一類苝醌類化合物及其提取分離方法與應用的製作方法

2023-04-26 09:18:51

專利名稱：一類苝醌類化合物及其提取分離方法與應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一類新的茈醌類化合物及其提取分離方法與應用，尤其涉及一類新茈醌類化合物(I-VI)及其由蜈蚣衣屬植物地衣的內生真菌(Phaeosphaeria sp.)發酵液中提取分離的方法與其在製備抗真菌和抗腫瘤藥物中的應用。
背景技術：
茈醌類化合物除少數來自昆蟲體內，大多數來是自真菌的次級代謝產物，在結構上是一類聚合的二萘酮類化合物，存在旋阻異構和許多手性中心，通常根據真菌來源命名；到目前為止，已從真菌代謝產物中分離獲得茈醌類化合物10多個，常以茈醌母核的取代和來源的差異分為三種結構類型，即=C20 Compounds, Mold Perylenequinones， Aphid Perylenequinones (Carol A. Mulrooney, Barbara J.Morgan, Xiaolin Li, Marisa C. Kozlowski. Perylenequinonenatural products :enantioselective synthesis of the oxidized pentacyclic core. J. Org. Chem. 2010,75(1) 16-29.).目前，天然抗真菌，抗腫瘤化合物已經成為人們開發新藥以及利用天然原料提取新藥的重要來源，因此人們正在不斷尋找活性較好，結構新穎的新型天然化合物。茈醌類化合物是天然的光敏化合物，具有較好的光敏殺傷作用，在抗腫瘤，抗菌，抗病毒方面，甚至食品和材料領域有較好的應用前景。因此，尋求新的茈醌類化合物迫在眉睫。

發明內容
針對上述現有技術，本發明要解決的問題是提供一類新的茈醌類化合物I-VI，及其由蜈蚣衣屬植物地衣的內生真菌(Phaeosphaeria sp.)發酵液中提取分離的方法與其在製備抗真菌藥物和抗腫瘤藥物中的應用。本發明是通過以下技術方案實現的一類新的茈醌類化合物，包括下述通式(I-VI)的化合物
權利要求
1.下述通式(I-VI)的茈醌類化合物
2.權利要求1所述的茈醌類化合物的提取分離方法，其特徵在於，包括以下步驟(1)製備真菌發酵液將蜈蚣衣屬植物地衣的內生真菌在PDA培養基上25°C斜面培養 15天；然後取真菌菌落轉染到錐形瓶中，每個錐形瓶中含有200ml的PDB，在22°C條件下， IlOrpm的搖床上培養7天；取IOml的發酵液加入到含有200ml PDA培養基的錐形瓶中，在 22°C條件下，IlOrpm的搖床上培養30天，得到真菌發酵液；(2)製備氯仿總提物將上述所得真菌發酵液減壓過濾，過濾液在旋轉蒸發儀50°C，真空度9. Ombar條件下，減壓濃縮至相對密度115，用一倍量的氯仿(體積比)萃取5次，收集，合併氯仿萃取液，於50°C條件下旋轉蒸除氯仿後得氯仿總提物；(3)分離將上述氯仿總提物用其1.5倍量的200 300目的矽膠拌樣，進行矽膠柱層析，以石油醚-丙酮系統按常規比例梯度洗脫，在石油醚丙酮為20 1的洗脫部分用聚醯胺薄膜檢測，展開劑為丙酮水=1 1，可見光下觀察並以常規方法進行合併和濃縮得兩部分黃色浸膏A和B;在石油醚丙酮為10 1的洗脫部分用聚醯胺薄膜檢測，展開劑為丙酮水=1 1，可見光下觀察並以常規方法進行合併和濃縮得黃色浸膏C ；在石油醚 丙酮為1 1的洗脫部分用聚醯胺薄膜檢測，展開劑為丙酮水=1 1，可見光下觀察並以常規方法進行合併和濃縮得黃色浸膏D ；(4)純化將上述浸膏A進行S^hadexLH-20層析，先用氯仿甲醇=1 1的溶液洗脫，然後再用純甲醇溶液洗脫，可見光下以常規方法合併和濃縮黃色流份，進行HPLC純化， 得到化合物I和化合物II ；上述浸膏B進行S^hadex LH-20層析，以純甲醇溶液洗脫，可見光下以常規方法合併和濃縮黃色流份，進行HPLC純化，得到化合物V和化合物VI ；上述浸膏C進行Sephadex LH-20層析，以純甲醇溶液洗脫，可見光下以常規方法合併和濃縮黃色流份，進行HPLC純化，得到化合物III ；上述浸膏D進行進行S印hadex LH-20層析，以純甲醇溶液洗脫，可見光下以常規方法合併和濃縮黃色流份，進行HPLC純化，得化合物IV。
3.根據權利要求2所述的提取分離方法，其特徵在於所述PDA培養基的組成為2% 葡萄糖，20%土豆，1.8%瓊脂，餘量為水。
4.根據權利要求2所述的提取分離方法，其特徵在於所述PDB培養基的組成為2% 葡萄糖，20%土豆，餘量為水。
5.根據權利要求2所述的提取分離方法，其特徵在於所述HPLC是安捷倫1100高效液相色譜，其中泵為Agilent 1100G1310A泵，脫氣裝置為Agilent 1100G1322脫氣裝置，檢測器為 Agilent 1100G1314AVWD，檢測波長為 210nm，反相柱為 ZORBAX SB-C18 5ym C18 反相柱，柱外徑和長度為9. 4X 250mm。
6.根據權利要求2所述的提取分離方法，其特徵在於所述步驟(3)中，石油醚-丙酮系統為體積比從100 0到0 1。
7.權利要求1所述的茈醌類化合物在製備抗菌藥物中的應用。
8.權利要求1所述的茈醌類化合物在製備抗真菌藥物中的應用。
9.權利要求1所述的茈醌類化合物在製備抗腫瘤藥物中的應用。
10.權利要求1所述的茈醌類化合物在製備光敏抗腫瘤藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一類新的苝醌類化合物，包括通式I-VI)的化合物本發明的苝醌類化合物是由蜈蚣衣屬植物地衣的內生真菌(Phaeosphaeria sp.)發酵液中提取分離得到的，其純度達98％以上，抗菌活性實驗表明部分化合物具有較好的抗真菌作用，抗腫瘤活性實驗表明該類化合物具有較好的抗腫瘤作用，在加入光照條件下，表現出明顯的光敏殺傷腫瘤細胞作用。在目前藥物耐藥嚴重的環境下，採用本發明的化合物I-VI具有良好的開發、利用和發展前景，同時也為研究開發新的抗真菌和抗腫瘤藥物提供先導化合物開闢了一個新的途徑。
文檔編號C12P17/18GK102219768SQ20111010096
公開日2011年10月19日 申請日期2011年4月21日 優先權日2011年4月21日
發明者婁紅祥, 李剛 申請人:山東大學