抗黃病毒的抗病毒組合物的製作方法

2023-04-30 02:39:06 2

抗黃病毒的抗病毒組合物的製作方法
【專利摘要】本發明涉及一種預防或治療人類或動物中黃病毒感染或由其所產生的疾病的具有抗病毒活性的組合物，其特徵在於該組合物中包含黃芩素、其類似物或其衍生物。該組合物可進一步包含醫藥上可接受的載劑。所述抗病毒活性可包括對病毒附著於宿主細胞的抑制、細胞內病毒複製的抑制、及直接殺病毒活性。黃病毒可包含登革熱病毒1型、登革熱病毒2型、登革熱病毒3型、登革熱病毒4型及日本腦炎病毒。
【專利說明】抗黃病毒的抗病毒組合物
[0001] 發明背景

【技術領域】
[0002] 本發明涉及一種預防或治療正鏈RNA病毒感染或疾病的具有抗病毒活性的組 合物，更具體而目，涉及用以預防或治療黃病毒（flavivirus)感染的含有類黃酮黃零素 (baicalein)的組合物。
[0003] 相關技術描述
[0004] 包含黃病毒科的正鏈RNA病毒包括許多醫藥上重要的病毒，包括登革熱病毒，一 種於世界上的熱帶及亞熱帶區常見的嚴重的蚊子傳播的疾病。登革熱已每年引起許多死亡 且有數百萬人罹病並威脅生活於此區域中的幾乎250萬人。其為最迅速蔓延的蚊子傳播的 病毒感染。
[0005] 登革熱是由登革熱病毒引起，其為黃病毒科黃病毒屬的一員，為一種正鏈RNA 病毒。此科中其他常見的醫學上重要病毒包括日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus)、黃熱病病毒（Yellow fever virus)、C型肝炎病毒、西尼羅腦炎病毒（West Nile encephalitis virus)、墨累山谷腦炎病毒（Murray Valley encephalitis virus)、蜱傳 腦炎病毒（Tick-borne encephalitis virus)、聖路易腦炎病毒（St. Louis encephalitis virus)及卡薩諾爾森林病病毒（Kyasanur Forest disease virus)。感染這些病毒中的 任一者都會造成廣範圍的臨床病症，由無表現的無症狀或輕微發熱感染、自限性感染至嚴 重腦炎、肝炎及死亡。相似地，登革熱可表現為自限性登革熱發燒（self-limited dengue fever(DF))至嚴重登革熱出血熱（dengue hemorrhagic fever(DHF))及登革熱休克症 候群（dengue shock syndrome(DSS))。有四種登革熱病毒的血清型或基因型，登革熱病 毒1型（DENV-1)、登革熱病毒2型（DENV-2)、登革熱病毒3型（DENV-3)及登革熱病毒4 型（DENV-4)，其是通過至少二種蚊蟲傳染至人類，埃及斑蚊（Aedesaegypti)及白線斑蚊 (Aedesalbopictus)。所有四種病毒基因型引起相似的臨床症狀。怎樣的機制引起嚴重的 登革熱仍未知。登革熱的嚴重度被認為是與存在於個體血液中的病毒量直接相關。
[0006] 迄今，對於大多數黃病毒感染的治療並無有效的治療劑或抗病毒療法，若非其中 所有的病毒感染，包括登革熱。並無可幫助減少病患中登革熱病毒負載的有效的抗病毒以 預防嚴重的登革熱DHF或DSS的表現。由於全球性快速擴展登革熱病，發展有效的抗病毒 藥或抗登革熱的可接受的疫苗是急迫的。使用疫苗預防登革熱的嘗試被許多可能的議題及 風險所困擾。因此，可幫助減少於感染早期登革熱病毒負載的有效藥物是極被期望的。
[0007] 由於植物和衍生自植物的化合物具有較低的副作用及其於自然界中無所不在的 可親近性，使得植物和衍生自植物的化合物仍然是新抗病毒藥物一個重要來源。已有抗登 革熱病毒的各種植物化學劑的抗病毒活性的許多報告。其中包括類黃酮。類黃酮是在不同 植物形式中廣泛被發現的低分子量酚化合物。不同型的類黃酮可於植物的果、根、堅果、種 子、樹皮、蓮及花中發現。黃零素（ 5,6, 7-三輕基黃酮（flavone))，為類黃酮的一型，於許多 草本植物的根中被發現。
[0008] 黃芩素抗許多常見人類病毒的抗病毒活性已被評估，包括雙鏈DNA病毒，皰疹病 毒，及少數負鏈呼吸道病毒，但無一者證實其作為正鏈RNA病毒複製的抑制劑。黃芩素作為 正鏈RNA病毒的有效抑制劑的應用，更具體而言為黃病毒登革熱病毒的複製，於本發明中 被強調。
[0009] US專利申請公開案No. 2010/0004325 A1公開了一種黃芩素的新分子及細胞效 果，其是通過使用化合物庫的脯胺醯輕化酶2(proxlylhydroxylase 2(PHD2))抑制劑篩選 法而被選出。所引述的先前技術分析細胞中黃芩素誘導的缺氧誘導因子（HIF)蛋白質表 達，定量分析黃芩素抗PHD 2的抑制效果，確認抗抑制HIF因子的抑制效果，並通過使用報導 子分析及ELISA確認是否VEGF被表達。所引述的先前技術證明黃芩素可被使用作為治療 缺血性及其他相關疾病的藥物。儘管如此，所引述的先前技術並未提及黃芩素的特定組合 物，其作用為抗黃病毒複製的抑制劑。因此，有需要具有某種可作用的組合物或黃芩素的濃 度，其展現抗病毒性，尤其是抗登革熱病毒。此外，有需要最大化黃芩素減少病毒RNA複製 的潛力，以治療及預防由屬於黃病毒屬的RNA病毒激發的感染疾病，其通過具有不同濃度 的黃芩素以展現直接的殺病毒活性、預防性質、及抗附著活性。
[0010] us專利申請公開案No. 2〇08/0176932 A1是關於一種具有協同性抗腫瘤效果的醫 藥組合物的發明，更具體而言為一種含有類黃酮的醫藥組合物。所引述的先前技術進一步 是關於此組合物的製備及醫藥用途，其含有黃尊素（baicalein)及黃苳苷（baicalin)或野 黃芩甙（scutellarin)。所引述的先前技術也公開了呈現抗腫瘤效果的黃芩素及黃芩苷或 野黃芩甙及其相關化合物的組合物，但並未提及此組合物與黃病毒複製有關。因此，有需要 具有展現抗病毒性質及抑制黃病毒複製的組合物或化合物，尤其是登革熱病毒及日本腦炎 病毒。
[0011] US專利申請案No. 6, 083, 921 -般而言是關於具有抗病毒、抗細菌、或免疫調節 性的醫藥組合物，具體而言是關於有用於治療或預防副流行性感冒（parainfluenza)病 毒或呼吸道融合病毒感染的醫藥組合物。此醫藥組合物是獲自含黃芩苷的植物、氯原酸 (chlorogenic acid)、及連翹酯試（forsythiaside)的組合，尤其是經分離及純化的形式。 此醫藥組合物有用性並未擴展至正鏈RNA病毒，尤其是黃病毒。因此，有通過具有由黃芩素 作為活性抗病毒成分所構成的組合物以解決所引述的先前技術的需求，以治療及預防由正 鏈RNA病毒諸如黃病毒引起的感染，例如登革熱病毒及日本腦炎病毒。


【發明內容】

[0012] 本發明的一目的是提供一種預防或治療黃病毒感染或由其所產生的疾病的具有 抗病毒活性的組合物。
[0013] 本發明的一目的是提供一種預防或治療登革熱病毒感染或日本腦炎病毒感染的 具有抗病毒活性的組合物。
[0014] 本發明的又一目的是提供一種具有包含抑制病毒複製、減少病毒產量、殺病毒活 性及抑制病毒附著至宿主細胞的抗病毒活性的組合物。
[0015] 因此，這些目的可通過本發明的下列及延伸的釋明而達成。本發明是關於一種於 人類或動物中預防或治療黃病毒感染或其所產生的疾病的具有抗病毒活性的組合物，其特 徵為所述組合物由黃芩素、其類似物或其衍生物所構成。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 由下列詳細說明並結合的本發明較佳實施例中的圖式來說明，本發明的特徵將可 更容易被了解及知悉，其中：
[0017] 圖1(a)顯示於登革熱病毒感染前添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處理登革 熱病毒感染後的登革熱病毒灶減少百分比（RF% )的圖。
[0018] 圖1 (b)顯示於登革熱病毒感染前添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處理登革 熱病毒感染後的登革熱病毒RNA減少量的圖。
[0019] 圖2(a)顯示於登革熱病毒感染期間同時添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處 理登革熱病毒感染後的登革熱病毒灶減少百分比（RF%)的圖。
[0020] 圖2(b)顯示於登革熱病毒感染期間同時添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處 理登革熱病毒感染後的登革熱病毒RNA減少量的圖。
[0021] 圖3 (a)顯示於登革熱病毒感染後添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處理登革 熱病毒感染後的登革熱病毒灶減少百分比（RF% )的圖。
[0022] 圖3 (b)顯示於登革熱病毒感染後添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處理登革 熱病毒感染後的登革熱病毒RNA減少量的圖。
[0023] 圖4(a)顯示直接以不同濃度的黃芩素處理登革熱病毒的登革熱病毒灶減少百分 比（RF% )的圖。
[0024] 圖4(b)顯示直接以不同濃度的黃苳素處理登革熱病毒的登革熱病毒RNA減少量 的圖。
[0025] 圖5顯示於JEV感染後添加不同濃度的黃芩素的Vero細胞於處理JEV感染後日 本腦炎病毒（JEV)灶減少百分比（RF% )。
[0026] 圖6是黃芩素的分子結構。

【具體實施方式】
[0027] 依據要求，本發明的詳細實施例中揭示於本文；然而，應了解所揭示的具體實施例 僅為發明的示範，其可以各種形式被體現。因此，本文揭示的特定結構及功能上的細節不被 解釋為限制而僅作為權利要求的基礎。應了解圖式及其詳細說明並未被意圖用來限制本 發明為所揭示的特定形式，相反地，本發明是涵括落入添附的權利要求所定義的本發明範 疇的所有變體、相等物、及替換物。如本申請案全文所使用，〃可〃一詞是用於允許的意義 (即，意指具有潛力），而非強迫的意義（即，意指必須）。相似地，〃包括〃、〃包含〃及〃含 "意指包括，但未限於。又，〃一"或"一種"意指"至少一個"且"複數"一詞意指一或 多個,除非另有陳述。於使用技術詞語的縮寫時，表示此項【技術領域】中己知的通常被接受的 意義。為了容易參照，當引述圖式的共通的相同或相似特徵時，全部圖式使用共通的標號。 現參照圖1-5以描述本發明。
[0028] 本發明是關於一種用於預防或治療人類或動物中黃病毒感染或其所產生的疾病 的具有抗病毒活性的組合物，其特徵為所述組合物包含黃芩素、其類似物或其衍生物。如本 文使用的"其類似物或其衍生物"一詞亦包括黃芩素的鹽類、溶劑化物、水合物、前藥、及包 括互變異構物及立體異構物的異構物。
[0029] 在本發明的一優選的實施例中，所述黃芩素的濃度範圍為約〇· 1至100重量％。
[0030] 在本發明的一優選的實施例中，所述組合物的有效濃度範圍為 ml(1. 56 μ g/ml)至 100. 〇 μ g/ml。
[0031] 在本發明的一優選的實施例中，所述黃芩素是萃取自植物黃零 (Scutellariabaicalensis)的根。
[0032] 在本發明的一優選的實施例中，所述組合物以醫藥上可接受的載劑被調配。
[0033] 在本發明的一優選的實施例中，所述具有抗病毒活性的組合物的有效濃度包含 50 μ g/ml - 100 μ g/ml 的黃苳素。
[0034] 在本發明的一優選的實施例中，抗病毒活性是殺病毒活性。
[0035] 在本發明的一優選的實施例中，所述具有殺病毒活性的組合物的有效濃度包含 12. 5ug/ml的黃芩素。
[0036] 在本發明的一優選的實施例中，用於人類或動物中預防黃病毒感染或由其所產生 的疾病的所述組合物的有效濃度包含50 μ g/ml的黃芩素。
[0037] 在本發明的一優選的實施例中，抗病毒活性是抑制病毒附著於宿主細胞。
[0038] 在本發明的一優選的實施例中，所述具有抑制病毒附著至宿主細胞的組合物的有 效濃度包含25 μ g/ml的黃芩素。
[0039] 在本發明的一優選的實施例中，黃病毒是選自包含登革熱病毒1型、登革熱病毒2 型、登革熱病毒3型、登革熱病毒4型、及日本腦炎病毒所組成的群組。
[0040] 在本發明的一優選的實施例中，所述組合物是用於革熱病毒2型及日本腦炎病毒 的預防或治療。
[0041] 所屬領域技術人員於相似於本發明的目的上可企圖修飾黃芩素的分子結構。通過 加入、移除或取代黃芩素化合物中的基團，此種修飾是可能的。通過於一或多個位置的酷 化、水解、皂化、造成取代、或任何化學製法的手段，所述黃芩素可被加以修飾。
[0042] 圖6呈示黃芩素的分子結構。
[0043] 黃本素僕會物
[0044]

【權利要求】
1. 一種預防或治療人類或動物中黃病毒感染或由其所產生的疾病的具有抗病毒活性 的組合物，其特徵在於所述組合物中包含黃芩素、其類似物或其衍生物。
2. 根據權利要求1所述的組合物，其中黃芩素的濃度範圍為〇. 1至100重量％。
3·根據權利要求1所述的組合物，其中所述組合物的有效濃度範圍為L 6 μ g/ ml (1· 56 μ g/ml)至 100. 0 μ g/ml。
4·根據權利要求1所述的組合物，其中所述組合物萃取自植物。
5. 根據權利要求1所述的組合物，其中所述組合物是與醫藥上可接受的載劑一起調 配。
6. 根據權利要求1所述的組合物，其中抗病毒活性是指預防性感染後抗病毒活性。
7. 根據權利要求6所述的組合物，其中具有預防性抗病毒活性的所述組合物的有效濃 度為50 μ g/ml的黃芩素。
8. 根據權利要求1所述的組合物，其中抗病毒活性是指直接殺病毒活性。
9. 根據權利要求8所述的組合物，其中具有殺病毒活性的所述組合物的有效濃度為 12. 5 μ g/ml的黃苳素。
10. 根據權利要求1所述的組合物，其中抗病毒活性是指對病毒附著至宿主細胞的抑 制。
11. 根據權利要求10所述的組合物，其中具有抑制病毒吸附至宿主細胞的所述組合物 的有效濃度為25 μ g/ml的黃芩素。
12. 根據權利要求1所述的組合物，其中抗日本腦炎病毒複製活性為預防性感染後抗 病毒活性。
13. 根據權利要求12所述的組合物，其中具有預防性抗日本腦炎病毒複製活性的所述 組合物的有效濃度為50 μ g/ml的黃芩素。
14. 根據權利要求1所述的組合物，其中黃病毒是選自包含登革熱病毒1型、登革熱病 毒2型、登革熱病毒3型、登革熱病毒4型及日本腦炎病毒的群組。 $ ,
15. 根據權利要求1所述的組合物，其中所述組合物是用於預防或治療登革熱病毒2型 及曰本腦炎病毒。
【文檔編號】A61K38/20GK104203265SQ201380018609
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2013年1月16日 優先權日:2012年3月30日
【發明者】沙札利·阿布·貝克爾 申請人:馬來亞大學