一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的製作方法

2023-04-28 16:19:51

專利名稱：一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥領域，涉及一種抗高血壓藥物芹菜素的新劑型，特別涉及一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物。
背景技術：
芹菜素的化學結構為4，5，7_三羥黃酮，其4，5，7 位置的三個羥基和C2C3雙鍵決定了其獨特的藥理學效應和生物學特性。芹菜素來源傘形科植物旱芹(Apiumgraveolens var. dulce)葉；卷柏科卷柏(Selaginella tamariscina)全草；柏科圓柏(Sabina chinensis)葉。Zhang等發現，芹菜素在濃度大於I時對由高K引起去除內皮細胞的小鼠主動脈環收縮有明顯鬆弛作用[IC5tl為(12.0±1. I) μΜ]。苯腎上腺素對無論有無內皮細胞的離體主動脈環都有穩定的收縮作用，芹菜素以劑量(I 12.5μΜ)依賴方式對由苯腎上腺素引起的主動脈環收縮產生鬆弛作用，對內皮細胞完整的主動脈環鬆弛作用的IC5tl為(3. 7±0. 5)，對去除內皮細胞的主動脈環鬆弛作用的IC5tl為(8. 2+0. 9) OM，撤除芹菜素後苯腎上腺素引起的收縮作用可以完全恢復。芹菜素還以劑量依賴方式抑制由12，13-二丁酸佛波醇引起去除內皮細胞的主動脈環收縮[IC5tl為(34.6±1.2)]。在加入芹菜素30min後，由乙醯膽鹼引起的血管鬆弛明顯加強[5μΜ芹菜素的IC5o為(O. 12±0.07)μΜ，
2.5μ M芹菜素的IC5tl為(0.68±0.24)]。進一步研究發現，芹菜素抑制由苯腎上腺素和高K引起的血管收縮，而對佛波醇引起血管收縮的舒張作用較弱。芹菜素可能不影響蛋白激酶C介導的血管收縮作用，而是誘導生成某種內皮細胞源性刺激因子，從而產生內皮細胞依賴的血管鬆弛作用。經研究，芹菜素有保護心臟的作用以及治療帕金森氏症的功效。現代芹菜品種是從原產地中海沼澤地區的野生種馴化而來。野生芹菜的莖，葉含蛋白質成分，遠超過栽培品種的芹菜。野生芹菜首先被應用在醫學上，在公元前九世紀荷馬史詩〈〈奧德賽》中首次提至IJ。中國人是在公元七世紀，從尼泊爾統治者送來的禮品中得到了芹菜這種植物。然而，直至中世紀，芹菜才作為蔬菜廣泛食用。大約在十八世紀在歐洲開始被用作生蔬菜食用，十九世紀初引到美國。中華大地的芹菜分為旱芹和水芹。旱芹生於旱地；水芹營養豐富，清香撲鼻。旱芹口感較差，但藥用功能較強，如脾胃虛弱。芹菜應儘可能的食用葉子，因為葉子中礦物質、維生素的含量，明顯的較葉柄中的含量要豐富的多。葉柄含水份高，熱量低(17千卡/IOOg);種子含蛋白質、脂肪、維生素、鈣、磷、鎂、鉀、鐵和鋅，熱量高(392千卡/100克)。芹菜中還含有芹菜元，佛手苷內酯、糖類、有機酸等，含有的揮髮油中有一種α-芹子烯，對人腦中樞神經有安定和抗痙攣作用；揮髮油中另一種叫丁基苯酸是旱芹菜特殊氣味的來源。水芹中含有多種游離胺基酸、芳香油、甘露糖及多種維生素，常食不但可增進食慾，還有促進血液循環和健腦作用。芹菜在歐美，認為可消除水腫，因為吃了芹菜有利尿作用。芹菜中有重要成分芹菜元，又叫芹菜素，能降壓和影響中樞神經。關於降壓機制，初步認為是透過頭動脈體和主動脈弓的化學感受器的反射作用而引起的。血管灌輸試驗，證明芹菜元還有一定的擴張末梢血管的作用，這與降壓作用也有一定關係。灌胃芹菜元700mg/kg能明顯降低大鼠癲癇發作的程度和次數，延長潛伏期。腦形態學研究，芹菜元對大腦頂葉皮層細胞，膠質細胞，和小腦細胞有一定的保護作用。芹菜元能對抗小鼠腹腔注射震顫素引起的中樞性震顫。大鼠口服芹菜元能對抗古柯鹼引起的興奮。現在市場上已有如芹菜素混懸液劑的降壓藥物，雖然口服後能從胃腸道吸收，但吸收速度慢、吸收不完全，另外片劑中藥物的溶出速率慢，生物利用度差，再加上芹菜素本身作用緩慢，使得芹菜素的藥效無法迅速得到利用。

發明內容
針對現有技術中存在的缺陷與不足，本發明的目的在於提供一種分布均勻，穩定性好，生物利用度高，療效顯著的複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物。實現上述發明目的的技術方案是一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其粒徑在20. I 59. 7nm之間，平均粒徑為42. 7nm。各原料及其質量百分比為
芹菜素1% 15%
表面活性劑5% 35%
助表面活性劑I % 20%
油1% 20%
茺蔚子水取物O. 5% 10%
決明子水取物O. 5 % 10 %
其餘成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100%。以正常大鼠在給藥前後血壓變化情況，觀察茺蔚子的降壓作用。空白對照組給予相應量的蒸餾水，陽性對照組給予硝苯吡啶O. 003g/kg ;實驗組給予茺蔚子醇提液的乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物，劑量為O. 216 g/ mL ;灌胃給藥，連續10 d;採用頸動脈插管法，分別觀察並記錄最後I次給藥後10、20、30、45、60 min時的血壓變化。結果茺蔚子水層對正常大鼠有明顯降壓作用(P 0.05)，對舒張壓無明顯影響，但有一定降低趨勢。結論茺蔚子水溶性成分對正常大鼠降壓作用明顯，水層中主要含生物鹼類成分，生物鹼可能是茺蔚子降壓作用的主要化學成分。決明子為豆科一年生草本植物決明或小決明的乾燥成熟種子。降壓作用決明子水浸液、醇-水浸液、醇浸液對麻醉犬、貓、兔等皆有降壓作用。在慢性實驗中，煎劑每日2g(生藥)/kg，無降壓作用。決明子注射液O. 05g/100g體重靜脈注入可使自發遺傳性高血壓大鼠收縮壓明顯降低，同時也使舒張壓顯著降低，其降壓效果、降壓幅度、作用時間均優於靜脈注射利血平O. 3mg/kg組大鼠。對高脂血症的影響含7%決明子的高脂飲料餵養小鼠2星期，決明子不能影響血清總膽固醇(TC)水平，但能明顯升高血清高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)含量及提高HDL-C/TC比值，即明顯改善體內膽固醇的分布狀況，而有利於預防動脈粥樣硬化。決明子散有降低實驗性高脂血症大鼠血漿總膽固醇和三醯甘油(甘油三酯)的作用，使之分別比模型組降低29%和73%，還能降低肝中三醯甘油和抑制血小板聚集的作用，其值分別比模型組降低49%和59%。有資料證明決明中蒽醌類化合物具有降血脂作用。本複方納米乳所述的表面活性劑用非離子表面活性劑聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40),蓖麻油聚氧乙烯醚 40 (EL40)、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物。這些表面活性劑對人體低毒、安全、無刺激。所述的油是大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯(IPM)或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物。安全、無毒。為了達到更好的效果，本發明在上述表面活性劑中加入助表面活性劑無水乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200 (PEG200)、聚乙二醇400 (PEG400)或聚乙二醇600(PEG600 )中的任意一種，或幾種的混合物。本發明中助表面活性劑在複方芹菜素納米乳的構建中同樣是很好的藥物助溶劑，本發明在藥物中加入刺激性小的助表面如乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇或聚乙二醇200，聚乙二醇400，聚乙二醇600，除了助溶作用外，助表面活性劑主要是為了調整表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)，使得油水界面張力進一步降低，增大界膜的油水性和剛性。助表面活性劑摻入到界面膜中，促進曲率半徑很小膜的形成，擴大複方芹菜素納米乳的乳區面積。本發明的複方芹菜素納米乳，一方面極大的提高了芹菜素的溶解度，減少了藥物在體內的首過效應，促進藥物的胃腸道吸收。芹菜素在水中極難溶解，使藥物的轉運及吸收變得困難，納米乳基質為芹菜素提供了良好的溶解環境。口服時可經淋巴吸收，克服首過效應和分子通過胃腸道時的屏障；另一方面通過復配茺蔚子水提物及決明子水提物，使得本藥物降壓更平穩，效果更持久。本發明的複方芹菜素納米乳與現有技術相比，具有以下優點
I.本發明的芹菜素抗高血壓納米乳的藥物粒徑在20. I 59. 7nm之間，平均粒徑為42. 7nm，是將芹菜素溶於油相，加入表面活性劑和助表面活性劑，用溶解茺蔚子水提物及決明子水提物的蒸餾水滴定到均勻、透明的納米乳體系。形成的複方芹菜素納米乳含芹菜素達 6. 1%。2.本發明的芹菜素抗高血壓納米乳分布均勻，體系透明、穩定性好，有較低的表面張力，油包水型納米乳具有良好的流動性。3.本發明的芹菜素抗高血壓納米乳給藥後迅速被網狀內皮細胞吞噬，使藥物迅速起效，並維持恆定的血藥濃度及藥理效應，提高藥物的生物利用度，減少藥物的用量和使用次數。4.本發明的芹菜素抗高血壓納米乳通過中西藥結合，發揮兩者優點，一方面降壓迅速、起效快，另一剛面藥效穩定、作用持久，符合高效安全的治療標準。5.本發明的療菜素抗高血壓納米乳藥效穩定,生耗能低。6.本發明製成納米乳後可製成口服液直接服用、也可經膠囊包封或經凍乾粉技術
等處理。


圖I為本發明複方芹菜素納米乳電鏡照片。圖2為本發明複方芹菜素納米乳粒徑分析曲線圖。
具體實施例方式發明人給出具體製備方法實施例及使用藥效試驗來進一步說明本發明藥物的效
果O試驗例I本發明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物粒徑大小分析
本發明的最優配比經透射電子顯微鏡檢測(圖1)，液滴呈類球形，分散性好，無粘連；經馬爾文粒度分析儀檢測(圖2)其直徑分布在20. I 59. Ixm之間，平均粒徑為42. 7nm。
試驗例2本發明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物穩定性分析
通過以下離心試驗、光穩定性試驗、溫度穩定性試驗等觀察本發明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的穩定性，觀察本發明是否有分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。I.高速離心試驗
取適量製備好的本發明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物於離心管中，以10 000r/min的轉速離心15 min，離心試驗後，本發明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物依然保持離心前的澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。2.光穩定性試驗
將適量製備好的複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置於正常光照條件下10(1，分別於1(1、2(1、4(1、6(1、8(1、10(1取樣觀察。結果表明複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物每份樣品均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。3.溫度穩定性試驗
將適量製備好的複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置於4°C、室溫(25°C)和40°C三中溫度條件下留樣考察各30d，每隔5d取樣觀察。結果表明，複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物在此三種溫度條件下均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩定現象。4.長期穩定性試驗
將3批納米乳密封於棕色玻璃瓶內，置於(25±2)°C、相對溼度(60±5)%條件下12個月，分別於0、3、6、9和12個月時取樣，考察納米乳的性狀及含量變化，並參考文獻統計分析方法，計算複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的有效期。試驗結果表明在長期試驗條件下，複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的外觀一直保持澄明、均一，未見分層、色變、絮凝和破乳等現象；體系中的芹菜素含量隨時間延長而逐漸降低，其含量一時間變化曲線提供的線性回歸方程，計算出複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的有效期為34. 14個月。試驗例3大鼠尾部測壓法測定複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的藥效(與市售芹菜素混懸液對比)
SHR大鼠3隻隨機分為3組，每組10隻，分別設為SHR陽性對照組、芹菜素混懸液組、複方芹菜素納米乳組分別給予芹菜素混懸液、複方芹菜素納米乳各20 mg/kg*d，溶於飲水中，均從飲水中給藥，I次/d，連續14周。WKY6隻為正常對照組，對照組不給藥物，飲水不
限。、
測量各組大鼠尾動脈血壓。鼠齡為6周時(即用藥前)測壓I次，鼠齡7周(用藥後I周)測壓I次，以後每隔兩周測I次血壓，直到實驗結束。結果見表I。表I各組大鼠SBP的比較(x±s，n=6)_
權利要求
1.一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其特徵在於，其原料及其質量百分比為 芹菜素1% 15% 表面活性劑5% 35% 助表面活性劑I % 20%油1% 20% 茺蔚子水取物O. 5% 10% 決明子水取物O. 5 % 10 % 其餘成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100% ； 所述的表面活性劑為聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油，蓖麻油聚氧乙烯醚40、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物； 所述的油為大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物； 所述的助表面活性劑為無水乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200、聚乙二醇400或聚乙二醇600中的任意一種，或幾種的混合物。
2.根據權利要求I所述的複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其特徵在於，該藥的粒徑介於20. I 59. 7nm之間。
全文摘要
本發明公開了一種複方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其原料及其質量百分比為芹菜素1％～15％、表面活性劑5％～35％、助表面活性劑1％～20％，油1％～20％，茺蔚子水提物0.5％～10％，決明子水提物0.5％～10％，其餘成分為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100％。本納米乳乳滴顆粒小、分布均勻、粘度小、流動性好。芹菜素製備成納米乳劑型後，明顯增加了透過血腦屏障的能力、顯著提高了原藥的生物利用度，延長了藥物的半衰期，減少給藥次數；納米乳提高了芹菜素的藥物溶解及滲透能力，增加芹菜素的穩定性；而且與茺蔚子和決明子的水提物復配後，具有明顯的協同作用，藥物療效發揮更加充分。
文檔編號A61K9/107GK102631405SQ20121014280
公開日2012年8月15日 申請日期2012年5月10日 優先權日2012年5月10日
發明者孫江宏, 曹統, 歐陽五慶, 步國花 申請人:西北農林科技大學