1%。5、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素11.5%，糊精81%，明膠1%，羧甲基澱粉鈉3%，乙醇2.5%，硬脂酸鎂1%。6、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素12.0%，糊精78%，羥甲基纖維素2%羥丙基澱粉4%，乙醇2.5%，聚乙二醇1%。7、根據權利要求1所描述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素12.5%，澱粉77%,阿拉伯膠1%，羥丙基澱粉4.5%，乙醇3%，硬脂酸鎂2%。8、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素13.0%，糊精76%，羥甲基纖維素3%，碳酸氫鈉3%，乙醇3%，滑石粉2%。9、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素13.5%，糊精75%，明膠4%，碳酸氫鈉3.5%，乙醇2%，硬脂酸鎂2%。10、根據權利要求1所述的一種抗腫瘤的異甘草素片劑，其特徵在於它由下述原料按重量百分比製成異甘草素14.0%，澱粉73%,明膠3%，羥甲基纖維素2.5%，碳酸氫鈉6%，乙醇2.5%，滑石粉2%。全文摘要本發明公開了一種抗腫瘤的異甘草素片劑。將異甘草素作為有效成分用於製備抗腫瘤的片劑。它由異甘草素、填充劑、粘合劑、崩解劑、潤溼劑、潤滑劑按一定比例構成，配方合理，使用方便。所得的藥物組合物具有很好的抗腫瘤作用，而且其配方合理，效果良好，毒副作用少。文檔編號A61K31/12GK101152165SQ20071005314公開日2008年4月2日申請日期2007年9月6日優先權日2007年9月6日發明者洋劉,倩周,英敖,朱玲新,穎李,靜楊,昊程,剛陳申請人:武漢大學