一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物及其製備方法
2023-05-10 07:39:06 2
專利名稱：一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥提取物組合物，具體涉及一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合 物及其製備方法。
背景技術：
「複方貞術調脂方」(FTZ)，是一種中藥組合物，用於治療高脂血症，取得理想療效， 臨床總有效率達91%。全方由女貞子、白朮、佛手、杜仲、大薊、丹參、黃連、三七8味中藥組 成。該組方FTZ已獲國家發明專利授權，專利號200410051250.4。雖然不少複方中藥具有良好的血脂調節功能和臨床療效，但是由於是中藥複方制 劑，還有許多不足之處(1)其成分較複雜，其有效成分還不清楚，不易量化，最終將影響產 品的臨床療效的穩定性，(2)相對簡單的製備工藝，方中有效成分得不到應有的純化，雜質 成分多，服用劑量大，病人服用順應性不夠理想，(3)由於方劑提取物量大，應用範圍受到各 種限制。
發明內容
本發明的目的在於克服已有技術的不足，提供一種療效更顯著確切，有效成份含 量高，易於量化，質量易於控制的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物。本發明的另一目的是提供一種工藝穩定，重現性好的上述防治脂代謝紊亂的植物 提取物組合物的製備方法。本發明的又一目的是提供上述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在製備預防 或治療脂代謝紊亂相關疾病藥物和或保健品中的應用。本發明通過以下技術方案實現上述目的
一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼提 取物。三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼提取物的重量比優選為廣9:廣3。一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，步驟如下
(ι)三七總皂苷提取物的製備將原料藥物三七經過(V3醇提後，合併總提取物，濃縮 總提取物後得到濃縮液，除去濃縮液中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；
(2)黃連總生物鹼提取物的製備將原料藥物黃連加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，濃縮 得濃縮液，再以酸溶解鹼沉澱重結晶析出黃連總生物鹼提取物；
(3)將三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼提取物混合，得到防治脂代謝紊亂的植物提 取物組合物。上述製備方法步驟(1) Ci_3醇提是用30 95體積％的CV3醇提取1 5次，優選 用65 75體積％的C"醇提取2 3次，每次提取的CV3醇體積為藥材質量的1 15倍， 優選為5 10倍，每次提取時間為5分鐘以上，優選為6(Γ120分鐘；所述Cu醇為甲醇、乙 醇或丙醇，優選為乙醇，因為乙醇安全性比甲醇更高，也更易獲得，提取效果也比丙醇好。
步驟(1)中除去濃縮液中非皂苷類成分採用大孔樹脂，大孔樹脂與濃縮液的用量 比是Ikg樹脂加濃縮液0. 5飛L，優選為廣1. 5L。用大孔樹脂柱吸附後洗脫用5(Γ95體積％ 乙醇，優選為75 85體積％乙醇，用量為每Ikg大孔樹脂用;Γ20 L乙醇，優選4飛L乙醇， 以廣20 ml/min，優選5 12 ml/min流速洗脫、洗脫至無色；所述大孔樹脂為聚醯胺型樹脂 或聚苯乙烯弱鹼性陰離子交換樹脂。步驟(2) CV3醇回流提取是用50 95體積％，優選為65 75體積％ C1^3醇提取1 5次，優選為2 3次，每次提取的C"醇體積為藥材質量的1 15倍，優選為5 10倍， 每次提取時間為5分鐘以上，優選為6(Γ120分鐘。所述CV3醇為甲醇、乙醇或丙醇，優選為 乙醇，因為乙醇安全性比甲醇更高，也更易獲得，提取效果也比丙醇好。酸溶解是用醋酸溶解，醋酸用量為Cu醇提物的3 10倍，優選為3 5倍；加 Γ30質量％，優選為10質量％HC1調pH為0. 2 4，優選pH為1. 5 2. 5。加入NaCl重結晶， 溶液NaCl濃度約為5 12質量％，優選為6 8質量％ ；鹼沉澱是用廣30質量％，優選為 10質量％NaOH溶液，pH為纊13，優選pH為1廣12. 5，重結晶體積為黃連重量的廣5倍，優選 為2 3倍。防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在製備預防或治療脂代謝紊亂疾病藥物或 保健品中的應用，所述脂代謝紊亂疾病為高脂血症、代謝綜合症等。本發明中所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物簡稱為SHCE。所述藥物為將SHCE按照藥劑學上可以接受的載體和/或輔料，使用一般製劑方 法，加工成為口服製劑或注射製劑等形式。常規輔料有潤滑劑、填充劑、粘合劑、崩解劑等。 口服製劑有片劑、膠囊、散劑、丸劑、粉末、顆粒、晶體、溶液、浸出物、懸劑、湯、糖漿、酏劑、 茶、油等形式。本發明的SHCE有效成分為三七皂苷Rl、人參皂苷Rb 1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、 人參皂苷Rgl、小檗鹼、黃連鹼、表小檗鹼、巴馬汀。其中重量比例比為三七皂苷Rl 人參皂 苷Rbl 人參皂苷Rd:人參皂苷Re 人參皂苷Rgl 小檗鹼黃連鹼表小檗鹼巴馬汀等於 1 4:1 8:1 3:1 2:1 11:1 10 :1 3:1 2:1 3。當三七總皂苷提取物和黃總生物鹼提取物的配比為7 3時，SHCE有效成分及重 量百分含量比分別為三七皂苷Rl 人參皂苷Rgl 人參皂苷Re 人參皂苷Rbl 人參皂苷 Rd 小檗鹼黃連鹼表小檗鹼巴馬汀等於2. 3 2. 8 10 12 :0. 95 1. 1 :7. 6 9. 0 1. 6 1. 9 :9· 5 11. 5 :2· 4 2. 8 1. 1 1. 3 :2. 1 2. 4。經藥理研究，(1)動物體內試驗表明，本發明SHCE對實驗性高脂血症，有明顯降低 膽固醇的作用，能夠改善脂質代謝；(2)本發明SHCE能作用於脂代謝的膽固醇吸收、轉運、 轉化、排洩和體內膽固醇合成等環節，從而調節脂質代謝紊亂；(3)臨床研究結果表明，本 發明SHCE具有顯著的降脂作用，治療高血脂症和代謝症候群臨床療效確切，並且沒有觀察 到明顯副作用。與現有技術相比，本發明具有如下有益效果
本發明SHCE是在中國發明專利ZL200410051250. 4基礎上，選取其中的兩味中藥三七 和黃連，用其提取物組成的組合物，該組合物是在進行活性成分群(有效部位)及其組分配 伍的活性篩選而獲得的最佳配伍。通過本發明製備方法，可以去除複方中藥中大量無效的 化學成分，得到更有效的中藥有效提取部位，既保留了中藥特色，又使傳統中藥中的有效成分含量大大提高，減少了無效成分對產品加工和製劑質量及安全性的影響，使該複方中藥 有效成分明確，製備工藝穩定，產品質量可控，有利於大量生產。動物體內試驗表明，該植物 提取物組合物對實驗性高脂血症有明顯降脂作用，能降低膽固醇，改善脂質代謝，並且沒有 觀察到明顯副作用，增加了用藥的安全性。本發明的優點在於為預防和/或治療脂質代謝紊亂相關疾病提供了一種新產品。 本發明與同類防治脂代謝脂紊亂相關疾病的藥品比較，療效確切，安全無明顯毒副作用，單 獨使用或與其它藥物復配都有良好的應用前景。本發明的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物與複方貞術調脂方(原方，FTZ)相 比較
(1)服用量由原來的6g提取物縮減為600mg，縮減為原來的1/10；
(2)藥物有效成分的含量提高約10倍；
(3)動物體內試驗表明，SHCE對實驗性高脂血症有明顯降脂作用，並能降低膽固醇的作 用，改善脂質代謝，並且沒有觀察到明顯副作用，增加了用藥的安全性。對於高脂飲食性高 脂血症的降血膽固醇的藥效，SHCE部分指標優於原方，達到了減少服用量而不降低藥效的 目的。
圖1 實施例1 SHCE的製備(6)片劑的製備項下SHCE經HPLC分析得到的指紋圖 譜中三七總皂苷成分的色譜峰圖。圖2 實施例1 SHCE的製備(6)片劑的製備項下SHCE經HPLC分析得到的指紋圖 譜中黃連總生物鹼成分的色譜峰圖。圖3 實施例2中SHCE促進L_02肝細胞膽固醇7 α羥化酶(CYP7A1)基因mRNA表 達的試驗結果圖，其中1為空白對照，2為FTZ組，3為SHCE低劑量組，4為SHCE中劑量組， 5為SHCE高劑量組。圖4 實施例2中SHCE對HMG-CoA還原酶活性的抑制作用，圖中C為空白對照；FTZ 為FTZ組；SHCE小為SHCE小劑量組；SHCE大為SHCE大劑量組；辛伐他汀為辛伐他汀組。
具體實施例方式實施例1 SHCE的製備 一、三七總皂苷提取物的製備 (1)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、8倍和6倍的75體積％乙醇分別回流提 取3次，每次池，合併提取液用200目濾布過濾，合併濾液。回收乙醇並使醇提部分濃度為 Iml相當於Ig生藥的濃縮液(1. 9 L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂為聚苯乙烯弱鹼性陰離 子交換樹脂系列的HPD-100，按1 kg樹脂加濃縮液1.5L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗脫 液近無色，然後用85體積％乙醇4. 5 L以10 ml/min流速洗脫，洗脫至流出液無色，合併 洗脫液，真空減壓回收乙醇並濃縮至為Iml約相當於2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，600C以下乾燥得總皂苷提取物0. 65 kg。乾燥的方法很多，可用減壓乾燥，也可用薄膜蒸發乾燥等。本發明優選採用噴霧幹
5燥法，其進風口溫度80 108°C，出口溫度55 60°C，風速5 10m/S，壓力0. 02 0. IkPa,廣2次乾燥。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為73. 8%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的25. 6%、 5. 2%、3· 1%、32· 1%、7· 5%。(2)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、7倍和5倍的65體積％甲醇分別回流提 取3次，每次池，合併提取液用200目濾布過濾，合併濾液。回收甲醇並使醇提部分濃度為 Iml相當於Ig生藥的濃縮液(2. O L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂為聚苯乙烯弱鹼性陰離 子交換樹脂系列的HPD-600，按1 kg樹脂加濃縮液1.2 L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗 脫液近無色，然後用90體積％乙醇3. 5 L以10 ml/min流速洗脫，洗脫至流出液無色，合併 洗脫液，真空減壓回收乙醇並濃縮至為Iml約相當於2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，600C以下減壓乾燥得總皂苷提取物0. 64 kg。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為75. 2%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的26. 1%、 5. 3%、3· 2%, 32. 8%、7· 6%。(3)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、7倍的70體積％正丙醇分別回流提取2 次，每次池，合併提取液用200目濾布過濾，合併濾液。回收正丙醇並使醇提部分濃度為Iml 相當於Ig生藥的濃縮液(1.7 L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂優選為聚醯胺型AB-8。按 1 kg樹脂加濃縮液1.3L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗脫液近無色，後用80%乙醇6 L以 9 ml/min流速洗脫、洗脫至流出液無色、合併洗脫液，真空減壓回收乙醇並濃縮至為Iml約 相當於2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，60°C以下減壓乾燥得總皂苷提取 物 0.62 kg。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為72. 2%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的25. 3%、 5. 0%、3· 2%, 31. 3%、7· 2%。 表1不同製備工藝三七總皂苷提取物得率及HPLC含量測定結果(％)
樣品序號得率三七總皂苷人參皂苷Rbl人參皂苷Rd人參皂苷Re人參皂苷Rgl三七皂苷Rl(1)6. 573. 825. 65. 23. 132. 17. 5(2)6. 475. 226. 15. 33. 232. 87. 6(3)6. 272. 225. 35. 03. 231. 37. 2
、黃連總生物鹼的製備
(4)黃連總生物鹼提取物
稱取10 kg黃連藥材，粗粉碎，以藥材量的6倍、5倍和5倍的70%乙醇分別回流提取3 次，每次2 h，合併提取液，真空減壓回收乙醇濃縮至1.3g藥材、ml，得流浸膏2. lkg。加入 冰醋酸6 L溶解，充分攪拌，4 10°C放置過夜，離心(5000 r / min，15min)，抽濾，棄去沉 澱，取上清液，上清液中加10質量％HC1調pH至2. 5，然後加入NaCl，使溶液NaCl濃度約為 8質量％，充分攪拌，使NaCl溶解，靜置Mh，離心(5000 r / min，15min)，收集沉澱物；上清 液加10質量％NaOH調pH至12，靜置24h，離心(5000 r / min，15min)，收集沉澱物，合併2次沉澱物，60°C減壓乾燥，即得黃連總生物鹼提取物1.65 kg。黃連總生物鹼提取物用HPLC方法測定含總生物鹼含量為57. 1%，其中小檗鹼 35. 0%,黃連鹼8. 6%、表小檗鹼4. 1%、巴馬汀7. 6%。(5 )黃連總生物鹼提取物
稱取10 kg黃連藥材，粗粉碎，以藥材量的8倍、5倍和4倍的75體積％甲醇分別回流 提取3次，每次2 h，合併提取液，真空減壓回收甲醇得浸膏2. 05kg。加入冰醋酸溶解5. 5 L， 得酸水提取液，4 1(TC放置過夜，離心(5000 r / min，15min)，抽濾，棄去沉澱，取上清液， 上清液中加10質量％HC1調pH至3. 0，然後加入NaCl，使溶液NaCl濃度約為6質量％，充 分攪拌，使NaCl溶解，靜置Mh，離心(5000 r / min，15min)，收集沉澱物；上清液加10質 fi%NaOH調pH至12，靜置24h，離心(5000 r / min，15min)，收集沉澱物，合併2次沉澱物， 60°C減壓乾燥，即得黃連總生物鹼提取物1. 63 kg。黃連總生物鹼提取物用HPLC方法測定含總生物鹼含量為55. 6%，其中小檗鹼 34. 0%,黃連鹼8. 4%、表小檗鹼4. 0%、巴馬汀7. 5%。三七總皂苷色譜條件
以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按下表2中的 規定進行梯度洗脫；檢測波長為203nm ；流速lml/min ；柱溫25°C ；檢測波長203nm ；自動 進樣器進樣。表 權利要求
1.一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼 提取物。
2.根據權利要求1所述的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，其特徵在於所述三七 總皂苷提取物與黃連總生物鹼提取物的重量比為廣9:廣3。
3.權利要求1或2所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，步驟如下(ι)三七總皂苷提取物的製備將原料藥物三七經過(V3醇提後，合併總提取物，濃縮總提取物後得到濃縮液，除去濃縮液中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；(2)黃連總生物鹼提取物的製備將原料藥物黃連加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，濃縮 得濃縮液，再以酸溶解鹼沉澱重結晶析出黃連總生物鹼提取物；(3)將三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼提取物混合，得到防治脂代謝紊亂的植物提 取物組合物。
4.根據權利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 步驟(1) C1^3醇提是用30 95體積％的Cp3醇提取1 5次，每次提取的Cp3醇體積為藥 材質量的1 15倍，每次提取時間為5分鐘以上；所述CV3醇為甲醇、乙醇或丙醇。
5.根據權利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 步驟(1)中除去濃縮液中非皂苷類成分採用大孔樹脂，大孔樹脂與濃縮液的用量比是Ikg 大孔樹脂加濃縮液廣5L。
6.根據權利要求5所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 是用大孔樹脂柱吸附後洗脫用5(Γ95體積％乙醇，用量為每Ikg大孔樹脂用5 20 L乙醇，以 Γ20 ml/min流速洗脫，洗脫至無色；所述大孔樹脂為聚醯胺型樹脂或聚苯乙烯弱鹼性陰離 子交換樹脂。
7.根據權利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 步驟(2)(V3醇回流提取是用5(Γ70體積醇提取1 5次，每次提取的Cu醇體積為藥 材質量的1 15倍，每次提取時間為5分鐘以上。
8.根據權利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 步驟(2)所述酸溶解是用醋酸溶解，用廣30質量％HC1調pH為0.廣5。
9.根據權利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的製備方法，其特徵在於 步驟(2)所述鹼沉澱是用廣30質量％NaOH溶液，pH為9 13，重結晶體積為黃連重量的廣5 倍。
10.權利要求1或2所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在製備預防或治療脂代 謝紊亂疾病藥物或保健品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物鹼提取物。本發明還公開了上述組合物的製備方法，是將三七經過C1-3醇提後，合併總提取物，濃縮後得總提取物濃縮液，除去其中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；將黃連加C1-3醇回流提取，回收C1-3醇，濃縮，濃縮液再以酸溶解鹼沉澱重結晶析出總生物鹼提取物，兩者混合後得到防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物。本發明的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物去除了原複方中藥中大量無效的化學成分，減少了無效成分對產品加工和製劑質量及安全性的影響，使有效成分明確，含量增加，製備工藝穩定，產品質量可控，利於工業化生產，並顯著提高降脂藥效。
文檔編號A61P3/06GK102100761SQ20111002684
公開日2011年6月22日 申請日期2011年1月25日 優先權日2011年1月25日
發明者郭姣 申請人:廣州中醫藥大學