含有殺真菌劑和陽離子成分的組合物的製作方法
2023-04-25 17:19:11 2
專利名稱：含有殺真菌劑和陽離子成分的組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及組合物，例如體用和發用清洗產品，特別是香波，其含有作為第一活性成分的一種或多種可抑制真菌麥角甾醇生物合成的殺真菌劑、作為第二活性成分併兼作陽離子表面活性劑的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨，以及作為載體的本領域已知的體用或發用清洗產品。
背景技術：
已知的藥物香波例如有以含2％活性成分的製劑形式市售的酮康唑香波，經局部施用後對頭皮屑和脂溢性皮炎具有有益的效果。Rosenberg等人在US-4569935中公開了酮康唑適用於局部治療牛皮癬和脂溢性皮炎。US-5456851中公開的酮康唑香波具有較佳的美容益處，如發泡和調理性，並且具有防止降解的適宜的穩定性，使其能夠被配製為含有2％以下的活性成分的製劑。具有皮脂調節作用的Elubiol香波已由WO-93/18743公開。WO-96/29983公開了一種柔和的含水洗滌劑組合物，該組合物含有約4至約12％(重量)的陰離子表面活性劑、相對於每1重量份所述陰離子表面活性劑至少約0.75重量份的兩性表面活性劑以及一種或多種11所列的治療劑。10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨是由Rewo Chemische Werke GmbH(Steinau，Germany)和Witco以商品名Rewocid UTM185銷售的可商購的陽離子表面活性劑。
現有技術的含有去頭皮屑劑的香波製品是如此配製的在功效和可耐受性之間達到最佳的平衡；藥物香波中活性成分的濃度使儘可能多的使用者得到有效的治療而儘可能少地產生不利的效果。然而還有大量的病人不能從現有技術的香波製品的使用中受益，或是因為他們不能對此治療產生反應，或是甚至由於他們不能耐受採用特殊的藥物香波進行的治療。
對特殊的藥物香波不起反應的人數會很高(酮康唑高達30％；硫化硒高達40％)。因此，急需能令大部分使用此產品的病人有效地去除頭皮屑的新香波；即一種新的香波，與現有技術的香波製品相比，對其不起反應的人數更少。
另一方面，患頭皮屑或脂溢性皮炎的病人以及藥物香波的批准機構對這一類香波所要滿足的標準提出了日益更為嚴格的要求。在這些標準中，最重要的是不能因治療導致病情進一步惡化，副作用發生的可能性最低，進一步降低刺激性、瘙癢和脫皮(粘連性和鬆弛性脫皮)等症狀；改進的美容適用性，尤其是良好的清洗特性，沒有氣味或惡臭，不汙染衣物，還有全面的調理性(乾濕梳理性能)。頭皮屑或脂溢性皮炎經常會伴隨產生大量或過量的油脂或皮脂，對其存在有益效果的組合物明顯會令頭皮屑治療產生進一步提高。
至此，為滿足以上迫切的需要，在重新配製香波基質方面進行了最大的努力。然而，仍需要增加藥物香波的可耐受性/適用性，即，希望新香波能更好地被應用此產品的更大比例的病人所耐受。
發明描述本發明涉及組合物，例如體用和發用清洗產品，尤其是香波，其含有下列成分，基本上由下列成分組成，或由下列成分組成作為第一活性成分的一種或多種可抑制真菌麥角甾醇生物合成的殺真菌劑、作為第二活性成分的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨，以及作為載體的本領域已知的體用和發用清洗產品。在以下描述中，本發明將採用香波作為實施例加以說明，但很明顯，本領域技術人員可將本發明的混合物用於其它體用和發用清洗產品。
兩種不同作用的去頭皮屑劑的混合物具有兩點顯著優於現有技術僅含有任意一種活性成分的香波製品的長處。其一，某些混合物具有協同作用，因而可以降低其中一種或兩種不同類型活性成分的濃度，因此，增加產品的可耐受性。其二，對本發明香波產品生產反應的頭皮屑和脂溢性皮炎患者的比例增加。現在依次對每種組分進行討論。
抑制真菌麥角甾醇生物合成的抗真菌劑優選氮二烯五環(azole)、烯丙胺，或其混合物。優選的氮二烯五環選自包括酮康唑、益康唑、elubiol、咪康唑、伊曲康唑、氟康唑、及其混合物的一組物質。優選的烯丙胺選自包括特比萘芬、萘替芬及其混合物的一組物質。氮二烯五環化合物最優選酮康唑、益康唑、elubiol，因為它們對正常皮膚尤其是頭皮的菌叢的損害最低。尤其優選酮康唑和elubiol，因為當它們與10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨(參見以下所述)共用時，可對皮膚真菌產生相互的協同效果。在本發明的組合物中所用的抗真菌劑的有效量在約0.1％至約2.5％(重量)範圍內，優選約0.5％至約1％(重量)。如將進一步解釋的，在此範圍的最低點，可能必須採取特殊的預防措施以確保貯存過程中不會因抗真菌化合物的降解而使香波失效。高於那些所指出的濃度並不能進一步增加對病情的治療作用，並且從總體看，弊大於利。
第二活性成分是一種如下式所示的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨
其化學文摘登記號為[94313-91-4]，其CTFA用名是十一烯基醯氨基丙基三甲基甲基硫酸銨。該陽離子表面活性劑由Rewo Chemische WerkeGmbH(Steinau，Germany)和Witco以商品名Rewocid UTM 185銷售的可商購產品。該產品是固體含量為47-49％的透明黃色液體狀含水製劑，當用水稀釋到1％時pH為5-7。
第一和第二活性成分的用量優選能使它們在抑制皮膚真菌、尤其與頭皮屑和脂溢性皮炎有關的菌種的生長方面產生相互的協同效果，這些菌種例如有粃糠狀鱗斑黴(Pityrosporum ovale)，及其它真菌，如與皮膚真菌病、雜色糠疹及與類似疾病有關的表皮癬菌屬、小孢子菌屬、毛癬菌屬的一些菌種。根據所述活性成分的性質和所針對的菌種決定第一和第二活性成分用量的比例。特別地，預計第一和第二活性成分(抗真菌劑10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨)的重量比可以在約5∶1至約1∶150，尤其在約1∶1至1∶25。例如，如已提及的，當酮康唑和elubiol與10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨共用時，尤其在重量比約為2∶1至1∶25時，尤其在重量範圍為約1∶20時，對真菌尤其是粃糠狀鱗斑黴具有相互的協同效果。本發明組合物中10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨的有效量為約0.04-10％(重量)。
可以用本領域已知的香波基質方便地製備本發明的香波。本領域已知的香波組分包括一種或多種表面活性劑、發泡劑、增稠劑、防腐劑、抗氧化劑，和足以使香波pH約為4-10的酸或鹼或緩衝劑。一種組分可具有兩種或多種作用，如表面活性劑和發泡劑，或抗氧化劑和緩中劑。
此後討論的許多組分以製劑形式(如水溶液)而非以純化合物市售。組分在製備本發明製劑時的用量通常以％(重量)的形式表示，並且是指所用的市售產品的量，而非純品的量。
用於本發明香波的適宜的表面活性劑可以選自含有C14-16烯烴磺酸鹽、月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸酯三乙醇胺、月桂基醚硫酸鈉、椰油醯氨基丙基氧化胺、月桂基氧化胺、月桂醯氨基二乙醇胺、椰油醯氨基丙基甜菜鹼、月桂基二甲基甜菜鹼、椰油二甲基磺丙基甜菜鹼、椰油基肌氨酸鈉、油醯氨基MIPA磺基琥珀酸二鈉、椰油醯氨基MIPA磺基琥珀酸二鈉、月桂基醚磺基琥珀酸二鈉、椰油兩性羧基甘氨酸鹽、油醯氨基單乙醇胺磺基琥珀酸二鈉、甘氨酸胺、丙酸胺、磺基甜菜鹼胺，及其混合物。優選可用於本發明香波中的是兩種或多種不同的表面活性劑的混合物，尤其是月桂基醚硫酸鈉和椰油基肌氨酸鈉；或月桂基醚硫酸鈉和月桂基醚磺基琥珀酸二鈉；或月桂基硫酸鈉、月桂基醚硫酸鈉、月桂基硫酸酯三乙醇胺和椰油醯氨基丙基甜菜鹼。在本發明的香波中，表面活性劑的總量可以為約36-55％(重量)。優選兩性表面活性劑的重量低於表面活性劑總量的15％。
在以上及以後的說明中，術語「MEA」代表具有下式的單乙醇胺RCO-NH-CH2CH2-OH，術語「DEA」代表具有下式的二乙醇胺RCO-N(CH2CH2-OH)2，術語「TEA」代表三乙醇胺，術語「MIPA」代表具有下式的單異丙醇胺RCO-NH-CH2-CHOH-CH3；其中每個RCO基團是脂肪酸殘基，如一個C13-19烷基羰基或C13-19烯基碳基基團。
適用於本發明香波的發泡劑(泡沫促進劑和穩定劑)可以選自含有椰油醯胺單乙醇胺、椰油醯胺二乙醇胺、油醯胺單乙醇胺、油醯胺二乙醇胺及其混合物的一組脂肪酸單-和二-鏈烷醇醯胺。發泡劑的用量可以是約1-10(重量)％，優選約2-6％(重量)，尤其優選約4-5(重量)％。這些組分一般對製劑有增稠作用。
適用於本發明香波的防腐劑是皮膚學上可接受的防腐劑，如EDTA(乙二胺四乙酸)四鈉或EDTA二鈉、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸乙酯、咪唑烷基脲、苯氧基乙醇、Quaternium 15、檸檬酸，優選它們的混合物。EDTA四鈉和EDTA二鈉及檸檬酸也可以用作螯合劑。
如US-5456851所公開的，當酮康唑或其它抗真菌劑的濃度為上述範圍的較低點時，加入仔細控制量的抗氧化劑能在50℃13周的加速老化期間內有效地防止香波中的酮康唑或其它氮二烯五環的降解以使之穩定，抗氧化劑選自丁基化羥基甲苯(BHT)、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、抗壞血酸，以及N-乙醯基-半胱氨酸，認為該老化試驗預示在環境溫度下貯存2年的性能。認為有效的穩定性能令貯存過程中活性成分的損失不多於約10％。已發現BHT或BHA的比例在約0.01％至1(重量)％的範圍內最有效。大於該量的比例並不能如在13周的加速老化期間中那樣有效地穩定酮康唑，雖然如果延長加速老化期間使之長於13周，更大的BHT或BHA比例將會更有效，因為BHT或BHA自身也易發生降解。然而，政府制訂規章的機構和製藥和化妝品工業充分認識到在50℃13周的穩定性試驗足以用於預測室溫下2年的正常貨架期貯存期間的產品穩定性。也同樣重要的是，出於對安全因素的考慮(即，為使皮膚過敏性降至最低)，希望BHT或BHA的用量儘可能低。
由於香波使用者希望香波稍粘稠，通常在製劑中加入一種或多種增稠劑使香波在室溫具有4000至9000mPa.s的粘度。適宜的增稠劑是丙烯酸聚合物或多羧酸，如CarbopolTM1342或CarbopolTM1382，在製備過程的最後加入氫氧化鈉或氯化鈉而使其變稠。其它適宜的增稠劑是以上所述的發泡劑，優選椰油醯胺單乙醇胺。
香波還可以含有一種或多種選自以下物質的珠光劑二硬脂酸乙二醇酯、單硬脂酸乙二醇酯及其混合物，濃度為0.0％至2％；一種或多種植物提取物，如來自蘆薈、山菊油、樺木、墨角藻、龍膽草、人參、金縷梅屬植物(witch hazel)、山楂、kina、檸檬、旱金蓮、迷迭香、茶樹等植物的提取物，濃度為0.0％至5％；維生素類，如維生素E(生育酚)及其衍生物，如生育酚乙酸酯、泛醇等，濃度為0.0％至3％；合成或天然來源的抗炎劑，如沒藥醇，濃度為0％至5％；濃度為0％至2％的香料；以及一種或多種著色劑。
香波還可以含有0.0％至10％的調理劑，如季銨化羥乙基纖維素-7、季銨化羥乙基纖維素-10或類似的陽離子季銨化聚合物，如季銨化聚矽氧烷聚合物。其它聚矽氧烷化合物如聚烷基矽氧烷、聚烷基芳香基矽氧烷、聚醚矽氧烷共聚物及其混合物也是適合的。此處有用的聚烷基矽氧烷包括例如聚二甲基矽氧烷(PDMS)。可以使用的聚烷芳基矽氧烷包括聚甲基苯基矽氧烷。可以使用的聚醚矽氧烷共聚物包括聚環氧丙烷改性的聚二甲基矽氧烷。也可以使用環氧乙烷或環氧乙烷和環氧丙烷的混合物。優選水不溶性成分。此處最希望使用以上所述的矽氧烷聚合物樹膠。這些矽氧烷聚合物樹膠與液體或流體相比是剛性的，它們具有約為200000至1000000的高質量分子量，在25℃粘度約為100000mPa.s至150000000mPa.s。優選聚二甲基矽氧烷樹膠。25℃這些樹膠粘度約為100000mPa.s至150000000mPa.s。選擇用於此處的樹膠具有一定粘度，從而當其與PDMS流體混合時，樹膠和流體混合物的粘度落於此範圍中。這些PDMS流體用量約為所述樹膠-流體混合物總重量的50％至60％。本發明優選一種含有約40％至60％PDMS流體和約60％至40％PDMS樹膠的混合物。優選的PDMS流體是25℃粘度約為350mPa.s的聚二甲基矽氧烷流體。
通常採用皮膚學上可接受的酸、鹼和緩衝劑調節本發明香波的pH。pH範圍為約4至10，但優選約6.5至8，尤其優選約6.9至7.4。
當在大約中性pH值(pH6至8)時，某些第一活性成分具有有限的溶解度。為保持這些活性成分均勻地分散於整個香波中，可以加入懸浮劑，如Avicel RC-591TM(羧甲基纖維素鈉和微晶纖維素的混合物)。但是，某些香波基質組分本身具有相當的懸浮性能，因此在本發明的香波中加入特殊的懸浮劑是完全任選的。
可採用常規量的香波組分，例如(a)36％至55％表面活性劑，(b)2％至6％發泡劑，(c)0.1％至2％抗真菌劑，(d)0.05％至2％10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨鹽，(e)0.2％至1.3％增稠劑，(f)0.01％至1％BHT或BHA，(g)足以延緩最終組合物的降解以達到足夠的貯存期的防腐劑，(h)達到所需pH範圍的酸、鹼或緩衝劑，和(i)適量的水加到100％(即，加入足量的水使總量達100％)。
實施例以下列出製備本發明香波的通用方法。可以從上述的描述和以下表中列出的示例製劑得出各種組分的適宜用量。
在容器中加入1.64％的Carbopol1342儲備溶液(製備方法為用Quadro分散器將粉狀聚合物均勻地分散，並將粉末通過真空裝置注入水流中)和去離子水，加熱到約70℃。加入兩種表面活性劑，即月桂基醚硫酸鈉和椰油基肌氨酸鈉，然後加入發泡劑椰油醯胺MEA和珠光劑(二硬脂酸乙二醇酯)，混合直至其完全溶解。然後加入BHT，攪拌混合物直至其完全溶解。將溶液緩緩冷卻，隨後邊充分攪拌邊加入抗真菌組分。(在稍酸性的pH條件下加入抗真菌劑以促進溶解。)然後，將10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨分散於混合物中並攪拌直至均勻分散。將混合物冷卻到約40℃，在此溫度下加入調理劑(季銨化羥乙基纖維素-7)、防腐劑Quaternium-15和EDTA四鈉、著色劑和香料，並加入氯化鈉以使溶液增稠。用25％的氫氧化鈉水溶液將溶液的pH調到6.9-7.4，加入去離子水至最終體積。可以用本領域技術人員顯而易見的類似工藝製備相似的香波製劑。
採用以上所述的通用方法可以製備以下的本發明的香波；此後的所有用量均以重量計。
本發明的製劑適用於治療疾病如頭皮屑、脂溢性皮炎，控制牛皮癬，降低頭皮的油性或皮脂分泌物，及類似失調和不適。按規則的時間間隔將這些製劑局部施用於患處，尤其每周至少一次到約每日一次。優選在治療開始時較頻繁地使用，如，每周4-7次，在治療後期已觀察到理想的效果並預防復發的情況下可以降低用藥頻率(如每周1或2次)。實施例1用於正常頭髮的香波製劑(含調理劑)組分 (a)(b)月桂基醚硫酸鈉 3030椰油基肌氨酸鈉 1010椰油醯胺MEA4 4酮康唑USP 0.5 110′-十一碳烯-3-醯基-氨基 0.5 1丙基三甲基甲基硫酸銨二硬脂酸乙二醇酯 1.251.25季銨化羥乙基纖維素-7 1 1CarbopolTM1342 0.6 0.6EDTA四鈉 0.5 0.5芳香油 0.5 0.5氯化鈉 0.3 0.325％的氫氧化鈉 0.920.9丁基化羥基甲苯 0.1 0.1quaternium-150.050.05著色劑 0.001 0.001適量去離子水加至 100 100實施例2用於油性頭髮的香波製劑(含調理劑)組分 (a) (b)(c)月桂基醚硫酸鈉 33.33 33.33 33.33椰油基肌氨酸鈉 11 11 11椰油醯胺MEA 4 4 4酮康唑USP0.5 0.75 1.210′-十一碳烯-3-醯基-氨基0.5 0.25 0.8丙基三甲基甲基硫酸銨二硬脂酸乙二醇酯 1.251.25 1.25季銨化羥乙基纖維素-7 0.6 0.60.6CabopolTM1342 0.750.75 0.75EDTA四鈉 0.5 0.50.5芳香油 0.5 0.50.5氯化鈉 0.3 0.30.325％的氫氧化鈉 1.181.243 1.18丁基化羥基甲苯 0.1 0.10.1quaternium-150.050.05 0.05著色劑 0.0053 0.0053 0.0053適量去離子水加至 100 100100實施例3用於乾性或受損頭髮的香波製劑(含調理劑)組分 (a)(b)(c)月桂基醚硫酸鈉3030 30椰油基肌氨酸鈉1010 10椰油醯胺MEA 4 4 4酮康唑USP 0.75 0.33 110′-十一碳烯-3-醯基-氨基 0.25 0.67 1丙基三甲基甲基硫酸銨二硬脂酸乙二醇酯 1.25 1.25 1.25季銨化羥乙基纖維素-7 5 5 5CarbopolTM1342 0.5 0.50.5EDTA四鈉 0.5 0.50.5芳香油0.5 0.50.5氯化鈉0.4 0.40.325％的氫氧化鈉0.73330.733 1.19丁基化羥基甲苯0.1 0.10.1quaternium-15 0.05 0.05 0.05著色劑0.00180.0018 0.0018適量去離子水加至 100 100100在以上實施例1-3給出的所有製劑中，可以稍改變氫氧化鈉的比例，以達到優選的pH值6.9-7.4，可以改變鹽(NaCl)的比例以達到理想的粘度。實施例410′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨和酮康唑的混合物(含調理劑)組分 百分含量純化水 44.30月桂基醚硫酸鈉 15.00月桂基硫酸鈉 10.00月桂基硫酸酯三乙醇胺 12.0010′-十一碳烯-3-醯基-氨2.10基丙基三甲基甲基硫酸銨酮康唑 1.00對羥基苯甲酸甲酯 0.20對羥基苯甲酸丙酯 0.05椰油醯胺MEA5.00二硬脂酸乙二醇酯 1.25季銨化羥乙基纖維素-7 3.00咪唑烷基脲 0.50椰油醯氨基丙基甜菜鹼 5.00檸檬酸 0.35香料 0.25100.00實施例5和10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨和elubiol的混合物(含調理劑)組分 百分含量純化水 44.30月桂基醚硫酸鈉 15.00月桂基硫酸鈉10.00月桂基硫酸酯三乙醇胺12.0010′-十一碳烯-3-醯基-氨基 2.10丙基三甲基甲基硫酸銨elubiol 1.00對羥基苯甲酸甲酯0.20對羥基苯甲酸丙酯0.05椰油醯胺MEA 5.00二硬脂酸乙二醇酯1.25季銨化羥乙基纖維素-73.00咪唑烷基脲 0.50椰油醯氨基丙基甜菜鹼5.00檸檬酸 0.35香料0.25100.00在以上給出的實施例4和5的製劑中，可以稍改動檸檬酸的比例，以達到優選的pH值6.9-7.4。實施例6酮康唑(2.1％)與2％和1％(重量)的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨的香波(不含調理劑)酮康唑2.100g2.100g10′-十一碳烯-3-醯基-氨 2.000g2.000g基丙基三甲基甲基硫酸銨咪唑烷基脲0.200g0.200g月桂基醚磺基琥珀酸二鈉15.000g 15.000g椰油醯胺DEA 2.000g2.000g水解月桂基二甲基銨1.000g1.000g聚乙二醇120 1.000g1.000g香料 0.200g0.200g鹽酸 0.400g0.400g紅色赤蘚紅(FDC No.40)0.002g0.002g月桂基醚硫酸鈉38.000g 38.000g氫氧化鈉 0.100g0.100g氯化鈉0.500g0.500g純化水適量加至100g 適量加至100g實施例7酮康唑和10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨之間對粃糠狀鱗斑黴的體外協同抑制作用包括9個粃糠狀鱗斑黴(M.furfur)分離菌種和雙倍稀釋的受試物的測試方格盤的相互作用實驗表明受試物的組合物具有高度協同作用。
將酮康唑溶於DMSO得到含量為2000μg/ml的儲備室液。用乙醇將10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨稀釋為含量為2000μg/ml的儲備溶液。用相同的溶劑將每份受試物進一步稀釋3162倍(稀釋係數＝SQRT(10)，因此每份二次稀釋物被稀釋了10倍)，得到六份系列試樣。然後將每組受試物的7個濃度系列進一步在水中稀釋至最終實驗濃度的12倍。然後在平底塑料微量稀釋皿的孔中，用豎直排列的酮康唑稀釋物系列和水平排列的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨稀釋物，製備稀釋物的8×8測試方格盤排列。每孔含有10μl每份受試物溶液。在微量稀釋孔的一個附加的柱中，用移液管單獨加入10μl對應溶劑的水稀釋物，作為化合物空白對照。
從Janssen研究基地的細菌學和真菌學部的真菌保藏收集處得到本研究所用的有9個粃糠狀鱗斑黴分離菌種的菌種組。從臨床物質原始地分離得到所有的分離菌種，並且其中3個是在研究前9個月內經新鮮分離的。將酵母菌保存在被Van Abbe，N.J.稱為「H.Dixon’s製劑」的介質的改良型中進行傳代培養(頭皮屑的研究，《美容藥劑師會志》(J.SocCosmetic Chemists)15，609-630，1964)。此介質含有(每1000ml水)麥芽提取物(Difco)36g；真菌腖(Oxoid)6g；細菌-牛膽汁(Bacto-oxgall)(Difco)20g；吐溫40(Merck)10ml；甘油(Difco)2.5ml；和細菌-瓊脂(Difco)20g。對於用作肉湯製劑，省略瓊脂。將瓊脂基和肉湯基培養基在100℃高壓滅菌5分鐘。
將Dixon肉湯置於試管中，試管與水平位置成5°角，以20rpm轉速不斷旋轉，在30℃培養2天以製備實驗用接種物。將肉湯培養基以分光光度法標定，發現在530nm有一OD讀數為0.1。以瓊脂平板計數器測定，這些懸浮液平均含有2×106細胞/毫升。將酵母菌在Dixon肉湯中稀釋500倍形成含有3-10×105CFU/ml的懸浮液。
將接種培養基以100μl體積加到已含有受試物的稀釋物的微量稀釋孔中。將平板以粘膠標籤密封，並在30℃培養5天。然後除去粘膠標籤，藉助於微板閱讀器以490nm處的吸光度測定生長濁度。對於受試物的每種組合，平行測定9個微板，每板接種不同的粃糠狀鱗斑黴分離菌種。第十板只接種Dixon肉湯，作為OD讀數的陰性對照。
藉助於計算機電子數據表模板(computer spreadsheettemplate)，將以陰性對照板測量的吸光度進行校正的每個含有受試物組合的微板孔的OD490，以接種粃糠狀鱗斑黴的8個無受試物的陽性對照孔的平均OD490的百分率表示。結果表示在一8×8矩陣中，自動畫陰影以指示在25％對照或低於25％對照下的生長抑制。以這種方式，兩種受試物之間的不明顯相互作用將顯示為圖形底部右邊的一個暗矩形，協同相互作用將在圖形底部右邊顯示為一個倒轉的「L」形，拮抗相互作用將顯示為向著圖形頂部左側的矩形的延伸。從測試方格盤的結果看，最小抑制濃度(MIC)測定為單獨和與其它化合物組合的實驗化合物的最低濃度，按下式計算每個化合物的分次抑制濃度(fractionalinhibitory concentration)(FIC)MIC(單獨化合物)/MIC(有第二化合物出現的化合物)對於沒有相互作用(無關)的化合物，兩個FIC的總和為1.0，對於有協同作用的化合物，該數值＜1.0，對於有拮抗作用的化合物，該數值＞1.0。
用10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨(Rewocid UTM 185)獲得了表示可能的協同作用的明顯陽性的結果。酮康唑與10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨混合物對9個粃糠狀鱗斑黴分離菌種體外實驗的分次抑制濃度(FIC)的總和為粃糠狀鱗斑黴分離菌種的編號 FICB393870.63B458360.42B458380.42B580470.20B582000.63B589680.42J95-0821 0.42J95-0822 0.13J95-1435 1協同作用的程度遠遠超過偶然出現的一次稀釋效應。因此進一步研究了10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨與酮康唑的混合物對9個分離菌種被測組的活性，但其中採用的是濃度系列中較小的稀釋步驟(2倍)。酮康唑和10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨混合物對9個粃糠狀鱗斑黴分離菌種的體外分次抑制濃度(FIC)總和為粃糠狀鱗斑黴分離菌種的編號 FICB39387 0.50B45836 0.26B45838 0.13B58047 0.25B58200 0.19B58968 0.25J95-0821 0.25J95-0822 0.12J95-1435 0.19此結果明確地證實，兩種實驗化合物確實能在體外與酮康唑協同作用於粃糠狀鱗斑黴。
權利要求
1.一種體用或發用清洗組合物，其含有(a-1)作為第一活性成分的一種或多種抑制真菌麥角甾醇生物合成的殺真菌劑，(a-2)作為第二活性成分的10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨，以及(b)作為載體的本領域已知的體用或發用清洗產品組分。
2.根據權利要求1的組合物，其中抑制真菌麥角甾醇生物合成的抗真菌劑是選自包括以下物質的氮二烯五環(azole)酮康唑、益康唑、elubiol、咪康唑、伊曲康唑、氟康唑或其混合物，或是選自包括以下物質的烯丙胺特比萘芬、萘替芬或其混合物。
3.根據權利要求2的組合物，其中第一和第二成分以對抑制粃糠狀鱗斑黴(Malassezia furfur)的生長產生相互的協同作用的量存在。
4.根據上述任一權利要求的組合物，其中第一成分以約0.1％至2.5重量％的量存在。
5.根據上述任一權利要求的組合物，其中第二成分以約0.04％至10重量％的量存在。
6.根據上述任一權利要求的組合物，其被配製成香波。
7.根據權利要求6的香波，其中本領域已知的香波組分包括一種或多種表面活性劑、發泡劑、足以使最終製劑在室溫下具有4000至9000mPa.s粘度的增稠劑、防腐劑、抗氧化劑和足以使香波的pH約為4-10的酸或鹼或緩衝劑。
8.根據權利要求7的香波，其含有一種或多種選自以下成分的表面活性劑C14-16烯烴磺酸鈉、月桂基硫酸鈉、月桂基醚硫酸鈉、椰油醯氨丙基氧化胺、月桂基氧化胺、月桂醯氨基二乙醇胺、椰油醯氨丙基甜菜鹼、月桂基二甲基甜菜鹼、椰油二甲基磺丙基甜菜鹼、椰油基肌氨酸鈉、油醯氨基MIPA磺基琥珀酸二鈉、椰油醯氨基MIPA磺基琥珀酸二鈉、月桂基醚磺基琥珀酸二鈉、椰油兩性羧基甘氨酸鹽、油醯氨基單乙醇胺磺基琥珀酸二鈉、甘氨酸胺、丙酸胺、磺基甜菜鹼胺，及其混合物。
9.根據權利要求7的香波，其中發泡劑選自脂肪酸單-和二-鏈烷醇醯胺，它們包括椰油醯胺單乙醇胺、椰油醯胺二乙醇胺、油醯胺單乙醇胺、油醯胺二乙醇胺及其混合物。
10.根據權利要求7的香波，其中抗氧化劑是丁基化羥基甲苯或丁基化羥基苯甲醚，其用量約為0.01至1重量％。
11.根據權利要求7的香波，其還含有調理劑。
12.根據權利要求7的香波，其還含有一或多種珠光劑，它們選自二硬脂酸乙二醇酯、單硬脂酸乙二醇酯及其混合物。
13.根據權利要求7的香波，其還含有一種或多種香料以及一種或多種著色劑。
14.一種製備上述任一權利要求所述的香波製劑的方法，其包括以下步驟(a)加熱增稠劑和去離子水的溶液，(b)將表面活性劑、發泡劑和任選的珠光劑與溶液(a)混合，(c)將BHT與溶液(b)混合，(d)將抗真菌劑與溶液(c)混合，(e)將10′-十一碳烯-3-醯基-氨基丙基三甲基甲基硫酸銨分散於混合物(d)中，(f)使懸浮液(e)稍冷卻，將其與防腐劑、使製劑增稠至所需粘度的氯化鈉和任選的調理劑、香料和著色劑混合，(g)向溶液(f)中加入酸、鹼或緩衝劑使pH達到4-10，以及(h)向溶液(g)中加入去離子水至100％。
全文摘要
本發明涉及組合物,例如體用和發用清洗產品,特別是香波,其含有作為第一活性成分的一種或多種抑制真菌麥角甾醇生物合成的殺真菌劑和作為第二活性成分的10′－十一碳烯－3－醯基—氨基丙基三甲基甲基硫酸銨。
文檔編號A01N33/12GK1242701SQ98801520
公開日2000年1月26日 申請日期1998年4月7日 優先權日1997年4月14日
發明者F·C·奧德斯, R·C·A·恩布雷赫茨, P·R·G·德東克爾 申請人:詹森藥業有限公司