川芎當歸總提取物及製劑和用途的製作方法

2023-04-28 08:19:16

專利名稱：：川芎當歸總提取物及製劑和用途的製作方法
技術領域：
：本發明屬於現代中藥領域，具體而言，本發明涉及系列用於製備治療婦科疾病以及頭痛、痺痛等疾病的現代中藥。
背景技術：
：複方芎歸由著名中藥川芎、當歸組成，又名佛手散，是經典中藥藥對。本方最初出自《普濟本事方》主治妊娠傷胎、難產，胞衣不下等婦科疾病，《醫宗金鑑》對其治病機理作了較詳盡的辨證分析'命名曰佛手者，謂婦人經前、產後諸症，如佛手之神妙也。川芎、當歸為血分之主藥，性溫而味甘、辛，以溫能和血，甘能補血，辛散血出也。"在以後的臨床應用中該方劑被廣泛地應用於與之辨證相關連的病症，如月經不調、經行腹痛、婦人難產、產後瘀血腹痛；瘡瘍腫痛；風溼痺痛；血虛、血瘀頭痛等症。對複方芎歸的研究除了傳統的煎、煮、熬給藥工藝外，現代的研究方法包括乙醚提取和乙醇滲濾後乙醚提取等，而這些方法存在著工藝周期長、大量使用有機溶劑等缺陷。例如，乙醇滲濾需要12小時左右；大量使用有機溶劑，操作上容易出危險，工業化生產有一定難度；提取過程中有機溶劑有可能清除不淨，藥品中有殘留物；使用試劑量大，成本較高；工藝過程長，可變因素多，不利於產品的監測等缺陷。超臨界萃取技術是一種新型的提取技術，在多個領域具有廣闊的應用。超臨界流體(SCF)指熱力學狀態處於臨界點(Pc，Tc)之上的流體，此時流體處於氣態與液態之間的一種特殊狀態，具有十分獨特的物理化學性質。SCF的粘度接近於氣體，密度接近於液體，擴散係數介於氣體和液體之間，兼有氣體和液體的優點，既象氣體一樣容易擴散，又象液體一樣有很強的溶解能力。因而SCF具有高擴散性和高溶解性。在其它條件完全相同的情況下，液體的密度在相當程度上反應了它的溶解能力，而SCF的密度與壓力和溫度有關，隨著壓力的增大，介電常數和密度增大，SCF對物質的溶解能力增大。超臨界萃取就是利用SCF在臨界點附近體系溫度和壓力的微小變化，使物質溶解度發生幾個數量級的突變性質來實現其對某些組分的提取和分離。通過改變壓力或溫度來改變SCF的性質，達到選擇性地提取各種類型的化合物的目的。超臨界萃取技術主要有兩類萃取過程恆溫降壓過程和恆壓升溫過程。不同點在於前者是把SCF經減壓後與溶質分離，3後者是SCF經加熱實現溶質與溶劑分離。溶劑都可以反覆循環使用。常用作SCF的溶劑有(202、NH3、甲苯等。其中C02是工業上最常用萃取劑，其特點是a)臨界溫度低(31.06°C)，萃取可以在室溫附近的溫和條件下進行，對易揮發組分或生理活性物質極少破壞，適合於天然活性成分的提取；b)臨界壓力適中(7.14MPa)，操作條件易於達到，在室溫下液化壓力為4Mpa—6MPa，便於儲運；c)安全無毒，尤其適合製藥、食品工業，且萃取分離一次完成，無溶劑殘留；d)具有化學惰性不可燃，操作安全，價廉易得；e)C0二,可循環使用。超臨界萃取在中藥現代化領域已經顯現強大的生命力，部分中藥己經藉此實現產業化。在不同的壓力、溫度區間，二氧化碳對物質的選擇具有不同的針對性，可使中藥提取純度更高、生產更為高效。此外，採用超臨界技術萃取有效成分，提取物中的耗氧微生物將被完全殺死，而生物活性物質不會被破壞。我們在充分研究的基礎上，採用超臨界萃取技術從複方川芎當歸中提取了一種總提取物，對川芎和當歸的有效成分進行提取。同時對提取物丌展了深入細緻的藥理研究，發現本提取物具有相同適應症其他治療藥物無法企及的優點，可以丌發用於製備治療婦科疾病以及頭痛、痺痛等疾病的現代中藥。發明概述本發明的目的是提供一種複方芎歸總提取物，其中含苯酞類成分20-95%，不飽和脂肪酸成分5-40%。本發明的另一目的是提供一種製備本發明複方芎歸總提取物的方法。本發明的另一目的是提供含有本發明複方芎歸總提取物的藥物製劑。本發明的另一目的是提供了本發明複方芎歸總提取物用於製備治療頭痛、風溼痺痛及婦科痛經、月經不調等症的中藥複方藥物。發明詳述本發明提供的複方芎歸總提取物，其中含苯酞類成分20-95%，不飽和脂肪酸成分5-40%。在苯酞類成分中，藁苯內酯含量為10-90%，優選20-80%，更優選30-70%，最優選優選40-60%;不飽和脂肪酸成分包括亞油酸，油酸或亞麻酸等。本發明提供的複方芎歸總提取物的具體方法包括如下歩驟a.分別將當歸和芎歸粉碎，過20F!篩；b.將重量比為20-80%，優選30-70%，更優選40-60%的當歸和重量比為20-80%,優選30-70%，更優選40-60%的芎歸粉末置超臨界C02提取儀萃取，萃取條件是壓力10-100Mpa，優選20-50Mpa;溫度0-l(XTC，優選室溫-80。C;取物分離條件第一分離釜壓力5-50Mpa，優選8-15Mpa,溫度0-IOO'C，優選，20-80'C;第二分離釜壓力l-20Mpa，優選4-6Mpa，溫度0-100。C，優選20-80。C;C.收取第二分離釜萃取物，過濾、離心，取油層得總提取物。與現有技術相比，本發明的總提取物的製備方法具有諸多優點1.工藝技術先進，生產成本低，適合現代化工業生產；2.得到的總提取物及其製劑起效迅速、療效好，無明顯毒副作用；3.使用超臨界C02;萃取技術提取藥物，不使用乙醚及乙醇等有機溶劑，產品安全、天然；4.本發明的萃取技術速度快，一個工作日內可完成一批次產品，大大縮短生產周期；5.由於川芎、當歸中的活性成分藁本內酯高溫下易發生反應，而超臨界C02萃取技術萃取溫度低，適於對該活性成分的萃取；6.超臨界C02;萃取技術得率高，萃取介質可循環使用，可降低生產成本和藥材用量o本發明人將總提取物進行了進一步研究，將提取物製成各種藥物組合物，包括片劑、丸劑、滴丸劑、粉術劑、錠劑、膠囊、軟膠囊劑、凝膠劑、糖漿劑、膏劑、懸浮液、扁囊劑和栓劑等，特別是滴丸劑和膠囊劑等。具體製備工藝如下滴丸製備工藝如下a.取上述芎歸總提取物，與常規重量比例的聚乙二醇等輔料加熱熔融，加熱溫度為60-90°C，其中聚乙二醇可以使用聚乙二醇4000-聚乙二醇20000系列中的一種或它們的混合物；b.置滴丸機中，60-90。C恆溫，控制流速，滴入二甲基矽油冷凝液中，條件滴口直徑2咖-5mm;滴距2-5cm;滴速30-60滴/分鐘；冷凝液溫度0°C-30°C;冷凝液高度30-60cm;C.取滴丸，拭去表面冷凝液，即得滴丸。軟膠囊製備工藝如下a.膠液的配置按常規比例稱取明膠、甘油、水，置於膠桶中，40-8(TC水浴化膠，呈熔融態後，攪拌下加入遮光劑二氧化鈦，調色劑可可棉等，混合均勻；b.將處理好的膠液抽真空除氣泡；C.將處理好的膠液與本發明的總提取物分別加入膠囊機膠桶與料鬥中，壓制。膠丸放至高燥室中乾燥24小時，取合格膠九即得。本發明方法得到的總提取物以苯酞類成分及不飽和脂肪酸類成分為主要活性成分，其中苯酞類成分含量可達10-90%，其中苯酞類成分中藁本內酯含量為10-90%，不飽和脂肪酸成分可達1-40%，優選5-40%，其中不飽和脂肪酸包括亞油酸、油酸，亞麻酸等。本發明的提取工藝可以使芎歸總提取物中苯酞類成分和不飽和脂肪酸類成分保持一定的比例關係，而這兩者的比例關係對總提取物的藥用效果是至關重要的。這是因為1.苯酞類成分具有明顯的活血化瘀、抗炎鎮痛的功效，但也有較明顯的副作用，可能對胃腸道、腎以及中樞神經有一定的損害；因此應注意適當降低該類成分在藥物中的比例；以及進行配伍降低毒性；2.不飽和脂肪酸具有一定的細胞保護作用，特別是在胃腸道中，可以預防或減少其它類成分引起的不良反應，另外不飽和脂肪酸也有一定的抗炎和改善血流變的作用。因此，我們通過長期研究，摸索出上述製備總提取物的工藝將以上兩類成分結合在一起，起到增效、減毒的作用，這一特點在我們所進行的試驗中得到了進一歩的證明。本發明人將總提取物進行了進一歩藥效學、藥理學及毒理學研究，包括對大鼠和家兔在體子宮的影響試驗、對抗縮宮素的影響試驗、抗凝血作用試驗、抗血小板聚集作用試驗、抗炎試驗、鎮痛試驗、大鼠和犬的長毒試驗、大鼠和小鼠的急毒試驗，小鼠和犬的一般藥理試驗等。從以上試驗中發現芎歸總提取具有解痙、鎮痛、活血、抗炎等藥理活性作用，對正常生理指標無影響，毒性低，安全性高等特點，具備開發成為中藥新藥的條件。將總提取物製成滴丸劑及軟膠囊，該劑型有利於該有效成分在人體內完全、快速的吸收，充分發揮其藥效作用，臨床上可用於治療頭痛、風溼痺痛及婦科痛經、月經不調等症。本發明合併該複方中川芎、當歸的有效成分，在所進行的有關痛經藥理試驗中證明合併提取物的藥效作用優於當歸的單獨提取物，芎歸總提取物起效時間較快、藥效作用強，有效劑量小；在抗凝血實驗中發現當歸提取物凝血速率和強度雖有一定藥效作用，但並不明顯，而芎歸總提取物有明顯的抗凝血作用；在抗血小板聚集實驗中芎歸總提取物有明顯的抗血小板聚集作用，而當歸提取物未表現出這一作用。下面通過實施例進一歩說明本發明。應該理解的是，本發明的實施例是用於說明本發明而不是對本發明的限制。根據本發明的實質對本發明進行的簡單改進都屬於本發明要求保護的範圍。除非另有說明，本發明中的百分數是重量百分數。實施例1芎歸總提取物的製備取川芎、當歸藥材，將佔藥材重量30%的川芎和佔藥材重量70%當歸藥材或飲片粉碎至20目，置超臨界萃取器中，萃取3小時，萃取壓力30Mpa，溫度40。C，第一分離釜壓力12Mpa，溫度4(TC，第二分離釜壓力5Mpa，溫度4(TC。取第二分離釜液體，抽濾，離心，取油層即得。實驗結果樣品得率2.87，苯酞類含量38.4%，藁本內酯含量16.9%，亞油酸含量3.21%。實施例2芎歸滴丸的製備取實施例l的總提取物，與聚乙二醇4000加熱熔融，攪拌均勻，傾入滴丸機中，80。C恆溫下滴入5-8。C甲基矽油50冷凝液中，滴速30-40滴/分鐘，滴距4cm，濾出滴丸，擦淨矽油，分裝製成滴丸即得。結果表明滴丸圓整、工業易操作，理化指標合格。實施例3芎歸軟膠囊的製備取實施例1的總提取物，按比例稱取明膠、甘油、水置化膠罐中，65'C水浴化膠，呈熔融態後，攪拌下加入調色劑可可棕。待混合均勻後，抽真空除氣泡。將處理好的膠液與藥液分別加入膠囊機膠桶與料鬥中，壓制。膠丸放至乾燥室中乾燥24小時，取合格膠丸，即得。實施例4芎歸總提取物對縮宮素所致小鼠痛經的影響研究試驗實驗目的觀察芎歸總提取物對縮宮素所致小鼠痛經的影響作用，以及比較芎歸總提取物和單味當歸提取物二者的藥效作用及各自作用特點。實驗材料1.受試動物ICR小鼠，雌性，體重20土2g,由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，合格證號SCXK11-00-0008。2.受試藥物芎歸總提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，批號020112，用蒸餾水和吐溫一80配成乳懸液供動物灌胃給藥。當歸提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，用蒸餾水、吐溫配成乳懸液供動物灌胃給藥。3.試劑及儀器縮宮素注射液10u/ml，南京新天生物化學製藥有限公司生產，批號020301。乙烯雌酚注射液2mg/ml，廣州明興製藥廠生產，批號001001。實驗結果和方法1.分組小鼠96隻隨機分為八組，即對照組，芎歸總提取物60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg組，當歸提取物60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg組。2.給藥途徑和給藥時間灌胃給予受試藥物，模型組給予等量的吐溫一80水溶液，給藥五次，每天一次，末次給藥後一小時正式實驗。給藥後第三天丌始腹腔注射乙烯雌酚注射液0.2ml/只，連續三次，每天一次。'3.實驗方法末次給藥後一小時，小鼠腹腔注射縮宮素注射液2u/只，記錄小鼠在IO分鐘內扭體的次數。4.統計方法各給藥組均與對照組比較，計算出各項指標進行組間t檢驗，PO.05被認為有顯著性差異。5.結果結果見表l。8表l二藥對縮宮素所致小鼠通經的影響作用tableseeoriginaldocumentpage9注林與模型組相比P<0.016.結論以上結果顯示，芎歸總提取物60mg/kg，30mg/kg和當歸提取物60mg/kg，均可明顯減輕小鼠扭體次數，統計學處理提示兩藥可對抗縮宮素引起的子宮痙攣性疼痛。比較兩藥，芎歸總提取物作用強度，作用劑量也較優於當歸提取物。實施例5芎歸總提取物抗凝血作用研究實驗目的觀察芎歸總提取物對大鼠的抗凝血作用，以及比較複方粵歸總提取物和單味當歸提取物二者的藥效作用。實驗材料1.受試動物Wistar大鼠，體重190土20g，購於北京醫科大學動物中心，動物證號醫動字01-3056，飼養處為本所動物詞養中心。2.受試藥物芎歸總提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，批號020108，用蒸餾水和土溫-80配成乳懸液供動物灌胃給藥。當歸提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，用蒸餾水和土溫-80配成乳懸液供動物灌胃給藥。3.試劑及儀器HAAKE-CV100/RV旋轉式流變儀德國、LXT-II離心機、KH-120A高速血球壓積微量離心機閂本、LXT-2離心機上海醫用儀器分析廠實驗方法和結果1.分組將大鼠70隻隨機分為空白對照組、芎歸總提取物大(36mg/kg)、中(18mg/kg)、小(9mg/kg)劑量組，當歸提取物大(36mg/kg)、小(18mg/kg)劑量組，每組動物10隻。2.給藥途徑和給藥時間每日口服給藥1次，容積為10ml/kg。連續灌胃7天，對照組給等容積的土溫-80水溶液。3.實驗方法連續給藥7天後，使用3%戊巴比妥鈉將大鼠麻醉，山動物腹主動脈處取血。對所取血液用枸櫞酸鈉抗凝血(二者體積比為1:9)，以500ml全血37。C溫浴lmin，加入1.29%氯化鈣iocmi進行復鈣，並測定凝血復鈣指標，並可同時得到以下三個參數凝血時間(tr)，動態凝血速率(di/dt)，凝血強度(THl)。4.統計方法各給藥組均與對照組比較，計算出各項指標進行組間t檢驗，P〈0.05被認為有顯著性差異。5.結果結果見表.l。表2芎歸總提取物對大鼠抗凝血的作用研究組別動物劑量TrDt/dtTm只mg/kg(min)(pa/min)(pa)空白對照100.921±0.106735.9±91.99104.47±25.20芎歸36mg/kg10361.027±0.086*563.3±183.90*82.60±17.58*芎歸18mg/kg10181.056±0.150*573.7±193.76*90.57±21.81芎歸9mg/kg1090.986±0.106687.7±147.70101.39±22.31當歸36mg/kg10361.035±0.129*633.3±189,2298.75±15.59當歸9mg/kg)0180.996±0.091704.2±200.68106.80±19.40*與空白對照組t檢驗P〈O.OS6.結論以上結果表明，芎歸總提取物大、中劑量組對於凝血時間、速率兩方面指標都表現出明顯的抑制作用，大劑量組同時還對凝血強度也有明顯降低作用，中劑量組雖使平均值下降，但未達到顯著限。當歸提取物大劑量組對凝血時間有明顯的抑制作用，對速率和強度雖有一定藥效作用，但並不明顯。綜上所述，芎歸總提取物有明顯的抗凝血作用，10並優於當歸單獨使用。實施例6芎歸總提取物抗血小板聚集作用研究實驗目的觀察芎歸總提取物對大鼠血小板聚集及全血粘度、血漿粘度的影響作用，以及比較芎歸總提取物和(相同工藝提取)當歸提取物的抗聚集作用。實驗材料1.受試動物Wistar大鼠，體重190土20g，購於北京醫科大學動物中心，動物證號醫動字01-3056，飼養處為本所動物飼養中心。2.受試藥物芎歸總提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，批號020108，用蒸餾水和土溫-80配成乳懸液供動物灌胃給藥。當歸提取物由北京瑞康醫藥技術有限公司提供，用蒸餾水和土溫-80配成乳懸液供動物灌胃給藥。3.試劑及儀器HAAKE-CV100/RV旋轉式流變儀德國DIC-3210四道血小板聚集儀閂本LXT-II離心機KH-120A高速血球壓積微量離心機閂本LBY-N6A自動清洗式旋轉粘度計北京普利生公司LBY-NW1自動清洗式毛細管粘度計北京普利生公司實驗結果和方法1.分組將大鼠60隻隨機分為空白對照組、芎歸總提取物大G6mg/kg)、中(18mg/kg)、小(9mg/kg)劑量組，當歸提取物大(36mg/kg)，每組動物10隻。2.給藥途徑和給藥時間每閂口服給藥1次，容積為10mL/kg。連續灌胃7天，對照組給等容積的吐溫-80水溶液。3.實驗方法3.1連續給藥7天後，使用3%戊巴比妥鈉將大鼠麻醉，由動物腹主動脈處取血。對所取血液用枸櫞酸抗凝血(二者體積比為1:9)，以1000轉/分離心IO分鐘，製備成為富血小板血漿(PRP);再以3000轉/分離心15分鐘，製備為貧血小板血漿(PPP)。將製備好的PRP與PPP按比例混合。用血小板聚集儀調透光度在4000左右，即血小板濃度為3.0Xl(fml，36。C溫浴2分鐘，測定由ADP誘導的血小板最大聚集百分率。3.2另取lraL全血，置於旋轉粘度計測定杯中，於37。C溫浴lmin，隨即測定不同切變率下的全血粘度。3.3用測定血小板時製備的貧血小板血漿(PPP)200W吸入毛細管粘度計中，測定37"下的血漿粘度。4.統計方法芎歸總提取物各給藥組均與對照組比較，進行t檢驗，P〈0.05被認為有顯著性差異。5.結果表l芎歸總提取物對大鼠血小板聚集的作用研究(動物數『10)組別劑]血小板聚壓積Al&l米佔iS(mpas)血漿粘度mg/Kg(%)10s-(mpas)空白對照芎歸36mg/kg芎歸18mg/kg芎歸9mg/kg當歸36mg/kg36183649.32±16.7629.29±17.53*31.27±15.02*35.00±17.2842.96±22.3738.55±1.7338.20±1.6439.57±1.3239.13±2.2938.39±2.3011.66±2.7811.41±3.1610.03±1.6910.37±2.5611.81±2.335.83±1.106.12±1.235.89±1.015.81±0.866.27±0.965.34±0.865.53±1.035.39±0.71、29±0.65;.55±0.721.09±0.0241.09±0.0171.10±0.0481.08±0.0391.08±0.036*與空白對照組t檢驗P<0.056.結論以上結果表明，三個劑量組的芎歸總提取物以及當歸提取物5天給藥對正常大鼠的血液流變學指標均沒有影響，即對於^常血流變參數不產生幹擾，使之繼續保持正常。大、中劑量組的芎歸總提取物對於血小板聚集均表現出明顯的抑制作用，聚集平均值降低在20%左右，從降幅而言其抑制作用比較溫和；當歸提取物未表現出抗血小板聚集的作用，表明就抗血小板聚集芎歸複方藥效要略強於當歸單位藥。1權利要求1.一種複方芎歸總提取物，其中含苯酞類成分20-95％，不飽和脂肪酸成分5-40％。2.權利要求所述總提取物，其中在苯酞類成分中，藁本內酯含量為10-90%。3.權利要求所述總提取物，其中在苯酞類成分中，藁本內酯含量為20-80%。4.權利要求所述總提取物，其中在苯酞類成分中，藁本內酯含量為30-70%。5.權利要求所述總提取物，其中在苯酞類成分中，藁本內酯含量為40-60%。6.—種製備權利要求1-5的提取物的方法，包括a.分別將當歸和芎歸粉碎，過20目篩；b.將重量比為20_80%當歸和重量比為20-80%的芎歸粉末置超臨界〔02提取儀萃取，萃取條件是壓力10-100Mpa;溫度0-IO(TC;取物分離條件第一分離釜壓力5-50Mpa，溫度0-IOO'C;第二分離釜壓力1-20Mpa，溫度0-IO(TC;'c.收取第二分離釜萃取物，過濾、離心，取油層得總提取物。7.—種藥物組合物，包括權利要求l-5任一項權利要求所述的芎歸總提取物及輔料。8.權利要求7的組合物，製備為片劑、丸劑、滴丸劑、粉末劑、錠劑、膠囊、軟膠囊劑、凝膠劑、糖漿劑、膏劑、懸浮液、扁囊劑和栓劑。9.權利要求7-8的組合物，製備為滴丸劑及軟膠囊劑。10.權利要求1-5及7-9任一項權利要求所述的芎歸總提取物或組合物用於製備治療頭痛、風溼痺痛及婦科痛經、月經不調等症的中藥複方藥物。全文摘要本發明涉及一種從複方川芎當歸中提取了一種總提取物，其中包括10-90％的含苯酞類成分及不飽和5-40％的脂肪酸成分，還涉及其提取方法、包含其的組合物、製劑的製備及其用於製備治療婦科疾病以及頭痛、痺痛等疾病的藥物。文檔編號A61P15/00GK101513436SQ20081005788公開日2009年8月26日申請日期2008年2月20日優先權日2008年2月20日發明者付俊昌,王海勇申請人:北京瑞康醫藥技術有限公司