以3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸為連接臂的雜交肽、其製備方法及應用的製作方法
2023-05-07 15:23:16 3
專利名稱：以3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸為連接臂的雜交肽、其製備方法及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種雜交肽，尤其涉及以3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸為連接臂的雜交 肽、其製備方法，本發明還涉及該雜交肽作為及應用溶血栓劑的應用，屬於醫藥領域。
背景技術：
目前臨床使用的治療急性血栓栓塞性疾病的鏈激酶、尿激酶和重組組織型纖溶酶 原激活劑等藥物普遍存在全身出血傾向和免疫原性反應，尋找安全有效的溶血栓藥物是新 藥研究的熱點之一。發明人以纖維蛋白降解產物Ρ6Α(ARPAK)為先導結構，通過液相合成 進行結構修飾，得到了一系列寡肽(發明人彭師奇，趙明，王超，唐朝樞，王銀葉；發明名 稱心血管活性多肽以及它們的合成和在醫學中的應用；授權公告號CN1055479C ；授權公 告日2000年8月16日)。這些寡肽具有明確的溶血栓活性，成為優秀的溶血栓寡肽先導 結構。在研究P6A及類似物的代謝時，發明人使用LC/MS跟蹤P6A及類似物在小鼠體內的 變化，發現 P6A 在小鼠體內降解為 Arg-Pro-Ala-Lys, Pro-Ala-Lys, Ala-Arg-Pro-Ala 禾口 Ala-Arg-Pr0四種代謝產物。發明人用液相合成法製備了這四種代謝產物，在大鼠血栓模型 上確認了它們作為溶血栓劑的應用前景(彭師奇，趙明，王超，徐友宣，吳豔芬，P6A的代謝 產物及其在醫學中的應用，專利申請號01136780. 6，中華人民共和國知識產權局)。P6A及類似物作為溶血栓寡肽先導結構及P6A的代謝產物作為溶血栓寡肽先導結 構都有固有的改進空間，即體內存在的蛋白和多肽給它們的檢測造成的困難，以及LC/MS 檢測造成的技術和經濟困難都有待改進。發明人注意到咔啉羧酸具有優秀的抗血小板聚集 作用(姚鑫生等，中國藥物化學雜誌，1995，5，134)，同時咔啉羧酸的吲哚環母核具有優秀 的紫外吸收性質並且作為可食天然產物具有潛在的應用前景。發明人採用化學方法合成了 咔啉羧酸，並將咔啉羧酸作為藥效團引入到P6A及相關序列中製備擬肽。製得的擬肽包含 了 PAK序列肽的溶栓活性，還包含了咔啉羧酸的抗血小板聚集活性，以及具有紫外可檢測 性(發明人彭師奇，趙明，王超，吳豔芬；發明名稱含P6A相關序列的咔啉羧酸，它們的合 成和在醫學中的應用；授權公告號CN1373139 ；授權公告日2002年10月9日)。血小板聚集在血栓形成中有重要作用。正常的血小板在凝血酶原、二磷酸腺苷 或膠原的誘導下被激活，釋放花生四烯酸(AA)。AA經環氧化酶催化，生成環內過氧化物 (PGH2)。PGH2在異構酶的作用下生成血栓素A2(TXA2)，引起血小板聚集和粘附。血小板激 活後，表面的糖蛋白nb/IIIa(GP Ilb/IIIa)受體暴露，發生構象變化，並與纖維蛋白原結 合，導致血栓形成。研究GP Ilb/IIIa受體與纖維蛋白結合的過程中，發現纖維蛋白之中存 在的RGD序列是介導它自身與GP nb/IIIa結合的關鍵序列(Samanen J.，et al.，J.Med.Chem.，1991,34,3114)。發明人採用液相法合成了 RGDS，RGDV和RGDF，並證實它們可以抑制 血栓形成(趙明，彭師奇，含RGD四肽的合成與功能，藥學學報，1997，32，271)。發明人曾報 道，含RGD的四肽，例如RGDS，可以把溶血栓藥物，例如尿激酶，輸送到血栓形成部位，具有 明確的靶向性(凌世長，趙明，彭師奇，RGDS修飾的脂質體作為藥物載體導向溶栓的研究， 北京醫科大學學報，1994，26，174)。
發明內容
本發明目的之一是提供具有溶血栓劑活性的以3S-四氫- β -咔啉-3-羧酸為連 接臂的的雜交肽。本發明目的之一是通過通式II的化合物IIa-O來實現的
權利要求
1.通式II的化合物
2.一種製備權利要求1所述通式II化合物的方法，包括(1)按照常規方法分別製備下述三種四肽Arg-Gly-ASp-Ser-0H、 Arg-Gly-Asp-Val-OH, Arg-Gly-Asp-Phe-OH ；將上述三種四肽的C-端和側鏈用保護基進行 保護；(2)按照常規方法製備3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸，然後苄基化製備得到3S-四 氫-β-咔啉-3-羧酸苄酯；(3)按照常規方法分別製備N-端和側鏈保護的下述5種短肽Gly-Arg-Pro-Ala-Lys-OH> Gln-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Ala-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、 Arg-Pro-Ala- Lys-0H>Pro-Ala-Lys-OH ；(4)按照常規方法先分別將N-端和側鏈保護的Gly-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、 Gln-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Ala-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Arg-Pro-Ala-Lys-OH 或 Pro-Ala-Lys-OH連接到3S-四氫-β -咔啉_3_羧酸苄酯的2位氮上、脫去苄酯基；再分別 把 C-端和側鏈保護 Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-OH 或 Arg-Gly-Asp-Phe-OH 連 接到3S-四氫- β -咔啉-3-羧酸的3-位羧基上、脫去所有保護基，得到通式II化合物。
3.按照權利要求2所述製備方法，其特徵在於所述的3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸由 L-色氨酸與甲醛縮合製備得到。
4.一種治療溶血栓的藥物組合物，由有效量的權利要求1所述的通式II化合物和藥學 上可接受的載體或輔料組成。
5.權利要求1所述的通式II化合物在製備溶血栓藥物中的用途。
全文摘要
本發明公開了具有溶血栓活性的通式II的化合物，其製備方法以及它們作為溶血栓劑的應用。本發明採用大鼠頸動靜脈旁路插管血栓模型上評價了通式II化合物的溶血栓活性，動物實驗結果表明，本發明通式II的化合物具有優秀的溶血栓活性，臨床上可作為溶血栓劑應用。
文檔編號C07K1/06GK102120757SQ201010586608
公開日2011年7月13日 申請日期2007年6月4日 優先權日2007年6月4日
發明者崔國輝, 彭師奇, 溫敏, 趙明 申請人:北京大學