環狀低聚物的酶水解方法

2023-04-26 19:31:46 2

專利名稱：：環狀低聚物的酶水解方法
技術領域：
：本發明涉及聚(對苯二甲酸乙二醇酯)(poly(ethyleneterephthalate))的環狀低聚物的酶水解的方法，該方法包括將一種或多種羧酸酯水解酶(聚酯水解酶)和一種非離子、非線性表面活性劑作用於環狀低聚物。
背景技術：
：聚(對苯二甲酸乙二醇酯)纖維是紡織工業中使用的聚酯的主要部分。這種纖維通過例如對苯二酸和乙二醇的縮聚產生，並通過熔化拉長纖維。在這些過程中，高溫下，環狀低聚物，具體是環狀三(對苯二甲酸乙二醇酯)在纖維內部和表面形成。環狀低聚物易於使具有聚(對苯二甲酸乙二醇酯)纖維的織物外觀呈現灰色。這是由於環狀低聚物在織物表面的沉積，這在象HT(高溫)染色這樣的高溫溼處理後特別明顯。環狀低聚物可通過有機溶劑萃取除去，但由於費用以及大量有機溶劑的處理和回收存在問題，所以這一方法在工業上不可行。環狀低聚物也可通過鹼後清洗(alkalinepostscouring)步驟除去，但鹼處理必須非常嚴格才有效，且還會導致纖維物質的顯著損失。環狀低聚物難以除去，甚至可能抵禦耐受鹼後處理[參見G.Valk等，MelliandTextilberichte19705504-508]。而且，環狀低聚物的有機溶劑萃取技術上是可能的，但工業上是不可行的。除去環狀低聚物還可通過用一種或多種水解酶水解完成(EP0882084)。這種酶通過水解酯鍵破壞環狀低聚物的環結構。得到的產物產生的問題較少，因為它可在溫和的條件下被除去或者甚至於殘留在產物中。酶處理不具有有機溶劑萃取和鹼後清洗的缺點，特別是不需要使用大量有機溶劑，並且沒有纖維物質的明顯損失。發明概述本發明提供了除去聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物，特別是環狀三(對苯二甲酸乙二醇酯)的酶方法，通過該方法環狀低聚物被酶水解為線性片段，然後這些片段可在溫和條件下被除去，或者這些片段可以以經過水解的形式保留在織物內部或表面。這樣，本發明的方法避免了對苛刻的(harsh)化學品或有機溶劑萃取的需要。通過用羧酸酯水解酶於非線性、非離子表面活性劑一起作用於聚酯纖維使效果得以提高。組合物中酶與非線性、非離子表面活性劑相互作用改善了聚酯織物的外觀，例如促進了聚酯纖維表面環狀低聚物的去除。雖然不限制於任何一種理論或操作，人們相信組合物中這些酶與非線性、非離子表面活性劑相互作用，因此改善酶對織物的酶促作用，從而改善了聚酯織物的外觀和質量，例如促進聚酯纖維表面環狀低聚物的去除。因此，第一個方面，本發明提供了聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的酶水解方法，該方法包括使環狀低聚物接受一種或多種羧酸酯水解酶和一種非線性、非離子表面活性劑的作用。第二個方面，本發明提供了改善聚酯織物的外觀和質量的方法，該方法包括用一種或多種羧酸酯水解酶和一種非線性、非離子表面活性劑處理所述織物。圖示被降解的三聚體的百分比對不同表面活性劑的作用時間的函數。發明詳述本發明涉及聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的酶水解方法。更具體地，本發明提供了聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的酶水解方法，該方法包括用一種或多種羧酸酯水解酶，特別是脂解酶和/或生物聚酯水解酶以及一種非離子、非線性表面活性劑作用於環狀低聚物。本發明上下文中，生物聚酯是一種生物來源的聚酯。另外，本發明上下文中術語「一種」非離子、非線性表面活性劑是指「至少一種」非離子、非線性表面活性劑，例如一種，兩種、三種等。本發明的方法可能特別適用於含有聚(對苯二甲酸乙二醇酯)纖維的紗線(yarn)或織物，在該過程中，作為纖維合成和加工過程的副產物而形成的環狀低聚物被除去或至少明顯減少，從而改善了織物的外觀。本發明上下文中，術語「改善外觀」是指與沒有依照本發明處理的織物相比，織物的外觀得以改進。聚酯織物(polyesterfabrics)聚(對苯二甲酸乙二醇酯)通過縮合合成，通過熔化被拉長為纖維，可能被切成穩定狀(stables)，可能與其它纖維類型混合，並紡成紗線。這種紗線被染色並編織成布或製成地毯，或者這種紗線被織成纖維並被染色。這些過程之後進行最後的(後處理)步驟。在合成和拉長(drawing)程中，聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物在纖維表面和內部形成，這些環狀低聚物部分沉積在機器上，部分停留在纖維表面/內部，結果使最終製成的織物或地毯呈現不受歡迎的帶灰色的外觀。根據本發明，環狀低聚物的除去，特別是環狀三聚物的除去，可通過在有非離子、非線性表面活性劑存在的條件下，用一種或多種水解酶水解得以促進。本發明的方法很容易應用於紡織工業，因為它可使用現有的溼處理裝置進行，例如在經軸染色機(beamdyer)、Pad-Roll、Jigger/Winch、J-Box或Pad-Steam型裝置中進行。該方法優選在最後的(後處理)步驟中進行。在一個優選的實施例中，本發明的方法可在存在於纖維表面和/或內部或者用聚(對苯二甲酸乙二醇酯)纖維製成(或部分製成)的紗線或織物中的聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物上完成。因此，聚酯紗線或織物可以是用純聚(對苯二甲酸乙二醇酯)製成的任何紗線或織物，或者是用聚(對苯二甲酸乙二醇酯)纖維與其它任何常規用於製造紗線或織物的材料的混合物製成的。因此，在一個優選的實施例中，本發明提供了聚酯纖維的酶處理方法，該方法包括使聚酯纖維或織物接受一種或多種羧酸酯水解酶，特別是脂解酶和/或生物聚酯水解酶以及一種非離子、非線性表面活性劑的作用。聚酯織物可以是任何織物或含有聚酯的織物混合物。優選織物含有50％(w/w)以上的聚酯，尤其是75％(w/w)以上的聚酯，90％(w/w)以上的聚酯，或95(w/w)以上的聚酯。在最優選的實施例中，本發明的方法適用於基本由聚(對苯二甲酸乙二醇酯)聚酯材料組成，即由純聚(對苯二甲酸乙二醇酯)聚酯材料組成的織物或紡織品或紗線。織物混合物的例子是聚酯/棉、聚酯/羊毛、聚酯/乙酸纖維素和聚酯/尼龍。水解酶本發明的酶促方法可使用任何能夠水解聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的羧酸酯水解酶完成，具體是脂解酶和/或任何生物聚酯水解酶。這些酶是已知的並詳細描述於文獻中，參見例如BorgstromB和BrockmanHL，(編輯)；Lipases；ElsevierSciencePublishersB.V.，1984，和KolattukudyPE；植物生化(TheBiochemistryofPlants)，AcademicPressInc.，19804624-631。上述酶的例子是通常可見於根據酶命名法(EnzymeNomenclature)(在網頁http//www.chem.qmw.ac.uk/iubmb/enzyme中可以獲得，或從酶命名法(EnzymeNomenclature)1992(AcademicPress，SanDiego，California，增刊1(1993)，增刊2(1994)，增刊3(1995)、增刊4(1997)和增刊5(分別在Eur.J.Biochem.1994，223，1-5；Eur.J.Biochem.1995，232，1-6；Eur.J.Biochem.1996，237，1-5；Eur.J.Biochem.1997，250，1-6和Eur.J.Biochem.1999，264，610-650中)歸類於EC3.1.1羧酸酯水解酶(CarboxylicEsterHydrolases)的酶，這些酶能夠水解羧酸酯鍵。脂解酶本文中脂解酶包括脂肪酶、酯酶、磷酸脂酶和溶血磷脂酶。更具體的脂解酶可以是歸類於EC3.1.1.3、EC3.1.1.23和/或EC3.1.1.26的脂肪酶，歸類於EC3.1.1.1、EC3.1.1.2、EC3.1.1.6、EC3.1.1.7和/或EC3.1.1.8的酯酶，歸類於EC3.1.1.4和/或EC3.1.1.32的磷酸酯酶，和歸類於EC3.1.1.5的溶血磷脂酶。脂解酶優選地來源於微生物，具體是來源於細菌、真菌或酵母。在一具體實施方案中，使用的脂解酶可衍生自如下菌株犁頭黴屬(Absidia)菌株，具體是Absidiablakesleena和傘枝犁頭黴(Absidiacorymbifera)，無色桿菌屬(Achromobacter)菌株，具體是Achromobacteriophagus，氣單胞菌(Aeromonas)菌株，鏈格孢屬(Alternaria)菌株，具體是Alternariabrassiciola，麴黴屬(Aspergillus)菌株，具體是黑麴黴(Aspergillusniger)和黃麴黴(Aspergillusflavus)，無色桿菌屬(Achromobacter)菌株，具體是Achromobacteriophagus，短梗黴屬(Aureobasidium)菌株，具體是出芽短梗黴(Aureobasidiumpullulans)，芽孢桿菌屬(Bacillus)菌株，具體是短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)、嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)和枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，白僵菌屬(Beauveria)菌株，索絲菌屬(Brochothrix)菌株，具體是Brochothrixthermosohata，念珠菌屬(Candida)菌株，具體是Candidacylindracea(皺落念珠菌(Candidarugosa))、Candidaparalipolytica和南極念珠菌(CandidaAntarctica)，色桿菌屬(Chromobacter)菌株，具體是粘稠色桿菌(Chromobacterviscosum)，鬼傘屬(Coprinus)菌株，具體是Coprinuscinerius，鐮孢屬(Fusarium)菌株，具體是尖孢鐮孢(Fusariumoxysporum)、腐皮鐮孢(Fusariumsolani)、Fusariumsolanipisi、和Fusariumroseumculmorum，Geotricum菌株，具體是Geotricumpenicillatum，漢遜酵母屬(Hansenula)菌株，具體是異常漢遜酵母(Hansenulaanomala)，腐質黴屬(Humicola)菌株，具體是短芽孢腐質黴(Humicolabrevispora)、Humicolabrevisvar.thermoidea和Humicolainsolens，Hyphozyma菌株，乳桿菌屬(Lactobacillus)菌株，具體是彎曲乳桿菌(Lactobacilluscurvatus)，綠僵菌屬(Metarhizium)菌株，毛黴屬(Mucor)菌株，擬青黴屬(Paecilomyces)菌株，青黴屬(Penicillium)菌株，具體是圓弧青黴(Penicilliumcyclopium)、皮落青黴(Penicilliumcrustosum)和擴展青黴(Penicilliumexpansum)，假單胞菌屬(Pseudomonas)菌株，具體是銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、產鹼假單胞菌(Pseudomonasalcaligenes)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonascepacia)(同名洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia))、螢光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)、莓實假單胞菌(Pseudomonasfragi)、嗜麥芽假單胞菌(Pseudomonasmaltophilia)、門多薩假單胞菌(Pseudomonasmendocina)、Pseudomonasmephiticalipolytica、產鹼假單胞菌(Pseudomonasalcaligenes)、植物假單胞菌(Pseudomonasplantari)、類產鹼假單胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)、惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)、施氏假單胞菌(Pseudomonasstutzeri)和Pseudomonaswisconsinensis，絲核菌屬(Rhizoctonia)菌株，具體是立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)，根毛黴屬(Rhizomucor)菌株，具體是曼赫根毛黴(Rhizomucormiehei)，根黴屬(Rhizopus)菌株，具體是日本根黴(Rhizopusjaponicus)、小孢根黴(Rhizopusmicrosporus)和Rhizopusnodosus，紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium)菌株，具體是紅冬孢酵母(Rhodosporidiumtoruloides)，紅酵母屬(Rhodotorula)菌株，具體是紅酵母(Rhodotorulaglutinis)，擲孢酵母屬(Sporobolomyces)菌株，具體是Sporobolomycesshibatanus，嗜熱黴屬(Thermomyces)菌株，具體是細毛嗜熱菌(Thermomyceslanuginosus)(以前稱Humicolalanuginosa)，Thiarosporella菌株，具體是Thiarosporellaphaseolina，木黴屬(Trichoderma)菌株，具體是Trichodermaharzianum和Trichodemareesei，和/或輪枝孢屬(Verticillium)菌株。在較佳的實施例中，根據本發明使用的脂解酶衍生自麴黴屬(Aspergillus)菌株、無色桿菌屬(Achromobacter)菌株、芽孢桿菌屬(Bacillus)菌株、念珠菌屬(Candida)菌株、色桿菌屬(Chromobacter)菌株、鐮孢屬(Fusarium)菌株、腐質黴屬(Humicola)菌株、Hyphozyma菌株、假單胞菌屬(Pseudomonas)菌株、根毛黴屬(Rhizomucor)菌株、根黴屬(Rhizopus)菌株或嗜熱黴屬(Thermomyces)菌株。在更優選的實施例中，根據本發明使用的脂解酶衍生自短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)菌株、嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)菌株、Candidacylindracea菌株、南極念珠菌(CandidaAntarctica)菌株，尤其是南極念珠菌LipaseB(WO88/02775)，Humicolainsolens菌株，Hyphozyma菌株，洋蔥假單胞菌(Pseudomonascepacia)菌株，或細毛嗜熱菌(Thermomyceslanuginosus)菌株。生物聚酯水解酶本發明上下文中，生物聚酯水解酶包括酯酶和聚-羥基鏈烷酸酯(poly-hydroxyalkanoate)解聚酶，具體是聚-3-羥基鏈烷酸酯解聚酶。酯酶是脂解酶以及生物聚酯水解酶。在一個較佳的實施例中，酯酶是角質酶(cutinase)(EC3.1.1.74)或栓質酶(suberinase)。本文中，角質酶是一種能夠降解角質的酶，參見例如LinTS和KolattukudyPE，J.Bacteriol.1978133(2)942-951，栓質酶是一種能夠降解木栓質的酶，參見例如KolattukudyPE；Science1980208990-1000，LinTS和KolattukudyPE；Physiol.PlantPathol.1980171-15，和TheBiochemistryofPlants，AcademicPress，1980，Vol.4624-634，而聚-3-羥基鏈烷酸酯解聚酶是一種能夠降解聚-3-羥基鏈烷酸酯的酶，參見例如Foster等，FEMSMicrobiol.Lett.1994118279-282。例如角質酶不同於典型的脂肪酶，因為在三丁酸甘油酯底物的臨界膠束濃度(criticalmicelleconcentration，CMC)附近沒有觀察到可測量的活化作用。而且，角質酶被認為屬於絲氨酸酯酶的一個類別。生物聚酯水解酶優選來源於微生物，具體地是來源於細菌、真菌或者酵母。在一個優選的實施例中，生物聚酯水解酶衍生自麴黴屬菌株，具體是米麴黴(Aspergillusoryzae)，鏈格孢屬菌株，具體是Alternariabrassiciola，鐮孢屬菌株，具體是腐皮鐮孢、Fusariumsolanipisi、Fusariumroseumculmorum、或Fusariumroseumsambucium，長蠕孢屬(Helminthosporum)菌株，具體是麥根腐長蠕孢(Helminthosporumsativum)，腐質黴屬菌株，具體是Humicolainsolens，假單胞菌屬菌株，具體是門多薩假單胞菌或惡臭假單胞菌，絲核菌屬菌株，具體是立枯絲核菌，鏈黴菌屬(Streptomyces)菌株，具體是瘡痂病鏈黴菌(Streptomycesscabies)，或單隔孢屬(Ulocladium)菌株，具體是Ulocladiumconsortiale。在一個最佳的實施例中，生物聚酯水解酶是衍生自Humicolainsolens菌株，具體是HumicolainsolensDSM1800菌株的角質酶。WO00/34450和WO01/92502公開了Humicolainsolens和Fusariumsolanipisi的不同的角質酶變異體，以及所述變異體的生產方法，本文引用作為參考。在另一個優選的實施例中，聚-3-羥基鏈烷酸酯解聚酶衍生自產鹼桿菌屬(Alcaligenes)菌株，具體是糞產鹼桿菌(Alcaligenesfaecalis)，芽孢桿菌屬菌株，具體是巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)，Camomonas菌株，具體是Camomonastestosteroni，青黴屬(Penicillium)菌株，具體是繩狀青黴(Penicilliumfuniculosum)，假單胞菌屬菌株，具體是螢光假單胞菌、勒氏假單胞菌(Pseudomonaslemoignei)和食油假單胞菌(Pseudomonasoleovorans)，或紅螺菌屬(Rhodospirillum)菌株，具體是Rhodospirillumrubrum。如上文所公開的，酶可以從任何來源衍生或獲得，包括來源於細菌、真菌、酵母或哺乳動物。術語「衍生的」在本文中是指，酶從自然存在的生物分離，也就是說該酶的胺基酸序列同一性與天然的酶相同。術語「衍生的」還指所述酶可在宿主生物中重組產生，重組產生的酶或者具有與天然酶相同的同一性，或者具有修飾的胺基酸序列，例如具有一個或多個胺基酸缺失、插入和/或取代，即重組產生的酶是天然胺基酸序列的一種突變體和/或片段，或者是由本領域已知的核酸改組方法生產的酶。天然的酶包括自然的變異體。另外，術語「衍生的」包括合成產生的酶，例如通過肽合成產生。術語「衍生的」還包括修飾過的酶，例如通過體內或體外的糖基化作用、磷酸化作用或其它化學修飾作用修飾過的酶。本文中術語「獲得的」是指該酶具有與天然酶相同的胺基酸序列。該術語包括從自然存在的生物中分離的酶，或者在相同類型的生物或另一類生物中重組表達的酶，或者通過例如肽合成合成產生的酶。對於重組產生的酶，術語「獲得的」和「衍生的」是指酶的同一性，而不是重組生產酶的宿主生物的同一性。酶還可被純化。本文使用的術語「純化」包括酶從衍生酶的生物中的其它成分中分離出來。術語「純化」還包括酶從獲得該酶的天然生物的成分中分離出來。酶可被純化，僅很少量的其它蛋白質存在。術語「其它蛋白質」尤其是指其它的酶。本文使用的術語「純化」還指除去存在於產生本發明酶的細胞中的其它成分，尤其是其它蛋白質，特別是其它酶。酶可以被「充分純化」，即從產生酶的生物的其它成分中分離，該生物即，例如重組產生酶的宿主生物。在優選的實施例中，酶的純度至少為75％(w/w)，較佳的至少為80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，或至少99％純度。在另一個優選的實施例中，酶的純度為100％。酶可以為適合處理過程使用的任何形式，例如為乾粉或顆粒、非粉化的顆粒、液體、穩定的液體、或受保護的酶的形式。顆粒可如美國專利US4,106,991和US4,661,452中所述進行生產，並可任選地使用本領域已知的方法包被外衣。液體酶製劑可例如通過按照現有成熟方法加入穩定劑來穩定，所述穩定劑例如糖、糖醇或另一種多元醇、乳酸或另一種有機酸。受保護的酶可依據EP238,216中公開的方法製備。表面活性劑本發明中使用的表面活性劑是非離子、非線性表面活性劑，例如一種非離子、分支表面活性劑。術語「非離子」在文獻中有詳細的描述，通常是指不具有可電離的功能團的表面活性劑。本文中，術語「非線性」是描述一種表面活性劑，其分子結構的疏水部分具有分支的起源並具有鏈分支。本文中，鏈分支定義為具有一個或多個碳原子，優選1個碳原子到約10個碳原子，直接與一個以上的碳原子，優選是兩個或三個碳原子結合成鍵的分子結構，或其疏水部分衍生自仲醇或叔醇的分子結構。烷基酚的聚乙烯、聚丙烯和聚丁烯氧化縮合物適合於用做本發明的表面活性劑系統的非離子、非線性表面活性劑，聚乙烯氧化縮合物是優選的。這些化合物包括具有含約6-14個碳原子(優選約8-14個碳原子)的烴基的烷基酚縮合產物，為直鏈或支鏈構型中有。在一個優選的實施例中，每摩爾烷基酚中有環氧乙烷約2-25摩爾，更優選約3-15摩爾。商業購得的這類非離子、非線性表面活性劑包括由GAFCorporation公司銷售的IgepalTMCO-630，由DOW/UnionCarbide銷售的TritonTMX-45、X-114、X-100和X-102，以及TerginolNP，優選為TerginolNP9。這些表面活性劑通常被稱為指烷氧基化烷基酚(alkylphenolalkoxylates)(例如乙氧基烷基酚)。具有約1-25摩爾環氧乙烷的脂肪族仲醇的縮合產物適合用做本發明非離子表面活性劑系統的非離子表面活性劑。脂肪醇的烴鏈通常含有約8-22個碳原子。優選是醇的縮合產物，其具有含約8-20個碳原子的烴基，更優選約10-18個碳原子，每摩爾醇具有約2-15摩爾的環氧乙烷，優選約5-15摩爾的環氧乙烷，最優選約7-13摩爾的環氧乙烷。商業購得的這種類型的非離子表面活性劑的例子包括TergitolTM15-S-9(具有9摩爾環氧乙烷的C11-C15仲醇的縮合產物)、TerginolTM15-S-12和Softanol90。這些產品中較佳的HLB範圍為8-15，且最佳的為10-14。可用做本發明的表面活性劑系統的非離子表面活性劑的還有苯乙烯酚(styrenatedphenolics)與環氧乙烷的縮合產物。在一個優選的實施例中，環氧乙烷以每摩爾苯乙烯酚中約2-25摩爾的量存在，更優選約9-15摩爾。商業購得的這種類型的苯乙烯酚的例子為Ethox2622、Ethox2659、Ethox2938。分支脂肪醇的縮合產物，例如具有約1-25摩爾環氧乙烷的三癸基醇適合用做本發明非離子表面活性劑系統的非離子表面活性劑。商業購得的這類表面活性劑的例子為NovellIITDA-6.6、NovellIITDA-7、NovellIITDA-8.5、NovellIITDA-9、NovellIITDA-9.5和NovellIITDA-11。加工條件本發明的處理可以在依據本領域已知原則選出的適合於所選的酶和表面活性劑的條件下進行。應當理解每一種反應條件，例如酶/表面活性劑的濃度/劑量、pH、溫度和處理時間可以根據例如酶的來源、表面活性劑的類型、進行處理的方法等改變。還應該理解最佳的反應條件可通過使用常規實驗建立條件矩陣並測試矩陣中不同的點獲得。根據本發明的酶促處理優選為溼法處理。目前認為適當的液體∶織物比可以為約20∶1-約1∶1，優選約15∶1-約5∶1。酶的劑量足以水解環狀低聚物，優選總量從約0.001g/kg到約5g/kg酶蛋白/沙線或織物，更優選從約0.001g/kg到約0.5g/kg。本發明方法中使用的表面活性劑的量也取決於不同的參數，例如使用的酶。表面活性劑的量優選約0.05％-約5％w/w，更優選約0.1-1％w/w，最優選約1％w/w。酶水解優選在約30℃-100℃進行，更優選約50℃-約100℃。pH的範圍根據所使用的酶而不同，可為約pH4-約pH12，優選約pH6-pH10，更優選約pH8。適當的反應時間可以是約15分鐘-約3小時。本發明的方法可進一步包括添加一種或多種能夠改善酶-底物反應的化學製劑(以改善底物的可接近性和/或溶解反應產物)，該化學製劑可在酶處理前或酶處理的同時加入。這種化學製劑可具體為溼潤劑和分散劑等，或其混合物。本發明的方法可任選地含有衝洗步驟，在這一步驟過程中水解的環狀低聚物被衝洗，尤其是用稀釋的鹼衝洗。稀釋的鹼溶解環狀低聚物的線性片段，並在某種程度上可進一步水解這些線性片段。本文中，稀釋的鹼包括約pH7-約pH11的水溶液，更優選約pH7-約pH10，最優選約pH7-約pH9。緩衝液可加入培養基中。還可對材料進行其它加工。例如，對於織物材料，製備可包括應用塗裝技術(finishingtechnique)，和其它處理方法，例如賦予抗微生物特性(例如使用季銨鹽)、阻燃性(例如通過用磷酸或尿素磷酸化)，提高吸收性(通過用聚丙烯酸包衣(coat)或壓成薄片(laminating))，提供抗靜電塗飾劑(finish)(例如使用兩親性表面活性劑(N-油烯基-N，N-二甲基甘氨酸)，提供汙垢去除劑(soilreleasefinish)(例如使用NaOH)，提供防汙染製劑(例如使用氟代化學試劑)和提供抗起球製劑(例如使用NaOH、酒精)。本發明將參考下文的具體的實施例進一步進行描述。提供這些實施例的目的僅僅是為了舉例說明，除非另外具體說明，它們不限制本發明的範圍。材料和方法脂肪酶活性(LU)使用三丁酸甘油酯作為底物測定脂肪溶解活性。該方法是基於該酶對三丁酸甘油酯水解，記錄耗鹼量相對於時間的函數。一個脂肪酶單位(LU)被描述為在標準條件下(即在30攝氏度；pH7.0；用阿拉伯樹膠做乳化劑，三丁酸甘油酯做底物)每分鐘釋放1微摩爾可滴定的丁酸的酶量。更具體地描述該分析方法的文件(folder)AF95/5可從NovozymesA/S，Denmark獲得，該文件本文引用作為參考。培養基和底物酶角質酶得自US5,827,719的HumicolainsolensDSM1800，具有如下取代E6Q、A14P、E47K、R51P、E179Q、G8D、N15D、S48E、A88H、N91H、A130V、R189V、T29M、T166I、L167P。表2.用於有機玻璃膜上的水的保持壓對於其它的孔形狀可以重複上述計算，但會得出同樣的基本結果。增加膜厚度L並不能改變孔的保持壓。更圓的孔截面也給出同樣的基本結果，但是卻具有比孔的最窄點更大的有效孔半徑。有效半徑的數值取決於膜片表面材料的接觸角。膜片上一排相同的孔具有與單個孔相同的保持壓，但是對於氣體或液體卻具有更大流導的優點。因而成排的孔是更佳選擇，因為它在打開狀態下能提供受更少阻擋的流體，並因而在打開與密封狀態之間產生一更大的反差。如果成排的孔的直徑有變化，那麼保持壓將由更大的孔所確定。圖3a至3d顯示了據本發明的各種結構密封狀態的膜片30的橫截面。在這些結構中，膜片34下面的空間是溼的，而膜片34上面的空間則充滿空氣。液體與空氣被細線36所示的液面分開。在圖3a和3b中，膜片的頂側38是幹的。在圖3a中，從後面有一正壓，在圖3b方法所有研究中根據如下說明進行HPLC分析。實施例本發明參考如下實施例進一步描述，它不以任何方式限制本發明要求保護的範圍。實施例1該實施例中，測試不同的表面活性劑與US5,827,719中HumicolainsolensDSM1800所衍生的角質酶變異體的組合。向一隻清潔、乾燥的試管中(直徑1.5cm)加入一個磁力攪拌棒(10×4mm)，5mL7mM的碳酸氫鈉緩衝液(pH8.2)，3.1mg粉末狀的聚酯低聚物(用氯仿從聚脂樹脂的Soxlet提取物獲得)，0.5％w/w表面活性劑和200LU/ml的酶，根據最終體積計算。試管中的物質在70℃水浴中加熱。定時取出等分量的溶液(100μL)，稀釋到1.0mL二甲基甲醯胺中，然後使用上述材料和方法一節中描述的條件進行HPLC分析。聚酯的降解通過從100％減去對應於低聚物的曲線下面積百分數來確定。結果顯示於圖中。該圖顯示了當用酶和非離子、非線性表面活性劑聯合處理時三聚物的降解比僅用酶或酶與Dobanol25-7(一種非離子、線性表面活性劑)聯合處理時增加。權利要求1.一種酶促水解聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的方法，其中所述方法包括使環狀低聚物接受一種或多種羧酸酯水解酶和一種非離子、非線性表面活性劑的作用。2.權利要求1的方法，其中所述方法包括使環狀低聚物接受一種或多種脂解酶和/或生物聚酯水解酶的作用。3.權利要求2的方法，其中所述脂解酶是一種脂肪酶，該脂肪酶衍生自麴黴菌屬菌株、無色桿菌屬菌株、芽孢桿菌屬菌株、念珠菌屬菌株、色桿菌屬菌株、鐮孢菌屬菌株、腐質酶屬菌株、Hyphozyma菌株、假單胞菌屬菌株、根毛黴屬菌株、根黴屬菌株和嗜熱黴屬菌株。4.權利要求3的方法，其中所述脂解酶是一種脂肪酶，該脂肪酶衍生自短小芽孢桿菌屬菌株、嗜熱脂肪芽孢桿菌菌株、Candidacylindracea菌株、南極念珠菌菌株、Humicolainsolens菌株、Hyphozyma菌株、洋蔥假單胞菌菌株、或細毛嗜熱菌菌株。5.權利要求2的方法，其中所述生物聚酯水解酶是角質酶或是栓質酶。6.權利要求5的方法，其中所述生物聚酯水解酶衍生自麴黴菌屬菌株，具體是米麴黴，鏈格孢屬菌株，具體是Alternariabrassiciola，鐮孢屬菌株，具體是腐皮鐮孢，Fusariumsolanipisi，Fusariumroseumculmorum，或Fusariumroseumsambucium，長蠕孢屬菌株，具體是麥根腐長蠕孢，腐質黴屬菌株，具體是Humicolainsolens，假單胞菌屬菌株，具體是門多薩假單胞菌，或惡臭假單胞菌，絲核菌屬菌株，具體是立枯絲核菌，鏈黴菌屬菌株，具體是瘡痂病鏈黴菌，或單隔孢屬菌株，具體是Ulocladiumconsortiale。7.權利要求6的方法，其中所述的酶是衍生自Humicolainsolens菌株，具體是HumicolainsolensDSM1800菌株的角質酶。8.權利要求1的方法，其中所述表面活性劑選自烷基酚的非離子、分支表面活性劑縮合產物、脂肪族仲醇的縮合產物、苯乙烯酚的縮合產物和分支脂肪醇的縮合產物。9.權利要求1的方法，其中所述表面活性劑選自TritonX-100、TerginolNP9、Tergitol15-S-9、Terginol15-S-12和Softanol90、Ethox2400、Ethox2659、EthoxTDA-9、Ethox2622、Ethox2938、NovellIITDA-6.6、NovellIITDA-7、NovellIITDA-8.5、NovellIITDA-9、NovellIITDA-9.5和NovellIITDA-11。10.權利要求1的方法，其中所述酶促反應之後是衝洗步驟，在該步驟過程中水解的環狀低聚物用鹼性溶液處理。11.權利要求1的方法，其中所述環狀低聚物存在於含有聚酯的織物或紗線的纖維內部或表面。12.權利要求1的方法，其中所述環狀低聚物是環狀三(對苯二甲酸乙二醇酯)。13.一種改善聚酯織物外觀的方法，其中所述方法包括用一種或多種羧酸酯水解酶以及一種非線性、非離子表面活性劑處理該織物。全文摘要本發明涉及聚(對苯二甲酸乙二醇酯)的環狀低聚物的酶水解的方法，該方法包括用一種或多種脂解酶和/或生物聚酯水解酶以及一種非離子、非線性表面活性劑作用於環狀低聚物。文檔編號C12S11/00GK1774508SQ03819431公開日2006年5月17日申請日期2003年8月6日優先權日2002年8月16日發明者喬·江普,斯蒂法妮·麥克洛斯基申請人:諾維信北美公司