雞樅大規模液體深層發酵生產工藝的製作方法

2023-04-30 13:00:31

專利名稱：雞樅大規模液體深層發酵生產工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種雞樅大規模液體深層發酵生產工藝。
背景技術：
雞樅學名Termitomyces albuminosus(Berk.)Heim.，是一種夏秋季生於白蟻巢菌圃上的珍貴野生食用菌，屬鵝膏科(毒傘科)(Amanitaceae)蟻巢傘菌屬。古稱雞宗，別名傘把菇(四川)、雞肉絲菇(臺灣、福建)、白蟻菇等。雞樅菌的生長發育與土白蟻的活動有密切關係。白蟻一旦棄巢他去，此巢就不會再長雞樅菌。雞樅菌分布於非洲、亞洲、南太平洋群島的熱帶地區和亞洲的亞熱帶地區，中國的江蘇、福建、臺灣、廣東、廣西、四川、貴州、雲南等亦有分布。
雞樅菌味道鮮美，該菌為古今中外頗為讚美的名貴食用菌。中國傳統醫學認為雞樅味甘、性平、無毒，功用「益胃、清神、治痔」，有助消化、提神、療痔等作用。現代醫學研究證明，雞樅有增強人體免疫功能、預防腸癌、養血、潤燥、健脾胃等功效，適用於食欲不振、虛勞怔忡、痔瘡下血等。我國歷代都稱讚白蟻雞樅菌美不絕口，營養豐富。據分析，每100克鮮雞樅菌含水92.61％，乾物質7.39％。在乾物質中，含粗蛋白34.94％，粗脂肪3.40％，粗纖維13.91％，可溶性糖4.5％，水解糖9.59％，灰分7.73％等。在灰分中氧化鈣為20.29％，磷4.62％，鐵1.89％，錳0.08％。還含有麥角甾醇和16種胺基酸以及維生素C。
現代研究發現，食用雞樅後可使腸胃舒服，食慾增加，大小便暢通，睡眠較好，未發生任何副作用。經過詳細的市場調查發現，在全國18歲以下的青少年、兒童中，患有不同程度胃腸功能失調症狀者約佔我國青少年、兒童總數的25％-35％。因此，本發明可大量可控的生產優質雞樅發酵菌粉，可解決將來大量的市場需求。目前，雞樅子實體的人工栽培尚未成功。目前尚未見雞樅大規模液體深層發酵生產的報導。

發明內容
本發明的目的是以生產雞樅發酵菌絲體為目標，發明一種廉價高效的雞樅大規模液體深層發酵工藝，為雞樅的大規模液體深層發酵生產打下基礎。
實現本發明的技術方案以雞樅真菌為出發菌株，採用斜面菌種進行液體搖瓶培養、液體搖瓶擴大培養、一級種子培養和發酵培養。本菌株購自山東金鄉真菌研究所。
實現本發明的具體步驟如下(1)取出斜面菌種接入配製的新鮮斜面培養基中，培養溫度25-33℃，培養100-180小時。
(2)將步驟1中的斜面菌種轉接入裝有搖瓶培養基的搖瓶中，25-33℃培養，轉速120-180rpm/min，培養40-60小時後進行搖瓶的擴大培養。
(3)將步驟2中的搖瓶菌種轉接入裝有搖瓶擴大培養基的搖瓶再進行擴大培養，25-33℃培養，轉速120-180rpm/min，培養15-30小時後接入一級種子罐進行培養。
(4)將步驟3中的搖瓶菌種轉接入一個裝有種子培養基的一級種子罐中，接種量為4-10％，保持罐溫25-33℃，罐壓0.5-0.9kPa，攪拌速率80-150rpm/min，通氣量1∶0.3-0.5v/v.m，發酵30-55小時，然後轉接入發酵罐發酵。
(5)將一級種子罐中的菌種轉接入一個裝有發酵培養基的發酵罐中，接種量為4-10％，保持罐溫25-33℃，罐壓0.5-0.9kPa，攪拌速率80-150rpm/min，通氣量1∶0.3-0.5v/v.m，發酵80-110小時。在還原糖含量降低到1.0-2.0％左右時放罐。
本發明中斜面培養基的配方是(g/100ml)馬鈴薯10-20，葡萄糖1-3，瓊脂1.5-2.5，加水定容至所需體積，pH值自然。
本發明中搖瓶培養基和搖瓶擴大培養基的配方是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1.0-2.5，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5。
本發明中一級種子培養和發酵培養的培養基配方是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，玉米粉0.5-2，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1-3，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5。
本發明步驟2中搖瓶培養基與搖瓶容積比為1∶5，步驟3中搖瓶培養基與搖瓶容積比為1∶5。
本發明步驟4中一級種子罐的容積為100-300L，在該一級種子罐中裝有的一級種子培養基相應為50-180L；步驟5中發酵罐的容積為1000-5000L，在該發酵罐中裝有的發酵培養基相應為500-3500L。
本發明的放罐標準是發酵液開始變得粘稠，還原糖含量降低到1.0-2.0％左右，鏡檢發現菌絲體開始衰老。
本發明的有益效果本發明適用於大規模液體深層發酵生產雞樅，解決了雞樅大規模生產培養放大的難題，對於雞樅今後的工業化生產和相關的應用產業的發展具有重要意義。本發明在發酵結束後得到的發酵產物顏色呈淡黃色，散發出誘人的雞肉香味，發酵液味鮮美，乾燥菌絲體呈黃色。發酵液中菌絲體以乾重計為3.5-5.0％。將發酵菌粉用水煎煮，有類似雞肉的鮮美氣味。經分析發現，發酵菌粉中含有蛋白質20-25％，多糖20-25％；甲醇提取物佔乾重25-36％，其中，粗三萜類成分佔5-6％，香豆素類佔0.7-1.2％，皂甙類佔1.5-2.2％，其餘成分如低聚糖類等佔17-29％。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明做進一步的詳細說明。
實施例1在斜面培養基中接種雞樅菌絲體，培養溫度28℃，培養時間120小時。將新鮮的斜面菌種接入裝有100ml培養基的500ml三角瓶中，28℃搖床培養48小時，搖床轉速150rpm/min。然後將所得搖瓶菌種轉接入裝有100ml培養基的500ml三角搖瓶中進行擴大培養，28℃搖床培養24小時，搖床轉速150rpm/min。然後將三角瓶擴大的菌種2200ml轉接入裝有50L種子培養基的100L一級種子罐中，保持罐溫28℃，罐壓0.7kPa，攪拌速率100rpm/min，通氣量1∶0.5v/v.m，發酵時間45小時。將一級種子罐菌種轉接入裝有800L發酵培養基的1500L發酵罐中，保持罐溫28℃，罐壓0.7kPa，攪拌速率100rpm/min，通氣量1∶0.5v/v.m，發酵時間92小時，發酵液中菌絲體以乾重計為4.6％。
本實施例1中斜面培養基組成是(g/100ml)馬鈴薯15，葡萄糖2，瓊脂2，加水定容至所需體積，pH值為自然。
本實施例1中搖瓶培養基和搖瓶擴大培養基組成是(g/100ml)葡萄糖3，酵母膏0.2，黃豆粉1，麩皮汁2，KH2PO40.2，MgSO40.1，加水定容至所需體積，pH值為4.5。
本實施例1中100L一級種子罐的培養基組成是(g/100ml)葡萄糖3，酵母膏0.2，玉米粉1.5，黃豆粉1，麩皮汁2，KH2PO40.2，MgSO40.1，加水定容至50L，pH值為4.5。
本實施例1中1500L發酵罐的培養基配方是(g/100ml)葡萄糖3，酵母膏0.2，玉米粉1.5，黃豆粉1.0，麩皮汁2，KH2PO40.2，MgSO40.1，加水定容至800L，pH值為4.5。
本實施例中發酵結束標準是發酵液開始變得粘稠，還原糖含量降低到1.5％，鏡檢發現菌絲體開始衰老。
權利要求
1.一種雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是以雞樅真菌為出發菌株，採用斜面菌種進行液體搖瓶培養、液體搖瓶擴大培養、一級種子培養和發酵培養。
2.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是以購自山東金鄉真菌研究所雞樅真菌為出發菌株。
3.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的斜面菌種培養基組成是(g/100ml)馬鈴薯10-20，葡萄糖1-3，瓊脂1.5-2.5，加水定容至所需體積，pH值為自然，斜面菌種培養溫度25-33℃，培養100-180小時。
4.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的搖瓶培養的培養基組成是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1.0-2.5，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5，培養條件是培養溫度25-33℃，轉速120-180rpm/min，培養40-60小時，然後轉接入搖瓶進行擴大培養。
5.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的搖瓶擴大培養的培養基組成是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1.0-2.5，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5，培養條件是培養溫度25-33℃，轉速120-180rpm/min，培養15-30小時，然後轉接入一級種子培養。
6.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的一級種子培養的培養基組成是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，玉米粉0.5-2，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1-3，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5，接種量為4-10％，培養條件是培養溫度25-33℃，攪拌速率80-150rpm/min，發酵30-55小時，然後轉接入發酵罐發酵。
7.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的發酵培養，發酵培養基組成是(g/100ml)葡萄糖2-4，酵母膏0.05-0.5，玉米粉0.5-2，黃豆粉0.5-2，麩皮汁1-3，KH2PO40.1-0.5，MgSO40.01-0.2，加水定容至所需體積，pH值為4.5，接種量為4-10％，培養條件是培養溫度25-33℃，攪拌速率80-150rpm/min，發酵80-110小時。
8.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的發酵培養，可選擇1000-5000L的發酵罐進行發酵培養。
9.根據權利要求1所述的雞樅液體深層發酵生產工藝，其特徵是所述的發酵培養，發酵液中菌絲體以乾重計為3.5-5.0％。
全文摘要
雞樅大規模液體深層發酵生產工藝。珍稀食用真菌雞樅子實體的人工栽培尚未成功，尚未見大規模液體深層發酵培養工藝的報導。本發明以大規模液體深層發酵生產雞樅菌絲體為目標，以山東金鄉真菌研究所雞樅真菌為出發菌株，採用斜面菌種進行液體搖瓶培養、液體搖瓶擴大培養、一級種子培養和發酵培養，最終發酵罐體積達1000－5000L。利用本發酵工藝，在1500L發酵罐中發酵92h，發酵液中菌絲體以乾重計可達4.6％。
文檔編號C12N1/14GK1528118SQ20031010608
公開日2004年9月15日 申請日期2003年10月14日 優先權日2003年10月14日
發明者敖宗華, 符慧子, 鄒錫良 申請人:敖宗華, 符慧子, 鄒錫良