黴菌氧化物的生物發酵方法
2023-05-07 13:09:06 2
專利名稱：黴菌氧化物的生物發酵方法
技術領域：
本發明屬於一種留體激素類藥物黴菌發酵工藝，尤其是一種黴菌氧化物的生物發酵方法。
背景技術：
留體化合物類藥物生產過程中，「黴菌氧化物」是製備激素類藥物重要的中間體，通過生物發酵，使用「黑根黴(Rhizzopus nigricans)」將底物「沃氏氧化物」轉化為「黴菌氧化物」，該過程受著諸多因素、條件的限制。雖多年來工藝不斷改進，各項指標有所提高，但其轉化率、收率、指標並無大的突破。近年來，隨著激素類藥物不斷研製、開發，一些高效、低毒產品不斷推向市場，「黴菌氧化物」這個重要的中間體，更加顯現出它的重要地位。因此，在穩定產品質量前提下，改變突破現有工藝達到轉化率、收率的高指標，產品的高產率尤顯重要。據檢索，專利文獻CN102174630公開了一種留體激素類藥物黴菌發酵工藝，尤其涉及到黴菌發酵生物合成製備黴菌氧化物新工藝，它是以碳源、氮源和消沫劑為主要原料，碳源:葡萄糖60 85kg ;氮源:玉米眾60 85kg ;蠶蛹粉10 20kg ;硫酸銨5 IOkg ；消沫劑:聚醚1000 2000ml ;攪拌反應，並在生物發酵過程中通入空氣，在26±4°C攪拌反應，並在生物發酵過程中進行通氣，經24-72h氧化反應，再經板框壓濾脫水、吹乾，將底物沃氏氧化物轉化為含有黴菌氧化物的菌絲體，再經丙酮提取得到黴菌氧化物粗品，經甲苯、氯仿混合溶劑精製得到黴菌氧化物精品。本發明在上述發明的基礎上，經過進一步研發，將培養基的成分經過科學配比，獲得更加優良的培養基配方，收率獲得很大提高。
發明內容
本發明的目的在於克服現有技術的步驟之處，提供一種黴菌氧化物的生物發酵方法，本發明重新對發酵培養 基進行配伍，提出一種全新的培養基成分，大幅度提高產品轉化率和收率。本發明的目的是通過以下技術方案實現的:—種黴菌氧化物的生物發酵方法，所用培養基的成分及重量份數如下:葡萄糖80-90玉米漿50-70蠶蛹粉2-10硫酸銨2-10棉籽蛋白2-10。而且，培養基還包括消泡劑。而且，所述消泡劑為聚醚消泡劑。而且，發酵的具體方法如下:
⑴將發酵培養基一次投入一級種子罐中，加水，攪拌均勻後，加入30%鹼液，調整PH4.8-5.0,進行蒸汽滅菌，降溫至27-28°C，接入「黑根黴」孢子懸浮液，通氣攪拌下培養18-20h,鏡檢達標後形成一級種子液；⑵二級發酵罐培養基同一級發酵罐配比，滅菌，降溫，移入一級種子液後，通氣、攪拌、培養18-20h，鏡檢達標，投入底物「沃氏氧化物」，進行生物氧化至24-50h，取樣鏡檢，及色譜測試底物達標後，提高溫度至50-60°C時，培養結束獲得黴菌氧化物培養液及菌絲體，放料濾幹再提純精製黴菌氧化物。本發明的優點和積極效果是:本發明在氮源的組分中首次使用了棉籽蛋白最為新的氮源配方，彌補蛋白質含量偏低，胺基酸配方不夠合理等缺陷，同時棉籽蛋白中含有微量元素鐵，不會給微生物的生長廣生不良影響，進而提聞發酵效率，增加收率。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護範圍。本發明的化學反應式是:
權利要求
1.種黴菌氧化物的生物發酵方法，其特徵在於:所用培養基的成分及重量份數如下:葡萄糖80-90 玉米漿50-70 香蛹粉2_10 硫酸銨2-10 棉籽蛋白2-10。
2.據權利要求1所述的黴菌氧化物的生物發酵方法，其特徵在於:培養基還包括消泡劑。
3.據權利要求1所述的黴菌氧化物的生物發酵方法，其特徵在於:所述消泡劑為聚醚消泡劑。
4.據權利要求1所述的黴菌氧化物的生物發酵方法，其特徵在於:發酵的具體方法如下: (1)將發酵培養基一次投入一級種子罐中，加水，攪拌均勻後，加入30%鹼液，調整PH4.8-5.0,進行蒸汽滅菌，降溫至27-28°C，接入「黑根黴」孢子懸浮液，通氣攪拌下培養18-20h,鏡檢達標後形成一級種子液； ⑵二級發酵罐培養基同一級發酵罐配比，滅菌，降溫，移入一級種子液後，通氣、攪拌、培養18-20h，鏡檢達標，投入底物「沃氏氧化物」，進行生物氧化至24-50h，取樣鏡檢，及色譜測試底物達標後，提高溫度至50-60°C時， 培養結束獲得黴菌氧化物培養液及菌絲體，放料濾幹再提純精製黴菌氧化物。
全文摘要
本發明涉及一種黴菌氧化物的生物發酵方法，將發酵培養基一次投入一級種子罐中，加水，攪拌均勻後，加入30%鹼液，調整pH4.8-5.0，進行蒸汽滅菌，降溫至27-28℃，接入「黑根黴」孢子懸浮液，通氣攪拌下培養18-20h，鏡檢達標後移入二級發酵罐內；移入一級種子液後，投入底物「沃氏氧化物」，進行生物氧化至24-42h，取樣鏡檢，及色譜測試底物達標後，提高溫度至50-60℃時放料。本發明在氮源的組分中首次使用了棉籽蛋白最為新的氮源配方，彌補蛋白質含量偏低，胺基酸配方不夠合理等缺陷，同時棉籽蛋白中含有微量元素鐵，不會給微生物的生長產生不良影響，提高發酵效率，增加收率。
文檔編號C12R1/845GK103088099SQ20121059483
公開日2013年5月8日 申請日期2012年12月31日 優先權日2012年12月31日
發明者宋香羿 申請人:天津太平洋化學製藥有限公司