一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法
2023-04-30 14:01:36
一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法
【專利摘要】本發明涉及一種銀耳多糖的提取及純化方法，包括：將銀耳粉碎，加水浸泡，打漿，加混合酶進行酶解，然後將混合渣液置於循環超聲提取機中進行提取；固液分離，濃縮；乙醇靜置沉澱，得銀耳胞內多糖沉澱物；銀耳胞內多糖沉澱物加水,超聲波輔助溶解，上D101樹脂進行層析；最後將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，合併洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。本發明可以實現銀耳多糖提取的連續化、規模化生產；極大提高了銀耳多糖的產率及純度。
【專利說明】一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，屬於生化工程【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 銀耳（Tremella)，生於溫帶和亞熱帶地區，是有隔擔子菌亞綱銀耳科銀耳的子 實體，又稱白木耳。作為一種珍貴的食用菌和重要藥材，銀耳平甘無毒，滋陰、潤肺、養 胃、生津，治療肺熱咳嗽、胃炎、大便下血、痢疾、面部面斑、癌症腫瘤等病症。
[0003] 銀耳多糖具有廣泛的藥理學作用。調節機體免疫功能是許多多糖的主要藥理學作 用之一，是多糖的共性。
[0004] 人體腸胃道非免疫系統主要為內源微生物群。這些正常微生物是人體胃腸道中不 可缺少的組成部分，通常又分為有益微生物（如雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬）和有害微生物 群（如產氣莢膜梭菌屬、葡萄球菌屬）。有益微生物菌群通常覆蓋在胃腸道黏膜上皮表面， 阻止病原微生物在腸道黏膜組織上的定植。據目前的研究結果來看銀耳多糖可能具有果寡 糖、甘露寡糖、木糖的類似作用，能直接到達後腸作為雙歧桿菌和乳酸桿菌特異性的營養 物質，促進腸道理想微生物菌群的形成，增強人體對外源性病原菌的抵抗能力，改善腸 道的健康狀況，起到提高人體非免疫防禦系統的作用。研究表明，銀耳多糖能增強小鼠 機體體液免疫。銀耳多糖可增強正常小鼠及改善免疫功能低下小鼠的體液免疫功能。銀耳 多糖-Fe (III)配合物能減緩膜的脂質過氧化反應和抑制鄰苯三酚自氧化產生的氧自由基 對紅細胞膜的損傷，起到對細胞膜的保護作用。銀耳多糖可明顯促進正常小鼠和部分肝切 除小鼠的肝臟蛋白質及核酸合成，且銀耳多糖可優先促進損傷肝臟的修復。銀耳多糖亦 可通過促進核酸及蛋白質的合成、增加肝微粒體細胞色素 P-450含量、增強機體免疫功能 而發揮抗衰老作用。銀耳多糖可明顯降低高脂血症大鼠血清游離膽固醇、膽固醇脂、甘油三 酯、β-脂蛋白含量，降低高膽固醇血症小鼠總膽固醇含量，並可預防小鼠高膽固醇血症 的形成。銀耳多糖具有明顯的抗血栓形成作用。銀耳多糖可對抗環磷醯胺引起的小鼠骨髓 微核率增加，同時還可防止受照射動物的淋巴細胞染色體發生畸變。銀耳多糖對中樞神經 系統、呼吸系統、血液系統及心、肝、腎等均無毒性作用，不影響小鼠的生殖能力和幼仔的 成活率。銀耳多糖亦不會引起急、慢性中毒，無三致作用，屬無毒性物質。
[0005] 目前銀耳多糖的提取方法常用的有熱水浸提法、酸提取法、鹼浸提法等。酸、鹼的 添加對提取過程中已溶銀耳多糖的結構有一定的破壞。銀耳多糖提取液黏度的大小與其濃 度的大小成正比，即提取液的濃度越大，其黏度也越大；熱力對銀耳多糖的結構有一定 的破壞作用，提取液的溫度越高，其黏度越小；酸鹼性的改變會導致提取液中銀耳多糖 的分解，使其提取液的黏度下降。
[0006] 銀耳多糖無甜味，易溶於熱水。銀耳多糖的種類較多，其中大多數是以α-(1， 3)連接的甘露糖為主鏈，目前分為五大類，分別為酸性雜多糖、中性雜多糖、胞壁多糖、 胞外多糖及酸性低聚糖五類。最具代表性的是銀耳酸性雜多糖，其結構是以α-甘露聚糖 為主鏈，以β-(1，2)L_木糖、β-(1，2)葡萄糖醛酸和少量的巖藻為側鏈，其分子中 有典型的乙醯基結構。
[0007] 銀耳多糖屬於大分子物質，其分子量較大，而且它的理化性質及生物活性較為復 雜。目前對於銀耳多糖的研究的一個非常重要的方面就是銀耳多糖的分子量及其分布，而 銀耳多糖的分子量又與其理化性質及活性存在著一定的關係，且它也是多糖類藥物的一個 重要參數。由於分子量較大的多糖活性、結構較為複雜，所以銀耳多糖的提取及純化至關重 要，提取不當或純化不當，銀耳多糖很容易失去活性。
[0008] 發明目的 本發明提供一種高效提取分離銀耳多糖的方法，既提高銀耳多糖的得率同時保持多糖 的生物活性。
【發明內容】
[0009] 一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，包括以下步驟： (1) 將銀耳粉碎至40?60目，加20?40倍水浸泡1?2h，打漿；向打漿液中加入混 合酶，30?40°C條件下攪拌酶解1. 5?2. 5 h，酶解結束後，將混合渣液置於循環超聲提取 機中進行提取； (2) 循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮倍數為提取液體積的 1/6?1/8,優選1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10?15倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為 100W，超聲時間為20?30min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。
[0010] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。
[0011] 步驟（1)中所述的混合酶為纖維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶： 蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為200-500u/ml，蛋白酶的酶活為5-10萬u/g。
[0012] 進一步地： 步驟（1)中所述的銀耳與水的比例為1:30~1:35,優選1:32。
[0013] 步驟（1)中所述的循環超聲提取條件為：溫度30~35°C，優選35°C ;超聲功率為 500~1000W，優選900W ;循環攪拌轉速500~1000 rpm，優選800rpm ;佔空比1:2;超聲提取 時間2. 5~3. 5h，優選3h。
[0014] 步驟（2)中濃縮方式可採用真空減壓濃縮或膜濃縮。
[0015] 步驟（4)中所述的DEAE纖維素樹脂為DE52或DE32中的一種，優選DE52。
[0016] 步驟（5)中所述的洗脫液的乾燥方式為冷凍乾燥或噴霧乾燥。銀耳多糖的乾燥方 式為噴霧乾燥的最優條件為：進風溫度160~200°C，優選180°C;出風溫度為70~100°C，優選 90°C ;進料固形物含量為50~80%，優選60%。銀耳多糖的乾燥方式為冷凍乾燥的最優條件 為：冷凍溫度-20 ~ -80°C，優選-40°C ;固形物含量為70~90%，優選80%。
[0017] 本發明的優點在於： 1. 酶解過程將銀耳細胞壁進行消化，細胞壁變薄，銀耳多糖在超聲波的作用下可以 很快進入提取液中。
[0018] 2. 循環超聲提取較普通熱水提取銀耳多糖具有效率高，能耗低，多糖純度高等 優點。
[0019] 3. 經過優化篩選，DlOl樹脂最適宜對銀耳多糖進行純化，經過超聲波的提取聯 合DlOl樹脂純化，銀耳多糖純度可達95%以上。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0020] 圖1為本發明的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0021] 實施例1 (1)將銀耳粉碎至40目，加40倍水浸泡lh，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為500u/ ml，蛋白酶的酶活為5u/g; 40°C條件下攪拌酶解1.5h，酶解結束後，將混合渣液置於循環 超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度35°C ;超聲功率為500W，循環攪拌轉速 1000 rpm，佔空比1:2;超聲提取時間2. 5h。
[0022] (2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/6,提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加15倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為20min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE52。
[0023] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為噴霧幹 燥的最優條件為：進風溫度200°C，出風溫度為KKTC ;進料固形物含量為50%。
[0024] 銀耳多糖的得率為11. 23%，多糖純度為95. 2%。
[0025] 實施例2 (1)將銀耳粉碎至60目，加20倍水浸泡2h，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為500u/ ml，蛋白酶的酶活為5u/g; 40°C條件下攪拌酶解1.5h，酶解結束後，將混合渣液置於循環 超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度35°C ;超聲功率為500W，循環攪拌轉速 800rpm;佔空比1:2;超聲提取時間2.5h。
[0026] (2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/8,提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為30min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE32。
[0027] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為噴霧幹 燥的最優條件為：進風溫度160°C，出風溫度為70°C，進料固形物含量為50%。
[0028] 銀耳多糖的得率為12. 51%，多糖純度為96. 3%。
[0029] 實施例3 (1)將銀耳粉碎至30目，加35倍水浸泡I. 5h，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶 為纖維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為 300u/ml，蛋白酶的酶活為7萬u/g;35°C條件下攪拌酶解2h，酶解結束後，將混合渣液置 於循環超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度32°C，超聲功率為600W，循環攪 拌轉速800 rpm;佔空比1:2;超聲提取時間3h。
[0030] (2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加14倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為25min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE52。
[0031] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為噴霧幹 燥的最優條件為：進風溫度180°C，出風溫度為90°C ;進料固形物含量為60%。
[0032] 銀耳多糖的得率為13. 51%，多糖純度為95. 6%。
[0033] 實施例4 (1)將銀耳粉碎至60目，加28倍水浸泡lh，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為400u/ ml，蛋白酶的酶活為8萬u/g; 40°C條件下攪拌酶解2.5 h，酶解結束後，將混合渣液置於 循環超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度35°C;超聲功率為900W ;循環攪拌 轉速700 rpm;佔空比1:2;超聲提取時間3h。
[0034] ( 2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為20min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE52。
[0035] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為噴霧幹 燥的最優條件為：進風溫度170°C ;出風溫度為95°C，進料固形物含量為60%。
[0036] 銀耳多糖的得率為12. 98%，多糖純度為96. 1%。
[0037] 實施例5 (1)將銀耳粉碎至55目，加35倍水浸泡2h，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為400u/ ml，蛋白酶的酶活為7萬u/g;35°C條件下攪拌酶解2. 4h，酶解結束後，將混合渣液置於 循環超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度35°C ;超聲功率為670W ;循環攪 拌轉速850 rpm，佔空比1:2;超聲提取時間3. 5h。
[0038] (2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為25min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE52。
[0039] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為冷凍幹 燥的最優條件為：冷凍溫度_20°C ;固形物含量為80%。
[0040] 銀耳多糖的得率為13. 56%，多糖純度為96. 7%。
[0041] 實施例6 (1)將銀耳粉碎至55目，加35倍水浸泡lh，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為400u/ ml，蛋白酶的酶活為6萬u/g;35°C條件下攪拌酶解1.5 h，酶解結束後，將混合渣液置於 循環超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度30°C，超聲功率為700W，循環攪拌 轉速600 rpm，佔空比1:2;超聲提取時間3. 4h。
[0042] ( 2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/6 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為30min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE52。
[0043] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為冷凍幹 燥的最優條件為：冷凍溫度_80°C，固形物含量為90%。
[0044] 銀耳多糖的得率為12. 31%，多糖純度為95. 7%。
[0045] 實施例7 (1)將銀耳粉碎至33目，加32倍水浸泡2h，打漿；向打漿液中加入混合酶，混合酶為纖 維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白酶=2:1，纖維素酶的酶活為400u/ ml，蛋白酶的酶活為6萬u/g; 40°C條件下攪拌酶解1.5 h，酶解結束後，將混合渣液置於 循環超聲提取機中進行提取；循環超聲提取條件為：溫度30 °C，超聲功率為600W，循環 攪拌轉速1000 rpm，佔空比1:2;超聲提取時間2. 7h。
[0046] (2 )循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮方式可採用真空減壓 濃縮或膜濃縮，濃縮倍數為提取液體積的1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得 銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為100W， 超聲時間為30min，溶解液上DlOl樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液。DEAE纖維素樹脂為DE32。
[0047] (5)將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖。銀耳多糖的乾燥方式為冷凍幹 燥的最優條件為：冷凍溫度-20，固形物含量為60%。
[0048] 銀耳多糖的得率為11. 23%，多糖純度為95. 5%。
[0049] 實施例8採用熱水提取銀耳多糖的對比試驗 按照實施例1的步驟進行，所不同的是步驟（1)提取步驟不同。將銀耳粉碎至40目， 加40倍水浸泡lh，80°C條件下攪拌提取I. 5h。其與步驟相同。
[0050] 銀耳多糖的得率為8. 27%，多糖純度為62. 8%。
[0051] 實施例9採用熱水提取銀耳多糖的對比試驗 按照實施例2的步驟進行，所不同的是步驟（1)提取步驟不同。將銀耳粉碎至60目， 加20倍水浸泡lh，90°C條件下攪拌提取2. 5h。其與步驟相同。
[0052] 銀耳多糖的得率為7. 42%，多糖純度為72. 5%。
[0053] 銀耳多糖的抗氧化實驗效果： (1)銀耳多糖清除羥自由基效果實驗 利用H2O2與Fe 2+混合產生OH在體系內加入水楊酸捕捉OH並產生有色物質，該物質在 510nm 下有最大吸收。反應體系中含 8. 8mmol/L H2O2 lml,9mmol /LFeSO4 lmL，9mmol/L 水 楊酸-乙醇lml，不同濃度的多糖溶液Iml最後加 H2O2啟動反應，37°C反應0. 5小時，以蒸 餾水為參比，在510nm下測量各濃度的吸光度。考慮到多糖本身的吸收光值，以9 mmol /L FeSO4 lml，9mmol/L水楊酸-乙醇lml，不同濃度的多糖溶液Iml和Iml蒸饋水作為多糖的 本底吸收值。清除率計算公式為： 清除率（%) =[ (A。-(Ax -Axq )) /Atl ] X100% 式中：Atl為空白對照液的吸光度；AxS加入多糖溶液後的吸光度；Aro為不加顯色劑H 2O2 多糖溶液本底的吸光度。
[0054] (2 )銀耳多糖清除超氧陰離子自由基（02-)效果實驗 取4. 5mL，pH8. 2,50mmol/L Tris-HCl緩衝液，4. 2m 1蒸餾水.混勻後在25°C水浴中 保溫20m in，取出後立即加入在25°C預熱過的3mmol鄰苯三酚0. 3ml (以lOmmol/LHCl配 制，空白管用IOmmoVLHCl代替鄰苯三酚的HCl溶液），迅速搖勻後倒入比色杯，325nm 下每隔IOs測定吸光度，計算線性範圍內每分鐘吸光度的增加。
[0055] 抑制率（%) = [( Λ A0 - Λ A) / Λ A0 ] X 100% 式中：AAtj為鄰苯三酚的自氧化速率；ΛΑ為加入多糖溶液後鄰苯三酚的自氧化速 率。
[0056] 表1實施例1製備所得銀耳多糖清除自由基的測定
【權利要求】
1. 一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於，包括以下步驟： (1) 將銀耳粉碎至40?60目，加20?40倍水浸泡1?2h，打漿；向打漿液中加入混 合酶，30?40°C條件下攪拌酶解1. 5?2. 5 h，酶解結束後，將混合渣液置於循環超聲提取 機中進行提取； (2) 循環超聲提取結束後，固液分離，上清液進行濃縮；濃縮倍數為提取液體積的 1/6?1/8,優選1/7 ;提取液濃縮後加85%乙醇進行靜置沉澱，得銀耳胞內多糖沉澱物； (3) 銀耳胞內多糖沉澱物加10?15倍去離子水，採用超聲波輔助溶解，超聲波功率為 100W，超聲時間為20?30min，溶解液上D101樹脂，採用去離子水進行層析； (4) 將層析液過DEAE纖維素樹脂進行分離，洗脫至流出液檢測不到多糖停止洗脫，合 並洗脫液； (5) 將洗脫液進行濃縮乾燥，得純化後的銀耳多糖， 步驟（1)中所述的混合酶為纖維素酶與蛋白酶的混合物，二者比例為纖維素酶：蛋白 酶=2:1，纖維素酶的酶活為200-500u/ml，蛋白酶的酶活為5-10萬u/g。
2. 如權利要求1所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：步驟（1)中 所述的銀耳與水的比例為1:30~1:35,優選1:32。
3. 如權利要求1所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：步驟（1)中 所述的循環超聲提取條件為：溫度30~35°C，優選35°C ;超聲功率為500~1000W，優選900W ; 循環攪拌轉速500~1000 rpm，優選800rpm;佔空比1:2;超聲提取時間2. 5~3. 5h，優選3h。
4. 如權利要求1所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：步驟（2)中 濃縮方式可採用真空減壓濃縮或膜濃縮。
5. 如權利要求1所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：步驟（4)中 所述的DEAE纖維素樹脂為DE52或DE32中的一種，優選DE52。
6. 如權利要求1所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：步驟（5)中 所述的洗脫液的乾燥方式為冷凍乾燥或噴霧乾燥。
7. 如權利要求6所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：銀耳多 糖的乾燥方式為噴霧乾燥的最優條件為：進風溫度160~200°C，優選180°C ;出風溫度為 70~100°C，優選90°C ;進料固形物含量為50~80%，優選60%。
8. 如權利要求6所述的一種銀耳胞內多糖分離、純化的方法，其特徵在於：銀耳多糖 的乾燥方式為冷凍乾燥的最優條件為：冷凍溫度-20 ~ _80°C，優選-40°C;固形物含量 為 70~90%，優選 80%。
【文檔編號】C08B37/00GK104497157SQ201410796766
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月22日 優先權日:2014年12月22日
【發明者】周鷺紅, 黃永恆, 付立忠, 諶奇偉, 魏善龍 申請人:綠雅（江蘇）食用菌有限公司